檢專檢驗(yàn)技能考學(xué)生復(fù)習(xí)提綱

1、技能操作復(fù)習(xí)提綱【血檢】敘述POX染色的臨床應(yīng)用答：主要的臨床應(yīng)用1.各類白血病細(xì)胞特征急粒：（+），顆粒多、粗、局灶分布急單：弱+，顆粒少、小、彌散分布急淋：（-），陽性率3%2.鑒別診斷（1）小型原始粒細(xì)胞和原始淋巴細(xì)胞：小原粒（+），原淋（-）（2）急性早幼粒細(xì)胞白血病與急性單核細(xì)胞白血病，前者強(qiáng)（+），后者弱（+）（3）急單與組織細(xì)胞白血病、惡性組織細(xì)胞?。呵罢呷酰?）陽性，后者為陰性。【生檢】1.怎樣正確使用刻度吸管，應(yīng)該注意的方面有哪些？（10分）答：1.使用前先看量程，選擇最接近移取液體量的量程。2.用被移取液體潤洗刻度吸管內(nèi)壁，保證潤洗完全。3.吸液。左手握洗耳球，右手持刻度吸

2、管，吸取所需液體至最上刻度以上。吸樣后用潔凈紗布或紙巾擦去管尖外面多余的液體。4.調(diào)整。調(diào)整液面至最上面刻度，讀數(shù)時視線應(yīng)與吸管內(nèi)液體凹面的最低點(diǎn)相切。5.移取。將吸管緊貼容器內(nèi)壁（容器與水平約成45度角傾斜），把液體從最上面的刻度處開始徐徐轉(zhuǎn)移到容器內(nèi)，直到到所需要的量時在容器壁上提留15秒左右（如果所需液體量正好是吸管的量程且吸管上標(biāo)有吹字，則要將吸管內(nèi)余液吹出）。手指不得接觸吸管下端。6.多余的液體棄去。7.清洗刻度吸管。2.有一肝區(qū)疼痛的病人，其膽紅素測定的結(jié)果如下：TBil:25.1 umolL,DBil:20.5umol/L,請對其進(jìn)行黃疸分類并提供進(jìn)一步的診斷指標(biāo)。答：1.直接膽

3、紅素升高，間接膽紅素正常。2.屬于梗阻性黃疸。3.測定ALT、ALP。3.血?dú)夥治鰰r血液標(biāo)本采集、貯存的注意事項(xiàng)答：1.血?dú)夥治鲆詣用}血為主，一般選用橈動脈。股動脈、肱動脈、足背動脈。根據(jù)動脈所在的部位。搏動班強(qiáng)弱以及患者的情況決定選擇其一。2.采血前了解病人診斷，如有經(jīng)血傳染的傳染病患者，操作人員要保護(hù)好自己，做好保護(hù)措施。3.采血前向患者解釋，動作輕柔，操作熟練。活動后喘憋明顯的患者應(yīng)先休息15-30分鐘，避免因患者緊張、恐懼和活動影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。4.嚴(yán)格無菌操作。5.選擇橈動脈應(yīng)保證側(cè)支血運(yùn)好的情況下穿刺，否則選擇其它動脈。股動脈穿刺因動脈位置靠的近，外側(cè)有股神經(jīng)，斜刺易深入靜脈或神經(jīng)

4、，在膀胱充盈時斜刺入過深（如兒童），易損傷膀胱造成感染出血。6.必須用稀釋后的肝素液濕潤注射器，且采血前必將肝素及空氣排空，否則易引起酸堿失衡及氧濃度的判斷的誤差。7.采血完畢后立即排出針管內(nèi)空氣，針頭套橡皮塞。并用無菌紗布或棉球重壓穿刺部位10-15min，無揉。如有凝血機(jī)制障礙或服用抗凝劑、溶栓治療的病人應(yīng)延長壓迫時間直至無出血方可松手離開。8.采血完畢后血標(biāo)本立即送檢。4.使用容量瓶應(yīng)注意什么答：1.不允許將容量瓶放在烘箱或者冰箱中，也不能用任何形式加熱的方法促使瓶中的物質(zhì)溶解。2.容量瓶僅做定容之用，不能用容量瓶長期存放溶液。3.容量瓶長期不用，應(yīng)該洗凈，將玻璃瓶塞隔上一層干凈紙?jiān)偃?/p>

5、以防長時間久后，塞子打不開。【免檢】1.簡述ELISA的基本原理、方法類型及應(yīng)用答：基本原理：抗原或抗體預(yù)先結(jié)合到某種固相載體表面，測定時，將受檢樣品和酶標(biāo)抗原或抗體按一定程序與結(jié)合在固相載體上的抗原或抗體起反應(yīng)形成抗原或抗體復(fù)合物。反應(yīng)終止時，固相載體上酶標(biāo)抗原或抗體被結(jié)合量即與標(biāo)本中待檢抗體或抗原的量成一定比例。經(jīng)洗滌除去反應(yīng)液中其它物質(zhì)，加入底物進(jìn)行顯色，最后通過定性或定量分析有色產(chǎn)物量即可確定樣品中待測物質(zhì)含量。方法類型及應(yīng)用：1.雙抗體夾心法：用于檢測抗原，適用于檢測兩個或兩個以上抗原決定基的多價(jià)抗原。2.間接法：用于檢測抗體。3.競爭法：用于抗原和半抗原的定量測定，也可對抗體進(jìn)行測

6、定。4.捕獲法：用于血清中某種抗體亞型成分的測定。2.簡述初次應(yīng)答與再次應(yīng)答時抗體產(chǎn)生的規(guī)律。初次應(yīng)答再次應(yīng)答潛伏期長，抗體產(chǎn)量低潛伏期短，抗體產(chǎn)量高抗體水平維持時間短抗體水平維持時間長以IgM為主以IgG為主抗體親和力弱抗體親和力強(qiáng)【微檢】簡述三區(qū)畫線法接種細(xì)菌的操作和注意事項(xiàng)。答：操作：1.穿隔離衣、戴帽子、口罩、手套。準(zhǔn)備好菌種、酒精燈、滅菌平板、接種針（或接種環(huán)）、記號筆等。2.坐到超凈工作臺前，接通電源。點(diǎn)燃酒精燈，將接種環(huán)作火焰滅菌，待冷。3.接種環(huán)取標(biāo)本先涂布于平板1區(qū)內(nèi)并作數(shù)次畫線，再將接種環(huán)在火焰上灼燒，接著在2區(qū)劃線，使1、2兩區(qū)有劃線相接觸。最后作第3區(qū)劃線，不應(yīng)與1或者

7、2區(qū)的劃線接觸。4.接種完將接種環(huán)火焰滅菌，在培養(yǎng)基底上做好標(biāo)記，置孵育箱培養(yǎng)。注意事項(xiàng)：1.應(yīng)嚴(yán)格無菌操作，以免造成污染。2.不能全部打開培養(yǎng)基蓋進(jìn)行接種。應(yīng)將裝有培養(yǎng)基的平皿置于手掌內(nèi)，皿蓋側(cè)向上，用手指固定平皿蓋邊緣，以減少污染機(jī)會。3.應(yīng)在酒精燈火焰上側(cè)5-6cm處畫線 。4.劃線的粗細(xì)、間隔、相交與否等應(yīng)該得當(dāng)，不可重復(fù)劃線?！九R檢】1.請?jiān)敿?xì)敘述瑞氏染色的染料組成、原理（體內(nèi)物質(zhì)的受色情況）、操作、注意事項(xiàng)答：染料組成：瑞特染料是由帶負(fù)電的酸性染料伊紅和帶正電的堿性染料亞甲藍(lán)組成有復(fù)合染料。染色原理：細(xì)胞的染色既有物理的吸附作用，又有化學(xué)的親和作用，各種細(xì)胞成分化學(xué)性質(zhì)不同，對各種

8、染料的親和力也不一樣。因此，用本染料液染色后，在同一血片上，可以看到各種不同的色彩，例如血紅蛋白，嗜酸性顆粒為堿性蛋白質(zhì)，與酸性染料伊紅結(jié)果，染粉紅色，稱為嗜酸性物質(zhì)；細(xì)胞核蛋白和淋巴細(xì)胞胞漿為酸性，與堿性染料美藍(lán)或天青結(jié)合，染紫藍(lán)色，稱為嗜堿性物質(zhì)；中性顆粒呈等電狀態(tài)與伊紅和美藍(lán)均可結(jié)合，染淡紫色，稱為中性物質(zhì)。操作：1、采血：無菌操作，第一滴血棄去，取末梢血一滴于已編號的潔凈載玻片的一側(cè)。左手持載玻片，右手以邊緣平滑的推片的一端，從血滴前方后移接觸血滴，使血滴沿推片邊緣散開。然后使推片與載片的夾角保持3045度，平穩(wěn)地向前移動，推成一張頭體尾分明的薄層血膜。2.待干。用蠟筆在血膜兩端畫線，

9、然后將血膜平方在染色架上。3.加瑞特染液數(shù)滴，覆蓋整個血膜，固定0.51分鐘。4.滴加等量的緩沖液，輕輕晃動載玻片，使之與燃料自然混勻，染色數(shù)分鐘。5.用流水沖去染色，待干，油鏡鏡檢。注意事項(xiàng)：1.待血膜干透后方可固定染色。2.注意保持緩沖液的正確PH值。3.染色時間與染液和緩沖液的比例、室溫高低、有核細(xì)胞的多少有關(guān)。室溫低、有核細(xì)胞多、要適當(dāng)增加染色時間，反之減少。4.所加染液不能過少，以免蒸發(fā)干燥。5.流水沖掉染液，不可先倒調(diào)染液，以免染料渣沉著于玻片上影響鏡檢。2.手工進(jìn)行尿液蛋白質(zhì)定性檢查最常用和經(jīng)典的方法是什么？該試驗(yàn)需要什么材料？原理、操作（假設(shè)所需試劑已配好）、注意事項(xiàng)是什么，怎

10、樣進(jìn)行結(jié)果判斷和報(bào)告？答：方法是加熱醋酸法。材料：酒精燈、試管、試管夾、試管架、滴管和5醋酸。原理：加熱可使蛋白質(zhì)變性凝固，加酸可使尿液PH值下降接近蛋白質(zhì)等電點(diǎn)，促使蛋白質(zhì)沉淀更完全。此外，加酸還可以溶解因加熱析出的磷酸鹽結(jié)晶所致的混濁。操作：1.取大試管一只，用滴管加入被檢尿液至試管的1/3處2.用試管夾夾住試管底部，斜置試管于酒精燈上加熱尿上斷1/3處，至沸騰。3.滴加5%醋酸2-3滴，再煮沸后，在黑色背景下對光立即觀察結(jié)果。注意事項(xiàng)：1.煮沸加酸后立即判斷結(jié)果。2.尿內(nèi)蛋白質(zhì)含量較低時，加酸后才顯混濁，必須堅(jiān)持加熱、加酸、再加熱的程序。保證微量蛋白的檢出。3.加酸過多遠(yuǎn)離蛋白質(zhì)等電點(diǎn)，

11、可使陽性減弱或呈假陰性。4.取離心后上清尿做試驗(yàn)，可排除尿中有形成分的干擾。5.無鹽或低鹽飲食的病人，可先加1-2滴飽和氯化鈉于尿液中，再操作。6.加熱時勿使尿液底部受熱，以便上下對照。同時防止尿液賤出，以免在試管壁上留下痕跡，影響接過判斷。7.加熱時管口勿對人，防止尿液賤出燙傷。結(jié)果判斷：清晰透明 陰性 （-）黑色背景下輕微混濁 微量 （）明顯白色霧狀，無顆粒 弱陽性 （+）混濁，有明顯顆粒 陽性 （+）大量絮片狀沉淀 強(qiáng)陽性 （+）出現(xiàn)凝塊并有大量絮片狀沉淀 最強(qiáng)陽性（+）【病例分析】患者男，21歲，廣東韶關(guān)人，因畏寒、發(fā)熱腹瀉9天，全身黃染、尿色變深3天入院。體溫39.5度，3天前漸出現(xiàn)全身皮膚、鞏膜黃染、尿色深黃，乏力加重，雙側(cè)腰部脹痛，無白陶土樣大便，無鼻衄及牙齦出血。實(shí)驗(yàn)室結(jié)果：Hb 62g/L,WBC 3.2*109/L,PLT 116*109/L,RET 3.8%。尿常規(guī)：尿膽原+，尿膽紅素-，尿隱血+，尿蛋白。ALT 121U/L，TBIL 69.9umol/L,IBIL 57.6um