化驗室色譜系統(tǒng)數(shù)據(jù)積分處理管理規(guī)程

1、目的：制定化驗室氣相色譜、高效液相色譜及質(zhì)譜軟件正確的積分方法，確保檢測數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性、完整性和可追溯性。范圍：適用于化驗室氣相色譜、高效液相色譜及質(zhì)譜的所有積分責(zé)任人：QC、QA內(nèi)容：1.1 定義積分是指色譜軟件定量測定峰面積或峰高的過程。1.2 分類1.2.1 自動積分自動積分是指采用色譜軟件內(nèi)置的積分事件設(shè)置積分參數(shù)進行積分1.2.2 手動積分手動積分是指采用手動積分工具進行積分。2.0色譜系統(tǒng)數(shù)據(jù)處理積分的基本概念和術(shù)語2.1色譜圖(chromatogram)樣品流經(jīng)色譜柱和檢測器，所得到的信號-時間曲線，又稱色譜流出曲線(elutionprofile)。2.2基線(baseline)經(jīng)

2、流動相沖洗，柱與流動相達(dá)到平衡后，檢測器測出一段時間的流出曲線。一般應(yīng)平行于時間軸。2.3噪音(noise)基線信號的波動。通常因電源接觸不良或瞬時過載、檢測器不穩(wěn)定、流動相含有氣泡或色譜柱被污染所致。2.4漂移(drift)基線隨時間的緩緩變化。主要由于操作條件如電壓、溫度、流動相及流量的不穩(wěn)定所引起，柱內(nèi)的污染物或固定相不斷被洗脫下來也會產(chǎn)生漂移。2.5色譜峰(peak)組分流經(jīng)檢測器時響應(yīng)的連續(xù)信號產(chǎn)生的曲線。流出曲線上的突起部分。正常色譜峰近似于對稱形正態(tài)分布曲線(高斯Gauss曲線)。不對稱色譜峰有兩種：2.6前延峰(leadingpeak)和拖尾峰(tailingpeak)。前者少

3、見。2.7峰底基線上峰的起點至終點的距離。2.8峰高(peakheight，h)一峰的最高點至峰底的距離。2.9峰寬(peakwidthW)一峰兩側(cè)拐點處所作兩條切線與基線的兩個交點間的距離。W=4o2.10半峰寬(peakwidthathalf-height,Wh/2)一峰高一半處的峰寬。2.11峰面積(peakarea,A)峰與峰底所包圍的面積。2.12保留時間(retentiontime,tR)從進樣開始到某個組分在柱后出現(xiàn)濃度極大值的時間。2.13理論塔板數(shù)(theoreticalplatenumber,N)用于定量表示色譜柱的分離效率(簡稱柱效)。2.14分離度(resolution

4、,R)目鄰兩峰的保留時間之差與平均峰寬的比值。也叫分辨率，表示相鄰兩峰的分離程度。RN1.5稱為完全分離。2.15拖尾因子(tailingfactor,T)T=，用以衡量色譜峰的對稱性。也稱為對稱因子(symmetryfactor)或不對稱因子(asymmetryfactor)。2.16斜率(slope)又叫峰檢測靈敏度、閾值，它是用來認(rèn)識峰的參數(shù)。3.0色譜系統(tǒng)積分管理3.1 色譜系統(tǒng)圖譜積分原則：3.1.1 原則1：色譜數(shù)據(jù)采集色譜圖譜的積分首要原則為使用積分事件完成數(shù)據(jù)處理。3.1.2 原則2：采用內(nèi)標(biāo)與外標(biāo)計算時，對照與供試品的閾值(斜率)與峰寬必須保持一致。3.1.3 原則3：同一序

5、列或同時(非同一序列連續(xù)進樣)采集的色譜圖譜屬于同一檢測項目的使用相同的積分事件進行處理；同一序列或同時(非同一序列連續(xù)進樣)采集的色譜圖屬于不同檢測項目的可以按照項目使用相同積分事件進行處理，如結(jié)合雌激素含量與游離甾體。3.1.4 原則4：色譜系統(tǒng)軟件采用既定的積分事件積分不正確時，需要采用手動積分工具方式處理色譜圖譜，即手動積分，或個別圖譜增加使用了積分事件部分功能，需申請手動積分申請表(SMP-QMP-298現(xiàn)行版-PF01)及填寫手動積分臺帳(SMP-QMP-298現(xiàn)行版-PF02)，經(jīng)批準(zhǔn)后由具有手動積分權(quán)限人員執(zhí)行。4.0色譜系統(tǒng)手動積分管理4.1 手動積分原因分類4.1.1低分離

6、度或低響應(yīng)。4.1.2流動相不穩(wěn)定，基線紊亂，保留時間變化小。4.1.3色譜柱性能：運行過程中，出現(xiàn)異常峰。4.1.4軟件積分的局限性，如由于軟件參數(shù)閾值的設(shè)置導(dǎo)致峰未積分，峰起點和終點間出現(xiàn)肩峰和異常的基線漂移，軟件錯誤（峰未積分和錯誤識別峰）。4.1.5由于樣品母體的干擾導(dǎo)致的復(fù)雜色譜圖：裂峰、目標(biāo)雜質(zhì)的同時洗脫/肩峰、基線噪音、負(fù)峰、基線上升或下降（由于某些梯度程序）峰的嚴(yán)重拖尾或峰前延等導(dǎo)致自動積分不正確。4.2手動積分舉例4.2.1分裂峰，如圖4-1；AiIrri自動積分卜*riudl手動積分圖4-1圖4-24.2.3基線紊亂，如圖4-3；4.2.2主峰與肩峰重復(fù)積分，如圖4-2；自

7、動積分4.2.4負(fù)峰，如圖4-4；手動積分圖4-3圖4-44.2.5峰上升或下降，如圖4-5；自動積分2-手動積分圖4-54.2.6峰拖尾嚴(yán)重，如圖4-6；'IIIAutom-aticInteflr-aEionMoinuolIntcgralion自動積分手動積分圖4-64.3手動積分流程及操作：檢驗員在處理某產(chǎn)品檢驗批次數(shù)據(jù)時，需要進行手動積分時，先報告儀器組組長，經(jīng)組長核對后再決定是否需要進行手動積分。如果不需要手動積分，就照自動積分方法進行數(shù)據(jù)處理；如果需要手動積分，檢驗人員填寫手動積分申請表（SMP-QMP-298現(xiàn)行版-PF01）及檢驗人員填寫手動積分登記表（SMP-QMP-298現(xiàn)行版-PF02）及，經(jīng)QC主管審核批準(zhǔn)后，由儀器組長完成手動積分操作，再提交與QC主管進行審核，最后由現(xiàn)場QA進行審核。QC分析員報告QC組長復(fù)核自動積分手動積分申請QC主管批準(zhǔn)QC組長積分現(xiàn)場QA確認(rèn)queen歸檔4.4 手動積分方法：4.4.1 放大圖譜，辨別是否是基線噪音。4.4.2 檢驗員必須以正確的方式進行手動積分。將峰的面積去掉“峰消除”、添加“峰擴大和改變峰高的手動積分都不符合標(biāo)準(zhǔn)。4.5 手動積分的注意事項4.5.1手動積分后不能試圖通過以下動作來使數(shù)據(jù)符合標(biāo)準(zhǔn)要求：減少峰（減少峰面積）；增加峰（增加峰面積）；改變峰高。如圖4-7自動積分手動積分圖4-