獸醫(yī)微生物學(xué)重要知識點匯總

1、獸醫(yī)微生物學(xué)重要知識點匯總DocumentserialnumberNL89WT-NY98YT-NC8CB-NNUUT-NUT108獸醫(yī)微生物學(xué)重要知識點匯總緒言1、微生物學(xué)的定義：研究微生物形態(tài)、生理、遺傳變異、生態(tài)分布以及其與人類關(guān)系的科學(xué)，廣義的微生物學(xué)還包括免疫學(xué)，甚至還包括寄生蟲學(xué)，特別是原蟲學(xué)。2、微生物的特點：個體微小，需借助顯微鏡觀察，其群體可見。結(jié)構(gòu)簡單，繁殖快，分布廣。比較面積大（有利于物質(zhì)交換，代謝繁殖）。易變異，適應(yīng)性強。3、微生物的種類：三型八大類（三菌四體一病毒）真菌細胞型：細胞核有核膜、核仁，細胞器完整。Eg:真菌。原核細胞型：僅有原始核，無核仁、核膜，細胞器很不完

2、善。DNARNA同時存在（擬核/核體）Eg：細菌、放線菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體。非細胞型微生物：最小的一類微生物，無典型細胞結(jié)構(gòu)。只能在活細胞內(nèi)生長繁殖。核酸類型為DNAeRNA.Eg：病毒。4、微生物學(xué)的發(fā)展過程第一階段一一形態(tài)學(xué)時期：1683年荷蘭呂文虎克首次觀察到微生物。1861年巴斯德否定“自然發(fā)生說”；證明發(fā)酵由微生物引起的。第二階段一一生理學(xué)及免疫學(xué)的奠基時期：I巴斯德（微生物學(xué)、生理學(xué)與免疫學(xué)的主要奠基人）的歷史性貢獻：酒是某種微生物的發(fā)酵產(chǎn)物解決了酒的敗壞問題研究炭疽病、人的狂犬病，確定這些疾病由相應(yīng)的微生物引起、微生物可以至弱作作預(yù)防傳染病用，而且對至弱的途徑做了

3、示范性的試驗發(fā)明免疫學(xué)的預(yù)防接種發(fā)明巴氏消毒法n科赫（建立微生物研究的基本操作技術(shù)和對病院細菌的研究，有突出貢獻）功績：發(fā)明培養(yǎng)基并用于純化微生物發(fā)明染色觀察、顯微攝影科赫法則證實炭疽病原因-炭疽桿菌發(fā)現(xiàn)結(jié)核病源菌-結(jié)核桿菌【科赫法則：病原微生物應(yīng)在同一疾病中查見，但在健康動物體內(nèi)不存在該病原菌能被分離培養(yǎng)得純種該純培養(yǎng)物接種至易感動物，能產(chǎn)生同樣的疾病自人工感染的實驗動物體內(nèi)能再次分離培養(yǎng)得到相同的病原】【免疫方法：注射、口服、點眼、滴鼻、氣霧】第三階段一一近代及現(xiàn)代微生物理論上取得的成就極其應(yīng)用價值：進入真正意義上的基因工程時代進行化學(xué)治療腰肌和抗生素的研究組織移植、免疫耐受的研究，抗原抗

4、體反應(yīng)在診斷及防治疾病上的應(yīng)用技術(shù)上的重大創(chuàng)新及其應(yīng)用價值電子顯微鏡的應(yīng)用標記抗原或標記抗體的應(yīng)用細胞培養(yǎng)、空斑技術(shù)、蛋白質(zhì)及核酸的提純核磁共振儀的使用分子克隆、PCR（聚合酶鏈式反應(yīng)）、DNAM試、基因組學(xué)及電子計算機等技術(shù)的應(yīng)用微生物學(xué)領(lǐng)域的三大進展：微生物遺傳學(xué)、免疫學(xué)及病毒學(xué)第1篇總論第一章細菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)【內(nèi)容提要】細菌個體微小，經(jīng)染色后在光學(xué)顯微鏡下才能觀察。最常用的是革蘭染色法，可講細菌分為革蘭陰性和革蘭陽性兩大類。就某種細菌而言，菌體有一定的大小、形態(tài)及排列方式。細菌的基本結(jié)構(gòu)包括細胞壁、細胞膜、細胞質(zhì)及擬核等。革蘭陽性菌的細胞壁有較厚的肽聚糖及特有的磷壁酸。革蘭陰性菌有外膜，外

5、膜由外膜蛋白、脂多糖等構(gòu)成，外膜下有一薄層肽聚糖。細菌的特殊結(jié)構(gòu)有莢膜、鞭毛、菌毛、芽抱等，各有一定的結(jié)構(gòu)及特殊的生理功能，與細菌的致病性及免疫原性有關(guān)。細菌是原核生物界中的一大類單細胞微生物，它們個體微小，形態(tài)結(jié)構(gòu)簡單，廣義的細菌除一般細菌外，還包括立克次體、衣原體、支原體、螺旋體及放線菌。復(fù)習(xí)思考題1、細菌的大小、基本形態(tài)答：大?。杭毦鷤€體微小，需染色后在光學(xué)顯微鏡下才能觀察到。細菌大小的度量單位通常是微米。形態(tài)：形態(tài)比較簡單，有球狀、桿狀和螺旋狀三種基本形態(tài)及某些其他形態(tài)。細菌的繁殖方式都是簡單的裂殖，不同細菌裂殖后其菌體排列方式不同。有特征性的、相對穩(wěn)定的形態(tài)和排列方式的細菌有球菌、雙

6、球菌、鏈球菌、葡萄球菌（四聯(lián)、八疊）、桿菌、螺形菌適宜條件下培養(yǎng)的細菌在對數(shù)生長期形態(tài)典型。不亮環(huán)境或老齡期，會出現(xiàn)與正常形狀不一樣的個體，稱為衰老型或退化型。但有些細菌即使在適宜的環(huán)境中生長，其形狀也很不一致，有多形性。2、菌落的概念，菌落的實際意義菌落：某個細菌在適宜的條件下、在適合生長的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部，培養(yǎng)后分裂繁殖出巨大的菌體，形成一個肉眼可見的、有一定形態(tài)的獨立群體?！締蝹€細菌及其后代組成的“大家族”】菌苔：生長的菌落連成一片?！径鄠€“大家族”】菌落的實際意義：菌落肉眼可見，各種細菌的菌落在大小、色澤、質(zhì)地、表面形狀、邊緣結(jié)構(gòu)等方面均有個各自的特征。觀察細菌的菌落特征，可推測該

7、細菌的種類，工作中通常通過固體培養(yǎng)基上分離培養(yǎng)的菌落，進行細菌的分離、純化、傳代、計數(shù)和鑒定等。3、細菌的基本結(jié)構(gòu)和特殊結(jié)構(gòu)（繪制細菌結(jié)構(gòu)模式圖）基本結(jié)構(gòu)：細胞壁、細胞膜、細胞質(zhì)、擬核等基本結(jié)構(gòu)。特殊結(jié)構(gòu)：莢膜、S層、鞭毛、菌毛、芽抱等。4、比較革蘭氏陽性和陰性細菌細胞壁的異同陽性陰性厚度厚1580nm薄1075nm肽聚糖多40%95%少10%20%脂類少1%4%多11%22%磷壁酸VX外膜XV脂蛋白XV脂多糖XV5、脂多糖和外膜蛋白的組成及功能組成功能脂多糖（LPS）（革蘭陰性菌所特有，位于外膜的最表面）由類脂A、核心多糖和側(cè)鏈多糖三部分組成能夠吸附鈣離子、鎂離子等陽離子為噬菌體提供特異的吸

8、附受體外膜蛋白（OMP）（外膜中向前的多種蛋白質(zhì)的統(tǒng)稱，按含量和功能分為主要次要兩類）主要OMP微孔蛋白、脂蛋白微孔蛋白：分子篩作用，與細胞粘附和特定物質(zhì)攝取有關(guān)、受體作用脂蛋白：使外膜層與肽聚糖牢固的連接，可作為噬菌體的受體，或參與鐵及其他營養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)運6、細菌的遺傳物質(zhì)擬核和質(zhì)粒。遺傳物質(zhì)DNA6核膜包圍，分布于菌體中央形成擬核（核體）。擬核含細菌的遺傳基因，其功能是控制細菌的遺傳和變異。質(zhì)粒在擬核DNA之外，游離的小型雙股DN酚子，含細菌生命非必須基因，其功能是控制產(chǎn)生菌毛、毒素、耐藥性和細菌素等遺傳性狀。質(zhì)粒能獨立復(fù)制傳給子代。7、細菌莢膜的概念及主要功能概念：某些細菌在其生活過程中，

9、在細胞壁的外周產(chǎn)生一層包圍整個菌體、邊界清楚的粘液樣物質(zhì)。主要功能：抗吞噬抗有害物質(zhì)損傷營養(yǎng)物質(zhì)的儲存場所（主要含多糖類）與廢物排出之地。8、細菌芽抱的特點及意義（某些革蘭陽性菌在一定的環(huán)境條件下，在菌體內(nèi)形成一個圓形或卵圓形的休眠體，稱為芽抱或內(nèi)芽抱。未形成芽抱的菌體稱為繁殖體或營養(yǎng)體，老齡芽抱將脫離原菌體獨立存在，稱為游離芽抱）特點：對高溫、干燥、輻射、化學(xué)藥物等有強大的抵抗力。含水量低，壁厚而致密，通透性差不易著色，折光性強。芽抱內(nèi)新陳代謝幾乎停止，處于休眠狀態(tài)，但能保持潛在萌發(fā)力。不是繁殖器官，一個芽抱萌發(fā)只產(chǎn)生一個營養(yǎng)狀態(tài)的細胞。意義：芽抱抵抗力強，可在自然界中存在多年，是重要的傳染

10、源，但芽抱并不直接引起疾病，只有發(fā)芽成為繁殖體后，才能迅速大量繁殖而致病。芽抱抵抗力強，故應(yīng)以殺滅芽抱座位可靠的滅菌標準。可根據(jù)其形態(tài)位置鑒別細菌第二章細菌的生長繁殖與生態(tài)【內(nèi)容提要】細菌菌體的形成是一個復(fù)雜的過程，涉及物質(zhì)攝取、生物合成、聚合作用（DNAM制，轉(zhuǎn)錄、翻譯）及組裝四個步驟。菌體以二等分分裂法無性繁殖。細菌群體的生長繁殖和培養(yǎng)時間呈特定規(guī)律，用生長曲線表示，并可分為遲緩期、對數(shù)期、穩(wěn)定期及衰亡期四個階段。大多數(shù)細菌可在人工培養(yǎng)基上生長。根據(jù)細菌對氧氣和溫度的需求差異，可將細菌分為需氧菌、厭氧菌、兼性菌以及嗜溫菌、嗜冷菌、嗜熱菌等。生化試驗系根據(jù)細菌傳代特點設(shè)計，用于細菌鑒定。自然

11、界中的細菌多以群落存在，生物被膜是一種重要的表現(xiàn)形式，其抵抗力較游離細菌強，其生長受控于密度感應(yīng)系統(tǒng)。后者通過信號分子作用，在基因水平完成對細菌群落生長的調(diào)控。微生物種群之間在自然界存在著復(fù)雜的相互作用，正常菌群對維護動物健康至關(guān)重要。復(fù)習(xí)思考題1、形成細菌個體的代謝過程有何特點?細菌生長和繁殖速度極快，超過動物細胞10100倍細菌利用各種化合物作為能源的能力遠遠強于動物細胞細菌對營養(yǎng)的需求比動物細胞更為多種多樣，因為他們有多種代謝旁路細菌可利用超長流水線式的生產(chǎn)方式生成大分子物質(zhì)細菌能生產(chǎn)諸如肽聚糖、脂多糖、磷壁酸等特殊物質(zhì)2、物質(zhì)攝取的方式有哪幾種各有何特點單純擴散被動擴散，細胞內(nèi)外物質(zhì)最

12、簡單的一種交換方式。細胞膜兩側(cè)的物質(zhì)靠濃度差（濃度梯度）進行分子擴散，不需要能量。無特異性和選擇性，速度較慢，細胞內(nèi)為溶質(zhì)濃，旦達到平衡，擴散便停止。促進擴散某些物質(zhì)與某些位于細胞膜的特異性載體蛋白相結(jié)合，然后將其轉(zhuǎn)運至細胞內(nèi)，這一過程具有特異性和選擇性，不需要能量。主動運輸細菌吸收營養(yǎng)物質(zhì)的一種主要方式，需要特異性載體蛋白，能將特異性溶質(zhì)逆濃度梯度泉入細胞，因此需要能量?；蛭晦D(zhuǎn)物質(zhì)在運輸?shù)耐瑫r受到化學(xué)修飾，從而能慍緣不斷輸入細胞，此種方式在缺氧環(huán)境中最常見，其過程涉及從可溶物向分子的化學(xué)變化，需要特異莊載體蛋白的參與，需要能量。3,細菌菌體分裂為什么只需較短時間?細菌以二等分分裂法進行無性

13、繁殖。大多數(shù)細菌菌體在適宜條件下分裂需要較短時間，是因為在上一輪的復(fù)制還未完成時，下一輪的細胞分裂已經(jīng)啟動。此外染色體DNA存在多個復(fù)制叉，可使自帶的染色體DNAW時開始部分復(fù)制。4、何謂細菌的生長曲線如何確定有何意義不同時期有何特點細菌生長曲線：將細菌接種在液體培養(yǎng)基并置于適宜的溫度下，定時取樣檢查活菌數(shù)，可發(fā)現(xiàn)其生長過程具有規(guī)律性。以時間為橫坐標、以活菌數(shù)為縱坐標，可得出一條生長曲線。曲線顯示了細菌生長繁殖的四個期。細菌的生長曲線是在體外人工培養(yǎng)條件下觀察到的，在動物體內(nèi)因受諸多因素的制約，未必能出現(xiàn)此種典型的曲線，但對細菌生長規(guī)律的研究及實踐有重要的參考價值。以下為各個時期及其特點：遲緩

14、期細菌來到新環(huán)境的一個適應(yīng)過程。菌體增大，代謝活躍，合成并積累所需酶系統(tǒng)。RN蛤量明顯增加，但DNA含量無變化。此時細菌數(shù)并不增加。對數(shù)期細菌此時生長迅速，以恒定的速度進行分裂繁殖，活菌數(shù)以幾何級數(shù)增長，達到頂峰。生長曲線接條斜的直線。該期的病原菌致病力最強，其形態(tài)、染色特性及生理活性較典型，對抗菌藥物的作用較為敏感。穩(wěn)定期因營養(yǎng)的消耗、代謝產(chǎn)物的蓄積等，細菌繁殖速度卜-降，死亡數(shù)逐步上升，新繁殖的活菌數(shù)與死亡數(shù)大致平衡。該期細菌的形態(tài)及生理形狀常有改變。毒素等代謝產(chǎn)物大多在此時產(chǎn)生。衰亡期細菌開始大量死亡，死菌數(shù)超過活菌數(shù)。細菌菌體變形或自溶，染色不典型，難以進行鑒定。5、何謂培養(yǎng)基種類有哪

15、些培養(yǎng)基還是人工配制的基質(zhì)，含有細菌生長繁殖必需的營養(yǎng)物質(zhì)。培養(yǎng)基制成后，通常都要進行滅菌處理。種類：按營養(yǎng)組成，狀態(tài)，功能差異區(qū)分基礎(chǔ)培養(yǎng)基含多數(shù)細菌生長繁殖所需的基本營養(yǎng)成分，常用新鮮牛肉浸膏，加入適量的蛋白月東、NaCl、磷酸鹽，調(diào)節(jié)pH至7.27.6即成。宮養(yǎng)培養(yǎng)基在基礎(chǔ)培養(yǎng)基內(nèi)，添加葡萄糖、血液或血清等，即成宮養(yǎng)培養(yǎng)基，最常用的是血瓊脂平板（在營養(yǎng)瓊脂中加入5%勺新鮮血液配制成）液體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入1%2%1瓊脂，加熱融化再冷卻凝固。用于細菌的分離純化、菌落觀察、生物活性檢測等，可制成試管斜面或傾倒平面。固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入0.5%的瓊脂。可做穿刺試驗，觀察細菌的運動

16、力。半固體培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基針對特定菌種設(shè)計，根據(jù)其特定產(chǎn)物，在培養(yǎng)基中加入特定作用底物或顯色指示劑，憑肉眼識別顏色既能鑒別菌種。Eg三糖鐵培養(yǎng)基和麥康凱選擇培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某些化學(xué)物質(zhì)，對不同細菌分別產(chǎn)生抑制或促進作用，從而可從混雜多種細菌的樣本分離出所需細菌Eg麥康凱培養(yǎng)基、SS培養(yǎng)基、伊紅美藍培養(yǎng)基等。厭氧拈加生為培養(yǎng)厭氧菌而設(shè)計。6、試述主要的細菌生化反應(yīng)的原理及用途。P28P29各種細菌能夠分解利用的營養(yǎng)物質(zhì)不同，對相同營養(yǎng)物質(zhì)的分解產(chǎn)物也不同，據(jù)此可以設(shè)計特定的生化反映，作為鑒定細菌只用。細菌的合成代謝產(chǎn)物如毒素、色素等也有一定的鑒別意義，但一般不用生化反應(yīng)檢測。常用的生化反應(yīng)有

17、氧化酶實驗、觸酶試驗、氧化發(fā)酵（O/F）實驗、VP試驗及甲基紅實驗等。可采用微量法和常量法。目前一般多用商品化的微量生化試劑檢測劑盒。VP試驗由兩學(xué)者創(chuàng)建得名。大腸桿菌和產(chǎn)氣桿菌均能發(fā)酵葡.萄糖，產(chǎn)酸，產(chǎn)氣，兩者/、能區(qū)別。但產(chǎn)氣桿菌能使丙酮酸脫落，生成中性的乙酰甲基甲醇，后者在堿性溶液中被空氣中的分子樣所氧化，生成的乙二酰與培養(yǎng)基中含月瓜基的化合物發(fā)生反映，生成紅色化合物，是為陽性。大腸桿菌不能生成乙酰甲基甲醇，故為陰性。甲基紅試驗在VP試驗中，產(chǎn)氣桿菌分解匍匐糖，產(chǎn)生的兩分子丙酮酸轉(zhuǎn)變升-分子中性的乙酰甲基甲醇，故最終的酸類較少，培養(yǎng)液pH>5.4。以甲基紅（MR）做指示劑是，溶液呈

18、橘黃色，是為陰性。大腸桿菌分解葡萄糖時，丙酮酸不轉(zhuǎn)變?yōu)橐阴＜兹状迹逝囵B(yǎng)基酸性較強，pHW4.5,甲基紅指示劑呈紅色，則為陽性。7、生物被膜有何特點。生物被膜中的細菌由于被多糖等物質(zhì)包埋而受到保護，對外環(huán)境的抵抗力及對抗生素的抗性均較同種游離的單個菌體強，影響抗生素的療效和滅菌效果。電鏡下可觀察到細菌的生物被膜呈連片狀的菌體團塊。研究表明有的細菌如嗜水氣單胞菌，治病菌株可形成生物被膜，而非致病菌不形成。生物被膜的形成手細菌的密度感應(yīng)系統(tǒng)調(diào)控。8、何謂密度感應(yīng)系統(tǒng)調(diào)控？舉例說明其應(yīng)用價值。P309、試述益生菌和益生元的概念及應(yīng)用價值。某些細菌或真菌有利于宿主胃腸道微生物區(qū)系的平衡，能抑制對宿主

19、有害的微生物的生長，用這些微生物制成的制劑稱為益生菌或益生素。飼料或食品中的某些寡糖例如果寡糖（FOB等成分，不被宿主消化吸收，但等選擇性的刺激宿主消化道有益微生物或飼喂的益生菌的生長，對宿主產(chǎn)生有益作用，此類成分叫益生元或益生素元。益生菌及一生緣亦可聯(lián)合使用。二者對動物有一定的保健作用。10、何謂菌群失調(diào)保持動物正常菌群有何重要意義因患病、外科手術(shù)、環(huán)境改變和濫用抗菌藥物等原因，宿主某個微生物正常菌群中的細菌種類和數(shù)量發(fā)生改變，對機體造成損失，出現(xiàn)一定病理效應(yīng)的狀態(tài)，稱為菌群失調(diào)。例如長期連續(xù)或短期大量口服大腸桿菌敏感的抗菌藥物，殺死了腸道有益大腸桿菌，致使對抗菌藥物不敏感的致病性大腸桿菌或

20、其他腸道致病菌借機大量增值，引起腸道疾病。正常菌群與其宿主之間形成一個共生關(guān)系，具體表現(xiàn)在營養(yǎng)免疫和生物拮抗三個方面。P3211、試述悉生生物學(xué)和悉生動物的概念、實驗動物分類(包括定義)以及培育實驗動物的意義。悉生動物學(xué)：是用無菌動物技術(shù)研究微生物與其宿主相互關(guān)系的生命科學(xué)，它是在科學(xué)研究與臨床醫(yī)學(xué)中應(yīng)用悉生動物的科學(xué)。悉生動物：一切生命形態(tài)都知道的動物。根據(jù)概念可分為五類，其中無特定病原體動物應(yīng)用正日趨廣泛。元由動物不帶任何微生物的動物，即無外源菌動物。實際上某些內(nèi)源性病毒或正常病毒很難去除，因此無菌動物事實上金-個相對概念。無菌動物中還L種無丫球蛋白動物。悉生動物俠義的悉生動物是指無菌動物

21、，廣義也指有目的地帶有某種或某些已知微生物的動物。無菌動物帶有或接種了一種微生物的動物叫單聯(lián)悉生動物，帶兩種微生物者稱雙聯(lián)微生物，依次類推，稱為三聯(lián)或多聯(lián)微生物。無特定病原體動物(SPF)是指不存在某些特定的具有病原性或潛在病原性微生物的動物。例如為了排除某些細菌如假單胞菌屬、變形桿菌屬、克雷伯菌屬等的干擾，可通過無菌動物與這些細菌以外的正常菌群相聯(lián)系培育SPF動物。清潔動物是指動物來源于剖腹產(chǎn)，飼養(yǎng)與半屏蔽系統(tǒng)，其體內(nèi)外不能攜帶人畜共患病和動物主要傳染病的病原體。是尢菌動物與健康動物純正的正常微生物群相聯(lián)系的結(jié)果。普通動物是指在開放條件下飼養(yǎng)，其體內(nèi)外存在著多種微生物和寄生蟲，但不能攜帶人畜

22、共患病病原微生物的動物。培育實驗動物的意義：由于無菌動物不受任何微生物的刺激和干擾，所以可以用于研究動物體內(nèi)外微生物區(qū)系對機體的影響及微生態(tài)學(xué)研究，可用來研究免疫、腫瘤、病理及傳染病的凈化等。由于無菌動物的培育和飼養(yǎng)技術(shù)很困難，所以通常用悉生動物代替。第三章消毒、滅菌及獸醫(yī)微生物實驗室的生物安全【內(nèi)容提要】消毒和滅菌是獸醫(yī)微生物學(xué)實踐中的最常用的措施。常用的火焰滅菌法、熱空氣滅菌法、高壓蒸汽滅菌法、巴氏消毒法及煮沸滅菌法各有特點和實用范圍?？梢姽庵械淖贤饩€和紅外線有殺菌作用，光復(fù)活作用是一個值得注意的現(xiàn)象。r射線和微波等也常用于滅菌。濾過除菌應(yīng)用廣泛，制造生物制品等藥品的車間的空氣需要濾過并要

23、求達到一定的潔凈程度?；瘜W(xué)消毒劑的功效易受環(huán)境因素的影響，抗生素等用于細菌感染的治療。細菌素對同種或類似細菌有一定的抑殺作用。根據(jù)從事的病原微生物的危害性的差異，獸醫(yī)微生物實驗室通常通常分為生物安全等級14級(BSL14)4種規(guī)格，BSL4是最高安全級別。我國農(nóng)業(yè)部將動物病原微生物分為一至四類，一類危害性最大。復(fù)習(xí)思考題1、滅菌、消毒、防腐、無菌的概念？答：(1)滅菌：殺滅物體上所有微生物的方法，包括殺滅細菌芽胞霉菌抱子在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。(2)消毒：殺滅物體上病原微生物的方法，僅要求達到消除傳染性的目的，而對非病原微生物及其芽胞、抱子并不嚴格要求全部殺死。(3)防腐：阻止或抑

24、制物品上微生物生長繁殖的方法，微生物不一定死亡。(4)無菌：無菌為不存在活細菌的意思。防止或杜絕細菌進入動物、人或其他物品的方法稱為無菌操作。2、物理消毒滅菌方法主要有哪些如何合理選用答：(1)熱力滅菌法：高溫滅菌法是最古老、作用最大、應(yīng)用最廣、使用最簡便以及效果最可靠的滅菌方法。熱力使蛋白質(zhì)中的氫鍵破壞使之變性或凝固，使雙股DN的開為單股，活化核酸酶使單股DN幽裂。細菌繁殖體對其最為敏感，其次的真菌和病毒，細菌芽胞對熱有很強的抵抗力作用。熱力滅菌法分為干熱滅菌和濕熱滅菌兩大類，在同一溫度下后者的效力比前者大，這是因為濕熱中菌體蛋白較易凝固、濕熱穿透力比干熱強、蒸汽變?yōu)橐簯B(tài)時可釋放大量潛熱迅速

25、提高被滅菌物體的溫度。(2)輻射滅菌法輻射包括電磁波輻射和粒子輻射。輻射除可被一些產(chǎn)色素細菌利用作為能量源外，對多數(shù)細菌有損害作用。(3)超聲波殺菌法超聲波裂解細胞的主要機制：它通過水發(fā)生空(腔)化作用，在液體中造成壓力改變，應(yīng)力薄弱區(qū)形成許多小空腔，逐漸增大，最后崩裂。有殘存，費用頗大，故未應(yīng)用于消毒滅菌。目前主要用于裂解細胞，提取細胞組分進行研究。(4)濾過除菌法概念：是通過機械、物理阻流作用將液體或空氣中的細菌等微生物除去的方法。適用條件：通常不能除去病毒、支原體、細菌L型等微生物。糖培養(yǎng)液、各種特殊的培養(yǎng)基、血清、毒素、抗毒素、抗生素、維生素、氨基酸等不能加熱滅菌的液體常用濾器過濾除菌

26、。止匕外，還可以進行病毒的分離。利用空氣過濾器可以進行超凈工作臺、無菌隔離器、無菌操作室、實驗動物室以及疫苗、藥品、食品等生產(chǎn)廠房的空氣濾過除菌。（5）干燥及低溫抑菌法干燥一失水一新陳代謝障礙一菌體蛋白質(zhì)變性或鹽類濃度增高一死亡利用高濃度的鹽溶液或糖溶液保存食品，是由于高濃度的溶液吸取菌體內(nèi)的水分，造成微生物的生理性干燥而達到抑菌的目的。概念方法、滅菌機制條件干火以火焰直接灼燒灼燒（直接用火焰火菌）適用于耐燒的接種針（環(huán)）、金屬器熱焰殺死物品中病原具、試管口等的火菌滅滅微生物的方法焚燒（直接點燃或者焚燒爐內(nèi)常用于燒毀的物品，如患病動物尸菌菌焚燒）體、病畜禽的墊料及其他污染廢棄物法法等熱利用干熱

27、滅菌在干熱情況下，由于熱空氣的適用于圖溫卜/、損壞、/、艾質(zhì)、不蒸空器，以干熱空氣穿透力較低，需在160c維持發(fā)的物品，如各種玻璃器皿、瓷器、氣進行滅菌的方法2h才能達到殺死所有微生物及金屬器械等滅其芽胞、抱子的目的。菌法濕煮常壓卜煮沸1020min可殺死外科手術(shù)器械、注射器、針頭以及食熱沸所有細菌的繁殖體，芽胞長需具等多用此法消毒滅消煮沸12h才能被殺死。菌毒若在水中加入2%碳酸鈉或法法2%5%石炭酸，可以提高沸點，增強殺菌力巴氏消毒法以較低溫度殺滅液態(tài)食品中的病原微生物或特定微生物，而乂不嚴重損害n營養(yǎng).低溫維持巴氏消毒法：在6365c維持30min；目前主要應(yīng)用于葡相酒、啤酒、果酒、牛乳

28、等食品的消毒。超局溫巴氏消毒法的鮮乳在常溫下保質(zhì)期可長達半年。高溫瞬時巴氏消毒法：在7172c保持15s；成分和風(fēng)味的消毒方法超高溫巴氏消毒法：在132c保持12s。加熱消毒后迅速冷卻至10c以下（冷擊法）流通越八、汽消毒法是利用一個標準大氣壓卜100C的流通蒸汽進行物品消毒，又稱常壓蒸汽,肖毒法100c的蒸汽維持30min足以殺死細菌的繁殖體，但細菌的芽胞和真菌抱子不能被全部殺滅。該法常用阿諾德流通蒸汽滅菌器或蒸籠。流通越八、汽滅菌法利用反復(fù)多次的流通蒸汽間歇加熱以達到殺滅所有微生物的方法，又稱間歇滅國法或丁達爾火菌法在流通蒸汽滅菌器內(nèi)進行第一次流通蒸汽滅菌后,將物品移植37c保溫箱中保溫過

29、夜，待芽胞萌發(fā)出芽，次日以同樣的方式再進一次滅菌和保溫過夜，如此連續(xù)3次以上，可達到完全火菌的效果。此法常用于一些不耐高溫的培養(yǎng)基，如雞蛋培養(yǎng)基、血清培養(yǎng)基、糖培養(yǎng)基的火菌。如將物品在7080c力口熱1h0連續(xù)6次，也可達到火菌目的，且可/、破壞血清等物質(zhì)。根據(jù)滅菌對象/、同，溫度、加熱時間、次數(shù)，均可適當增減。高用局壓蒸汽滅菌在103.4kPa蒸汽壓下，于是應(yīng)用最廣、最有效的滅菌方法。凡類另U壓器H希滅菌的方12,.步港!年閘典0min,可殺不怕潮濕的物品，如各種培非電離輻射:、哂滅S宏1g兄指紅外線和外線之間的肉可見的光線，長400800nm止匕布啊波加加附咽他傅慚所懶困彳頰，若將某些染料

30、如結(jié)占紫、美藍、汞澳紅、伊紅、沙黃等加到培養(yǎng)基或涂在外傷表面，能增強可見光的殺rr=，/、r、.十tvt.、r、r»t4、兼幽IW寸眼展現(xiàn)制：細庖器械、攵檢例假印聯(lián)國仰旗對綏旅爾動勿大體等均可。革蘭陽性菌對光感作用比陰性敏感，美藍、汞澳紅、伊紅僅作用困件用，隹一嘰家林力尢惑作用。一般在有氧的情況才出現(xiàn)光感作用。（染料激活氧或染料氧化起殺菌作用）于革二陽性困，口沙黃則作用于革蘭陰性菌。日光直射日光有強烈的殺菌作用多數(shù)微生物在直射日光的照射下半小時到數(shù)小時即可死亡。芽胞往往須經(jīng)20h才可死亡。效果影響因素眾多。實際生活中，日光對被污染的土壤、牧場、畜舍、用具等的消毒以及江河的自凈作用均后

31、重要意義紫外線紫外線波長200300nm部分具有殺菌作用，其中265266nm殺菌力最強。紫外線損害DNA構(gòu)型，干擾DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄；使空氣中的分子氧變?yōu)槌粞?，釋放出氧化能力強的氧原子。實驗室通常使用的紫外線殺菌燈，殺菌力強而穩(wěn)定紫外線的穿透力弱，故只能用于微生物實驗室、無菌室、手術(shù)室、傳染病房、種蛋室等的空氣消毒，或用于不能用高溫或化學(xué)藥品消毒的表面消毒；光復(fù)活作用。紅外線紅外線是波長為0.771000微米的電磁波，尤以110微米的熱效應(yīng)最強利用紅外線烤箱滅菌。無需空氣傳導(dǎo)，可是照射物體表面迅速升溫。火菌作用與干熱相似，滅菌時間、所需溫度亦同于熱空氣滅菌法。此法多用于醫(yī)療器械的滅菌。微波微

32、波主要是一種波長1mn®J1m的超圖頻電磁波消毒中常用的微波頻率為9152450MHz主要是利用微波的加熱作用?？赏高^玻璃、塑料薄膜、陶瓷等物質(zhì)，但不能透過金屬表面。目前主要用于食品，業(yè)，醫(yī)藥方面用于維生素和中藥藥丸等的滅菌。時間短，加熱均勻是其顯著特點。電離輻射放射性同位素的射線（即a射線、B射線、丫射線）和X射線以及高能質(zhì)子、中子等可將被照射物質(zhì)原子核周圍的電子擊出，引起電離，故稱為電離輻射。射線使水電離出游離基（強烈的還原劑和氧化劑）直接作用于細菌；射線使酶失活；導(dǎo)致包括DNA在內(nèi)的細胞內(nèi)物質(zhì)分解；在足夠”里口寸，對各種細困均啟致死作用。在實際工作中，其他等缺乏穿透力不實用，主

33、要應(yīng)用X射線、丫射線、B射線。電離輻射多用于大量一次性塑料制品的消毒，亦可用于食品、飼料的消毒，且不破壞其營養(yǎng)成分。3、影響消毒劑作用的因素消毒劑的性質(zhì)和作用時間：絕大多數(shù)消毒劑在高濃度時殺菌作用大，濃度低至一定程度只有抑菌作用。過濃不一定能提高消毒效力。一定濃度下，對細菌作用的時間越長，效果越好。微生物的種類和數(shù)量：同一消毒劑對不同種類處于不同事情的微生物效果不同。微生物數(shù)數(shù)量越大，所需消毒時間就越長。溫度：一般溫度升高可增強殺菌效果。酸堿度：消毒劑的殺菌效果受PH的影響。PH也影響消毒劑的電離度，一般未電離的因子易通過細胞壁殺菌效果好。有機物：環(huán)境中有有機物，特別是蛋白質(zhì)能和許多消毒劑結(jié)合

34、，嚴重影響效果。藥物的相互拮抗：消毒劑理化性質(zhì)不同，兩種藥品合用時可能產(chǎn)生相互拮抗，使藥效降低影響消毒效果的還有濕度、穿透力、表面張力及拮抗物質(zhì)等。4、試述我國獸藥GMP對獸藥生產(chǎn)潔凈室(區(qū))空氣潔凈度的劃分。答：100級、10000級、100000級、300000級5.比較消毒劑、防腐劑，化學(xué)治療劑的殺菌機制。答：消毒劑和防腐劑之間沒有嚴格界限。消毒劑與化學(xué)治療劑不同，它在殺滅病原微生物的同時，對動物體的組織細胞也有損害作用，所以只能外用或用于環(huán)境的消毒，其中少數(shù)不被吸收的化學(xué)消毒劑亦可用于消化道的消毒。而化學(xué)治療劑對于宿主和病原微生物的作用具有選擇性，她能使微生物受抑制或死亡，而對宿主細胞

35、毒副作用甚小。消毒劑：用來殺滅病原微生物的化學(xué)藥劑。防腐劑：用于抑制微生物生長繁殖的化學(xué)藥劑?；瘜W(xué)治療劑：用于消除宿主體內(nèi)病原微生物或其他寄生蟲的化學(xué)藥品稱為化學(xué)治療劑。6、抗生素和細胞素二者的作用原理如何？(1)抗生素：某些微生物在代謝中產(chǎn)生的一類能抑制或殺死另一些病原微生物的物質(zhì)。作用原理：干擾細菌細胞壁的合成；損傷細胞膜而影響其通透性；影響菌體蛋白質(zhì)的合成；影響核酸的合成；(2)細菌素：是某種細菌產(chǎn)生的一種具有殺菌作用的蛋白質(zhì)。只能作用于與它同種不同株的細菌以及與它親緣關(guān)系相近的細菌第四章細菌的感染與致病機理【內(nèi)容提要】細菌是否有致病性，經(jīng)典的依據(jù)是柯赫法則，近年來提出的基因水平的柯赫法

36、則對此標準做了補充和完善。就某種病原菌而言，其致病性一般通過測定LD50來定量。細菌的致病性在很大程度上取決于其毒力因子，包括侵襲力與毒素，以及毒力因子的分泌系統(tǒng)。侵襲力導(dǎo)致病原菌在機體內(nèi)定殖、突破機體的防御屏障、內(nèi)化作用、繁殖與擴散。毒素有外毒素和內(nèi)毒素之分，外毒素是具有特異性毒性作用的蛋白質(zhì)，典型結(jié)構(gòu)為A-B亞單位的聚體。內(nèi)毒素為LPS的類脂A,耐熱，具有致熱作用等。有關(guān)病毒致病性的現(xiàn)代觀點不僅要考慮病原菌，還要考慮宿主及二者的相互作用，機會致病菌因此得以重視。細菌的毒力可用人工的方法增強或減弱，并受到溫度、離子濃度等多種環(huán)境因子、非編碼小RNAR二元信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)等的調(diào)節(jié)。復(fù)習(xí)思考題(16

37、重點)1 .致病性與毒力的概念。(1) 一定種類的病原菌在一定的條件下，能在宿主體內(nèi)引起感染的能力稱為致病性。(2)病原菌致病力的強弱程度稱為毒力。2.經(jīng)典的柯赫法則。由德國細菌學(xué)家羅伯特柯赫890年提出，是確定某種細菌是否具有致病性的主要依據(jù)：(1)特殊的病原菌應(yīng)在同一疾病中查見，在健康者不存在：(2)此病原菌能被分離培養(yǎng)而得到純種；(3)此純培養(yǎng)物接種易感動物，能導(dǎo)致同樣病癥。3 .LD50的概念。答：半數(shù)致死量(LD5。是指能使接種的實驗動物在感染后一定時限內(nèi)死亡一半所需的微生物量或毒素量。4 .外毒素與內(nèi)毒素的區(qū)別。概念特性組成化學(xué)性產(chǎn)生耐熱性毒性作毒性程致熱性免疫原能含產(chǎn)質(zhì)用度性生共

38、毒素外毒素是某些蛋白質(zhì)由某些通常不特異局,往對宿主強，刺能，用大多數(shù)病原菌革蘭陽耐熱性，為往致死/、致熱激機體甲醛處外*在生長性困或細胞毒產(chǎn)生中理由A、繁殖過陰性菌素、腸和抗體B兩種程中所分泌毒素或(抗毒亞單位產(chǎn)生的神經(jīng)毒素)組成。對宿主素，對*A亞單細胞啟特點的毒性的細胞或素的活可溶性組織發(fā)性中蛋白質(zhì)揮特點心，B作用亞單位為結(jié)合部位內(nèi)毒素特指革蘭陰性菌中的脂多糖(LPS)成分，細菌在死亡后破裂或用人工方法裂解菌體后才釋放脂多糖由革蘭陰性菌裂解產(chǎn)生極為耐熱全身性，致發(fā)熱、腹瀉、嘔吐弱，很少致死常致宿主發(fā)熱較弱，免疫應(yīng)答/、足以中和毒性不能LPS由O特意多糖側(cè)鏈、非特異核心多糖和類脂A組成。5

39、.感染的類型。答：隱形感染和顯性感染6 .細菌毒力減弱的方法答：(1)長時間在體外連續(xù)培養(yǎng)傳代；(2)在高于最適生長溫度條件下培養(yǎng)；(3)在含有特殊化學(xué)物質(zhì)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)；(4)通過非易感動物；(5)通過基因工程的方法；7 .試述致病菌侵入宿主細胞的主要過程。答：定殖(細菌感染的第一步就是在體內(nèi)定殖)一干擾或逃避宿主的防御機制(抗吞噬作用、抗體液免疫機制)一內(nèi)化作用(指某些細菌在粘附在細胞組織后能進入吞噬細胞或非吞噬細胞內(nèi)部的過程)一在體內(nèi)增殖(核心問題，增殖速度對致病性極其重要)一在體內(nèi)擴散8 .什么樣的細菌能進行內(nèi)化作用，意義何在？答：(1)結(jié)合桿菌、李氏桿菌、衣原體等嚴格的胞內(nèi)寄生菌及大

40、腸桿菌、沙門菌、耶爾森菌等胞外寄生菌；(2)意義：細菌通過這種位移作用進入深層組織，或進入血液循環(huán)，借以從感染的病發(fā)原灶擴散至全身或較遠的靶器官。宿主細胞為進入其中的細菌提供了一個增殖的小環(huán)境和庇護所，使細菌逃避宿主免疫機制的殺滅。9 .胞外蛋白酶有何致病作用，舉例說明。細菌分泌的蛋白酶稱為胞外蛋白酶。它們具有多種致病作用，例如激活外毒素、滅活細菌中的補體等，有的蛋白酶本身就是外毒素。止匕外，最主要的作用是造成組織基質(zhì)或細胞膜的損傷，增加其通透性，有利于細菌在體內(nèi)擴散。此毒素常見的有：透明質(zhì)酸酶，分解基地組織，葡萄球菌、鏈球菌可產(chǎn)生；膠原酶，分解ECMfr的膠原蛋白，見之于梭菌、氣單胞菌等；神

41、經(jīng)氨酸酶，分解細胞膜的磷脂，產(chǎn)氣莢膜梭菌等可產(chǎn)生。10 .什么是類毒素，有何用途？答：外毒素在0.4%的甲醛溶液作用下，經(jīng)過一段時間可脫毒，但仍保留原有抗原性，稱為類毒素。注入機體后可刺激機體產(chǎn)生抗毒素，可作為疫苗進行免疫接種。11 .舉例說明細菌毒力因子重要的分泌系統(tǒng)的主要特點。答：具有接觸介導(dǎo)的特征：以腸致病性大腸桿菌(EPEC為例，置37c的處于對數(shù)生長期的EPECW宿主細胞接觸后，T3s以量分泌蛋白質(zhì)并進入宿主細胞。EPEC勺4型菌毛(BFP對激活此分泌系統(tǒng)起關(guān)鍵作用。T3SS的這種接觸激活作用可被氯霉素抑制。12 .什么是機會致病菌為什么應(yīng)予以重視是指某些細菌通常不主動入侵宿主，但當

42、宿主的免疫屏障被打開或免疫功能異常時，這類細菌就會進入機體的血液或組織，造成感染并致病。細菌致病性與毒力的傳統(tǒng)概念的缺陷是僅考慮病原菌本身，即著重研究那些專性致病菌，忽視了宿主因素以及宿主和病原菌的相互作用。13 .環(huán)境因子如何影響細菌毒力因子的調(diào)節(jié)，舉例。(1)溫度：嗜水汽單胞菌的毒素、菌毛在25c左右表達量最佳；(2)鐵：它不僅可以誘導(dǎo)鐵載體、鐵載體受體及其它鐵結(jié)合蛋白受體等與鐵代謝有關(guān)的成分表達，而且還對某些細菌毒素有調(diào)節(jié)作用，如類志賀毒素；(3)鈣：鈣對耶爾森菌Yops的表達有調(diào)節(jié)作用。Yops是耶爾森菌的一系列外膜蛋白，是重要的毒力因子；(4)滲透壓：滲透壓對霍亂弧菌的毒力及菌毛的表

43、達有調(diào)節(jié)作用，在宿主組織相近的生理范圍內(nèi)表達量最高。14 .什么是非編碼小RNA答：是一大類不編碼蛋白質(zhì)的RN的子，存在于所以生物體中。sRNA乍為一種新的調(diào)控因子，可與mRN船合，導(dǎo)致后者降解；或與蛋白質(zhì)結(jié)合，影響蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能。15 .什么是二元信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)？其在病原信號傳遞上有何作用。答：最簡單的二元信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)(TCSTS用組氨酸激酶(HK和反應(yīng)調(diào)節(jié)因子(RR組成。感受到外界環(huán)境信號后將RR磷酸化，將外界信號傳遞到胞內(nèi)。整個雙組分信號通路由信號輸入，HK自身磷酸化、RR磷酸化及信號輸入等環(huán)節(jié)構(gòu)成。TCSTSS病原菌的信號傳導(dǎo)中起著極為重要的作用，包括病原菌對宿主的識別和侵襲，對環(huán)境的代謝性適應(yīng)。對滲透壓改變的勝利應(yīng)答、趨化性等等。第五章細菌的遺傳變異【內(nèi)容提要】細菌遺傳變異的物質(zhì)基礎(chǔ)組合要是基因組。質(zhì)粒作為細菌基因組外自我復(fù)制的遺傳物質(zhì)，控制細菌的某些次要形狀，如抗性等，并可以轉(zhuǎn)移或丟失。轉(zhuǎn)位因子包括插入序列、轉(zhuǎn)座子、Mu噬菌體及基因盒-整合子系統(tǒng)，具有可移動性和不穩(wěn)定性。毒力島是具有潛在可移動性的毒力基因群。轉(zhuǎn)化、傳導(dǎo)和接合是細菌個體間交換遺傳物質(zhì)的天然方，采用原生質(zhì)體融合等人工方法也可達到相似的目的。掌握細菌遺傳變異的規(guī)律，不僅有利于感染性疾病