血清直接膽紅素D-BIL測(cè)定

1、血清直接膽紅素D-BIL測(cè)定1 .實(shí)驗(yàn)原理直接膽紅素與2,4-二氯苯胺重氮鹽形成重氮化合物,在酸性條件下呈紅色.2 .標(biāo)本：2.1 病人準(zhǔn)備：無特殊要求.最好用禁食的標(biāo)本以減少乳糜血的干擾.2.2 類型：血清、肝素或EDTA1漿,應(yīng)避光保存.3 .標(biāo)本存放：1525c保存可穩(wěn)定2天；28c保存可穩(wěn)定7天;-20C保存可穩(wěn)定3個(gè)月,如冰凍保存,不可反復(fù)凍融！.4 .標(biāo)本運(yùn)輸：常溫條件下避光保存運(yùn)輸.5 .標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、脂血、非避光保存運(yùn)輸?shù)臉?biāo)本.6 .實(shí)驗(yàn)材料6.1 試劑：奧林巴斯總膽紅素試劑盒：試劑+空白對(duì)照6.1.1 試劑準(zhǔn)備：試劑為即用式.6.1.2 試劑穩(wěn)定性與貯存：

2、試劑避光保存于28C,假設(shè)無污染,可穩(wěn)定至失效期.試劑有效期為18個(gè)月.試劑2必需避光保存試劑不可冰凍.6.1.3 變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有濁度時(shí),說明有細(xì)菌污染,不能繼續(xù)使用.6.1.4 考前須知：此試劑為體外診斷用.警告！腐蝕劑！不要入口.防止和眼睛,皮膚或衣服接觸.如果接觸到,立即用大量的水沖洗受損害的部位15分鐘.接觸到眼睛或吞服,立即尋找醫(yī)療保護(hù).6.2 校準(zhǔn)品：使用奧林巴斯公司提供的校準(zhǔn)品對(duì)自動(dòng)分析儀進(jìn)行校準(zhǔn),參見生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SO&件6.3 質(zhì)控品：參見生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SO淺:件7 .儀器：奧林巴斯AU270C&化分析儀8 .操作步驟8.1 工程根本參

3、數(shù)：參見生化檢驗(yàn)奧林巴斯AU270C&化分析儀工程測(cè)定參數(shù).SO淺:件8.2 儀器操作步驟：參見生化檢驗(yàn)奧林巴斯AU270C&化分析儀操作規(guī)程.SO&件檢驗(yàn)結(jié)果的判斷與分析10 .質(zhì)量限制：在每一批標(biāo)本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析,以2s為質(zhì)控警告限,3s為失控限,繪制質(zhì)控圖,判斷是否在控.質(zhì)控規(guī)那么參見生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SO找件.11 .計(jì)算方法以TruCalU復(fù)合校準(zhǔn)品校準(zhǔn)儀器后,在病人結(jié)果可報(bào)告范圍內(nèi),儀器直接報(bào)告可靠的檢測(cè)結(jié)果無需手工計(jì)算,以以mol/L報(bào)告.手工測(cè)定計(jì)算方法為： Au直接膽紅素以mol/L=x校準(zhǔn)液濃度 As12

4、 .參考值范圍：6.8mol/L參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差異.根據(jù)好的實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn),每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立自己的參考值.13 .臨床意義：膽紅素是血紅蛋白的降解產(chǎn)物.游離膽紅素非極性很強(qiáng),幾乎不溶解于水.在血液中與白蛋白形成復(fù)合物由脾臟向肝臟運(yùn)輸.在肝臟中,膽紅素與葡萄糖醛酸結(jié)合,生成可溶性膽紅素葡萄糖醛酸酯由膽管排入腸道.溶血肝前黃疸、實(shí)質(zhì)的肝損傷肝性黃疸和膽管堵塞肝后黃疸都會(huì)導(dǎo)致血液膽紅素增高,形成高膽紅素血癥.人群中常見先天性慢性高膽紅素血癥,稱為Gilbert綜合癥.由于膽紅素降解酶的功能滯后以及出生后紅細(xì)胞破碎增多,使6070%勺嬰兒血液出現(xiàn)總膽紅素增高.常用的膽紅素檢測(cè)方

5、法能檢測(cè)總膽紅素和直接膽紅素.直接膽紅素的測(cè)定主要檢測(cè)水溶性的結(jié)合膽紅素,因此可以根據(jù)總膽紅素和直接膽紅素的差來估計(jì)游離膽紅素的含量.14 .操作性能14.1 線性范圍：1.7171mol/L14.2 精密度：精密度白評(píng)估是根據(jù)NCCLSt薦的標(biāo)準(zhǔn)方法5,AU2700比內(nèi)精密度小于4%gSDK0.04,總精密度小于5MSDK0.07o用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS規(guī)那么.批內(nèi)精密度n=20x(mol/L)s(mol/L)CV(%)批間精密度n=20X(mol/L)s(mol/L)CV(%)樣品16.00.203.34樣品16.20.193.12樣品212.80.121.00樣

6、品213.00.191.46樣品336.40.260.71樣品335.40.461.3014.3 方法學(xué)比擬：本公司的試劑盒y與某商品化試劑盒x,同時(shí)對(duì)85個(gè)樣品進(jìn)行DBIL檢測(cè),將檢測(cè)結(jié)果作方法學(xué)比擬,其統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下：y=0.95x+0.68mol/L;r=0.995.14.4 靈敏度：1.7mol/L.14.5 病人結(jié)果可報(bào)告范圍：1.7171mol/L15超出范圍結(jié)果處理本法線性上限為171mol/Lo樣品測(cè)定值超過上限時(shí),應(yīng)將樣品用0.9%氯化鈉溶液作1:1稀釋,重新測(cè)定,結(jié)果乘以2.16 .病危報(bào)警值的處理無.17 .方法局限性17.1 本法線性上限為171mol/Lo樣品測(cè)定值超過

7、上限時(shí),應(yīng)將樣品用0.9%氯化鈉溶液作1:1稀釋,重新測(cè)定,結(jié)果乘以2.17.2 干擾物質(zhì)：當(dāng)樣品中抗壞血酸濃度01704mol/L,甘油三酯濃度w22.6mmol/L時(shí)沒有觀察到干擾.血紅蛋白濃度0.50g/L將產(chǎn)生干擾.18 .補(bǔ)救舉措：當(dāng)儀器發(fā)生故障時(shí),迅速聯(lián)系儀器廠家進(jìn)行維修.rd19 .參考文獻(xiàn):Tietz,N.W.(Ed),FundamentalsofClinicalChemistry,3Edition,W.B.Saunders,1987.VandenBergh,A.andMueller,P.,Biochem乙77:90,1916NCCLS,InterferenceTestingi

8、nClinicalChemistry,EP7-P,1986.Young,D.S.,EffectsofDrugsonClinicalLaboratoryTests,4thEdition,AACCPress,1995.NCCLS,EvaluationProtocolEP5-T2,1992.Rand,R.N.,DIPasque,A.,ClinChem1962;8:570Henry,J.,Cannon,D.C.,Winkelmann,J.V.,Clinicalchemistry,principlesandtechnics,Harper&RowPublishersIns.,HagerstownMaryland,1974:1042Thomas