分子技術(shù)在腫瘤靶向藥物治療的應(yīng)用

1、 腫瘤靶向治療腫瘤靶向治療（ ）n依據(jù)已知腫瘤發(fā)生的異常分子和基因，設(shè)計(jì)和研發(fā)針對(duì)這些特定的分子和靶點(diǎn)藥物，選擇性殺傷腫瘤細(xì)胞的治療方法；n靶向治療的前提就是明確腫瘤的特異靶基因變異類存在與否和變異類型；n個(gè)體化治療的雛形。熒光原位雜交（熒光原位雜交（ ， ）技術(shù)）技術(shù)簡(jiǎn)介簡(jiǎn)介n = n利用熒光標(biāo)記的探針檢測(cè)組織或細(xì)胞內(nèi)與其互補(bǔ)的片段n應(yīng)用：遺傳病診斷 血液腫瘤 實(shí)體瘤n樣本：羊水、絨毛、流產(chǎn)組織、外周血、骨髓、體液及各種腫瘤組織等用已知的標(biāo)記單鏈核酸為探用已知的標(biāo)記單鏈核酸為探針，按照堿基互補(bǔ)的原則，針，按照堿基互補(bǔ)的原則，與待檢材料中未知的單鏈核與待檢材料中未知的單鏈核酸進(jìn)行異性結(jié)合，形成

2、可被酸進(jìn)行異性結(jié)合，形成可被檢測(cè)的雜交雙鏈核酸。由于檢測(cè)的雜交雙鏈核酸。由于DNA分子在染色體上是沿著分子在染色體上是沿著染色體縱軸呈線性排列，因染色體縱軸呈線性排列，因而可以探針直接與染色體進(jìn)而可以探針直接與染色體進(jìn)行雜交從而將特定的基因在行雜交從而將特定的基因在染色體上定位染色體上定位熒光標(biāo)記探針探針變性樣本DNA變性雜交工作原理工作原理檢測(cè)染色體易位（）在淋巴瘤分型中的應(yīng)檢測(cè)染色體易位（）在淋巴瘤分型中的應(yīng)用用技術(shù)在淋巴造血系統(tǒng)腫瘤技術(shù)在淋巴造血系統(tǒng)腫瘤中的應(yīng)用中的應(yīng)用檢測(cè)技術(shù)特點(diǎn)檢測(cè)技術(shù)特點(diǎn)n不同類型的淋巴瘤染色體易位類型不同n優(yōu)點(diǎn)n適用于形態(tài)學(xué)上難以診斷且結(jié)果不理想的標(biāo)本；n適用于細(xì)

3、胞數(shù)量少，形態(tài)不典型的活檢及穿刺組織。n必須結(jié)合組織形態(tài)學(xué)和免疫組化結(jié)果作最后診斷！基因檢測(cè)在淋巴瘤的應(yīng)用基因檢測(cè)在淋巴瘤的應(yīng)用淋巴瘤淋巴瘤檢測(cè)基因檢測(cè)基因臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用套細(xì)胞淋巴瘤套細(xì)胞淋巴瘤1 1融合基因融合基因輔助診斷濾泡性淋巴瘤濾泡性淋巴瘤2 2融合基因融合基因輔助診斷、判斷預(yù)后彌漫性大彌漫性大B B細(xì)胞淋細(xì)胞淋巴瘤巴瘤6 6基因斷裂重組基因斷裂重組輔助診斷、判斷預(yù)后伯基特淋巴瘤伯基特淋巴瘤基因斷裂重組基因斷裂重組輔助診斷粘膜相關(guān)淋巴組織粘膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤淋巴瘤基因斷裂基因斷裂輔助診斷胃粘膜相關(guān)淋巴組胃粘膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤織淋巴瘤2 2融合基因融合基因指導(dǎo)治療彌漫大彌漫大B B

4、細(xì)胞淋巴瘤（）細(xì)胞淋巴瘤（） 按免疫組化亞型分為按免疫組化亞型分為 5 5陽(yáng)性陽(yáng)性 生發(fā)中心生發(fā)中心B B細(xì)胞樣變細(xì)胞樣變型型()()、 非生發(fā)中心非生發(fā)中心B B細(xì)胞樣細(xì)胞樣變型變型() 3() 3類類可根據(jù)可根據(jù)10、6、1的表達(dá)區(qū)分生發(fā)中心的表達(dá)區(qū)分生發(fā)中心B細(xì)胞樣變型、非細(xì)胞樣變型、非生發(fā)中心生發(fā)中心B細(xì)胞樣變型。細(xì)胞樣變型。30%瘤細(xì)胞表達(dá)瘤細(xì)胞表達(dá)10或或10(-)、6(+)、1(-)診斷為診斷為;其他病例則為。其他病例則為。 6 6基因斷裂輔助診斷彌漫性大基因斷裂輔助診斷彌漫性大B B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤 6 6基因斷裂重排判斷預(yù)后基因斷裂重排判斷預(yù)后目前研究確定至少目前研究確定

5、至少40%40%的涉及的涉及6 6基因重排。基因重排。 一項(xiàng)針對(duì)一項(xiàng)針對(duì)102102名患者的名患者的6 6重排情況及其與預(yù)后關(guān)系的研究顯示，重排情況及其與預(yù)后關(guān)系的研究顯示，6 6陽(yáng)性患者診斷治療陽(yáng)性患者診斷治療3636個(gè)月后，疾病停止發(fā)展的比率為個(gè)月后，疾病停止發(fā)展的比率為82%82%，攜，攜帶有帶有6 6重排的病例預(yù)后較好。重排的病例預(yù)后較好。 6 6 基因斷裂與彌漫性大基因斷裂與彌漫性大B B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞淋巴瘤, K. N J , 1994. 331(2): p. 74-80.結(jié)果判讀結(jié)果判讀1融合基因可見(jiàn)于95%的套細(xì)胞淋巴瘤，是套細(xì)胞淋巴瘤與其他淋巴瘤鑒別的重要指標(biāo)。u1 1融合基

6、因輔助診斷套細(xì)胞淋巴瘤。融合基因輔助診斷套細(xì)胞淋巴瘤。1 1融合基因與套細(xì)胞淋巴瘤融合基因與套細(xì)胞淋巴瘤l l 正常細(xì)胞：兩個(gè)紅色信號(hào)，兩個(gè)綠色信號(hào)。正常細(xì)胞：兩個(gè)紅色信號(hào)，兩個(gè)綠色信號(hào)。l l 異常細(xì)胞：一個(gè)紅色信號(hào)，一個(gè)綠色信號(hào)，兩異常細(xì)胞：一個(gè)紅色信號(hào)，一個(gè)綠色信號(hào)，兩個(gè)融合信號(hào)。個(gè)融合信號(hào)。2121基因檢測(cè)試劑盒基因檢測(cè)試劑盒 探針：探針： 2 12 1凋亡抑制因子凋亡抑制因子2 2基因（基因（ 2222）, ,位于位于1111號(hào)染色體號(hào)染色體; ;粘膜相關(guān)淋巴組織基因（粘膜相關(guān)淋巴組織基因（ 1 1 1 1 ），位于），位于1818號(hào)染色體。號(hào)染色體。 2基因與1基因的融合導(dǎo)致凋亡抑

7、制的增加，引起細(xì)胞不依賴于抗原刺激的生存優(yōu)勢(shì)。 u 21 21融合基因的檢測(cè)可以指導(dǎo)抗治療融合基因的檢測(cè)可以指導(dǎo)抗治療 胃淋巴瘤與幽門螺旋桿菌（）感染導(dǎo)致的慢胃淋巴瘤與幽門螺旋桿菌（）感染導(dǎo)致的慢性胃炎有關(guān)，性胃炎有關(guān)，1212融合基因陰性的患者抗治療有效，融合基因陰性的患者抗治療有效，陽(yáng)性患者抗治療無(wú)效。陽(yáng)性患者抗治療無(wú)效。2121融合基因檢測(cè)意義融合基因檢測(cè)意義 l l 正常細(xì)胞：兩個(gè)紅色信號(hào)，兩個(gè)綠色信號(hào)。正常細(xì)胞：兩個(gè)紅色信號(hào)，兩個(gè)綠色信號(hào)。l l 異常細(xì)胞：一個(gè)紅色信號(hào)，一個(gè)綠色信號(hào)，兩異常細(xì)胞：一個(gè)紅色信號(hào)，一個(gè)綠色信號(hào)，兩個(gè)融合信號(hào)。個(gè)融合信號(hào)。2 2重排發(fā)生在約重排發(fā)生在約80

8、85%8085%的患者中，檢測(cè)的患者中，檢測(cè)2 2基因重排可以基因重排可以輔助診斷。輔助診斷。 2 2陰性的患者陰性的患者3 3年生存率為年生存率為100%100%，而陽(yáng)性者只有，而陽(yáng)性者只有54%54%； 陰性者陰性者3 3年疾病無(wú)進(jìn)展為年疾病無(wú)進(jìn)展為87.5%87.5%，而陽(yáng)性者只有，而陽(yáng)性者只有13%13%。 2 2融合基因與濾泡性淋巴瘤融合基因與濾泡性淋巴瘤n 2融合基因輔助診斷濾泡性淋巴瘤融合基因輔助診斷濾泡性淋巴瘤n 2融合基因判斷預(yù)后融合基因判斷預(yù)后l l 正常細(xì)胞：兩個(gè)紅色信號(hào)，兩個(gè)綠色信號(hào)。正常細(xì)胞：兩個(gè)紅色信號(hào)，兩個(gè)綠色信號(hào)。l l 異常細(xì)胞：一個(gè)紅色信號(hào)，一個(gè)綠色信號(hào)，兩

9、異常細(xì)胞：一個(gè)紅色信號(hào)，一個(gè)綠色信號(hào)，兩個(gè)融合信號(hào)。個(gè)融合信號(hào)。結(jié)果判讀結(jié)果判讀- -陽(yáng)性結(jié)果陽(yáng)性結(jié)果結(jié)果判讀結(jié)果判讀- -陽(yáng)性結(jié)果陽(yáng)性結(jié)果 約約80%80%的伯基特淋巴瘤病例發(fā)生的伯基特淋巴瘤病例發(fā)生t(8t(8；14) 14) （q2432q2432）；）； 約約15%15%的伯基特淋巴瘤病例發(fā)生的伯基特淋巴瘤病例發(fā)生t(2t(2；8)(p1124)8)(p1124)； 約約5%5%發(fā)生發(fā)生t(8t(8；22)22)（q2411q2411）。）。 染色體易位導(dǎo)致基因斷裂重組可能是伯基特淋巴瘤的一個(gè)標(biāo)染色體易位導(dǎo)致基因斷裂重組可能是伯基特淋巴瘤的一個(gè)標(biāo)志，可以應(yīng)用于臨床上伯基特淋巴瘤的輔助診

10、斷。志，可以應(yīng)用于臨床上伯基特淋巴瘤的輔助診斷?；驍嗔雅c伯基特淋巴瘤基因斷裂與伯基特淋巴瘤u 輔助診斷伯基特淋巴瘤輔助診斷伯基特淋巴瘤 結(jié)果判讀結(jié)果判讀- -陽(yáng)性結(jié)果陽(yáng)性結(jié)果技術(shù)在乳腺癌靶向治療應(yīng)用技術(shù)在乳腺癌靶向治療應(yīng)用乳腺癌乳腺癌 2基因基因l 致癌基因：2基因；l 位點(diǎn)：17q11.212；l 編碼蛋白：跨膜蛋白（與l 表皮生長(zhǎng)因子受體部分同源）；l 25-30%乳腺癌病人都有2的擴(kuò)增；l 2基因擴(kuò)增是決定治療是否有效的關(guān)鍵性指標(biāo)。l2擴(kuò)增的乳腺癌更具有侵襲性生長(zhǎng)能力。乳腺癌乳腺癌2 2基因及蛋白檢測(cè)基因及蛋白檢測(cè)2 :3+ 完全強(qiáng)膜陽(yáng)性細(xì)胞完全強(qiáng)膜陽(yáng)性細(xì)胞30% 2+,1 檢測(cè)是否有

11、基因擴(kuò)增檢測(cè)是否有基因擴(kuò)增Her2基因基因檢測(cè)流程檢測(cè)流程石蠟組織標(biāo)本石蠟組織標(biāo)本IHC檢測(cè)檢測(cè)再用再用FISH方法檢測(cè)方法檢測(cè)1+3+2+Herceptin治療治療+再用再用FISH方法檢測(cè)方法檢測(cè)Herceptin治療治療FISH檢測(cè)檢測(cè)+再用再用FISH方法檢測(cè)方法檢測(cè)+A. 無(wú)須計(jì)數(shù)的大簇團(tuán)信無(wú)須計(jì)數(shù)的大簇團(tuán)信號(hào)（高度擴(kuò)增）號(hào)（高度擴(kuò)增）B. 顆粒狀信號(hào)（顆粒狀信號(hào)（R10，高度擴(kuò)增），高度擴(kuò)增）C. 須計(jì)數(shù)的顆粒狀信須計(jì)數(shù)的顆粒狀信號(hào)（號(hào)（R=3.5，低度擴(kuò)增），低度擴(kuò)增）ACBHer-2基因擴(kuò)增狀況基因擴(kuò)增狀況30%的腫瘤細(xì)的腫瘤細(xì)胞全部的細(xì)胞膜胞全部的細(xì)胞膜高強(qiáng)度著色高強(qiáng)度著色免

12、疫組化免疫組化（3+）與與FISH對(duì)比對(duì)比 40100浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌級(jí)級(jí)IHC：+FISH：呈：呈簇團(tuán)狀高度擴(kuò)增簇團(tuán)狀高度擴(kuò)增100免疫組化免疫組化（）（）與與FISH擴(kuò)增陽(yáng)性擴(kuò)增陽(yáng)性浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌級(jí)級(jí)IHC：FISH：呈簇狀擴(kuò)增：呈簇狀擴(kuò)增腫瘤細(xì)胞不著色腫瘤細(xì)胞不著色40100基因突變檢測(cè)方法基因突變檢測(cè)方法1酶A切割() 2.變性梯度凝膠電泳()3. 雜合雙鏈分析法()4. 化學(xué)切割錯(cuò)配() 5.碳化二亞胺檢測(cè)() 6.酶促切割錯(cuò)配( , ) 7.單鏈構(gòu)象多態(tài)性 ( )8.切割片段長(zhǎng)度多態(tài)性 9測(cè)序() 10.雙脫氧指紋圖譜法( , )11.錯(cuò)配接合蛋白檢測(cè) 12.蛋白

13、截短測(cè)試（ ）方法方法13.變性的高效液相色譜檢測(cè)( ) 14芯片技術(shù)() 15.等位基因特異性擴(kuò)增16.等位基因特異性寡核苷酸片段分析( )17.引物延伸檢測(cè)( )18.寡核苷酸連接檢測(cè)( )19.限制性片段分析( ）20.突變體富集法（ ）21.蝎形探針擴(kuò)增阻滯突變系統(tǒng)（ ）肺癌組織基因擴(kuò)增和肺癌組織基因擴(kuò)增和突變檢測(cè)及其臨床意義突變檢測(cè)及其臨床意義研究背景研究背景n研究顯示吉非替尼對(duì)部分晚期患者的治療效果非研究顯示吉非替尼對(duì)部分晚期患者的治療效果非常顯著。常顯著。n存在基因突變的患者更有可能對(duì)吉非替尼的治療存在基因突變的患者更有可能對(duì)吉非替尼的治療敏感。敏感。 n存在基因擴(kuò)增的肺癌、腸癌

14、病人對(duì)分子靶點(diǎn)藥物存在基因擴(kuò)增的肺癌、腸癌病人對(duì)分子靶點(diǎn)藥物更為敏感。更為敏感。n檢測(cè)大腸癌有無(wú)過(guò)度表達(dá)，只要檢測(cè)大腸癌有無(wú)過(guò)度表達(dá)，只要1%的癌細(xì)胞的癌細(xì)胞的胞膜強(qiáng)陽(yáng)性染色即判斷為的胞膜強(qiáng)陽(yáng)性染色即判斷為3+，可作為應(yīng)用西妥，可作為應(yīng)用西妥昔單抗的指征。昔單抗的指征。n 檢測(cè)基因擴(kuò)增檢測(cè)基因擴(kuò)增n標(biāo)本類型：石蠟包埋組織（手術(shù)、活檢、穿刺）標(biāo)本類型：石蠟包埋組織（手術(shù)、活檢、穿刺） n 冰凍組織冰凍組織n 胸、腹水沉渣細(xì)胞胸、腹水沉渣細(xì)胞n 探針類型：探針類型： / 7n 定量檢測(cè)基因突變分型定量檢測(cè)基因突變分型n 突變類型：突變類型： 19 （2235-2249位點(diǎn)）位點(diǎn)）15缺失缺失突變突

15、變n 19 （2240-2257位點(diǎn)）位點(diǎn)）18缺缺失突變失突變n 19 （2240-2251位點(diǎn)）位點(diǎn)）12缺缺失突變失突變n 21 2573位點(diǎn)位點(diǎn)TG堿基置換突堿基置換突變變n 21 2582位點(diǎn)位點(diǎn)TG堿基置換突堿基置換突變變n 基因變異檢測(cè)基因變異檢測(cè)雙體性雙體性三體性三體性多體性多體性擴(kuò)擴(kuò) 增增EGFR基基 因因 FISH 檢檢 測(cè)測(cè) 狀狀 況況肺肺癌癌石石蠟蠟 分型技術(shù)檢測(cè)突變分型技術(shù)檢測(cè)突變存在突變肺癌樣本的瓊脂糖凝膠電泳圖存在突變肺癌樣本的瓊脂糖凝膠電泳圖71例肺癌組織中檢測(cè)出6例突變樣本 檢測(cè)檢測(cè)15缺失陽(yáng)性病例結(jié)果缺失陽(yáng)性病例結(jié)果 15缺失突變型的測(cè)序圖缺失突變型的測(cè)序圖

16、 FQ-PCR 檢測(cè)檢測(cè)18bp缺失陽(yáng)性病例結(jié)果缺失陽(yáng)性病例結(jié)果 目前突變檢測(cè)常用技術(shù)目前突變檢測(cè)常用技術(shù)方法方法n直接測(cè)序直接測(cè)序n焦磷酸測(cè)序焦磷酸測(cè)序n高分辨率熔解曲線高分辨率熔解曲線n芯片芯片n雜交雜交n 腫瘤組織的確認(rèn)和篩選腫瘤組織的確認(rèn)和篩選顯微切割腫瘤顯微切割腫瘤提取提取相應(yīng)的反應(yīng)或雜交相應(yīng)的反應(yīng)或雜交相關(guān)的分析和檢測(cè)相關(guān)的分析和檢測(cè)突變檢測(cè)基本流程圖直接測(cè)序( )擴(kuò)增后產(chǎn)物直接測(cè)序雙脫氧核苷酸鏈終止法(法) 片段是熒光標(biāo)記的，這些片段經(jīng)過(guò)平板膠電泳或毛細(xì)管電泳得到分離，熒光分子被激發(fā)而發(fā)光，發(fā)出的光信號(hào)被檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè) 突變檢測(cè)結(jié)果療效預(yù)測(cè)標(biāo)志物與預(yù)后判斷標(biāo)志物n療效預(yù)測(cè)標(biāo)志物：療

17、效預(yù)測(cè)標(biāo)志物：n能夠預(yù)測(cè)某種特定治療方式療效的標(biāo)記物能夠預(yù)測(cè)某種特定治療方式療效的標(biāo)記物n基因突變導(dǎo)致腫瘤對(duì)抑制劑抵抗基因突變導(dǎo)致腫瘤對(duì)抑制劑抵抗n預(yù)后判斷標(biāo)志物：預(yù)后判斷標(biāo)志物：n在不考慮治療因素的情況下能夠判斷患者結(jié)局在不考慮治療因素的情況下能夠判斷患者結(jié)局的標(biāo)記物的標(biāo)記物n18號(hào)染色體長(zhǎng)臂（號(hào)染色體長(zhǎng)臂（18q）缺失）缺失 n某些分子標(biāo)志物兼具兩種作用某些分子標(biāo)志物兼具兩種作用n胸腺嘧啶合成酶（胸腺嘧啶合成酶（ ） 作為預(yù)后因子的價(jià)值作為預(yù)后因子的價(jià)值 = ; = - - (1992), (1992) & () - (1998) (1996) () - (2000) (1993)

18、n(西妥昔單抗西妥昔單抗)n人源化嵌合單抗（人源化嵌合單抗（ 1 ）n靶向作用于表皮生長(zhǎng)因子受體（）靶向作用于表皮生長(zhǎng)因子受體（）n阻斷阻斷 和和與與 的結(jié)合，抑制酪氨酸激酶活性和其后的的結(jié)合，抑制酪氨酸激酶活性和其后的腫瘤生長(zhǎng)腫瘤生長(zhǎng)n200年獲得審批資格治療結(jié)直腸癌年獲得審批資格治療結(jié)直腸癌n（帕尼單抗）（帕尼單抗）n完全人源化單克隆抗體完全人源化單克隆抗體(2)n靶向作用于表皮生長(zhǎng)因子受體（）靶向作用于表皮生長(zhǎng)因子受體（）n2005年年7月獲得快速通道審批資格治療結(jié)直腸癌月獲得快速通道審批資格治療結(jié)直腸癌結(jié)直腸癌分子靶向治療藥物結(jié)直腸癌分子靶向治療藥物 突變突變n 突變可不依賴受體途徑，

19、自行激活突變可不依賴受體途徑，自行激活 通路通路n導(dǎo)致導(dǎo)致 耐藥耐藥n 突變與療效及患者生存相關(guān)突變與療效及患者生存相關(guān)n 突變并非孤立事件突變并非孤立事件n 突變常伴隨突變，并與突變常伴隨突變，并與 島甲基化表型島甲基化表型()1,2相關(guān)相關(guān)n 突變常伴隨突變常伴隨 3K 突變突變3 A, . J 2008;26:374379 = 基因野生型患者能從這類藥物治療中獲益。基因野生型患者能從這類藥物治療中獲益。 基因突變型患者并不能從抗治療中獲益基因突變型患者并不能從抗治療中獲益,反而徒增反而徒增不良反應(yīng)危險(xiǎn)和治療費(fèi)用；不良反應(yīng)危險(xiǎn)和治療費(fèi)用；抗治療和突變相互排斥抗治療和突變相互排斥基因抗治療關(guān)

20、系密切基因抗治療關(guān)系密切n2009年年7月批準(zhǔn)了對(duì)西妥昔單抗和帕尼單抗月批準(zhǔn)了對(duì)西妥昔單抗和帕尼單抗說(shuō)明書(shū)標(biāo)簽的修改：說(shuō)明書(shū)標(biāo)簽的修改：n 結(jié)直腸癌分子靶向治療藥物結(jié)直腸癌分子靶向治療藥物 注明基因突變的結(jié)直腸癌患者不推薦這使用這注明基因突變的結(jié)直腸癌患者不推薦這使用這兩種用藥物。兩種用藥物。 l 基因突變基因突變: 20-60%: 20-60%結(jié)直腸癌結(jié)直腸癌l 基因突變發(fā)生在腫瘤惡變的早期，原發(fā)灶和基因突變發(fā)生在腫瘤惡變的早期，原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移灶的基因高度保持一致轉(zhuǎn)移灶的基因高度保持一致基因突變基因突變 臨床實(shí)踐指南指南明確指出所有轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌患者臨床實(shí)踐指南指南明確指出所有轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌患者 都應(yīng)檢測(cè)基因狀態(tài)。都應(yīng)檢測(cè)基因狀態(tài)。 美國(guó)美國(guó)臨床腫瘤學(xué)會(huì)美國(guó)美國(guó)臨床腫瘤學(xué)會(huì)()()推薦把基因突變檢測(cè)作為推薦把基因突變檢測(cè)作為 結(jié)直腸癌患者接受單抗治療的預(yù)測(cè)指標(biāo)。結(jié)直腸癌患者接受單抗治療的預(yù)測(cè)指標(biāo)。 歐盟藥品審評(píng)管理局規(guī)定：歐盟藥品審評(píng)管理局規(guī)定： 及及 用于的治療前，患者必須確定為野生型。用于的治療前，患者必須確定為野生型。與結(jié)直腸癌治療與結(jié)直腸癌治療結(jié)直腸癌（）缺乏基因突變結(jié)直腸癌（）缺乏基因突變n對(duì)愛(ài)必妥單藥治療轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌（）