比色分析法測(cè)定環(huán)氧乙烷的原理和方法.

1、國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局濟(jì)南醫(yī)療器械檢測(cè)中心化學(xué)檢測(cè)室 劉斌電話 053182682912比色法測(cè)定一次性使用醫(yī)療器械中環(huán)氧乙烷殘留量EO的特性和殘留過(guò)量對(duì)人的危害 EO具有較強(qiáng)的擴(kuò)散和穿透能力,對(duì)細(xì)菌芽孢、真菌和病毒等各種微生物均有殺滅作用,屬于一種光譜的殺菌劑,因而在一次性使用輸液器和輸血器的滅菌處理中得到了廣泛的應(yīng)用.但由于EO殘留量超過(guò)一定限度會(huì)對(duì)人體造成傷害,可引起頭暈惡心嘔吐,器官損害、致癌致突變等.因此在實(shí)際生產(chǎn)和臨床應(yīng)用中有必要對(duì)產(chǎn)品中的EO殘留量嚴(yán)格加以控制.常用測(cè)定方法 氣相色譜法: 費(fèi)用高,技術(shù)及人員要求較高. 比色分析法: 操作簡(jiǎn)單,方便易行,缺點(diǎn)是線性范圍較窄,靈敏度偏

2、低.EO的基本性質(zhì) 室溫常壓下為無(wú)色氣體. 沸點(diǎn)為10.8,溫度低于10.8時(shí)處于液體狀態(tài),該液體無(wú)色透明,可溶于水. 其水溶液能發(fā)生緩慢水解,生成乙二醇,但這個(gè)反應(yīng)速度非常慢,當(dāng)加入酸堿和其它一些催化劑時(shí)可大大加快其水解速度. 實(shí)驗(yàn)基本原理 在560nm波長(zhǎng)下,用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定EO含量.可見(jiàn)-紫外吸收光度法的基本原理 Lambert-Beer定律: 一束平行光通過(guò)含有吸光物質(zhì)的物體時(shí)會(huì)有一部分光被吸掉，通過(guò)之前的光強(qiáng)度為I0 ，之后的光強(qiáng)度為I，經(jīng)過(guò)一系列的推導(dǎo)，得出公式： -lgI/ I0=Elc ，令（吸光度） -lgI/ I0，則 Elc，吸光度與待測(cè)溶液的濃度呈正比 吸收系

3、數(shù)，常數(shù)溶液配制(見(jiàn)講義) 乙二醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:取一外部干燥、清潔的50 ml容量瓶,加水約30ml,精密稱重到0.1mg, 移取0.5ml乙二醇迅速加入瓶中,精密稱重,加水稀釋至刻度. 濃度計(jì)算:C=W/501000 式中:W 溶液中乙二醇重量,g C 乙二醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液濃度,g/l;乙二醇標(biāo)準(zhǔn)溶液 稀釋到 1.0ml儲(chǔ)備液 1000ml 實(shí)際上是將上述儲(chǔ)備液稀釋了1000倍,這時(shí)得到的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為C=C/1000 g/l.用乙二醇代替EO的原因 EO和乙二醇之間存在著定量關(guān)系,一個(gè)EO能生成一個(gè)乙二醇. EO沸點(diǎn)10.8,室溫條件下呈氣體狀態(tài),不宜操作.乙二醇的沸點(diǎn)是196198 .品紅-亞

4、硫酸試液(配制方法見(jiàn)講義) 品紅可分為堿性品紅,中性品紅和酸性品紅三種,本實(shí)驗(yàn)中采用堿性品紅. 120ml熱水,也可加入冷的蒸餾水,加熱使品紅溶解. 10%的亞硫酸鈉溶液應(yīng)該現(xiàn)用現(xiàn)配,否則配不出無(wú)色的溶液. 配好的試液應(yīng)為無(wú)色透明的或淡黃色,否則應(yīng)重新配制. 鹽酸2ml系指濃鹽酸.配制品紅-亞硫酸試液的現(xiàn)象 品紅溶解后呈現(xiàn)紫紅色,加入20ml亞硫酸鈉溶液后變?yōu)榈奂t色,再加入2ml鹽酸后粉紅色變深,但搖勻后接著變?yōu)榈t色,暗處放置一段時(shí)間后(1h內(nèi))褪為無(wú)色.有時(shí)為微黃色仍可用. 退色反應(yīng)對(duì)雜質(zhì)干擾反應(yīng)敏感,所使用的玻璃儀器應(yīng)該嚴(yán)格清洗干凈.試液制備(見(jiàn)講義) EO的沸點(diǎn)很低, 10.8,室溫

5、條件下是氣體,因此我們的操作必須準(zhǔn)確迅速,包括剪樣品和稱量樣品,時(shí)間過(guò)長(zhǎng),EO很容易從樣品中釋放到大氣中,導(dǎo)致我們的測(cè)量結(jié)果嚴(yán)重偏低. 室溫下浸提1h。 操作步驟至少8支比色管 1支(空白管) +5支(標(biāo)準(zhǔn)曲線) +2支(樣品管)。注意: 滴加硫代硫酸鈉溶液使黃色恰好消失。(破壞剩余高碘酸) 現(xiàn)象:無(wú)色溶液 黃色 深黃色 黃色變淺 無(wú)色。 原理:IO4-(無(wú)色) I2(黃色) I- (無(wú)色)。增加靈敏度的方法 顯色時(shí)可置37干燥箱中進(jìn)行,但不可超過(guò)40 ,否則,顯色劑易被破壞. 適當(dāng)延長(zhǎng)顯色時(shí)間,但不要超過(guò)3h.結(jié)果與計(jì)算數(shù)據(jù)處理: Excel處理數(shù)據(jù)并獲得回歸方程及相關(guān)系數(shù)?；蛴米鴺?biāo)紙描點(diǎn)繪

6、圖。 計(jì)算公式: WEO=1.775C1V1G 式中: WEO單位產(chǎn)品中EO的殘留量,mg。 C1乙二醇標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度,g/L。 V1標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得試液相應(yīng)的體積,ml。 G單位產(chǎn)品的重量,g。若計(jì)算相對(duì)值,公式為: CEO=1.775C1V11000 式中: CEO產(chǎn)品中EO的殘留量,mg/kg或g/g。 其余:同上。1.775的推導(dǎo) EO 乙二醇 44 62 1g乙二醇相當(dāng)于EO 質(zhì)量為:44/62=0.711g樣品生成的乙二醇的質(zhì)量為: V1C1(10/2)/2=V1C12.5則1g樣品中含有的EO的質(zhì)量為:0.71V1C12.5=1.775V1C1例題 一批輸液器,平均重量為22.4g, 乙二醇標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為10.210-3g/L。 標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定結(jié)果如下: V(mL) 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 A 0.06 0.10 0.13 0.17 0.21 樣品測(cè)定結(jié)果:A=0.01 0.08 平均:0.0