天然藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)講義(四實(shí)驗(yàn))分享

1、真誠為您提供優(yōu)質(zhì)參考資料，若有不當(dāng)之處，請指正。目錄天然藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)須知2天然藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目7實(shí)驗(yàn)一 黃柏中鹽酸小檗堿的提取分離與鑒定7實(shí)驗(yàn)二 槐米中蕓香苷的提取、分離與鑒定11實(shí)驗(yàn)三 八角茴香中揮發(fā)油的提取、分離與鑒定15實(shí)驗(yàn)四 茶葉中咖啡因的提取、分離與鑒定19天然藥物化學(xué)基本操作技能2326 / 26天然藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)天然藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)須知（一）實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.驗(yàn)證理論，加深對理論知識的理解。2.掌握回流提取、連續(xù)回流提取、兩相溶劑萃?。ǚ忠郝┒贩ǎ?、溶劑回收、薄層色譜等基本操作技能。3.熟悉結(jié)晶法、柱色譜法、化學(xué)成分預(yù)試驗(yàn)等實(shí)驗(yàn)技術(shù)。4.了解四大光譜（紫外、紅外、核磁共振、質(zhì)譜）的基本操作規(guī)

2、程。5.培養(yǎng)觀察、分析和解決問題的實(shí)際工作能力以及科研動手能力。（二）實(shí)驗(yàn)要求1.實(shí)驗(yàn)前，認(rèn)真閱讀實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及其相關(guān)知識，掌握實(shí)驗(yàn)原理、各步操作方法以及實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)。2.天然藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)時間長及操作多，實(shí)驗(yàn)前應(yīng)作好有關(guān)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容在時間上的計劃，盡量做到實(shí)驗(yàn)緊湊有序。3.尊重實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)老師，聽從實(shí)驗(yàn)安排。4.不遲到，不早退。因急事中途離開實(shí)驗(yàn)室，必須向老師請假。6.以科學(xué)的實(shí)事求是態(tài)度，認(rèn)真及時記錄操作步驟、實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象、有關(guān)數(shù)據(jù)、實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。7.認(rèn)真如實(shí)地填寫實(shí)驗(yàn)報告，及時上交。（三）實(shí)驗(yàn)室規(guī)則1.進(jìn)實(shí)驗(yàn)室必須穿工作服。2.進(jìn)實(shí)驗(yàn)室后，首先清點(diǎn)本次實(shí)驗(yàn)所用儀器設(shè)備、溶劑、試劑，熟悉存放位置。3.實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)

3、禁吸煙、飲食。不做與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的事情。4.實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保持安靜，不許在實(shí)驗(yàn)室大聲談笑、嬉戲打鬧。5.嚴(yán)格遵守安全規(guī)則和各種儀器操作規(guī)程。對性能和操作不熟悉以及與本次實(shí)驗(yàn)無關(guān)的儀器設(shè)備，不要隨便安裝使用，貴重儀器設(shè)備，未經(jīng)老師允許，不得隨意動用。6.正確取用藥品、溶劑和試劑，避免交叉污染，確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。7.實(shí)驗(yàn)藥品、試劑以及儀器，用后及時歸還原位，不要亂拿亂放。8.保持實(shí)驗(yàn)室的干凈整潔，實(shí)驗(yàn)藥渣以及紙屑等固體廢棄物投入垃圾箱，易污染環(huán)境的廢棄液倒入廢液缸，有毒、易燃、易揮發(fā)的廢棄液倒入指定的有蓋廢液瓶中，一般廢棄液沖入下水道。9.愛護(hù)公物，注意節(jié)約水電和能源，不浪費(fèi)藥品、試劑。損壞儀器設(shè)備，及時向

4、老師報告，并登記。10.實(shí)驗(yàn)完畢后，將所用儀器設(shè)備洗滌或擦拭干凈，擺放整齊，清點(diǎn)數(shù)目。11.安排值日生打掃實(shí)驗(yàn)室。檢查關(guān)閉水、電、煤氣、門窗。（四）實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)則1.實(shí)驗(yàn)前，熟悉本次實(shí)驗(yàn)所用儀器設(shè)備的安裝、操作方法、注意事項(xiàng)以及藥品、試劑、溶劑的有關(guān)性能。熟悉有關(guān)消防器材的存放位置和使用方法。2.藥品、試劑應(yīng)遠(yuǎn)離火源。使用易燃溶劑時，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)避免有明火。3.在實(shí)驗(yàn)過程中，應(yīng)檢查儀器管道是否暢通，連接部位是否牢固。溫度控制是否適宜。電器及開關(guān)是否發(fā)熱，有無漏電或煤氣泄漏現(xiàn)象。4.實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保持空氣流通。做有害氣體產(chǎn)生的實(shí)驗(yàn)，應(yīng)在難風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行。嗅聞氣體要注意正確的方法。5.不要正面俯視正在加熱的物質(zhì)

5、。加熱的容器管口不要對著別人或自己。不要在加熱溶液中加放沸石或活性炭。玻璃儀器不要驟冷或驟熱，防止爆裂。6.吸取有害液體，應(yīng)使用吸球（不能直接用口吸?。?，使用有毒害藥品、溶劑、試劑后，要及時洗手。7.配制易產(chǎn)熱溶液時，應(yīng)將藥品或試劑緩慢向溶劑中加入，邊加邊攪拌。8.不要用濕手開閉電閘或電器開關(guān)。9.實(shí)驗(yàn)完畢后，及時切斷電源，關(guān)閉酒精燈，關(guān)閉煤氣。（五）實(shí)驗(yàn)室安全事故天然藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，常以電、煤氣、酒精作能源，經(jīng)常接觸對人體有毒害作用的試劑，難免發(fā)生一些安全事故。下面介紹幾種實(shí)驗(yàn)室事故處理措施：1. 中毒 中毒有呼吸道吸入中毒、口服中毒、皮膚接觸中毒三種情況。如發(fā)生中毒現(xiàn)象，應(yīng)迅速將中毒者扶離現(xiàn)

6、場至通風(fēng)良好的地方，解開衣領(lǐng)，松開褲帶，作深呼吸，輕者可慢慢恢復(fù)。較重者可飲服高錳酸鉀（1：5000）或1硫酸銅溶液后，壓舌催吐，嘔吐后，再根據(jù)毒物性質(zhì)不同，選擇飲服雞蛋清、牛奶、淀粉糊、桔子汁、咖啡堿、濃茶等。如發(fā)生昏迷、休克，應(yīng)進(jìn)行人工呼吸或給氧，并及時送往醫(yī)院急救。2. 灼傷 火焰、高溫液體、熾熱物體、溶劑蒸汽、電熱物、化學(xué)藥品直接作用于人體，引起皮膚或機(jī)體的燒、燙傷，稱為灼傷。如為火灼傷，忌水洗，可局部涂抹苦味酸、甘油、雞蛋清、燒（燙）傷膏等。藥物灼傷應(yīng)先用大量水沖洗，再根據(jù)藥物的性質(zhì)，采用適宜的方法處理。如酸堿灼傷，先用大量水沖洗后，再用弱堿或弱酸水溶液沖洗，并局部涂凡士林。溴灼傷，

7、用酒粗以及2硫代硫酸鈉分別清洗，接著用蘸有甘油的棉球輕輕擦洗，最后涂抹甘油或燙傷油膏等。酚類灼傷，用溫水和5酒精洗后，用飽和硫酸鈉水溶液濕敷。如果試劑濺入眼內(nèi)，先用在量水淋沖，再點(diǎn)入可的松眼藥水等。3. 觸電 如有人發(fā)生觸電事故，設(shè)法使觸電者脫離電源是當(dāng)務(wù)之急，方法有：（1）迅速切斷電源（2）用木棍或竹竿撥開電線（3）穿膠底鞋或踏木板，戴橡膠手套拉開觸電者（切忌不采取措施，徒手直接拉觸電者，以免連環(huán)觸電）。脫離電源后，觸電輕微者可立即自行恢復(fù)，輕嚴(yán)重者（數(shù)秒鐘未恢復(fù)知覺）須進(jìn)行人工呼吸，并立即送醫(yī)院急救。4. 燃燒 一旦發(fā)生燃燒事故，要沉著冷靜，切忌手忙腳亂。首先迅速切斷電源，關(guān)閉煤氣，移走火

8、源附近易燃、易爆物品，再根據(jù)燃燒物的理化性質(zhì)，選用適宜物質(zhì)和方法法撲滅。常用的滅火物質(zhì)與器材有水、砂土或泡沫、惰性氣體、四氯化碳滅火器等。比水輕，與水不混溶的溶劑燃燒，用砂土或泡沫、二氧化碳、四氯化碳滅火器撲滅，切忌用水，以免火勢蔓延。比水重，與水不混溶的有機(jī)溶劑燃燒，可用噴水的方法撲滅。水溶性溶劑的燃燒，可用砂土、噴水或泡沫、二氧化碳、四氯化碳滅火器等撲滅。不能用水和泡沫滅火器滅火的物質(zhì)有：鉀、鈉、鈣、鋅粉、鎂粉、鋁粉、硼氫化鈉（鉀）、氫氧化鈉（鉀）、五氯化磷、五氧化二磷、過氧化鈉（鋇）、發(fā)煙硫酸等。電器起火，必須迅速切斷電源，切忌在有電情況下使用水或泡沫滅火器。5. 爆炸 產(chǎn)生爆炸的原因一

9、般有三種情況：（1）易爆物在一定條件下發(fā)生劇烈的化學(xué)反應(yīng)而爆炸，如多硝基化合物。（2）某物質(zhì)的蒸氣與空氣達(dá)到一定濃度時，遇火星產(chǎn)生爆炸。（3）加熱液體物質(zhì)時，容器因內(nèi)壓增大而爆炸。爆炸不僅直接傷害人體，損壞儀器設(shè)備，而且往往伴隨燃燒，危害極大。萬一發(fā)生爆炸事故，不要驚慌，應(yīng)根據(jù)情況，采取適當(dāng)方法處理。因爆炸而受傷者，小傷可自行處理，重傷及時送往醫(yī)院救治。對因爆炸而產(chǎn)生的燃燒，按上述燃燒滅火的方法處理。天然藥物化學(xué)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目實(shí)驗(yàn)一 黃柏中鹽酸小檗堿的提取分離與鑒定目的要求通過提取分離和鑒定黃柏中的小檗堿，掌握滲漉法、鹽析法、結(jié)晶法和薄層色譜法的基本操作過程及注意事項(xiàng)，熟悉小檗堿的化學(xué)鑒定方法。實(shí)驗(yàn)

10、內(nèi)容（一）主要成分的結(jié)構(gòu)黃柏為蕓香科植物黃皮樹Phellodendron Chinese Schneid.或黃檗Phellodendron amurense Rupr.的干燥樹皮。前者習(xí)稱“川黃柏”，后者習(xí)稱“關(guān)黃柏”。川黃柏主產(chǎn)于四川、貴州、湖北等地。關(guān)黃柏主產(chǎn)于遼寧、吉林等地。黃柏具有清熱燥濕，瀉火除蒸，解毒療瘡等功效。黃柏中主要含有小檗堿（berberine），基結(jié)構(gòu)如下：川黃柏含小檗堿約1.375.8，關(guān)黃柏含小檗堿約0.601.64。（二）主要成分的性質(zhì)小檗堿異名黃連素，分子式C20H18NO4+，分子量336.37。自水或稀乙醇中結(jié)晶得到的小檗堿為黃色針狀結(jié)晶，鹽酸小檗堿為黃色小針

11、狀結(jié)晶。小檗堿能緩溶于冷水（1：20），易溶于熱水和熱乙醇 ，難溶于丙酮、氯仿、苯。鹽酸小檗堿微溶于冷水，易溶于熱水，不溶于冷乙醇、氯仿和乙醚。（三）基本原理利用小檗堿可溶于水，鹽酸小檗堿幾乎不溶于水的性質(zhì)，先將藥材用石灰乳潤濕，使藥材吸水膨脹，小檗堿游離，同時可使黃柏中含有的粘液質(zhì)沉淀。用水滲漉提取小檗堿，再將其轉(zhuǎn)化成鹽酸鹽而沉淀析出，結(jié)合鹽析法得到鹽酸小檗堿。（四）操作步驟1.提取黃柏粗粉（100g），置1000mL燒杯中，加入15gCa(OH)2,800mL水，靜置1小時，用棉花抽濾。濾液加入7氯化鈉，裝廣口瓶中過夜析出沉淀，抽濾。沉淀即為鹽酸小檗堿粗品3.鑒定（1）取鹽酸小檗堿（自制）

12、約50mg于10mL試管中，加純化水5mL，加熱溶解，加入2滴10氫氧化鈉，顯橙色。溶液放冷后，漏斗濾過，濾液中加入數(shù)滴丙酮即產(chǎn)生黃色丙酮小檗堿的沉淀。（2）取鹽酸小檗堿（自制）少許于10mL試管中，加稀硫酸2mL振搖半分鐘溶解后（不會全溶），加漂白粉少許，顯櫻紅色。（3）鹽酸小檗堿的薄層色譜鑒定吸附劑：中性氧化鋁（軟板）展開劑：氯仿-甲醇（9：1）顯色劑：紫外燈下觀察熒光或自然光下觀察黃色斑點(diǎn)試樣：0.1%鹽酸小檗堿乙醇液（自制）對照品：0.1鹽酸小檗堿乙醇液基本操作注意點(diǎn)1.實(shí)驗(yàn)原料盡可能選用小檗堿含量較高（1.375.8）的川黃柏。2.加入氯化鈉的目的是將小檗堿轉(zhuǎn)化成鹽酸鹽并利用其鹽析作

13、用，降低鹽酸小檗堿在水中的溶解度。其用量不宜超過10,否則溶液的比重增大，使鹽酸小檗堿結(jié)晶呈懸浮狀態(tài)而難以沉淀，要趁熱濾過，防止鹽酸小檗堿在濾過時析出結(jié)晶，使濾過困難，產(chǎn)量降低。3.中性氧化鋁板自行制備，3g氧化鋁加入7mL CMC-Na，鋪成兩塊板思考題1. 怎樣從黃柏中提取分離鹽酸小檗堿？原理是什么？2. 用薄層色譜法檢識鹽酸小檗堿時，為什么常選用氧化鋁作吸附劑？如果選用硅膠作吸附劑，怎樣操作才能達(dá)到較準(zhǔn)確的結(jié)果？實(shí)驗(yàn)二 槐米中蕓香苷的提取、分離與鑒定目的要求1. 通過蕓香苷的提取與精制，掌握堿溶酸沉法提取黃酮類化合物的原理及操作。2. 通過蕓香苷結(jié)構(gòu)的鑒定，了解苷類結(jié)構(gòu)研究的一般程序和方

14、法。3. 要求得到蕓香苷、槲皮素產(chǎn)品。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容（一） 主要成分的結(jié)構(gòu)及性質(zhì)槐米為豆科植物槐Sophora japonica的花蕾，其有效成分為蕓香苷，又稱蘆?。╮utin），蕓香苷是由苷元槲皮素與蕓香糖（rha16glc）連接而成的二糖苷，結(jié)構(gòu)及性質(zhì)見教材第六章第六節(jié)“黃酮類化合物提取分離實(shí)例”。（二） 基本原理提取蕓香苷的方法很多，目前我國多采用堿溶酸沉法，提取原理是依據(jù)蕓香苷結(jié)構(gòu)中含有酚羥基，能與堿成鹽而溶于水中，向此鹽溶液中加入酸，則蘆丁游離析出。蘆丁的精制是利用它可溶于熱水，難溶于冷水的性質(zhì)進(jìn)行的。（三） 操作步驟1. 蕓香苷的提取 稱取槐米粗粉20g，置500mL或1000mL燒杯中

15、，加入0.4%硼砂沸水溶液200mL，在攪拌下加石灰乳，調(diào)至PH89，加熱微沸20分鐘（注意保持pH89）,并隨時補(bǔ)充蒸發(fā)掉的水分，趁熱用雙層紗布濾過。收集濾液，藥渣按同樣操作再提取一次，合并兩次濾液。濾液在6070用濃鹽酸調(diào)至pH34，靜置過夜使沉淀完全，抽濾，沉淀用蒸餾水洗23次，抽干，置空氣中晾干，得粗品蕓香苷。2. 蕓香苷的精制 稱定粗品蕓香苷的重量，按約1：200的比例懸浮于蒸餾水中，煮沸10分鐘使蕓香苷全部溶解，趁熱抽濾，冷卻濾液，靜置析晶。抽濾，置空氣中晾干或6070干燥，得精制蕓香苷，稱重，計算收率。3. 蕓香苷的水解 取蕓香苷1g，研細(xì)后置于250mL圓底燒瓶中，加入2硫酸溶

16、液100mL，直火微沸回流約40分鐘，至析出的黃色沉淀不再增加為止，放冷抽濾，濾液保留作糖檢查，沉淀用少量水洗去酸，抽干水分，晾干稱重，得粗制槲皮素，然后用乙醇（95乙醇約15mL）重結(jié)晶即得精制槲皮素。4. 鑒定（1） 苷和苷元的化學(xué)鑒別 取蕓香苷34mg，加乙醇56mL使溶解，分成二份，作以下試驗(yàn)。取槲皮素同樣量，同樣操作。1. 鹽酸-鎂粉反應(yīng)：取上述溶液12mL，加2滴濃鹽酸，再加少許鎂粉，注意觀察顏色變化的情況。2. Molisch反應(yīng)：取上述溶液12mL，加10等體積的-萘酚乙醇溶液，搖勻，沿管壁加濃硫酸，注意觀察兩液面間產(chǎn)生的顏色變化。3. 苷和苷元的薄層色譜鑒定吸附劑 硅膠G（1

17、040u）-0.4%CMC水液制板，105110活化1小時展開劑 氯仿-甲醇-甲酸（15：5：1）供試品 實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品1蕓香苷醇溶液及1槲皮素醇溶液對照品 1蕓香苷醇溶液及1槲皮素醇溶液顯色劑 1FeCl3和1K3Fe(CN)6水溶液，臨用時等體積混合基本操作注意點(diǎn)1. 加入石灰乳既可達(dá)到堿溶解提取蕓香苷目的，又能使槐米中含有的大理粘液質(zhì)生成鈣鹽沉淀除去，但應(yīng)嚴(yán)格控制在pH8¬9，不得超過10。pH過高，在加熱提取過程中可促使蕓香苷水解破壞，造成產(chǎn)率明顯下降。酸沉?xí)r加濃鹽酸調(diào)pH34，不宜過低，否則會使蕓香苷生成羊鹽溶于水，也會降低收率。2. 加入硼砂的目的是使其與蕓香苷鄰二酚羥基絡(luò)合，

18、這樣既保護(hù)鄰二酚羥基不被氧化破壞，亦保護(hù)鄰二酚羥基不與鈣離子絡(luò)合，使蕓香苷不受損失。同時還有調(diào)節(jié)堿性水溶液pH值的作用。3. 蕓香苷的提取還可利用蕓香苷在冷、熱水中的溶解度不同，采用沸水提取法。又據(jù)報道將生產(chǎn)工藝改進(jìn)為95乙醇回流提取后回收醇得浸膏，然后將粗浸膏除去脂溶性雜質(zhì)，常水洗凈，濾過，干燥即得蕓香苷，可提高收率6.96，并降低了成本。4. 鑒定所用硅膠G板自行制備，3g硅膠G加入7mL CMC-Na,鋪成二塊板。5. 粗制時由于產(chǎn)生的粘液質(zhì)較多，抽濾之前不要振搖底部固體使成混懸液。抽濾所用時間較長，注意要少量分批抽濾，如果濾紙濾孔被堵住無法濾下，要及時更換濾紙。思考題1. 根據(jù)蕓香苷的

19、性質(zhì)，還可采用何種方法進(jìn)行提??？試設(shè)計槐米中提取蕓香苷的另一咱方法，并說明方法原理。2. 本實(shí)驗(yàn)提取過程中應(yīng)注意哪些問題？3. 試解釋蕓香苷水解過程中出現(xiàn)的混濁澄清混濁現(xiàn)象。4. 怎樣正角鑒定蕓香苷？實(shí)驗(yàn)三 八角茴香中揮發(fā)油的提取、分離與鑒定目的要求通過提取和鑒定八角茴香中的揮發(fā)油，學(xué)會利用揮發(fā)油含量測定器測定和提取藥材中押發(fā)油的操作方法。能對揮發(fā)油中的化學(xué)成分進(jìn)行薄層點(diǎn)滴性檢識及單向二次色譜檢識。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容（一）主要成分的結(jié)構(gòu)八角茴香為木蘭科植物八角茴香Iuicium verum干燥成熟的果實(shí)。含揮發(fā)油約5。主要成分是茴香腦（anethole），約為揮發(fā)油的8090。此外，尚有少量甲基胡椒酚、

20、茴香醛、茴香酸等。（二）主要成分的性質(zhì)茴香腦為白色結(jié)晶，mp.21.4,溶于苯、醋酸乙酯、丙酮、二硫化碳及石油醚，幾乎不溶于水。（三）基本原理依據(jù)揮發(fā)油具有揮發(fā)性，能隨水蒸氣蒸餾的性質(zhì)，利用水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油。本實(shí)驗(yàn)采用揮發(fā)油含量測定器提取揮發(fā)油。揮發(fā)油的組成成分復(fù)雜，常含有烷烴、烯烴、醇、醛、酮、酸等官能團(tuán)。因此可選擇適宜的檢識試劑在薄層板上進(jìn)行點(diǎn)滴試驗(yàn)，從而了解組成揮發(fā)油的成分。揮發(fā)油中各類成分的極性不相同，一般不含氧的烴類和萜類化合物極性小，在薄層板上可被石油醚較好地展開；而含氧的烴類和萜類化合物極性較大，可被石油醚與醋酸乙酯的混合溶劑較好地展開。為了使揮發(fā)油中各成分能在同一塊薄層板

21、上進(jìn)行分離，可采用單向二次色譜法展開。（四）操作步驟1.提取 取八角茴香25g，置揮發(fā)油含量測定器燒瓶中，加適量的水，連接揮發(fā)油測定器與回流冷凝管。自冷凝管上端加水使充滿揮發(fā)油測定器的刻度部分，并使溢流入燒瓶時為止。緩緩加熱至沸。至測定器中油量不再增加，停止加熱，放冷，分取油層計算得率。2.鑒定（1）油斑試驗(yàn)：取適量八角茴香油，滴于濾紙片上，常溫（或加熱烘烤）觀察油斑是否消失。（2）色譜點(diǎn)滴反應(yīng)：取硅膠G薄層板1塊，用鉛筆按實(shí)驗(yàn)表畫線。被檢查揮發(fā)油用95乙醇稀釋成510倍溶液，然后用毛細(xì)管分別滴加于各揮發(fā)油樣品斑點(diǎn)上，觀察顏色變化。初步推測每種揮發(fā)油中可能含有化學(xué)成分的類型。123456點(diǎn)滴試

22、劑：1.三氯化鐵試液 2.2，4-二硝基苯肼試液 3.堿性高猛酸鉀試液4.香草醛-濃硫酸試液 5.0.05溴酚藍(lán)乙醇溶液 6.硝酸鈰銨試劑實(shí)驗(yàn)結(jié)果推測可參考天然藥物化學(xué)理論書第243-244頁表格（3）揮發(fā)油單向二次展開薄層色譜：取硅膠G薄層板（自制）一塊，在距底邊0.5cm及5cm處分別用鉛筆畫出起始線和中線。將揮發(fā)油點(diǎn)在起始線上，先在石油醚-醋酸乙酯（85：15）展開劑中展開至薄層板中線時取出，揮去展開劑。再放入石油醚中展開，至接近薄層板頂端時取出，揮去展開劑，用香草醛-濃硫酸顯色劑顯色，觀察斑點(diǎn)的數(shù)量、位置及顏色，推測每種揮發(fā)油中可能含有化學(xué)成分的數(shù)量?；静僮髯⒁恻c(diǎn)1.揮發(fā)油含量測定裝

23、置一般分為兩種。一種適用于相對密度小于1.0的揮發(fā)油測定；另一種用于測定相對密度大于1.0的揮發(fā)油。中國藥典規(guī)定，測定相對密度大于1.0的揮發(fā)油，也可在相對密度小于1.0的測定器中進(jìn)行，其法是在加熱前，預(yù)先加入1mL二甲苯于測定器內(nèi)，然后進(jìn)行水蒸氣蒸餾，使蒸出的相對密度大于1.0的揮發(fā)油溶于二甲苯中，由于二甲苯的相對密度為0.8969，一般能使揮發(fā)油與二甲苯的混合溶液浮于水面。計算揮發(fā)油含量時，扣除加入二甲苯的體積即可。2.提取完畢，須待油水完全分層后，再將油放出。3.進(jìn)行單向二次展開時，在第一次展開后，應(yīng)將展開劑完全押去，再進(jìn)行第二次展開，否則將改變第二次展開劑的極性，從而影響分離效果。4.

24、揮發(fā)油易揮發(fā)逸失，應(yīng)置于冰箱中冷藏保存。進(jìn)行層析檢識時，操作應(yīng)及時，不宜久放。5.噴灑香草醛-濃硫酸顯色劑時，應(yīng)于通風(fēng)櫥內(nèi)進(jìn)行。思考題1. 用揮發(fā)油含量測定器提取揮發(fā)油應(yīng)注意什么問題？2. 揮發(fā)油的單向二次展開時，為什么先用石油醚與醋酸乙酯的混合溶劑進(jìn)行第一次展開，再用石油醚進(jìn)行第二次展開？實(shí)驗(yàn)四 茶葉中咖啡因的提取、分離與鑒定目的要求1.通過從茶葉中提取咖啡因，掌握一種從天然產(chǎn)物中提取純有機(jī)物的方法。2.學(xué)習(xí)使用索氏提取器的原理和方法3.學(xué)習(xí)升華的基本操作實(shí)驗(yàn)原理 茶吐中含有多種生物堿，其中以咖啡堿即咖啡因?yàn)橹??？Х纫蚣s占15，其結(jié)構(gòu)式為： 其化學(xué)名稱為1，3，7-三甲基-2，6-二氧嘌呤，

25、屬黃嘌呤衍生物?？Х纫蚴侨鯄A性化合物。味苦，能溶于氯仿、水、乙醇等溶劑中?？Х纫蚝Y(jié)晶水時為白色針狀結(jié)晶，在100時失去結(jié)晶水，并開始升華，在120178時升華迅速。純凈的咖啡因?yàn)槿埸c(diǎn)236的白色針狀結(jié)晶?，F(xiàn)在制藥工業(yè)多用合成方法來制取咖啡因。本實(shí)驗(yàn)是用索氏提取器提取，然后濃縮，升華得到咖啡因晶體。實(shí)驗(yàn)用品1.儀器：250mL燒杯，分液漏斗，溫度計，100mL蒸餾燒瓶，直形冷凝管，蒸發(fā)皿，抽濾裝置，錐形瓶，索氏提取器，濾紙2.試劑：干茶葉，95乙醇，生石灰，氯酸鉀，碘試液，氨水操作步驟 1.稱取干茶葉8g裝入濾紙筒中，輕輕壓實(shí)，放入索氏提取器中，另外在圓底燒瓶中加入100mL95乙醇，放入一粒

26、沸石，按圖1安裝好索氏提取裝置（脂肪提取器）。圖1 索氏提取器 1.浸提管 2.通氣管 3.虹吸管 4.燒瓶 5.冷凝管 小火加熱至沸騰，連續(xù)提取1小時，此時提取液的顏色變得很淡，待提取器中的液體剛虹吸下去時，立即停止加熱。2.按圖2裝好蒸餾裝置，將萃取液倒入蒸餾瓶中蒸除乙醇。當(dāng)蒸餾瓶中液體剩約8mL時，立即停止蒸餾，將殘留液倒入蒸發(fā)皿中，加入4g生石灰（起中和及脫水作用）。在蒸氣浴上加熱，趕盡乙醇，然后將蒸發(fā)皿轉(zhuǎn)移至石棉網(wǎng)上焙燒，除盡水分。圖2 蒸餾裝置3.在蒸發(fā)皿上蓋一張用大頭針刺有許多小孔的圓形濾紙，取一個合適的玻璃漏斗罩在濾紙上（圖3），在石棉網(wǎng)上小心加熱，逐漸升溫，盡可能使升華速度慢

27、一些，提高結(jié)晶純度?？Х纫蛘魵馔ㄟ^紙孔遇到漏斗內(nèi)壁冷卻，直到冷凝為固體，附著在漏斗內(nèi)壁和濾紙上。當(dāng)濾紙上出現(xiàn)大量白色結(jié)晶時，停止加熱，揭開漏斗和濾紙，觀看咖啡因的顏色形狀，仔細(xì)用小刀將附在其上的咖啡因刮下。圖3 常壓升華裝置4.鑒定（1）24mg咖啡因固體于磁皿中，加鹽酸1ml溶解，再加0.1g氯酸鉀。在通風(fēng)櫥內(nèi)，置水浴上蒸干殘渣后加氨水?dāng)?shù)滴，殘渣顯紫色。（2）24mg咖啡因，加入3ml水溶解，配成樣品液。取2滴樣品液，加碘-碘化鉀試液數(shù)滴，可見棕色、紅紫色或藍(lán)紫色化合物生成。思考題 1.試述索氏提取器萃取原理，它和一般的浸泡萃取比較有哪些優(yōu)點(diǎn)？2.進(jìn)行升華操作時應(yīng)注意哪些問題？ 天然藥物化學(xué)

28、基本操作技能一玻璃儀器的洗滌和干燥（1）玻璃儀器的洗滌是實(shí)驪室中經(jīng)常進(jìn)行的一項(xiàng)工作，玻璃儀器洗滌是否干凈，可直接影響到實(shí)驗(yàn)結(jié)果。所以洗滌玻璃儀器也是一項(xiàng)重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。玻璃儀器的洗滌方法，應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求、儀器污染程度以及污物的性質(zhì)來選擇。常用的洗滌方法有自來水刷洗、合成洗滌劑洗、酸堿溶液洗、鉻酸洗液洗等。如果粘附物是硝酸銀，可用稀硝酸或碘-碘化鉀（碘1g,碘化鉀2g，先混溶于適量水中，再加水至100mL）洗滌。如果是油污，可用有機(jī)溶劑洗，再少量多次地用乙醇脫去有機(jī)溶劑。如果是氯化銀，可用氨水洗。凡用洗液洗滌后的儀器，要用水沖洗干凈，最后用少量蒸餾水清洗23遍。玻璃儀器是否洗滌干凈，可在用蒸餾水清洗之前進(jìn)行檢查，即將容器盛一定量水，慢慢倒出（不要甩），水均勻流出后，容器壁無掛水珠的現(xiàn)象，示已洗干凈。（2）儀器的干燥：儀器是否需要干燥以及干燥的程度，根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求的不同而定。 1.自然干燥：對于不急用的，不耐高溫的，干燥要求不高的以及容量儀器等，在用蒸餾水清洗后，可直接將儀器倒置于潔凈的儀器架或柜中，任其自然晾干。 2.加溫干燥：將已洗滌干凈的儀器盡量甩出余水（不要用抹布或紙擦拭），置烘箱（或紅外線干燥箱）