動物實(shí)驗(yàn)的基本知識和操作技術(shù)

1、第二章動物實(shí)驗(yàn)的基本知識和操作技術(shù)第一節(jié)實(shí)驗(yàn)動物藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)常用的動物有蛙、蟾蜍、小白鼠、大白鼠、豚鼠、家兔、貓和犬等。常根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵筮x用不同的實(shí)驗(yàn)動物。 由于不同的動物具有不同的特點(diǎn)， 故所選用的動物應(yīng)能較好地反映試驗(yàn)藥物的選擇性作用，并符合節(jié)約的原則。（一）、實(shí)驗(yàn)動物的選擇原則1 、盡量選擇與人體結(jié)構(gòu)、機(jī)能、代謝及疾病特征相似的動物；2、選用的實(shí)驗(yàn)動物的解剖、生理特點(diǎn)應(yīng)符合實(shí)驗(yàn)?zāi)康模? 、根據(jù)人與實(shí)驗(yàn)動物對同一刺激的反應(yīng)差異，選用具有明顯反應(yīng)的動物；4、 根據(jù)生物醫(yī)學(xué)研究必須達(dá)到的精確度，選用結(jié)構(gòu)功能簡單又能反映研究指標(biāo)的動物；5、選用患有人類類似疾病的近交系或突變系動物；6、選用與實(shí)

2、驗(yàn)設(shè)計(jì)、技術(shù)條件、實(shí)驗(yàn)方法等相適應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)化動物；7、在不影響實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c結(jié)果的前提下，選擇最易獲得、 最經(jīng)濟(jì)、 便于操作管理的動物；8、 供實(shí)驗(yàn)用的動物應(yīng)具備質(zhì)量合格證。（二）、常用實(shí)驗(yàn)動物的特點(diǎn)1、蛙和蟾蜍離體心臟能較持久地有節(jié)律地搏動，常用于觀察藥物對心臟的作用；坐骨神經(jīng)和腓腸肌標(biāo)本可用來觀察藥物對周圍神經(jīng)、神經(jīng)肌肉或橫紋肌的作用；蛙的腹直肌還可以用于鑒定膽堿能藥物的作用。2、小白鼠是實(shí)驗(yàn)室最常用的一種動物。易于大量繁殖，且價廉，適用需要大量動物的實(shí)驗(yàn)，如藥物篩選、半數(shù)致死量測定、藥物效價比較、抗感染、抗腫瘤藥物及避孕藥物的研究等。3 、 大白鼠與小白鼠相似。 一些在小白鼠身上不便進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)

3、可選用大白鼠，如藥物抗炎作用的實(shí)驗(yàn)常選用大白鼠踝關(guān)節(jié)制備關(guān)節(jié)炎的模型。此外，也可用大白鼠直接記錄血壓、作膽管插管，或用大白鼠觀察藥物的亞急性或慢性毒性。大白鼠的血壓和人相近，且穩(wěn)定， 現(xiàn)常用于抗高血壓藥物實(shí)驗(yàn)。4、豚鼠是實(shí)驗(yàn)室常用動物之一。對組織胺很敏感， 容易致敏， 常用于平喘藥和抗組胺藥的實(shí)驗(yàn)。對結(jié)核菌亦敏感，故也用于抗結(jié)核藥的研究。此外還用于離體心臟及平滑肌實(shí)驗(yàn)，其乳頭肌和心房常用于電生理特性及心肌細(xì)胞動作電位實(shí)驗(yàn)，研究抗心律失常藥物的機(jī)理。5、家兔溫順、 易飼養(yǎng)， 常用于觀察藥物對心臟、呼吸的影響及農(nóng)藥中毒和解救的實(shí)驗(yàn)。亦用于研究藥物對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用、體溫實(shí)驗(yàn)、熱原檢查及避孕藥實(shí)驗(yàn)

4、。6、貓與家兔比較， 貓對外科手術(shù)的耐受性強(qiáng)，血壓較穩(wěn)定， 故常用于血壓實(shí)驗(yàn)，但價格較貴。此外，貓也常用于心血管藥物及中樞神經(jīng)系統(tǒng)藥物的研究。7、犬藥理實(shí)驗(yàn)需大動物時常用犬。常用于觀察藥物對心臟泵功能和血流動力學(xué)的影響，心肌細(xì)胞電生理研究， 降壓藥及抗休克藥的研究等。 犬還可以通過訓(xùn)練， 用于慢性實(shí)驗(yàn)研究，如條件反射、高血壓的實(shí)驗(yàn)治療、胃腸蠕動和分泌實(shí)驗(yàn)、慢性毒性實(shí)驗(yàn)。（三）、實(shí)驗(yàn)動物選擇的注意事項(xiàng)由于動物對外界刺激的反應(yīng)存在個體差異，在選擇實(shí)驗(yàn)動物時，還應(yīng)注意動物的年齡、體重、性別、生理狀態(tài)、健康狀況及其品系、等級等因素對實(shí)驗(yàn)的影響。二、實(shí)驗(yàn)動物的性別鑒別與編號（一）、實(shí)驗(yàn)動物的性別鑒別藥理

5、學(xué)實(shí)驗(yàn)常用的動物中，較大的動物 ( 如家兔、貓、犬等 ) 可以從生殖器分辨其性別，而較小的動物 ( 如小白鼠、 大白鼠、 豚鼠等 ) 的性別鑒別， 通常以肛門與生殖孔之間的距離來判斷，距離近者為雌性，距離遠(yuǎn)者為雄性。（二）、實(shí)驗(yàn)動物的編號藥理實(shí)驗(yàn)中常用多只動物同時進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，為避免混亂應(yīng)將動物進(jìn)行編號。實(shí)驗(yàn)動物編號的目的在于將觀察范圍內(nèi)的同種動物進(jìn)行區(qū)別，以便于觀察。 常用的方法有染色法、耳緣剪孔法、 烙印法和號牌法等，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、動物種類和具備的條件選用，一般編號應(yīng)具有清晰易辨、簡便耐久的特點(diǎn)。貓、犬、兔等較大的動物可用特別的號碼牌固定于身上。小白鼠、大白鼠及白色家兔等用黃色苦味酸涂于動物

6、不同部位進(jìn)行染色標(biāo)記而編號。例如在小白鼠，右前肢皮膚外側(cè)涂色標(biāo)記為1 號，腹部右外側(cè)皮膚涂色標(biāo)記為2 號，右后肢皮膚外側(cè)涂色標(biāo)記為3 號，頭部皮膚涂色標(biāo)記為4 號，背部正中皮膚標(biāo)記為5 號，尾巴根部標(biāo)記為6號， 7、 8、9 號在左側(cè)同1、2、 3 號，第 10 號不涂黃色。大白鼠的編號與小白鼠相同。第二節(jié)實(shí)驗(yàn)動物的捉拿、給藥和處死方法（一）、小白鼠、大白鼠1、捉拿法：小白鼠可采取雙手法和單手法兩種形式。雙手法：右手提起鼠尾，放在鼠籠蓋或其他粗糙面上，向后方輕拉，小白鼠則將前肢固定于粗糙面上。此時迅速用左手拇指和食指捏住小白鼠頸背部皮膚( 圖 1) ，并以小指與手掌尺側(cè)夾持其尾根部，固定于手中

7、。單手法： 小白鼠置于籠蓋上，先用左手食指與拇指抓住鼠尾，手掌尺側(cè)及小指夾住尾根部，然后用左手拇指與食指捏住頸部皮膚。圖 1 小白鼠的捉拿方法圖 2 大白鼠的捉拿方法大白鼠容易激怒咬人，捉持時左手應(yīng)戴防護(hù)手套或用厚布蓋住大鼠，先用右手抓住鼠尾，再用左手拇指和食指握住頭部，其余手指與手掌握住背部和腹部( 圖 2) 。不要用力過大，切勿捏其頸部，以免窒息致死。2 、給藥方法小白鼠（ 1）、灌胃 (po) ：左手固定小鼠，右手持灌胃器，灌胃針頭自口角進(jìn)入口腔，緊貼上腭插入食道 ( 圖 3) ，如遇阻力，將灌胃針頭抽回重插，以防損傷。常用灌胃量為0.1 0.2 ml/10g。（ 2）、皮下注射 (ih

8、)：可用腹部、背部、腹股溝的皮下，此處皮膚比較松弛，也可由助手協(xié)助。注藥量一般為0.1 0.2 ml/10g。（ 3）、肌肉注射(im) ：一人抓住小鼠頭部皮膚和尾巴，另一人持連4 號針頭的注射器，將針頭刺入后腿外側(cè)肌肉。注射量一般不超過0.1 0.2 ml/只。（ 4）、靜脈注射(iv)：將小鼠置入固定器，酒精涂擦尾部，以使血管擴(kuò)張。自尾部末端刺入，刺入血管后抽針芯可見回血。常用注射量為0.1 0.2 ml/10g。圖 3 小白鼠的灌胃方法圖 4小白鼠的腹腔注射方法（ 5）、腹腔注射(ip) ：將小鼠固定后，從下腹部外側(cè)進(jìn)針，深度較皮下注射深( 圖 4) 。常用注射量為0.1 0.2 ml/

9、10g。大鼠灌胃、腹腔注射、 皮下注射及尾靜脈注射與小鼠相似。靜脈注射也可在麻醉下行舌下靜脈注射。3 、處死方法（ 1）、頸椎脫位法：術(shù)者左手持鑷子或用拇指、食指固定小鼠頭后部，右手捏住鼠尾，用力向后上方牽拉，聽到鼠頸部喀擦聲即頸椎脫位，脊髓斷裂，鼠瞬間死亡。（ 2）、打擊法：用手抓住鼠的尾并提起，朝地面用力撞擊鼠頭致死（也可用小木錘用力打擊鼠頭（ 3）、吸入麻醉法：吸過量的乙醚。（ 4）、大量放血法：可采用眼眶動、靜脈放血致死。（ 5）、空氣栓塞法：將空氣急速注入靜脈致死。小白鼠可注入0.3-0.5ml空氣。（二）蛙和蟾蜍1、捉拿法：左手握持蛙或蟾蜍，食指和中指夾住左前肢，拇指壓住右前肢；右

10、手將雙下肢拉直，左手無名指及小指將其壓住而固定。此法用于淋巴囊注射。毀腦和毀脊髓則用左手食指和中指夾持蛙或蟾蜍的頭部，拇指和無名指小指握持雙下肢，右手持刺針進(jìn)行操作。2、給藥方法蛙皮下有數(shù)個淋巴囊( 圖 5) ，注藥易吸收，常用腹淋巴囊。注藥時，將蛙四肢固定，使腹部向上， 注射針頭從蛙大腿上部刺入，經(jīng)大腿肌層入腹壁肌層，再淺出至腹壁皮下，即是腹淋巴囊。此法可避免藥液外漏。注藥量一般為0.25 1.0 ml/只。圖 5 青蛙的淋巴囊分布3、處死方法斷頭、毀腦法： 常用于蛙類?？捎眉舻都羧ヮ^部或用金屬探針經(jīng)枕骨大孔破壞大腦和脊髓而致死。大鼠和小鼠也可用斷頭法處死，術(shù)者需戴手套，兩手分別抓住鼠頭與鼠

11、身，拉緊并顯露頸部，由助手持剪刀，從頸部剪斷頭部。（三）、豚鼠1、捉拿法：豚鼠性情溫順不咬人，可用左手直接從背側(cè)握持前部軀干，體重小者用一只手捉持，體重大者宜用雙手，右手托住臀部(圖 6)2、給藥方法灌胃（見圖6）、皮下注射、肌肉注射及腹腔注射方法基本同小鼠，給藥量稍多。靜脈注射可選后腳掌外側(cè)靜脈或頸外靜脈。圖 5豚鼠的捉拿方法圖 6豚鼠的灌胃方法3、處死方法豚鼠可采用注射麻醉法，即注射戊巴比妥鈉麻醉處死。豚鼠可注射麻醉劑量的3 倍以上的量腹腔內(nèi)注射。還可采用吸入麻醉法。（四）家兔1、捉拿法：用左手抓住頸背部皮膚( 抓的面積越大， 其吃重點(diǎn)越分散) ，將兔提起， 以左手托住其臀部，使兔呈坐位(

12、圖 7)圖 7家兔的捉拿方法2、給藥方法（ 1）灌胃：一人將兔身固定于腋下，一手固定兔頭，另一手將開口器放入兔口。另一人將導(dǎo)尿管從開口器孔插入口內(nèi)，再慢慢插入食道和胃放入水中，如無氣泡，則可證實(shí)導(dǎo)尿管在胃內(nèi)。灌胃量一般為( 圖8) 。為慎重起見，可將胃管外端10 ml/kg 。如用兔固定盒，可由一人操作。圖 8家兔的灌胃方法（ 2）、靜脈注射：一人固定兔身和兔頭，另一人在兔耳邊緣血管管，左手拇指和食指固定針頭和兔耳，右手注藥( 圖達(dá) 10 ml/kg 。( 耳緣靜脈 ) 擴(kuò)張后， 從靜脈末端刺入血 9) 。注藥量一般為 2 ml/kg ，等滲液可皮下、肌肉、腹腔注射與鼠類相似。常用注藥量分別0

13、.5 、 1.0 、 5.0 ml/kg。3、處死方法采用注射麻醉法：急速注射1.5-2 ml/kg（ 50 mg/ ml ）戊巴比妥鈉如兔的耳緣靜脈；大量放血法（暴露頸動脈放血）；空氣栓塞法（注入10-20 ml空氣）。（五）貓1 、捉拿法：貓較為溫順，可用一只手捉住貓的頸部皮膚，另一只手托起四肢部抱起(圖 9)。對兇暴貓，將手慢慢伸入籠內(nèi)，輕撫貓的背、頭、頸部。一只手抓住貓的頸部，取出籠外，另一只手捉住從背到腰部的皮膚。當(dāng)貓不許手接觸它的皮膚時，可用皮手套或用網(wǎng)捉拿。圖 9家兔的耳緣靜脈注射方法圖 10貓的捉拿方法2、給藥方法與兔基本相同3、處死方法采用注射麻醉法：靜脈或腹腔內(nèi)急速注射戊巴

14、比妥鈉麻醉劑量的2-3倍；大量放血法（暴露頸動脈放血）；空氣栓塞法（注入10-20 ml空氣）。（六）、犬1、捉拿法：用一捕犬叉夾住犬頸，另一人用一粗棉帶綁住嘴巴，使其不能咬人。如系馴順犬，可突然捉住兩耳，將前足提高，然后綁嘴巴。綁嘴的方法是將扁帶繞上下頜一周，在上頜上打一結(jié)，然后轉(zhuǎn)向下頜，再作一結(jié)， 最后將帶牽引至頭后頸背上打第三結(jié)，在此結(jié)上須再打一活結(jié)以固定之。2 、給藥方法腹腔注射：犬被夾住后，用力將犬的頸、頭壓在地上，提起側(cè)后肢，將藥注入腹腔。靜脈注射：可從后肢外側(cè)小隱靜脈或前肢皮下頭靜脈注射。3、處死方法采用注射麻醉法：靜脈急速注射戊巴比妥鈉脈放血）；空氣栓塞法（注入70-150 m

15、l空氣）。100 mg/ kg；大量放血法（暴露股動、靜第二節(jié)實(shí)驗(yàn)動物的取血方法一、小鼠和大鼠1、剪尾取血法：將清醒鼠裝入深顏色的布袋中，將鼠身裹緊，露出尾巴，用酒精涂擦或用溫水浸泡使血管擴(kuò)張， 剪斷尾尖后， 尾靜脈血即可流出，用手輕輕地從尾根部向尾尖擠捏，可取到一定量的血液。 取血后， 用棉球壓迫止血。也可采用交替切割尾靜脈方法取血。 用一鋒利刀片在尾尖部切破一段尾靜脈，靜脈血即可流出，每次可取 0.3 0.5 ml，供一般血常規(guī)實(shí)驗(yàn)。三根尾靜脈可替換切割，由尾尖向根部切割。由于鼠血易凝，需要全血時，應(yīng)事先將抗凝劑置于采血管中，如用血細(xì)胞混懸液，則立即與生理鹽水混合。2、眼球后靜脈叢取血法：

16、左手持鼠，拇指與中指抓住頸部皮膚，食指按壓頭部向下，阻滯靜脈回流，使眼球后靜脈叢充血，眼球外突。右手持1肝素溶液浸泡過的自制吸血器，從內(nèi)呲部刺入，沿內(nèi)下眼眶壁，向眼球后推進(jìn)4 5 mm，旋轉(zhuǎn)吸血針頭，切開靜脈叢，血液自動進(jìn)入吸血針筒，輕輕抽吸血管 ( 防止負(fù)壓壓迫靜脈叢使抽血更困難) ，拔出吸血針， 放松手壓力， 出血可自然停止。也可用特制的玻璃取血管( 管長 7 10 cm，前端拉成毛細(xì)管，內(nèi)徑0.1 1.5 mm，長為1 cm，后端管徑為0.6 cm) 。必要時可在同一穿刺孔重復(fù)取血。此法也適用豚鼠和家兔。3、眼眶取血法：左手持鼠，拇指與食指捏緊頭頸部皮膚，使鼠眼球突出，右手持彎鑷或止血鉗

17、，鉗夾一側(cè)眼球部，將眼球摘出，鼠倒置，頭部向下，此時眼眶很快流血，將血滴入預(yù)先加有抗凝劑的玻璃管內(nèi)， 直至流血停止。此法由于取血過程中動物未死，心臟不斷跳動，一般可取鼠體重 4 5的血液量，是一種較好的取血方法，但只適用一次性取血。4、心臟取血：動物仰臥固定于鼠板上，用剪刀將心前區(qū)毛剪去，用碘酒、酒精消毒此處皮膚，在左側(cè)第 3 4 肋間用左手食指摸到心搏， 右手持連有 4 5 號針頭的注射器， 選擇心搏最強(qiáng)處穿刺，當(dāng)針頭正確刺入心臟時，鼠血由于心臟跳動的力量，血自然進(jìn)入注射器。5、斷頭取血：實(shí)驗(yàn)者帶上棉手套，用左手抓緊鼠頸部位，右手持剪刀， 從鼠頸部剪掉鼠頭迅速將鼠頸端向下，對準(zhǔn)備有抗凝劑的試

18、管，收集從頸部流出的血液，小鼠可取血0.8 1.2 ml，大鼠可取血 510 ml 。6、頸動靜脈、股動靜脈取血：麻醉動物背位固定，一側(cè)頸部或腹股溝部去毛，切開皮膚，分離出靜脈或動脈，注射針沿動靜脈走向刺入血管。 20 g 小鼠可抽血 0.6 ml ， 300 g 大鼠可抽血 8 ml 。也可把頸靜脈或頸動脈用鑷子挑起剪斷， 用試管取血或注射器抽血， 股靜脈連續(xù)多次取血時， 穿刺部位應(yīng)盡量靠近股靜脈遠(yuǎn)心端。二、豚鼠1、心臟取血：需二人協(xié)作進(jìn)行，助手以兩手將豚鼠固定，腹部面向上， 術(shù)者用左手在胸骨左側(cè)觸摸到心臟搏動處，一般在第4 6 肋間、選擇心跳最明顯部位進(jìn)針穿刺。針頭進(jìn)入心臟，則血液隨心跳而

19、進(jìn)入注射器內(nèi)，取血應(yīng)快速，以防在試管內(nèi)凝血。如認(rèn)為針頭已刺入心臟，但還未出血時，可將針頭慢慢退出一點(diǎn)即可。失敗時應(yīng)拔出重新操作，切忌針頭在胸腔內(nèi)左右擺動，以防損傷心臟和肺臟而致動物死亡。此法取血量大，可反復(fù)采血。2、背中足靜脈取血：助手固定動物， 將其右或左后肢膝關(guān)節(jié)伸直提到術(shù)者面前，術(shù)者將動物腳背用酒精消毒，找出背中足靜脈，以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾端，右手拿注射針刺入靜脈，拔針后立即出血，呈半球狀隆起，用紗布或棉花壓迫止血?？煞磸?fù)取血，兩后肢交替使用。三、家兔1、心臟取血：將動物仰臥在兔板上，剪去心前區(qū)毛，用碘酒、酒精消毒皮膚。用左手觸摸胸骨左緣第3 4 肋間隙，選擇心臟跳動最明顯處作

20、穿刺點(diǎn)，右手持注射器，將針頭插入胸腔，通過針頭感到心臟跳動時，再將針頭刺進(jìn)心臟，然后抽出血液。2、耳緣靜脈取血：選好耳緣靜脈，拔去被毛，用二甲苯或75酒精涂擦局部，小血管夾子夾緊耳根部，使血管充血擴(kuò)張 術(shù)者持粗針頭從耳尖部的血管逆回流方向入靜脈取血，或用刀片切開靜脈，血液自動流出，取血后用棉球壓迫止血，一般取血量為2 3 ml，壓住側(cè)支靜脈，血液更容易流出，取血前耳緣部涂擦液體石蠟，可防止血液凝固。3、耳中央動脈取血：免置入固定箱內(nèi)，用手揉擦耳部，使中央動脈擴(kuò)張。左手固定兔耳，右手持注射器，中央動脈末端進(jìn)針，與動脈平行，向心方向刺入動脈。一次取血量為15 ml，取血后棉球壓迫止血。注意兔中央動

21、脈易發(fā)生痙攣性收縮。抽血前要充分使血管擴(kuò)張，在痙攣前盡快抽血，抽血時間不宜過長。中央動脈末端抽血比較容易，耳根部組織較厚，抽血難以成功。4、股靜脈取血：行股靜脈分離手術(shù)，注射器平行于血管，從股靜脈下端向向心端方向刺入，徐徐抽動針?biāo)纯扇⊙?。抽血完畢后，要注意止血。股靜脈易止血，用干紗布輕壓取血部位即可。若連續(xù)多次取血，取血部位應(yīng)盡量選擇離心端。5、頸靜脈取血：將兔固定于兔箱中，倒置使兔頭朝下，在頸部上l/3的靜脈部位剪去被毛，用碘酒、酒精消毒，剪開一個小口，暴露頸靜脈，注射器向向心端刺入血管，即可取血。此處血管較粗，很容易取血， 取血量也較多， 一次可取10 ml 以上，用干紗布或棉球壓迫取血

22、部位止血。四、 貓從前肢皮下頭靜脈、后肢股靜脈、耳緣靜脈取血，需大量血液時可從頸靜脈取血。五、 犬1、心臟取血：犬心臟取血方法與兔相似。將犬麻醉固定于手術(shù)臺上，暴露胸部， 剪去左側(cè)3 5 肋間被毛，碘酒、酒精消毒局部，術(shù)者觸摸心搏最明顯處，避開肋骨進(jìn)針，一般在胸骨左緣外1cm第 4 肋間處可觸到，用6 7 號針頭注射器取血，要垂直向背部方向進(jìn)針。當(dāng)針頭接觸到心臟時，即有搏動感覺。針頭進(jìn)入心腔即有血液進(jìn)入注射器。一次可采血20 ml 左右。2、小隱靜脈和頭靜脈取血：（ 1） 小隱靜脈： 從后肢外踝后方走向外上側(cè)，頭靜脈位于前肢腳爪上方背側(cè)正前位。剪去局部被毛，助手握緊腿，使皮下靜脈充盈，術(shù)者按常

23、規(guī)穿刺即可抽出血。（ 2） 頸靜脈取血：犬以側(cè)臥位固定于犬臺上，剪去頸部被毛，常規(guī)消毒。助手拉直頸部， 頭盡量仰。 術(shù)者左手拇指壓住頸靜脈入胸腔處，使頸靜脈曲張。 右手持注射器，針頭與血管平行，從遠(yuǎn)心端向向心端刺入血管，頸靜脈在皮下易滑動，穿刺時要拉緊皮膚，固定好血管，取血后棉球壓迫止血。3、股動脈取血：麻醉犬或清醒犬背位固定于犬臺上， 助手將犬后肢向外拉直， 暴露腹股溝， 剪去被毛，常規(guī)消毒，并用左手食指、中指觸摸動脈搏動部位，并固定好血管，右手持注射器，針頭與皮膚呈 45°角，由動脈搏動最明顯處直接刺入血管，抽取所需血液量，取血后，需較長時間壓迫止血。第三節(jié)實(shí)驗(yàn)動物麻醉一、 麻醉

24、藥的選擇（一）、理想的麻醉藥應(yīng)具備下列三個條件：1、 麻醉完善，實(shí)驗(yàn)過程中動物無掙扎或嗚叫現(xiàn)象，麻醉時間大致滿足實(shí)驗(yàn)要求。2、 對動物的毒性及所觀察的指標(biāo)影響最小。3、 使用方便。麻醉藥需根據(jù)動物的種類和不同實(shí)驗(yàn)手術(shù)的要求選擇， 麻醉必須適度，過淺或過深都會影響手術(shù)或?qū)嶒?yàn)的進(jìn)程和結(jié)果。（二）、常用麻醉有下列兩種形式：1、局部麻醉常用 5 10 g/l普魯卡因，動物實(shí)驗(yàn)中多采用局部皮下浸潤麻醉。劑量按所需麻醉面積的大小而定，一般不超過50 mg/kg 。2、全身麻醉（ 1） 吸入麻醉 乙醚 (ether) 為吸入性麻醉藥，可用于各種動物，尤其是時間短的手術(shù)或?qū)嶒?yàn)。 將乙醚滴在棉球上放入玻璃罩內(nèi)，

25、 利用其揮發(fā)的性質(zhì)， 經(jīng)呼吸道進(jìn)入肺泡，對動物進(jìn)行麻醉。吸入后約 15 20 min 開始發(fā)揮作用。其優(yōu)點(diǎn)：麻醉深度易于掌握，比較安全，術(shù)后動物蘇醒較快。缺點(diǎn)：需要專人管理，在麻醉初期常出現(xiàn)強(qiáng)烈興奮現(xiàn)象，對呼吸道有較強(qiáng)的刺激作用，使粘液分泌增加，易阻塞呼吸道而發(fā)生窒息。對于經(jīng)驗(yàn)不足的操作者，用乙醚麻醉動物時，容易因麻醉過深而致動物死亡。另外乙醚易燃、易爆，對人亦有作用，使用時應(yīng)避火、通風(fēng)，并注意安全。（已少用）（ 2） 注射麻醉巴比妥類各種巴比妥類藥物的吸收和代謝速度不同，其作用時間亦長短不一。戊巴比妥鈉 (sodium pentobarbital)在實(shí)驗(yàn)中最為常用。該品為白色粉末，常配成13

26、水溶液由靜脈或腹腔給藥。一次給藥麻醉的有效作用時間持續(xù)為35 h ，屬中效巴比妥類。靜脈注射時，前1/3 劑量可快速注射，以快速度過興奮期；后2/3 劑量則應(yīng)緩慢注射，并密切觀察動物的肌肉緊張狀態(tài)、呼吸頻率和深度及角膜反射。動物麻醉后，常因麻醉藥作用、肌肉松弛和皮膚血管擴(kuò)張，致使體溫緩慢下降，所以應(yīng)設(shè)法保溫。硫噴妥鈉(sodillm thiopental)為淺黃色粉末，其水溶液不穩(wěn)定，故需在使用之前臨時配制成2.5 5溶液經(jīng)靜脈注射。次給藥可維持0.5 1 h 。實(shí)驗(yàn)時間較長時可重復(fù)給藥，維持量為原劑量的1/l0 1/5 。適用于較短時程的實(shí)驗(yàn)，屬短效或超短效類。巴比妥類對呼吸中樞有較強(qiáng)的抑制

27、作用， 麻醉過深時， 呼吸活動可完全停止。 故應(yīng)注意防止給藥過多、過快。對心血管系統(tǒng)也有復(fù)雜的影響， 故這類藥物不用于研究心血管功能的實(shí)驗(yàn)動物麻醉。烏拉坦 (urethane) 又名氨基甲酸乙酯，作用性質(zhì)溫和，易溶于水，對動物麻醉作用強(qiáng)大而迅速，安全范圍大，多數(shù)動物實(shí)驗(yàn)都可使用，更適用于小動物麻醉?？蓪?dǎo)致較持久的淺麻醉，對呼吸無明顯影響。優(yōu)點(diǎn)是價廉，使用簡便，次給藥可維持 4 5 h ，且麻醉過程較平穩(wěn)， 動物無明顯掙扎現(xiàn)象； 缺點(diǎn)是蘇醒慢， 麻醉深度和使用劑量較難掌握。烏拉坦對兔的麻醉作用較強(qiáng)，是家兔急性實(shí)驗(yàn)常用的麻醉藥，對貓和犬則奏效較慢，在大鼠和兔能誘發(fā)腫瘤，不宜用于長期存活的慢性實(shí)驗(yàn)動

28、的麻醉，本藥易溶于水，使用時配成10 25溶液。若注射劑量過大，則可致動物血壓下降，且對呼吸影響也很大。用此藥麻醉時動物保溫尤為重要。氯醛糖本藥溶解度較小，常配成1水溶液。 使用前需先在水浴鍋中加熱，使其溶解，但加熱溫度不宜過高，以免降低藥效。本藥安全范圍大，能導(dǎo)致持久的淺麻醉，對自主神經(jīng)中樞無明顯抑制作用，對痛覺的影響也小，故特別適用于研究要求保留生理反射 ( 如心血管反射 ) 或神經(jīng)系統(tǒng)反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)中常將氯醛糖與烏拉坦混合使用。以加溫法將氯醛糖溶于25的烏拉坦溶液內(nèi)，使氯醛糖濃度為5。犬和貓靜脈注射劑量為1.5 2 m1/kg 混合液，其中氯醛糖劑量為 75 100 mg/kg 。兔也

29、可用此劑量做靜脈注射。非揮發(fā)性麻醉藥的優(yōu)點(diǎn)：使用簡便， 一次給藥 ( 硫噴妥鈉除外 ) 可維持較長時間的麻醉狀態(tài)， 手術(shù)和實(shí)驗(yàn)過程中不需要專人管理麻醉，而且麻醉過程比較平穩(wěn)，動物無明顯掙扎現(xiàn)象。缺點(diǎn)：蘇醒較慢。二、 各種動物的麻醉方法1、 小白鼠根據(jù)需要選用吸入麻醉或注射麻醉。注射麻醉時多采用腹腔注射法。2、 大白鼠多采用腹腔麻醉，也可用吸入麻醉。3、 豚鼠可進(jìn)行腹腔麻醉，也可將藥液注入背部皮下。4、 貓 多用腹腔麻醉，也可用前肢或后肢皮下靜脈注射法。5、 家兔多采用耳緣靜脈麻醉。注射麻醉藥時應(yīng)先快后慢，并密切注意家兔的呼吸及角膜反射等變化。6、 犬 多用前肢或后肢皮下靜脈注射。表 1 常用注

30、射麻醉藥物的劑量與給藥途徑三、 麻醉動物注意事項(xiàng)1、不同動物個體對麻醉藥的耐受性不同。因此在麻醉過程中，除參照上述一般藥物用量標(biāo)準(zhǔn)外，還必須密切注意動物的狀態(tài)，以決定麻醉藥的用量。2 、注意麻醉的深淺，根據(jù)呼吸的深度和快慢、角膜反射的靈敏度、有無四肢和腹壁肌肉的緊張性以及皮膚夾捏反應(yīng)等進(jìn)行判斷。 當(dāng)呼吸突然變深變慢、 角膜反射的靈敏度明顯下降或消失、四肢和腹壁肌肉松弛、皮膚夾捏無明顯疼痛反應(yīng)時，應(yīng)立即停止給藥。3、靜脈注藥時應(yīng)堅(jiān)持先快后慢的原則，避免動物因麻醉過深而死亡。麻醉過深時，最易觀察到的是呼吸減慢甚至停止，但仍有心跳。此時應(yīng)立即進(jìn)行人工呼吸。可用手有節(jié)奏地壓迫和放松胸廓，或推壓腹腔臟器

31、使膈上、下移動，以證肺通氣，與此同時迅速做氣管切開，并插入氣管套管，連接人工呼吸機(jī)以代替徒手人工呼吸，直至主動呼吸恢復(fù)。還可給予蘇醒劑以促進(jìn)恢復(fù)，常用的蘇醒劑有咖啡因 (1 mg/kg) 、尼可剎米 (2 5 mg/kg) 和洛貝林 (0.3 1 mg/kg) 等。心跳停止時應(yīng)進(jìn)行心臟按摩，注射溫?zé)嵘睇}水和腎上腺素。4、實(shí)驗(yàn)過程中如麻醉過淺，可臨時補(bǔ)充麻醉藥，但一次補(bǔ)充劑量不宜超過總量的1/5 。第四節(jié)實(shí)驗(yàn)動物劑量一、給藥劑量的確定在觀察一個藥物的作用時，應(yīng)該給動物多大的劑量是實(shí)驗(yàn)開始時應(yīng)確定的一個重要問題。劑量太小，作用不明顯；劑量太大，又可能引起動物中毒死亡。給藥劑量可以按下列方法來確定

32、：1、 根據(jù)有關(guān)文獻(xiàn)、 實(shí)驗(yàn)教材、 實(shí)驗(yàn)參考書提供的藥物劑量。由于藥物批號不同、動物、環(huán)境條件的差異，必要時通過預(yù)備實(shí)驗(yàn)調(diào)整用藥劑量。2、 根據(jù)臨床常用有效劑量換算成實(shí)驗(yàn)動物劑量。(1)對于新藥劑量的確定，先用小鼠粗略地探索中毒劑量或致死劑量，然后用小于中毒量的劑量，或取致死量的若干分之一為應(yīng)用劑量，一般為1/10 1/5 。通過預(yù)試來確定。(2) 植物藥粗制劑的劑量多按生藥折算。(3) 化學(xué)藥品可參考化學(xué)結(jié)構(gòu)相似的已知藥物，特別是其結(jié)構(gòu)和作用都相似的藥物劑量。(4)確定劑量后，如第一次實(shí)驗(yàn)的作用不明顯，動物也沒有中毒的表現(xiàn)( 如體重下降、精神不振、 活動減少或其它癥狀) ，可以加大劑量再次實(shí)驗(yàn)。如出現(xiàn)中毒現(xiàn)象，作用也明顯，則應(yīng)降低劑量再次實(shí)驗(yàn)。一般情況下， 在適宜的劑量范圍內(nèi)，藥物的作用常隨劑量的加大而增強(qiáng)。 所以，有條件時最好同時用幾個劑量作實(shí)驗(yàn)，以便迅速獲得有關(guān)藥物作用的較完整的資料。如實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)劑量與作用強(qiáng)度之間毫無規(guī)律時，則更