DNA復(fù)制過程中三種酶的作用及比較(共12張幻燈片)

1、 解旋酶解旋酶 DNADNA聚合酶聚合酶 DNADNA連接酶連接酶解旋酶解旋酶解開母鏈雙螺旋解開母鏈雙螺旋單鏈單鏈DNA結(jié)合蛋白結(jié)合蛋白穩(wěn)定母鏈穩(wěn)定母鏈DNADNA聚合酶聚合酶指導(dǎo)指導(dǎo)前導(dǎo)鏈由前導(dǎo)鏈由5至至3方向方向連續(xù)合成連續(xù)合成DNA聚合酶聚合酶滯后鏈的合成是不連續(xù)的，滯后鏈的合成是不連續(xù)的，引物酶引物酶合成合成RNA引物，引物，DNA聚合酶在引物后邊合成聚合酶在引物后邊合成DNA片段，即岡崎片段片段，即岡崎片段RNA引物引物岡崎片段岡崎片段復(fù)制方向復(fù)制方向RNA引物被移除，引物被移除，DNA連接酶連接酶連接岡崎片段連接岡崎片段DNA復(fù)制過程復(fù)制過程53 A T C G A A T C G

2、 G T T T A C C T T A G C C A A 解旋酶解旋酶 1、解旋酶 作用實(shí)質(zhì)：作用實(shí)質(zhì)：DNA復(fù)制過程中，斷開復(fù)制過程中，斷開氫鍵氫鍵，使雙，使雙螺旋解旋為單鏈。螺旋解旋為單鏈。 A T C G A A T C G G T T U A C C T T A G C C A A DNA聚合酶聚合酶母鏈母鏈DNA子鏈子鏈DNA引物引物3355 2、DNA聚合酶聚合酶 DNA聚合酶的作用特點(diǎn)（1）需要模板：以）需要模板：以DNA母鏈為模板，母鏈為模板，按照按照堿基互堿基互補(bǔ)配對原則補(bǔ)配對原則合成子鏈；合成子鏈；（2）需要引物：只能）需要引物：只能連接到已連接到已有的核酸片段上；有的

3、核酸片段上；（3）連接方式：形成）連接方式：形成磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵； （4）作用方向：子鏈只能從）作用方向：子鏈只能從5 3方向合成。方向合成。 岡崎片段岡崎片段岡崎片段岡崎片段岡崎片段岡崎片段滯后鏈的合成滯后鏈的合成子鏈子鏈母鏈母鏈3355磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵DNA鏈解旋方向鏈解旋方向 3、DNA連接酶連接酶 3、DNA連接酶連接酶 T4DNA連接酶DNA連接酶的作用特點(diǎn)（1）用途：）用途： a、 DNA復(fù)制中連接岡崎片段；復(fù)制中連接岡崎片段； b、在基因工程中連接目的基因和載體；、在基因工程中連接目的基因和載體；（2）不需要識別連接的）不需要識別連接的DNA序列；也不需序列；也不需要模板

4、；要模板；（3）作用實(shí)質(zhì)：形成）作用實(shí)質(zhì)：形成磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵連接連接DNA片段；片段； 3種酶的作用比較種酶的作用比較DNA聚合酶聚合酶DNA連接酶連接酶作用作用作用作用部位部位作用作用特點(diǎn)特點(diǎn)(條件條件)常用常用類型類型拼接拼接DNA片段，形成重片段，形成重組組DNA兩脫氧核苷酸的脫氧核糖與磷酸間形成的磷酸二酯鍵兩脫氧核苷酸的脫氧核糖與磷酸間形成的磷酸二酯鍵(1)將將DNA雙鏈上的雙鏈上的兩個缺口兩個缺口同時連接同時連接起來，起來，不需要模板不需要模板(2)在在兩個兩個DNA片段之間片段之間形成形成磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵EcoliDNA連接酶連接酶T4DNA連接酶連接酶以母鏈以母鏈DNA為模板合成子代為模板合成子代DNA(1) 只能將只能將單個核苷酸單個核苷酸連接到已連接到已有的核酸片段上，形成磷酸二有的核酸片段上，形成磷酸二酯鍵酯鍵(2)需要引物需要引物