
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文檔簡(jiǎn)介
1、實(shí)驗(yàn)室移液槍的使用1如何裝槍頭有沒有覺得新的移液器每次打槍頭的聲音特別像吃雞游戲里M24狙擊槍的開 槍聲一清脆舒服。但如果你還使勁在槍頭盒子上敲幾下來插上槍頭,就趕緊 收手吧,不然你的M24很快就要變成散彈槍了。因?yàn)殚L時(shí)間這樣 做會(huì)導(dǎo)致槍的內(nèi)部配件(如彈簧)因敲擊產(chǎn)生的瞬時(shí)撞擊力而變得松散,甚 至?xí)?dǎo)致刻度調(diào)節(jié)旋鈕卡住甚至?xí)審椛涮淄舱蹟唷U_的做法應(yīng)該是:將槍垂直插入槍頭中,稍微用力左右微微轉(zhuǎn)動(dòng)1/4或 1/2圈即可使其緊密結(jié)合。多道(如8道或12道,有錢人家)的移液槍,可 將移液槍的第一道對(duì)準(zhǔn)第一個(gè)槍頭,然后傾斜地插入,往前后方向搖動(dòng)即可 卡緊。槍頭卡緊的標(biāo)志是略微超過0型環(huán),并可以看到
2、連接部分形成清晰的 密封圈。2如何調(diào)節(jié)量程從大到小,按照正常的調(diào)節(jié)方法,逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)旋鈕即可;從小到大,則先順 時(shí)針旋轉(zhuǎn)刻度旋鈕至超過量程的刻度(繼續(xù)旋轉(zhuǎn)活塞按鈕約1/3圈),再回 調(diào)至設(shè)定體積,這樣可以保證量取的最高精確度(偉大而博學(xué)的導(dǎo)師教我 的)。在該過程中,不要將按鈕旋出量程,否則會(huì)卡住內(nèi)部機(jī)械裝置而損壞 了移液槍。通常,移液器推薦在35-100%量程范圍內(nèi)操作。移液槍建議有效使用范圍3高精度潤洗的重要性不知道大家有沒有遇到過這種情況,槍頭明明插緊了,手上的操作明明是緩 慢進(jìn)行,但還是會(huì)肉眼可見的抽取液體的體積不夠,排除人為操作失誤(也 就是說,你真的不會(huì)用槍),還要注意是否進(jìn)行了潤洗。
3、除了普通液體潤洗 以外,在吸取有機(jī)溶劑或高揮發(fā)性液體時(shí),揮發(fā)性氣體會(huì)在白套筒室內(nèi)形成 負(fù)壓,從而產(chǎn)生漏液的情況,這時(shí)就需要預(yù)洗4飛次,讓白套筒室內(nèi)的氣體 達(dá)到飽和,負(fù)壓就會(huì)自動(dòng)消失。注:高溫或者低溫(冰點(diǎn)以下)液體請(qǐng)不要 潤洗。4如何移液講了這么多,重點(diǎn)來了,移液器不就是為了移液嘛1)移液浸入的角度:保持垂直狀態(tài),最多不能超過20。傾斜吸液會(huì)造成 氣壓面的改變,增大移液誤差。2)槍頭浸入深度:槍頭正確的浸入深度可以有效的減少取液誤差。3)吸液速度:勻速。過快的吸液速度,容易使樣品形成漩渦,產(chǎn)生氣泡;樣 品液易進(jìn)入套柄,對(duì)活塞和密封圈造成損傷,除了損傷移液器,這一點(diǎn)也很 容易造成污染,細(xì)胞間曾因
4、為這種操作失誤,讓正常的細(xì)胞株里混入了腫瘤 細(xì)胞。特別是1ml以上的液體,很容易造成液體上沖。吸完后最 好能在液面內(nèi)停留1-3秒。4)排液及吹液:排液:將活塞按壓至第一檔;吹液:繼續(xù)下壓活塞按鈕,到達(dá)第二檔或者直接按到底。(大家應(yīng)該理解我 說的第一檔和第二檔是什么意思,但是我有點(diǎn)質(zhì)疑導(dǎo)師講的這一點(diǎn)到底對(duì)不 對(duì),因?yàn)槲抑暗呐乓汉臀和耆欠粗陌?。?)移液器使用完畢,必須卸掉槍頭后才可以掛在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以防止任何殘留 的液體都會(huì)在平放時(shí)倒流回吸液桿。5如何維護(hù)與保養(yǎng)一個(gè)物件的使用壽命,總的來說,6分靠正確的使用方法,4分就要靠正確的 保養(yǎng)了,所以請(qǐng)佛系用槍。1)如果移液器每天都需要使用,則建議
5、每三個(gè)月或半年清潔并校準(zhǔn)一次。2)如較長時(shí)間不使用,要把移液槍的量程調(diào)至最大值的刻度,使彈簧處于松 弛狀態(tài)以保護(hù)彈簧,不注意此點(diǎn)容易導(dǎo)致活塞無法回彈。3)如液體不小心進(jìn)入活塞室需及時(shí)清除污染物(這是公德心)。4)在吸取過高揮發(fā)、高腐蝕液體后,應(yīng)將整支移液器拆開,用蒸儲(chǔ)水沖洗活 塞桿及白套筒內(nèi)壁,并在晾干后安裝使用,以免揮發(fā)性氣體長時(shí)間吸附于活 塞桿表面,對(duì)活塞桿產(chǎn)生腐蝕,損壞移液器。留的液體都會(huì)在平放時(shí)倒流回吸液桿。6注意事項(xiàng)(1)(1)(1)當(dāng)我們碰到吸取粘稠液體的時(shí)候,該怎么辦? 日常實(shí)驗(yàn)中,我們偶爾會(huì)吸取高粘稠的液體,比如說TWEEN-20,或者是高粘 度的蛋白,在用槍吸取的時(shí)候,常常會(huì)
6、感覺液體吸取的很慢,打出的時(shí)候又 很容易殘留液體,吹不干凈,還容易一不小心吸到槍里。這里給大家介紹兩 種方式:1、無論槍頭的體積是適用于多少,槍頭口都很細(xì)小,這也是造成粘稠液體難 以吹打的原因之一。所以我們可以用剪子把槍頭的尖口處剪掉,然后再去吸 取粘稠液體;2、我們可以在槍的第二個(gè)卡頓點(diǎn)處時(shí)吸液,在第一個(gè)卡頓點(diǎn)處吹出液體。這 樣做就可以彌補(bǔ)掛在槍頭處的部分液體:3、如果實(shí)驗(yàn)室有條件的話,可以使用外置活塞式移液器,也就是油槍,小編 也只是聽說過,并沒有見過。但是這種移液器不但可以準(zhǔn)確地吸出高粘度液 體,還可以移取容易起泡的液體,很牛逼的樣子??诩由倭康囊后w時(shí),總是有一點(diǎn)很難打出,怎么辦?有時(shí)候
7、在配制大體積液體,遇到這種情況,也就馬馬虎虎的糊弄過去了,但 是在做PCR實(shí)驗(yàn)加樣時(shí),本身每一步加的量就很少,再有一點(diǎn)殘存在槍頭 里,誤差就太大了。遇到這種情況,解決的方法如下:1、使用進(jìn)口槍頭(高品質(zhì)、超低吸附);2、你可能要檢查一下自己的移液器了,它的密封性可能出了問題;3、請(qǐng)你的老板買一個(gè)“油槍”給你。(3)吸取液體時(shí),總會(huì)有氣泡,怎么辦?這一點(diǎn)小編也很奇怪,吸取大體積的液體時(shí)很少遇到這種情況,但是吸取的 液體體積越小,越容易出現(xiàn)氣泡的情況,尤其是在PCR加樣時(shí),一般這種情 況的原因有很多,對(duì)癥下藥就好了:1、可能是你的槍頭和槍并沒有接觸嚴(yán)密;2、沒有將槍插到液面下面,所以你在吸取液體的時(shí)候自然而然就會(huì)吸進(jìn)去空 氣;3、加樣速度太快,沒有吸滿液體就把槍拿出來;4、SDS這類的表面活性劑很容易氣泡。(4)如果不小心把液體吸進(jìn)槍里,該怎么辦?這就是所謂的倒吸,是用槍的大忌。如果不小心吸進(jìn)去了液體,一定要及時(shí) 清理,不然會(huì)使槍體生銹、腐蝕影響精準(zhǔn)度、如果實(shí)驗(yàn)室里有用廢的槍,可 以那它練手,學(xué)著拆卸移液器,這樣出現(xiàn)問題的時(shí)候,可以自己修理。(5)常實(shí)驗(yàn)室中比較方便的自檢方法:1、可以分別檢測(cè)一把移液器的最大量程、50%
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