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1、實(shí)驗(yàn)四 血糖的測(cè)定-鄰甲苯胺法標(biāo)準(zhǔn)曲線法1實(shí) 驗(yàn) 目 的掌握鄰甲苯胺法測(cè)定血糖的原理和方法。掌握標(biāo)準(zhǔn)曲線法在定量分析中的應(yīng)用2實(shí) 驗(yàn) 原 理本實(shí)驗(yàn)采用臨床上常用的鄰甲苯胺法，利用葡萄糖在熱的醋酸溶液中脫水后與鄰甲苯胺縮合，生成青色的Schiff堿，對(duì)波長(zhǎng)630nm的光有特征吸收，可比色定量測(cè)定。由于鄰甲苯胺只與醛糖作用而顯色，故此種測(cè)定法不受血液中其他還原物質(zhì)的干擾，測(cè)定時(shí)也無(wú)需去除血漿或血清中的蛋白質(zhì)。3 原理反應(yīng)式4實(shí) 驗(yàn) 操 作一、標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備（標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋?zhuān)?取l0ml容量瓶5只，分別編號(hào)1，2，3，4，5，依次加入葡萄糖貯存標(biāo)準(zhǔn)液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0(ml)，再

2、以飽和苯甲酸溶液稀釋至l0ml刻度，混勻。上述溶液l00ml葡萄糖含量分別為50，100，200，300，400(mg)。5二、顯 色取7只試管，編號(hào)，按下表操作。混勻后，置沸水浴中煮沸15min，取出，在冰水浴中冷卻。鄰甲苯胺法測(cè)定血糖操作表6比色及結(jié)果以“0”號(hào)管為對(duì)照，用分光光度計(jì)在630nm處比色測(cè)定，以各管的吸光度為縱坐標(biāo)，相應(yīng)管中葡萄糖含量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)測(cè)定管吸光度，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線即查得含量。7附：標(biāo)準(zhǔn)樣品法定量測(cè)定 試劑 空白管 標(biāo)準(zhǔn)管 檢測(cè)管 蒸餾水 0.1ml _ _ 鄰甲苯胺 5ml 5ml 5ml 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品 _ 0.1ml _ 待檢血清 _ _ 0.1ml取3只試管，編號(hào)，按下表操作?；靹蚝?，置沸水浴中煮沸15min，取出，在冰水浴中冷卻。以空白號(hào)管為對(duì)照，用分光光度計(jì)在630n

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