農(nóng)產(chǎn)品實驗室能力驗證過程中的質(zhì)量控制(共23頁)

1、今年(jnnin)3月參加省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)檢中心組織的蔬菜中農(nóng)藥殘留定性定量檢測能力驗證(ynzhng)，并且順利通過，在這次能力驗證過程中，總結(jié)了幾點小秘訣，奉獻給大家。(第六屆原創(chuàng)有一定格式要求，本文雖按格式寫，考慮一些網(wǎng)友喜歡看圖片，所以在“3討論”部分加了圖片，算做兩者兼顧吧。)農(nóng)產(chǎn)品實驗室能力驗證過程(guchng)中的質(zhì)量控制摘要：通過能力驗證，提高實驗室檢測能力，確保日常檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可比性。對能力驗證過程進行有效的質(zhì)量控制，是通過能力驗證的必要條件。關(guān)鍵詞：蔬菜；農(nóng)藥殘留，能力驗證，質(zhì)量控制能力驗證是通過實驗室間的比對來確定實驗室檢測能力的活動，定期對實驗室開展能力驗證的室間比對

2、是計量認(rèn)證和國家實驗室認(rèn)可的特定要求，為進一步加強農(nóng)業(yè)系統(tǒng)質(zhì)檢機構(gòu)能力建設(shè)，全面提高農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測機構(gòu)技術(shù)水平和整體素質(zhì)，根據(jù)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測考核方法和農(nóng)業(yè)部產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗測試機構(gòu)管理辦法等有關(guān)規(guī)定，每年農(nóng)業(yè)部或省農(nóng)業(yè)廳都會對農(nóng)產(chǎn)品實驗室進行能力驗證。通過能力驗證，可使實驗室了解分析項目的整體水平和自己所處的位置，有利于找差距，進一步提高自身技術(shù)能力和管理水平?？捎糜谧R別實驗室存在的內(nèi)存問題，及時發(fā)現(xiàn)自身的不足并加以改進。2013年3月我們參加了省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)檢中心組織的蔬菜中農(nóng)藥殘留定性定量檢測能力驗證，現(xiàn)將測定結(jié)果報告如下。1材料與方法1.1檢測樣品本次能力驗證發(fā)放的樣品為已破碎蔬菜樣

3、品，由省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)檢中心統(tǒng)一加入農(nóng)藥標(biāo)液，對每個實驗室發(fā)放了三個蔬菜樣品，一個空白樣品，兩個平行樣品。每個樣品均25g。1.2儀器及試劑GC450氣相色譜儀（美國布魯克公司），PFPD、ECD檢測器，高速分散均質(zhì)機、氮吹儀、快速混勻器。乙腈（色譜純）、正已烷（色譜純）、丙酮（色譜純）、氯化鈉（分析純）。1.3檢測方法本次能力驗證活動為了能準(zhǔn)確了解參加實驗室農(nóng)產(chǎn)品檢測的實際能力狀況，對檢測方法作了統(tǒng)一要求，均采用蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留檢測方法（NY/T761-2008）1進行檢測。1.4檢測項目甲胺磷、氧樂果、甲拌磷、對硫磷、甲基對硫磷、甲基異柳磷、水胺硫磷

4、、樂果、敵敵畏、毒死蜱、乙酰甲胺磷、三唑磷、丙溴磷、殺螟硫磷、二嗪磷、馬拉硫磷、亞胺硫磷、伏殺硫磷、辛硫磷、氯氰菊酯、氰戊菊酯、甲氰菊酯、氯氟氰菊酯、氟氯氰菊酯、溴氰菊酯、聯(lián)苯菊酯、氟胺氰菊酯、氟氰戊菊酯、三唑酮、百菌清、異菌脲、六六六共32種農(nóng)藥。2結(jié)果2.1測定結(jié)果見表1所測樣品值均為滿意結(jié)果，通過了能力驗證。2.2農(nóng)藥標(biāo)液與盲樣樣品色譜圖所測樣品值均為滿意結(jié)果，通過(tnggu)了能力驗證。2.2農(nóng)藥標(biāo)液與盲樣樣品(yngpn)色譜圖圖113種有機氯農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)(biozhn)色譜圖3討論(toln)3.1儀器狀況(zhungkung)與條件氣相色譜儀的精密度、穩(wěn)定性、重現(xiàn)性都會影響到分析

5、結(jié)果的準(zhǔn)確性。選擇合適的氣流、柱溫、進樣口溫度、檢測器溫度、色譜柱等條件，才能使氣相色譜儀能夠(nnggu)得出更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。有機磷的檢測條件：色譜柱：VF-1701（30m0.25mm0.25um）；溫度：80保持1min，以20速度上升到130，再以5上升到200，再以15上升到250，保持11min。進樣體積：1uL；進樣品：250，不分流進樣；檢測器300；進樣口溫度：250；氮氣流速：30mL/min；柱流速：2mL/min；空氣流速：17mL/min；氫氣流速14mL/min。有機氯的檢測條件：色譜柱：VF-1ms（30m0.32mm0.25um）；溫度：80保持1min，以15速

6、度上升到280,保持10.33min。進樣體積：1uL；進樣品：250，不分流進樣；檢測器300；進樣口溫度：250，氮氣流速：30mL/min；柱流速：2mL/min。檢測結(jié)果必須在領(lǐng)樣后72小時內(nèi)完成檢測，在只有一臺氣相色譜儀的情況下，就需要時間上合理安排有機磷、有機氯的檢測，我們采用的方法，柱箱里安裝兩根色譜柱，將PFPD與ECD的檢測器、進樣口同時升溫，在使用PFPD做有機磷時，ECD檢測器一直在預(yù)熱烘烤，有利于ECD的穩(wěn)定，當(dāng)有機磷做完，轉(zhuǎn)入ECD做有機氯，可立即進樣，減少了更換色譜柱與檢測器后還需預(yù)熱的時間，檢測結(jié)果可在48小時內(nèi)完成，能夠更快更準(zhǔn)確的完成檢測任務(wù)。3.2容量器具及

7、試劑純度標(biāo)準(zhǔn)溶液配制及樣品制備過程中所使用的容量器具本身的準(zhǔn)確性，會直接影響到標(biāo)準(zhǔn)溶液及樣品溶液配制濃度的準(zhǔn)確性。要對能力驗證過程中使用的容量瓶、移液槍、大肚吸管、刻度吸管進行檢定或校準(zhǔn)，以確保移取和定容體積的準(zhǔn)確性。所用的試劑如乙腈、正已烷、丙酮要使用色譜純，保證試劑無雜質(zhì)；所使用的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，要注意它的有效性，最好是臨用時打開安剖瓶里的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)液進行配制，不要使用已打開時間過長的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，以防農(nóng)藥揮發(fā)，降低了濃度。先將安瓿瓶內(nèi)標(biāo)液100ug/mL稀釋成10ug/mL，將安瓿瓶內(nèi)的標(biāo)液倒入10mL容量瓶中，用丙酮清洗安瓿瓶，并定容到刻度，混勻后倒入棕色樣品瓶中。存放于冰箱。32種農(nóng)藥標(biāo)液都

8、是這樣配制，然后再配制有機磷的混標(biāo)與有機氯的混標(biāo)。3.3樣品前處理的注意事項3.3.1要注意平行樣品的相對偏差，在樣品的前處理中注意以下細節(jié)，可使兩個平行樣品的相對偏差小于10%：（1）是吸取或定容液體時要準(zhǔn)確，兩個平行樣品無差別；（2）是在淋洗弗羅里析柱時，弗羅里析柱要使用同一廠家的，不同廠家的弗羅里析柱流速不同，所用淋洗液5mL要準(zhǔn)確，這樣可使弗羅里析柱的淋洗條件一樣；（3）三是氮吹時，氣體流速快慢要盡量一致，使兩個平行樣氮吹濃縮條件一致；3.3.2檢測方法中還要注意添加回收率試驗，在拿到盲樣進行前處理時，可自選一蔬菜樣品進行加標(biāo)回收率試驗，蔬菜樣品盡量選擇與盲樣樣品基質(zhì)一致的物質(zhì)，以保證

9、比對試驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。3.4回收率按試驗方法對未有農(nóng)藥含量檢出的筍瓜樣品中進行加標(biāo)回收率試驗，測定結(jié)果見表2所收到的盲樣樣品，一共3個，一個空白樣品，兩個平行樣品，平行樣品是25g，空白樣品多于25g。將樣品轉(zhuǎn)移至廣口瓶中，加50mL乙腈，過濾到裝有7-8g氯化鈉的具塞量筒中。振蕩兩分鐘，靜置30min。吸取10mL到刻度離心管中。已經(jīng)吸好的提取液。秘訣一：在一根針上氮吹，這樣可保證氣流穩(wěn)定，平行樣品相對偏差較小。秘訣二：最后不要吹干，要留一滴在底部，兩個平行樣要吹得盡量一致，要瞪大眼睛看，一不留神就吹干了。將吹得近干的樣品加5mL丙酮定容，用一次性針管經(jīng)0.22um有機濾膜，倒入2mL樣品瓶

10、中，至此樣品中有機磷前處理完畢。用丙酮和1：9丙酮+正已烷淋洗弗羅里析柱。將氮吹過后的提取液加2mL正已烷，倒入弗羅里析柱，再用淋洗液淋洗，繼續(xù)氮吹，氮吹結(jié)果后，加5mL正已烷定容，倒入2mL樣品瓶上機測定。至此有機氯的前處理完成。秘訣三：加標(biāo)回收-當(dāng)上述前處理完成后，將空白與樣品上機測試，很快可檢測出所加的農(nóng)藥品種與含量，但數(shù)據(jù)是否準(zhǔn)確呢？用加標(biāo)回收這個法寶，盲樣中空白樣品是多于25g，那么將多余的樣品稱取兩個10g，加入所測出的農(nóng)藥品種與含量，再進行一遍前處理，上機測定，見表2回收率試驗結(jié)果。這樣做的好處有兩個，一是不用猜測盲樣是什么樣品，再去找樣品，與盲樣保持相同的基質(zhì)。二是不用做空白，

11、因為它給你的是空白，直接加標(biāo)就行了。當(dāng)你看到加標(biāo)回收試驗結(jié)果時，你就可以滿懷信心的報結(jié)果了。這三個秘訣可保你順利通過能力驗證，不信你試試。4小結(jié)實驗過程中的質(zhì)量控制關(guān)鍵在于以下幾點：一是要進行充分的前期準(zhǔn)備工作，對所用的容量器具進行校驗，使用色譜純試劑，并進行無雜質(zhì)峰出現(xiàn)試驗。二是要進行預(yù)實驗。氣相色譜儀要選擇最佳工作條件，使32種農(nóng)藥能良好分離，峰型尖銳。三是要進行加標(biāo)回收率試驗，根據(jù)回收結(jié)果，來控制測定結(jié)果的準(zhǔn)確性。只要真正做好以上幾點，就能對蔬菜農(nóng)藥殘留定性定量檢測過程進行有效控制，順利通過能力驗證。題外：有網(wǎng)友問為何不加內(nèi)標(biāo)？我查了資料摘自化驗員讀本下冊第十六章氣相色譜法第六節(jié)定性及定

12、量分析方法(四)內(nèi)標(biāo)法(五)外標(biāo)法P346頁：內(nèi)標(biāo)法：把一定量的純物質(zhì)作內(nèi)標(biāo)物，加入到已知質(zhì)量的樣品中，然后進行色譜分析，測定內(nèi)標(biāo)物和樣品中幾個組分的峰面積。引入相對質(zhì)量校正因子，就可計算樣品中待測組分的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)。外標(biāo)法：選擇樣品中的一個組分作為外標(biāo)物，用外標(biāo)物配成濃度與樣品相當(dāng)?shù)耐鈽?biāo)混合物，進行色譜分析，求出與單位峰面積(或峰高)對應(yīng)的外標(biāo)物的質(zhì)量(或體積)百分?jǐn)?shù)(常稱K值)。然后在相同條件下對樣品進行色譜分析，由樣品中待測物的峰面積和待測組分對外標(biāo)物的相對質(zhì)量(摩爾)校正因子，就可求出待測組分的質(zhì)量(體積)百分?jǐn)?shù)。按書上的規(guī)定，我做的加標(biāo)回收就應(yīng)該是內(nèi)標(biāo)法，不知網(wǎng)友同意嗎？參考文獻：1中華人民共和國農(nóng)業(yè)部發(fā)布，NY/T761-2008蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多種殘留的測定.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2008：1-252GC450型氣相色譜儀操作說明書，美商亞洲瓦瑞安科技股份有限公司臺灣分公司2013/8/14 17:47:45 Last edit by