FASCAria日常保養(yǎng)與維護(hù)教程文件

1、Good is good, but better carries it.精益求精，善益求善。FASCAria日常保養(yǎng)與維護(hù)-關(guān)于FACSAria流式細(xì)胞儀的使用與保養(yǎng)知識FACSAria是B-D公司2003年最新推出的世界上第一臺臺式高速多熒光檢測和分選的流式細(xì)胞儀，結(jié)合目前用戶的使用情況，在這里提供有關(guān)FACSAria使用保養(yǎng)和維護(hù)的小知識，以確保儀器能夠良好地運行。儀器的運行環(huán)境流式細(xì)胞儀屬于一種高精密度的儀器，環(huán)境是決定儀器運行狀態(tài)好壞的重要因素之一。有的用戶將儀器放置在一個很小的空間內(nèi)，儀器在運行過程中將產(chǎn)生熱量，由于空間過小，將會影響散熱，造成儀器內(nèi)部過熱。輕者，會影響電子元件和集成

2、電子線路的工作環(huán)境，使它們偏離工作區(qū)；嚴(yán)重者，部分電子元件本身工作中產(chǎn)生的熱量無法排出，最后使該元件燒壞。有些用戶給出的空間足夠大，但是防塵做的不好。桌子和儀器上到處可見灰塵。流式細(xì)胞儀屬于精密的光學(xué)儀器，如果灰塵附著在它的光學(xué)部件上，對儀器的檢測靈敏度和分辨率會造成很大的影響。因此，儀器放置的位置應(yīng)離窗戶稍遠(yuǎn)些，放置儀器的房間與走道之間最好有一個緩沖帶。盡量少開或不開窗戶，要勤清潔儀器周圍的灰塵，養(yǎng)成良好的習(xí)慣，確保儀器一直工作在良好的狀態(tài)中。儀器的開機和關(guān)機開機前，先掀起流動室和分選室的罩蓋，開啟電源，開計算機，等計算機進(jìn)入WINDOWS后，開啟激光電源，運行B-DFACSDiVA軟件，檢

3、查廢液、鞘液、雙蒸水、酒精及清洗液的提示器是否有報警（見下圖），如果有，應(yīng)倒掉廢液或灌滿所提示桶內(nèi)的液體，然SKIPIF10后執(zhí)行BDFACSDiVa儀器菜單中的“FluidicsStartup”,該命令的功能是清除儀器管道內(nèi)的所有液體，換成鞘液桶內(nèi)液體。從BDFACSDiVa分選（Sort）菜單，進(jìn)入分選模式（SortSetup），選擇所需要的分選速度（High、Medium和Low），點擊液流顯示窗上的開液流開關(guān)，檢查液流是否正好流入廢液槽中間，否則，調(diào)整廢液槽的位置。同時，觀察液流是否是一條線，如果不是，要將噴嘴取下重裝。在日常關(guān)機前，必須先將激光器關(guān)掉，因為激光長時間照射在沒有液流流動

4、的流動室石英杯壁上，會影響它的光學(xué)特性，降低其透光率。選擇“FluidicsShutdown”命令，該命令的功能是清空管道內(nèi)鞘液，用雙蒸水代替，清洗進(jìn)樣管整個關(guān)機過程約3分鐘。該命令執(zhí)行完成后，請檢查噴嘴下面是否有水滴，如果有，取下噴嘴，擦干周圍的水；檢查高壓分選板上是否有水珠，如果有，要用棉簽或餐巾紙擦干。分析和分選的使用步驟當(dāng)只進(jìn)行常規(guī)的分析實驗而不做分選時，建議客戶不要使用PBS作為鞘液，而采用雙蒸水作為鞘液，因為液流的流速非?？?，與細(xì)胞接觸的時間非常之短,所以，尚未等細(xì)胞生物特性發(fā)生改變,細(xì)胞已經(jīng)通過檢測區(qū)，不會對檢測結(jié)果造成任何影響。同時，建議客戶在做分析的實驗時，請選擇低（Low）

5、的鞘液壓力，這樣可以有效延長噴嘴的壽命。在進(jìn)行分選實驗時，首先應(yīng)根據(jù)噴嘴的大小選擇鞘液壓力，High和Medium用于70um口徑的噴嘴，Low用于100um口徑的噴嘴，請從分選菜單（Sort）進(jìn)入分選模式設(shè)置(SortSetup)選擇鞘液壓力的大小，不要從儀器菜單（Instrument）進(jìn)入鞘液壓力（SheathPressure）選擇，通過前者選擇，儀器的一些參數(shù)（如：震動頻率，延遲時間等）會自動的根據(jù)你的選擇而改變。如果被分選的細(xì)胞要進(jìn)行無菌培養(yǎng)時，需對儀器的內(nèi)部管道進(jìn)行消毒，具體的消毒方法如下：準(zhǔn)備好70%的酒精、消毒過的雙蒸水和PBS鞘液，分別裝入各個標(biāo)記的桶內(nèi)，按正常程序開機，從儀器

6、菜單（Instrument）進(jìn)入清潔模式（CleaningModes）,選擇無菌分選準(zhǔn)備（PrepareforAsepticSort）,運行2分鐘（勿超過2分鐘），取一支裝有3ml消毒過的雙蒸水樣品管，放在進(jìn)樣托架上。進(jìn)入清潔模式（CleaningModes）,選擇清洗流動室（CleanFlowcell）,然后再運行FluidicsStartup命令，一旦啟動結(jié)束，再選擇無菌分選準(zhǔn)備。重復(fù)以上的步驟，便可進(jìn)行樣本分選（重復(fù)次數(shù)應(yīng)視儀器具體情況而定）。SKIPIF1CleaningModesCleanFlowCell。根據(jù)提示，手動在上樣架上放一支裝約3ml有效氯濃度0.5%漂白液的試管，然后點

7、擊“OK”。清洗完成后，清洗液留在進(jìn)樣管和流動室內(nèi)，所以需執(zhí)行“開啟液路”或“關(guān)機”命令清洗流動室，清除殘留的清洗液。添加液體后排除氣泡（PrimeAfterTankRefill）：一般情況下不用執(zhí)行該命令。但是，當(dāng)發(fā)現(xiàn)添加完液體后，管道內(nèi)有空氣或氣泡產(chǎn)生，且桶內(nèi)的液體受到氣泡的阻力不流動時，或者在開機狀態(tài)添加液體過程中液體管路與液流車斷開，請選擇InstrumentCleaningModesPrimeafterTankRefill，在如下命令窗口中相應(yīng)方形容器的位置上選勾。見下圖：SKIPIF1CleaningModesLongClean。它有3種可供選擇的清洗方式（漂水、蒸餾水和乙醇），提請客戶