菊花的組織培養(yǎng) (3)ppt課件

1、課題1 菊花的組織培育組織培育是指在人工培育基上，離體培育植物的器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體，并使其生長、增殖、分化以及再生植株的技術(shù)。 一、根底知識1、植物的組織培育1細(xì)胞的分化概念：在個體發(fā)育中，一樣細(xì)胞的后代在形狀、構(gòu)造、生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差別的過程 .過程：如：受精卵增殖、生長、分化構(gòu)成組織、器官、系統(tǒng).點此播放教學(xué)視頻 特點：B.穩(wěn)定性：C.全能性：A.耐久性：是一種耐久性的變化，它發(fā)生在生物體的整個生命過程中,在胚胎期到達(dá)最大限制.細(xì)胞分化是穩(wěn)定的，普通是不可逆轉(zhuǎn)的.已分化的細(xì)胞，仍具有發(fā)育的潛能.點此播放教學(xué)視頻 緣由：基因在特定的時間和空間條件下的選擇性表達(dá)的結(jié)果.結(jié)果：構(gòu)成不

2、同的細(xì)胞和組織2細(xì)胞的全能性定義： 生物體的細(xì)胞具有使后代細(xì)胞構(gòu)成完好個體的潛能的特性.原理： 生物體的每一個細(xì)胞都包含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成為完好個體所必需的全部基因.點此播放教學(xué)視頻 高度特化的動物細(xì)胞，從整個細(xì)胞來說，全能性遭到限制。但它的細(xì)胞核依然堅持著全能性，這是由于細(xì)胞核內(nèi)含有該物種遺傳性所需求的遺傳物質(zhì).已分化的植物細(xì)胞，仍具有全能性.實例受精卵生殖細(xì)胞體細(xì)胞全能性的比較:點此播放教學(xué)視頻 點此播放教學(xué)視頻 3植物組織培育細(xì)胞離體必要條件：一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件原理:細(xì)胞的全能性A.外植體：從活植物體上切下進(jìn)展培育的那部分細(xì)胞、組織或器官.相關(guān)概念:

3、點此播放教學(xué)視頻 B.脫分化：由高度分化的植物器官、組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程，又稱去分化。C.再分化：脫分化產(chǎn)生的愈傷組織在培育過程中重新分化根或芽等器官的過程D.愈傷組織:細(xì)胞陳列疏松而無規(guī)那么,是高度液泡化的、成無定外形狀的薄壁細(xì)胞.點此播放教學(xué)視頻 人參的愈傷組織菠蘿的愈傷組織點此播放教學(xué)視頻 點此播放教學(xué)視頻 2、影響植物組織培育的要素1植物資料的選擇煙草和胡蘿卜的組織培育較為容易枸杞愈傷組織的芽誘導(dǎo)比較難同一植物資料的年齡、保管時間的長短會影響實驗結(jié)果菊花的組織培育普通選擇未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝點此播放教學(xué)視頻 點此播放教學(xué)視頻 2離體的植物組織和細(xì)胞對營養(yǎng)、環(huán)境等條件的

4、要求相對特殊，需配置不同的培育基MS培育基主要成分包括：A、大量元素: N、P、 S 、 K、Ca、Mg等B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、 Co等C、有機(jī)物、植物激素點此播放教學(xué)視頻 MS固體培育基成分及比例討論：他能說出各種營養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎？同專題2中微生物培育基的配方相比，MS培育基的配方有哪些明顯的不同？答：微量元素和大量元素提供植物細(xì)胞生活所必需的無機(jī)鹽；蔗糖提供碳源，同時可以維持培育基的浸透壓；甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑遭到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營養(yǎng)需求。微生物培育基以有機(jī)營養(yǎng)為主。與微生物的培育不同，MS培育基那么需提供大量無機(jī)

5、營養(yǎng)，無機(jī)鹽混合物包括植物生長必需的大量元素和微量元素兩大類。 點此播放教學(xué)視頻 常用的植物激素：生長素、細(xì)胞分裂素和赤霉素生長素類：2，4二氯苯氧乙酸2，4D、吲哚乙酸IAA、萘乙酸NAA、吲哚丁酸IBA細(xì)胞分裂素類：激動素KT、6芐基嘌呤 6BA、玉米素ZT赤霉素類：赤霉酸GA33植物激素的影響點此播放教學(xué)視頻 生長素和細(xì)胞分裂素作用植物中生長素和細(xì)胞分裂素是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。在生長素存在的情況下，細(xì)胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強的趨勢使用順序?qū)嶒灲Y(jié)果先使用生長素，后使用細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂，但不利分化先使用細(xì)胞分裂素后使用生長素細(xì)胞既分裂也分化同時使用分化頻率高生長素

6、細(xì)胞分裂素：有利于根的分化生長素細(xì)胞分裂素：生長素細(xì)胞分裂素生長素再分化植物細(xì)胞培育不需求光?需求光點此播放教學(xué)視頻 植物組織培育的過程離體的植物組織或細(xì)胞愈傷組織根和芽完好的植物體脫分化再分化點此播放教學(xué)視頻 (1)、培育無病毒植株(2)、 培育紫草愈傷組織,提取紫草素治療燙傷和割傷的藥物以及染料和化裝品的原料(4)、基因工程中亦需用到植物組織培育的方法4、植物組織培育的運用： (3)、誘導(dǎo)離體的植物組織構(gòu)成具有生根發(fā)芽才干的胚狀構(gòu)造，包裹上人造種皮，制成人工種子，可以處理有些作物種類繁衍才干差，結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問題.點此播放教學(xué)視頻 人工種子點此播放教學(xué)視頻 同常規(guī)的無性繁衍方法相比，

7、組織培育快速繁衍法主要具有以下優(yōu)點：1快速。采用常規(guī)的方法如分株法，一棵花卉一年普通只能消費幾株或幾十株，但用組織培育的方法那么每年可以繁衍出幾萬甚至數(shù)百萬的小植株。2周年消費?；ɑ芙M織培育快速繁衍是在實驗室中進(jìn)展，因條件可控，所以不受季節(jié)限制，可以全年進(jìn)展延續(xù)消費。而常規(guī)的無性繁衍那么受季節(jié)限制，只能在花卉生長季節(jié)進(jìn)展繁衍。3經(jīng)濟(jì)效益高?；ɑ芙M織培育快速繁衍所需求的空間小，在一個200平方米的培育室內(nèi)一年可消費試管苗上百萬株。如按每株1元計算，每年產(chǎn)值上百萬元。4以組織培育繁衍的種苗與母株有著一樣的遺傳基因。所以運用這項技術(shù)可讓優(yōu)良的種類不斷地延續(xù)。組織培育與常規(guī)繁衍相比優(yōu)點眾多點此播放教學(xué)

8、視頻 二、實驗操作一制備MS固體培育基MS培育基包括20多種營養(yǎng)成分，實驗室普通運用4。C保管配制好的培育基母液來制備.1、配置各種母液點此播放教學(xué)視頻 無機(jī)物中大量元素濃縮10倍，微量元素濃縮100倍，常溫保管.激素類、維生素類以及用量較小的有機(jī)物普通可按1mg/ml的質(zhì)量濃度單獨配制成母液.用母液配制培育基時，需求根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù)，計算用量.點此播放教學(xué)視頻 2、配置培育基分裝到錐形瓶中，每瓶分裝50ml或100ml. 配制培育液 調(diào)PH培育基的分裝 由于菊花的莖段的組織培育比較容易，因此不用添加植物激素.點此播放教學(xué)視頻 3、滅菌分裝好的培育基連同其他器械一同進(jìn)展高壓蒸汽滅菌.1、

9、選材：菊花莖段，取生長旺盛的嫩枝.二外植體消毒2、消毒流水沖洗菊花莖段用流水沖洗后可少許洗衣粉，用軟刷悄然刷洗，刷洗后在流水下沖洗20min左右.點此播放教學(xué)視頻 酒精處置用無菌吸水紙吸干外植體外表的水分，放入體積分?jǐn)?shù)為70的酒精中搖動23次，繼續(xù)67s，立刻將外植體取出，在無菌水中清洗. 消毒液處置取出后用無菌吸水紙吸干外植體外表的水分，放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1的氯化汞溶液中12min，取出后在無菌水中至少清洗3次，漂凈消毒液.點此播放教學(xué)視頻 三接種污染的主要來源是空氣中的細(xì)菌和孢子，接種室消毒是至關(guān)重要的。用70的酒精噴霧使空氣消毒， 酒精或新潔爾滅搽洗任務(wù)臺并用紫外線照射20分鐘1、接種室

10、消毒2、無菌操作要求操作要在酒精燈火焰旁完成，每次運用器械后，都需求用火焰灼燒滅菌，接種后立刻蓋好瓶蓋。3、資料的切取和接種點此播放教學(xué)視頻 點此播放教學(xué)視頻 4、接種本卷須知每接種一塊外植體前，鑷子需放入體積分?jǐn)?shù)為75的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精燈火焰上燒一遍，冷卻后再接種.外植體在培育基中要分布均勻，放置外植體數(shù)量根據(jù)錐形瓶的大小確定，普通胡蘿卜34塊，菊的莖或葉68塊，也不要太少，以充分利用培育基中的營養(yǎng)成分和光照條件.插入時應(yīng)留意方向，不要倒插。莖段、莖尖基部插入培育基利于吸收水分和營養(yǎng).點此播放教學(xué)視頻 思索：他計劃做幾組反復(fù)？他計劃設(shè)置對照實驗嗎？答：每種資料或配方至少要做一組

11、以上的反復(fù)。設(shè)置對照實驗可以取用一個經(jīng)過滅菌的裝有培育基的錐形瓶，與接種操作后的錐形瓶一同培育，用以闡明培育基制造合格，沒有被雜菌污染。點此播放教學(xué)視頻 四培育1、愈傷組織的培育從接種外植體到出現(xiàn)愈傷組織需經(jīng)過2周時間。2周之內(nèi)可以看到外植體上逐漸長出乳白色或黃白色的瘤狀愈傷組織。初次培育愈傷組織時，恒溫箱的門應(yīng)該封鎖不用見光，由于在無光條件下愈傷組織長的更快。2周后，培育基成分接近耗盡，必需改換培育基，進(jìn)展繼代培育.點此播放教學(xué)視頻 繼代培育所用的培育基與培育愈傷組織的一樣，在嚴(yán)厲的無菌條件下，將愈傷組織連同原來的外植體一同移到新培育基上。愈傷組織的繼代培育一代為20d。假設(shè)延伸時間，培育基

12、中營養(yǎng)物質(zhì)減少，外植領(lǐng)會分泌有毒物質(zhì)，呵斥本身中毒。假設(shè)愈傷組織長到直徑為11.5cm時，就可以進(jìn)展試管苗培育，否那么還需進(jìn)展第二代繼代培育.2、愈傷組織的繼代培育在愈傷組織繼代培育期間，將恒溫箱的門翻開，讓愈傷組織見光，愈傷組織見光后顏色可以轉(zhuǎn)為綠色.點此播放教學(xué)視頻 3、試管苗的培育當(dāng)愈傷組織長到一定大小后，可以改換培育基，進(jìn)展試管苗的見光培育.五移栽移栽生根的菊花試管苗之前，應(yīng)先翻開培育瓶的封口膜，讓試管苗在培育間生長幾日.1、翻開封口膜2、清洗轉(zhuǎn)移用流水清洗根部的培育基，將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境下生活一段時間.點此播放教學(xué)視頻 六栽培3、移栽珍珠巖：固體基質(zhì)型，含水量高、

13、蓄水性強、透性好，適宜栽培.幼苗長壯后，移栽到土壤中.幼苗移栽后，每天察看并記錄幼苗的生長情況，適時澆水、施肥，直至開花.點此播放教學(xué)視頻 點此播放教學(xué)視頻 三、課題延伸1、普通來說，容易進(jìn)展無性繁衍的植物，也容易進(jìn)展組織培育.2、實例：蘆薈、豆瓣綠、秋海棠、月季.點此播放教學(xué)視頻 本課題內(nèi)容小結(jié)菊花組織培育根底知識實驗操作植物體的組織培育影響組織培育的要素細(xì)胞分化細(xì)胞全能性組織培育過程營養(yǎng)激素環(huán)境條件MS固體培育基制備外植體消毒接種培育移栽栽培點此播放教學(xué)視頻 作業(yè)：P361、在植物組織培育過程中，為什么要進(jìn)展一系列的消毒、滅菌，并且要求無菌操作。2、在選取菊花莖段是，為什么要選取生長旺盛的

14、嫩枝？外植體的生理形狀是勝利進(jìn)展組織培育的重要條件之一。生長旺盛的嫩枝生理情況好，容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。植物組織培育所利用的植物資料體積小、抗性差，對培育條件的要求較高。用于植物組織培育的培育基同樣適宜于某些微生物的生長，如一些細(xì)菌、真菌等的生長。而培育物一旦遭到微生物的污染，就會導(dǎo)致實驗前功盡棄，因此要進(jìn)展嚴(yán)厲的無菌操作。點此播放教學(xué)視頻 21.以下圖是植物組織培育的簡單表示。據(jù)此回答：練習(xí)1、以下圖是植物組織培育的簡單表示。據(jù)此回答：1表示_，它能被培育成為的根本緣由是_。2表示_，它與相比分化程度_，全能性_.3假想象制成人工種子，應(yīng)選用_。4假設(shè)是花藥，那么是_，繼續(xù)對其運用_處置可獲得_正常植株，該過程稱為_。5假設(shè)是胡蘿卜根尖細(xì)胞，那么培育成的葉片的顏色為_，這闡明_。6假設(shè)利用此項技術(shù)制造治療燙傷、割傷的藥物紫草素，培育將進(jìn)展到_。脫分化再分化答案：1離體的植物組織或器官 植物細(xì)胞具有全能性 2愈傷組織 低 高 3 4單倍體植株 秋水仙素 純合體 單倍體育種 5綠色 含有表達(dá)葉綠體的基因 6練習(xí)2、 基因型為AaBb的水稻含24條染色體的花藥經(jīng)過無菌操作接入試管后，在一定條件下構(gòu)成試管苗，問：1愈傷組織是花粉