臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)：第6章 血漿蛋白質(zhì)與含氮化合物的生物化學(xué)檢驗(yàn)

1、第六章血漿蛋白質(zhì)與含氮化合物的生物化學(xué)檢驗(yàn) 目錄第一節(jié) 血漿蛋白質(zhì)的生物化學(xué)檢驗(yàn) 第二節(jié) 氨基酸代謝紊亂的生物化學(xué)檢驗(yàn) 第三節(jié) 嘌呤核苷酸代謝紊亂的生物化學(xué)檢驗(yàn) 目錄重點(diǎn)提示1.熟悉血漿蛋白質(zhì)的功能和分類2.熟悉各電泳區(qū)帶的主要蛋白質(zhì)以及典型的異常圖譜3.掌握急性時(shí)相反應(yīng)蛋白的概念和時(shí)相變化4.掌握血清TP、Alb的臨床意義、常規(guī)方法原理和方法學(xué)評價(jià)5.熟悉血清PA、AAT、Cp、Hp、Tf、CRP的檢測依據(jù)和臨床意義重點(diǎn)提示重點(diǎn)提示6.了解血清特定蛋白質(zhì)測定方法、方法學(xué)評價(jià)及其校準(zhǔn)品7.熟悉遺傳性氨基酸代謝紊亂，苯丙酮酸尿癥 8.了解體液氨基酸過篩試驗(yàn)和定量檢測方法9.掌握高尿酸血癥的發(fā)生機(jī)

2、制，尿酸檢測原理和方法學(xué)評價(jià)重點(diǎn)提示第一節(jié) 血漿蛋白質(zhì)的生物化學(xué)檢驗(yàn) （一）血漿蛋白質(zhì)的功能和分類 （二）重要的血漿蛋白質(zhì)和血清蛋白質(zhì)電泳 （三）急性時(shí)相反應(yīng)蛋白 一、概述 概述 （一）血漿蛋白質(zhì)的功能和分類 1.直接在血液中發(fā)揮生理作用在血漿中維持血漿膠體滲透壓運(yùn)載弱水溶性的物質(zhì)組成血液pH緩沖系統(tǒng)參與凝血與纖維蛋白溶解一些血漿酶在血漿中起催化作用如卵磷脂膽固醇?；D(zhuǎn)移酶、假性膽堿酯酶等 一、概述 （一）血漿蛋白質(zhì)的功能和分類 2.在需要時(shí)進(jìn)入組織中發(fā)揮作用對組織蛋白起修補(bǔ)作用的營養(yǎng)蛋白如白蛋白和前白蛋白組成體液免疫防御系統(tǒng)的免疫球蛋白和補(bǔ)體抑制組織蛋白酶的蛋白酶抑制物如1-抗胰蛋白酶等參與

3、代謝調(diào)控作用的蛋白質(zhì)和肽類激素一、概述 （二）重要的血漿蛋白質(zhì)和血清蛋白質(zhì)電泳包括載體蛋白、蛋白酶抑制物、抗體、補(bǔ)體和凝血成分等含量最多的十二種蛋白質(zhì)總和占總量的95%以上白蛋白超過總量的50% 電泳可將血漿/血清蛋白質(zhì)分為56個(gè)組分，從快到慢為白蛋白、1-球蛋白、2-球蛋白、1-球蛋白、2-球蛋白和-球蛋白 一、概述 （二）重要的血漿蛋白質(zhì)和血清蛋白質(zhì)電泳前白蛋白 甲狀腺素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 0.20.4g/L 視黃醇結(jié)合蛋白 白蛋白 白蛋白 35551-球蛋白1-抗胰蛋白酶 0.92.0 1-酸性糖蛋白 0.51.5 甲胎蛋白 310-5 高密度脂蛋白 1.73.252-球蛋白 結(jié)合珠蛋白 0.32

4、.0 2-巨球蛋白 1.254.1 銅藍(lán)蛋白 0.20.51-球蛋白 轉(zhuǎn)鐵蛋白 2.03.5 低密度脂蛋白 0.61.55 C4 0.10.42-球蛋白 2-微球蛋白 0.0010.002 纖維蛋白原 2.04.0 C3 0.71.5 -球蛋白 IgA 0.74.0 IgG 7.016 IgM 0.42.3 C-反應(yīng)蛋白 0.008 重要的血漿蛋白質(zhì)及其電泳（二）重要的血漿蛋白質(zhì)和血清蛋白質(zhì)電泳圖譜類型TPAlb12低蛋白血癥型NNN腎病型NN肝硬化型NNN-（融合）彌漫性肝損害型NM蛋白血癥型在 - 區(qū) 帶 中 出 現(xiàn) M 蛋 白 區(qū)帶慢性炎癥型急性時(shí)相反應(yīng)型NNN高2()-球蛋白血癥型妊娠

5、型NN蛋白質(zhì)缺陷型個(gè) 別 區(qū) 帶 出 現(xiàn) 特 征 性 缺 乏血清蛋白電泳異常圖譜類型1.腎病型 Alb下降，2顯著升高 明顯升高，不變或相對下降2. 肝硬化型 Alb下降，明顯升高 典型者和區(qū)帶融合，見-橋（二）重要的血漿蛋白質(zhì)和血清蛋白質(zhì)電泳血清蛋白電泳典型異常圖譜（二）重要的血漿蛋白質(zhì)和血清蛋白質(zhì)電泳正常電泳圖譜 腎病綜合征 肝硬化血清蛋白電泳典型異常圖譜3.免疫球蛋白增多 （1）單克隆免疫球蛋白增多或間色澤深染的窄區(qū)帶,單克隆免疫球蛋白或其輕鏈或重鏈片段，稱M蛋白（monoclonal protein），見于漿細(xì)胞病（2）多克隆免疫球蛋白增多為各種合成Ig細(xì)胞的全面增殖區(qū)帶呈彌散性升高見

6、于慢性肝病.肝硬化.結(jié)締組織病.慢性感染.惡性腫瘤.獲得性免疫缺陷綜合征.淋巴母細(xì)胞性淋巴結(jié)?。ǘ┲匾难獫{蛋白質(zhì)和血清蛋白質(zhì)電泳血清蛋白電泳典型異常圖譜（二）重要的血漿蛋白質(zhì)和血清蛋白質(zhì)電泳M蛋白血癥血清蛋白電泳典型異常圖譜（三）急性時(shí)相反應(yīng)蛋白（acute phase protein，acute phase reactants, APRs） 急性的全身或系統(tǒng)性炎癥包括感染、組織損傷、炎癥性疾病等情況下，肝臟對多種血漿蛋白質(zhì)合成量發(fā)生變化，血漿中1-抗胰蛋白酶、1-酸性糖蛋白、結(jié)合珠蛋白、銅藍(lán)蛋白、C4、C3、纖維蛋白原等濃度增加數(shù)倍，C-反應(yīng)蛋白、降鈣素原和血清淀粉樣蛋白A則顯著增加，可

7、升至原濃度的1000倍，而血漿前白蛋白、白蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白等濃度則出現(xiàn)相應(yīng)下降，這些變化的血漿蛋白質(zhì)統(tǒng)稱APRs 16一、概述 （一）血清總蛋白（二）血清白蛋白（三）血清前白蛋白（四）血清1-酸性糖蛋白（五）1-抗胰蛋白酶（六）2巨球蛋白二、血漿蛋白質(zhì)的生物化學(xué)檢驗(yàn)項(xiàng)目與檢測方法 血漿蛋白質(zhì)的生物化學(xué)檢驗(yàn)項(xiàng)目與檢測方法 （七）銅藍(lán)蛋白（八）結(jié)合珠蛋白（九）轉(zhuǎn)鐵蛋白（十）2-微球蛋白（十一）C-反應(yīng)蛋白（十二）血清特定蛋白質(zhì)的檢測方法18二、血漿蛋白質(zhì)的生化檢驗(yàn)項(xiàng)目與檢測方法 血漿蛋白質(zhì)的生化檢驗(yàn)項(xiàng)目與檢測方法 （一）血清總蛋白（total protein，TP）1.檢驗(yàn)項(xiàng)目項(xiàng)目檢測依據(jù)血漿所有蛋

8、白質(zhì)含量的總體反映臨床意義血清TP濃度下降 常見于血清Alb含量下降，少數(shù)由Ig含量的明顯下降引起血清TP濃度增高 主要見于慢性炎癥等所致的多克隆免疫球蛋白增多、漿細(xì)胞病時(shí)單克隆免疫球蛋白的顯著增多（一）血清總蛋白（total protein，TP）1.檢驗(yàn)項(xiàng)目應(yīng)用評價(jià)是最常檢驗(yàn)的生化指標(biāo)之一與血清白蛋白同時(shí)檢測，能計(jì)算球蛋白濃度（一）血清總蛋白（total protein，TP）2.檢測方法 檢測原理雙縮脲法（biurea method） 蛋白質(zhì)中的兩個(gè)相鄰肽鍵（-CO-NH-）在堿性溶液中能與二價(jià)銅離子（Cu2+）作用產(chǎn)生穩(wěn)定的紫紅色絡(luò)和物。此反應(yīng)與雙縮脲（H2N-OC-NH-CO-NH2

9、，為兩個(gè)尿素分子縮合后生成）在堿性溶液中與Cu2+作用形成紫紅色的反應(yīng)相似，故稱為雙縮脲法（一）血清總蛋白（total protein，TP） 2.檢測方法 檢測原理凱氏定氮法測定樣品中的含氮量，推算出樣品中蛋白質(zhì)染料結(jié)合法 在酸性環(huán)境下，蛋白質(zhì)帶正電荷，與染料陰離子反應(yīng)而產(chǎn)生顏色改變鄰苯三酚紅鉬（pyrogallol red molybdate，PRM）法在酸性介質(zhì)中，復(fù)合物最大吸收峰轉(zhuǎn)移至594nm比濁法 某些酸如三氯乙酸、磺基水楊酸等能與蛋白質(zhì)結(jié)合而產(chǎn)生微細(xì)沉淀（一）血清總蛋白（total protein，TP） 2.檢測方法 檢測原理酚試劑法 蛋白質(zhì)中酪氨酸和色氨酸使磷鎢酸和磷鉬酸還原

10、為鎢藍(lán)和鉬藍(lán)直接紫外吸收法 根據(jù)蛋白質(zhì)分子中芳香族氨基酸在280nm處的紫外吸收值（一）血清總蛋白（total protein，TP）2.檢測方法 方法學(xué)評價(jià)雙縮脲法對蛋白質(zhì)特異性很高，含兩個(gè)-CONH-才能與Cu2+絡(luò)合呈色強(qiáng)度與肽鍵數(shù)量即蛋白質(zhì)含量成正比，各種蛋白質(zhì)呈色強(qiáng)度基本相同，為目前所有TP測定方法中最好（一）血清總蛋白（total protein，TP）2.檢測方法 方法學(xué)評價(jià)雙縮脲法該法線性范圍為10120g/L，靈敏度不高，但很適合血清TP濃度測定該法測定胸腹水TP的檢測低限為0.47g/L，生物檢測限為1.33g/L，因此能采用該法測定。對蛋白質(zhì)濃度很低的腦脊液和尿液，則該法

11、不是合適的定量方法（一）血清總蛋白（total protein，TP）2.檢測方法 方法學(xué)評價(jià)凱氏定氮法 是測定許多生物樣品中蛋白質(zhì)含量的參考方法。操作復(fù)雜、費(fèi)時(shí)，不適合臨床常規(guī)測定染料結(jié)合法 PRM法靈敏度高，線性下限約為1020mg/L，上限為2g/L，適合于尿液和腦脊液比濁法 操作簡便、靈敏度高，適合尿液、腦脊液等TP。需手工測定，影響濁度大小的因素較多（一）血清總蛋白（total protein，TP）2.檢測方法 方法學(xué)評價(jià)酚試劑法 靈敏度較高，但各蛋白質(zhì)酪氨酸和色氨酸含量不同，只適合較單一蛋白如組織中某一蛋白質(zhì)抽提物直接紫外吸收法 不適合血清、尿液等組成復(fù)雜的體液蛋白質(zhì)測定，常用于

12、較純的酶、免疫球蛋白等測定（二）血清白蛋白（albumin，Alb） 1.檢驗(yàn)項(xiàng)目項(xiàng)目檢測依據(jù)分子量66.3kD，半壽期約1820天是最重要的血漿營養(yǎng)蛋白是重要的血漿載體蛋白，為負(fù)離子，每分子帶有200個(gè)以上負(fù)電荷，能運(yùn)載許多疏水分子維持血漿膠體滲透壓的最重要成分是兩性電解質(zhì)，具有緩沖酸堿物質(zhì)的能力 （二）血清白蛋白（albumin，Alb） 1.檢驗(yàn)項(xiàng)目臨床意義低Alb血癥肝功能下降 慢性肝病以及重癥肝炎早期等白蛋白丟失尿中丟失胃腸道丟失皮膚丟失白蛋白分解代謝增加（二）血清白蛋白（albumin，Alb） 1.檢驗(yàn)項(xiàng)目臨床意義白蛋白的分布異常無白蛋白血癥蛋白質(zhì)營養(yǎng)不良或吸收不良應(yīng)用評價(jià)檢測頻

13、度非常高的指標(biāo)輔助肝臟疾病的診斷和病情判斷為其他目的的肝功能評估 （二）血清白蛋白（albumin，Alb） 2.檢測方法檢測原理溴甲酚綠（bromcresol green ，BCG）法 陰離子染料BCG能與Alb結(jié)合，產(chǎn)物為藍(lán)綠色復(fù)合物，最大吸收峰在630nm波長，其吸光度與Alb濃度成正比。球蛋白與BCG僅有弱結(jié)合溴甲酚紫（bromcresol purple，BCP）法 陰離子染料BCP能與Alb結(jié)合，產(chǎn)物為綠色復(fù)合物，在603nm波長處有吸收峰。球蛋白不結(jié)合BCP（二）血清白蛋白（albumin，Alb） 2.檢測方法方法學(xué)評價(jià)BCG法操作簡便、重復(fù)性好、能自動化血清中和球蛋白能發(fā)生較弱

14、反應(yīng)，為慢反應(yīng)線性范圍為560g/L，比BCP法線性略寬測定胸腹水Alb的生物檢測限為0.98g/L，宜用該法（二）血清白蛋白（albumin，Alb） 2.檢測方法方法學(xué)評價(jià)BCP法無球蛋白的非特異性干擾與牛、豬等血清Alb的反應(yīng)性比人低，若質(zhì)控血清采用動物血清，則限制其應(yīng)線性范圍為550g/L，上限較低（三）血清前白蛋白（prealbumin,PA ） 項(xiàng)目檢測依據(jù)前白蛋白即甲狀腺素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（transthyretin，TTR），55kD，半壽期2天,約結(jié)合10的甲狀腺激素 50%70%的TTR與視黃醇結(jié)合蛋白（retinol-binding protein，RBP）組成復(fù)合體，可避免小分

15、子RBP從腎小球?yàn)V過。 RBP 21kD，攜帶視黃醇，半壽期12小時(shí)（三）血清前白蛋白（prealbumin,PA ） 臨床意義PA下降是肝功能不全的靈敏指標(biāo)低水平的PA還可指示蛋白質(zhì)營養(yǎng)不良正常PA血清濃度200mg/L400mg/L100mg/L150mg/L為輕度缺乏50mg/L100mg/L為中度缺乏50mg/L則嚴(yán)重缺乏PA是負(fù)性APR（三）血清前白蛋白（prealbumin,PA ） 應(yīng)用評價(jià)濃度下降可靈敏地反映出肝功能下降和蛋白質(zhì)營養(yǎng)不良測定需采用特異性抗體，價(jià)格較高，但可自動化（四）血清1-酸性糖蛋白 （1-acid glycoprotein ，AAG） 項(xiàng)目檢測依據(jù)血清粘蛋白

16、的主要成分，含糖45脂質(zhì)運(yùn)載蛋白，能結(jié)合孕酮等類固醇激素和許多藥物具有下調(diào)免疫反應(yīng)、抑制白細(xì)胞吞噬等。主要的APR在急性炎癥和組織損傷時(shí)增高，與免疫防御功能有關(guān)（四）血清1-酸性糖蛋白 （1-acid glycoprotein ，AAG） 臨床意義AAG升高急性時(shí)相反應(yīng) 12h后迅速增高，35天時(shí)出現(xiàn)高峰糖皮質(zhì)激素增加可引起AAG升高AAG下降腎病綜合征時(shí)從尿液丟失，胃腸道疾病時(shí)從腸道丟失雌激素可減少AAG合成應(yīng)用評價(jià) 主要應(yīng)用是監(jiān)測急性時(shí)相反應(yīng)（五）血清1-抗胰蛋白酶 （1-antitrypsin,1AT或AAT） 項(xiàng)目檢測依據(jù)血漿主要的蛋白酶抑制物（proteinase inhibitor

17、，Pi） 占90活力左右能抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、膠原蛋白酶，白細(xì)胞溶酶體蛋白水解酶遺傳變異達(dá)75種，PiMM型為正常功能，變異型如Z型、S型等（五）血清1-抗胰蛋白酶 （1-antitrypsin,1AT或AAT） 臨床意義血清AAT下降A(chǔ)AT缺陷：年青肺氣腫，新生兒和幼兒肝臟疾病腎病綜合征時(shí)從尿液丟失，胃腸道疾病時(shí)從腸道丟失血清AAT增高作為急性時(shí)相反應(yīng)，急性炎癥后約24h開始升高，3-4天達(dá)峰值A(chǔ)AT受雌激素刺激而合成（五）血清1-抗胰蛋白酶 （1-antitrypsin,1AT或AAT） 應(yīng)用評價(jià)慢性阻塞性肺疾病全球計(jì)劃推薦，具有家族史且45歲前發(fā)病的慢性阻塞性肺病患者，需要檢測AAT

18、（六）血清2巨球蛋白 （2-macroglobulin,2 MG或AMG） 檢測項(xiàng)目項(xiàng)目檢測依據(jù)720kD，蛋白酶抑制劑應(yīng)用評價(jià)臨床應(yīng)用并不多腎病綜合征等Alb顯著下降，電泳能顯示2球蛋白區(qū)帶明顯增高（六）血清2巨球蛋白 （2-macroglobulin,2 MG或AMG） 臨床意義血清AMG增高雌激素使AMG增加?jì)胗變篈MG是成人水平的2-3倍低白蛋白血癥血漿AMG含量可顯著增高血清AMG下降急性胰腺炎晚期前列腺癌患者治療（七）血清銅藍(lán)蛋白（ceruloplasmin,Cp） 項(xiàng)目檢測依據(jù)每分子Cp含68個(gè)銅原子，呈藍(lán)色血漿銅95存在于Cp中，使血液中銅無毒Cp具有鐵氧化酶作用，將Fe2+氧

19、化為Fe3+（七）血清銅藍(lán)蛋白（ceruloplasmin,Cp） 臨床意義Wilson病的輔助診斷指標(biāo)。因血漿Cp減少，游離銅增加，沉積在肝可引起肝硬化，沉積在腦基底節(jié)的豆?fàn)詈藙t導(dǎo)致豆?fàn)詈俗冃栽l(fā)性的Cp遺傳性缺陷在臨床上顯示為血色病急性時(shí)相反應(yīng)時(shí)Cp增加（七）血清銅藍(lán)蛋白（ceruloplasmin,Cp） 應(yīng)用評價(jià)對Wilson病具有較好的鑒別診斷價(jià)值?；颊哐蹇傘~下降，尿銅排出增加（八）血清結(jié)合珠蛋白（haptoglobin，Hp） 檢測項(xiàng)目項(xiàng)目檢測依據(jù)能結(jié)合RBC溶解釋放的Hb，防止Hb從腎臟丟失,保留鐵Hp-Hb復(fù)合物不可逆，溶血后其含量急劇降低應(yīng)用評價(jià)對急性溶血性疾病有一定的鑒別

20、診斷價(jià)值（八）血清結(jié)合珠蛋白（haptoglobin，Hp） 臨床意義血清Hp下降溶血性疾病，明顯下降，監(jiān)測雌激素使Hp合成減少血清Hp增高Alb大量丟失，大分子Hp可代償性明顯增加在急性時(shí)相反應(yīng)時(shí)，Hp濃度會在48h內(nèi)增加3倍（九）血清轉(zhuǎn)鐵蛋白（transferrin，Tf） 檢測項(xiàng)目項(xiàng)目檢測依據(jù)可逆地結(jié)合多價(jià)陽離子，運(yùn)輸Fe3+ 到骨髓及各組織細(xì)胞應(yīng)用評價(jià)作為缺鐵性貧血的鑒別診斷指標(biāo)（九）血清轉(zhuǎn)鐵蛋白（transferrin，Tf） 臨床意義血清Tf增加缺鐵性低血色素貧血時(shí)代償性合成增加，鐵飽和度下降再生障礙性貧血時(shí)正?；虻拖?，鐵飽和度增高妊娠和應(yīng)用雌激素時(shí)則增高血清Tf下降Tf是負(fù)性急性

21、時(shí)相反應(yīng)蛋白腎病綜合征時(shí)Tf減少先天性低轉(zhuǎn)鐵蛋白血癥者，表現(xiàn)嚴(yán)重的低色素性貧血（十）2-微球蛋白（2-microglobulin，2M，BMG） 項(xiàng)目檢測依據(jù)11.8kD可從細(xì)胞表面尤其淋巴細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞表面脫落到血漿能從腎小球?yàn)V過，正常時(shí)被腎近端小管重吸收和分解（十）2-微球蛋白（2-microglobulin，2M，BMG） 臨床意義血清BMG增高腎衰竭、炎癥、腫瘤，尤其是與B淋巴細(xì)胞相關(guān)的腫瘤尿液BMG排泄量增加可反映腎小管功能損害應(yīng)用評價(jià) 血清和尿液BMG均為較常檢測的指標(biāo)（十一）血清C-反應(yīng)蛋白（C-reactive protein,CRP） 檢測項(xiàng)目 項(xiàng)目檢測依據(jù)結(jié)合多種細(xì)菌、真菌

22、及原蟲等體內(nèi)的多糖物質(zhì)、卵磷脂和核酸，激活補(bǔ)體系統(tǒng)，引發(fā)免疫調(diào)理和吞噬作用也能識別和結(jié)合由損傷組織釋放的內(nèi)源性毒性物質(zhì) 應(yīng)用評價(jià) 最常用的APR，臨床實(shí)驗(yàn)室廣泛開展（十一）血清C-反應(yīng)蛋白（C-reactive protein,CRP） 臨床意義作為急性時(shí)相反應(yīng)的極靈敏指標(biāo)迅速顯著地增高，可達(dá)正常的2000倍5 mg/L可作為明顯的炎癥信號或是急性時(shí)相反應(yīng)引發(fā)階段15mg/L慢性低程度的炎癥或者急性時(shí)相反應(yīng)的開始血漿CRP低濃度增高可作為心血管疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因子，1 mg/L為低風(fēng)險(xiǎn)（十二）血清特定蛋白質(zhì)的檢測方法檢測原理免疫比濁法，體液中特定蛋白質(zhì)與各自的特異性抗體，在特殊緩沖液中快速形成抗

23、原抗體復(fù)合物，使反應(yīng)液出現(xiàn)濁度。當(dāng)反應(yīng)液中保持抗體過量時(shí)，形成的復(fù)合物隨抗原量增加而增加（十二）血清特定蛋白質(zhì)的檢測方法方法學(xué)評價(jià)采用免疫比濁法，透射比濁法能在自動生化分析儀中測定，散射比濁法需要專用的免疫散射比濁儀免疫比濁法檢測限為1020mg/L，批內(nèi)變異系數(shù)（CV）通常小于5（十二）血清特定蛋白質(zhì)的檢測方法特定蛋白校準(zhǔn)品有證參考物質(zhì)CRM-470（Certified Reference Material）由歐共體標(biāo)準(zhǔn)局（BCR）制備和提供，在美國由CAP提供參考實(shí)驗(yàn)室按IFCC規(guī)定的具有詳細(xì)操作程序以及統(tǒng)計(jì)學(xué)方法的定值方案，統(tǒng)一使用指定的各特定蛋白純化標(biāo)準(zhǔn)為初級標(biāo)準(zhǔn)品血清特定蛋白質(zhì)的檢測

24、方法（十二）血清特定蛋白質(zhì)的檢測方法CRM-470已包含15種已定值的蛋白質(zhì)，即Alb、PA、AAT、AAG、HAP、AMG、CER、TRF、CRP、IgG、IgM、IgA、C3、C4和1抗糜蛋白酶CRM-470通常只提供給生產(chǎn)廠商，不直接用于一般實(shí)驗(yàn)室。廠商在定值其產(chǎn)品校準(zhǔn)品即進(jìn)行數(shù)值傳遞時(shí)，實(shí)驗(yàn)方案須和CRM-470定值方案一致血清特定蛋白質(zhì)的檢測方法第二節(jié) 氨基酸代謝紊亂的生物化學(xué)檢驗(yàn) （一）體內(nèi)氨基酸代謝氨基酸（amino acid，AA）合成蛋白質(zhì)，轉(zhuǎn)變?yōu)槠渌锘钚晕镔|(zhì)主要代謝是脫氨基成氨和-酮酸 20種氨基酸相應(yīng)的-酮酸由各自的酶系進(jìn)行氧化分解小部分氨基酸可由氨基酸脫羧酶催化

25、生成相應(yīng)胺和CO2某些氨基酸有其特殊的代謝途徑，并具重要生理意義一、概述 （二）氨基酸代謝紊亂的種類1.遺傳性氨基酸代謝紊亂 基因突變所致遺傳性氨基酸代謝酶缺陷，種類很多絕大多數(shù)罕見，病情嚴(yán)重，診斷早，某些疾患可治療酶缺陷在代謝起點(diǎn)，其催化AA在血循環(huán)中增加酶缺陷在代謝中間，此酶催化的中間代謝物堆積有時(shí)正常途徑受阻，經(jīng)旁路代謝，相應(yīng)產(chǎn)物便增多一、概述 （二）氨基酸代謝紊亂的種類1.遺傳性氨基酸代謝紊亂 氨基酸血癥 血漿氨基酸或其中間代謝物或其旁路代謝物增高氨基酸尿癥 腎小球?yàn)V過的氨基酸增多超出腎小管重吸收能力或腎小管細(xì)胞膜某種載體缺乏，相應(yīng)氨基酸從尿中排出增加 一、概述 （一）體液氨基酸過篩試

26、驗(yàn)1.檢測項(xiàng)目項(xiàng)目檢測依據(jù) 遺傳性氨基酸代謝紊亂時(shí)血清和/或尿液某種氨基酸常明顯或顯著增高如苯丙酮酸尿癥（phenyl ketonuria，PKU）血漿苯丙氨酸可超過1200mol/L（正常120）臨床意義 作為過篩試驗(yàn)二、氨基酸代謝紊亂 的生物化學(xué)檢驗(yàn)項(xiàng)目與檢測方法（一）體液氨基酸過篩試驗(yàn)1.檢測項(xiàng)目應(yīng)用評價(jià) 結(jié)果不太容易判斷，多數(shù)臨床實(shí)驗(yàn)室已不開展國外僅有極少數(shù)較小的老實(shí)驗(yàn)室還在做國內(nèi)少數(shù)中等醫(yī)院檢驗(yàn)科采用Guthrie 微生物試驗(yàn)篩查PKU二、氨基酸代謝紊亂 的生化檢驗(yàn)項(xiàng)目與檢測方法（二）體液氨基酸定量1.檢測項(xiàng)目項(xiàng)目檢測依據(jù) 定量檢測某種氨基酸或20種氨基酸臨床意義 對遺傳性氨基酸代謝

27、紊亂有較好的診斷價(jià)值對繼發(fā)性氨基酸代謝紊亂的診斷以及某些疾病時(shí)氨基酸代謝的研究，均能提供有價(jià)值的信息二、氨基酸代謝紊亂 的生化檢驗(yàn)項(xiàng)目與檢測方法（二）體液氨基酸定量1.檢測項(xiàng)目應(yīng)用評價(jià)國內(nèi)中等及以下醫(yī)院檢驗(yàn)科大多不具備儀器 體液氨基酸檢測頻度不高，故中、小醫(yī)院一般不開展 大的綜合醫(yī)院和兒童醫(yī)院有必要開設(shè)，診斷新生兒遺傳性氨基酸代謝紊亂二、氨基酸代謝紊亂 的生化檢驗(yàn)項(xiàng)目與檢測方法（二）體液氨基酸定量2.檢測方法檢測原理HPLC法 樣本前處理，包括沉淀蛋白質(zhì)、萃取氨基酸等離子交換層析，氨基酸柱前或柱后衍生，光譜儀或熒光儀檢測二、氨基酸代謝紊亂 的生化檢驗(yàn)項(xiàng)目與檢測方法（二）體液氨基酸定量2.檢測方

28、法檢測原理HPLC-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS） 樣本經(jīng)HPLC柱分離，進(jìn)入離子源，各氨基酸電離成不同質(zhì)荷比（m/z）的分子離子和碎片離子，不同的碎片離子在質(zhì)量分析器中被分離，并按質(zhì)荷比大小依次抵達(dá)檢測器，經(jīng)記錄即得到按不同質(zhì)荷比排列的氨基酸譜二、氨基酸代謝紊亂 的生化檢驗(yàn)項(xiàng)目與檢測方法標(biāo)準(zhǔn)樣本和患者樣本的氨基酸質(zhì)譜圖二、氨基酸代謝紊亂 的生化檢驗(yàn)項(xiàng)目與檢測方法（二）體液氨基酸定量2.檢測方法方法學(xué)評價(jià)HPLC法 樣品前處理過程比較費(fèi)時(shí)，若萃取氨基酸不佳，一些類似物可能會影響氨基酸種類的確定LC-MS/MS法 對氨基酸的鑒定更加準(zhǔn)確，定量靈敏度也較HPLC法高。良好的質(zhì)譜儀定量精密度可達(dá)2.

29、0%5.0%，回收率多數(shù)在90%110%，線性良好二、氨基酸代謝紊亂 的生化檢驗(yàn)項(xiàng)目與檢測方法第三節(jié) 嘌呤核苷酸代謝紊亂的生物化學(xué)檢驗(yàn) 一、概述（一）嘌呤核苷酸的正常代謝 （二）高尿酸血癥 二、體液尿酸的檢驗(yàn)第三節(jié) 嘌呤核苷酸代謝紊亂的生物化學(xué)檢驗(yàn)嘌呤核苷酸代謝紊亂的生物化學(xué)檢驗(yàn) 一、概述 （一）嘌呤核苷酸的正常代謝一、概述 （一）嘌呤核苷酸的正常代謝一、概述 （二）高尿酸血癥（Hyperuricemia）1.嘌呤代謝紊亂 在原發(fā)性中約占10，單酶缺陷者少2.尿酸排泄障礙 如腎小球尿酸濾過減少、腎小管重吸收增多、腎小管尿酸分泌減少等3.代謝綜合征與高尿酸血癥 一、概述 （二）高尿酸血癥（Hyperuricemia）4.高嘌呤飲食 各種動物內(nèi)臟和海鮮，大豆及豆制品等5.各種腎臟疾病 6.細(xì)胞破壞增多 骨髓增生性疾?。粣盒阅[瘤的化療和放療后；溶血性貧血、肺結(jié)核等1.檢測項(xiàng)目項(xiàng)目檢測依據(jù)高尿酸血癥和痛風(fēng)是同一疾病的不同階段高尿酸血癥男性和絕經(jīng)后女性大于420mol/L絕經(jīng)前女性大于350mol/L二、體液尿酸的檢驗(yàn)1.檢測項(xiàng)目項(xiàng)目檢測依據(jù)血液尿酸濃度增高到480mol/L以上時(shí)，可出現(xiàn)尿酸鹽結(jié)晶形成和沉積，并引起特征性急性關(guān)節(jié)炎、