第二章-藥物的鑒別試驗(yàn)課件

1、第二章 藥物的鑒別試驗(yàn)Identification test of drug 藥物的鑒別試驗(yàn) 藥物的雜質(zhì)檢查 藥物定量分析與分析方法驗(yàn)證藥品檢驗(yàn)工作的基本規(guī)律優(yōu)劣真?zhèn)蝺?yōu)劣Contents鑒別試驗(yàn)的內(nèi)涵1鑒別試驗(yàn)的項(xiàng)目2鑒別試驗(yàn)的方法3鑒別試驗(yàn)的條件4第一節(jié) 鑒別試驗(yàn)的內(nèi)涵藥物的鑒別試驗(yàn)(Identification Test) 根據(jù)藥物的分子結(jié)構(gòu)，采用化學(xué)、物理化學(xué)或生物學(xué)方法來判斷其真?zhèn)巍?鑒別試驗(yàn)用方法僅用于證實(shí)貯藏在有標(biāo)簽容器中的藥物是否為其所標(biāo)示的藥物，而非對未知物的鑒別。 鑒別試驗(yàn)方法應(yīng)專屬，每個(gè)品種一般23條。第二節(jié) 鑒別試驗(yàn)的項(xiàng)目性狀項(xiàng)和物理常數(shù)確認(rèn) 鑒別項(xiàng)下規(guī)定的試驗(yàn) 原料藥鑒

2、別制劑鑒別第二節(jié) 鑒別試驗(yàn)的項(xiàng)目1.外觀 藥物的聚集狀態(tài)、晶型、色澤以及臭、味等性質(zhì)。 VB1的描述：本品為白色結(jié)晶或結(jié)晶型粉末；有微弱的特臭，味苦；干燥品在空氣中迅速吸收約4%的水分。 一、性狀（Description）反映藥物特有的物理性質(zhì)2. 溶解度 一定程度上反映了藥品的純度、晶型和粒度。尼莫地平 在丙酮、三氯甲烷或乙酸乙酯中易溶，在乙醇中溶解，在乙醚中微溶，在水中幾乎不溶。一、性狀3.物理常數(shù)一、性狀 評價(jià)藥物質(zhì)量的重要指標(biāo)之一，用于藥品鑒別，反映其純雜程度。 藥典收載的物理常數(shù)包括：相對密度、餾程、熔點(diǎn)、凝點(diǎn)、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羥值、碘值、吸收系數(shù)。 一、性狀熔

3、點(diǎn)固體熔化成液體的溫度 熔融同時(shí)分解的溫度 自初熔至全熔的一段溫度 熔點(diǎn)的測定方法 b型管(Thiele管)(2) 比旋度一、性狀 在一定波長與溫度下，偏振光透過長1dm且每1ml中含有旋光性物質(zhì)1g的溶液時(shí)測得的旋光度。 反映手性藥物特性及其純度的主要指標(biāo)。(3)吸收系數(shù) 在給定的波長、溶劑和溫度等條件下，吸光物質(zhì)在單位濃度、單位液層厚度時(shí)的吸收度稱為吸收系數(shù)。 中國藥典收載是例如： 氯霉素（M=323.15)的水溶液在278 nm處有吸收峰。設(shè)用純品配制100 ml含有2.00 mg的溶液，以1.00 cm厚的吸收池在278 nm處測得A=0.614，求=A/CL=0.614/0.002=

4、307二、一般鑒別試驗(yàn)（General Identification Test）第二節(jié) 鑒別試驗(yàn)的項(xiàng)目只能證實(shí)是某一類藥物，而不能證實(shí)是哪一種藥物！只適用于純品，混合藥物或有干擾時(shí)不適用！ 依據(jù)某一類藥物的化學(xué)結(jié)構(gòu)或物化性質(zhì)的特征，通過化學(xué)反應(yīng)來鑒別藥物的真?zhèn)巍Ｖ袊幍涓戒浭蛰d項(xiàng)目 丙二酰脲類、托烷生物堿類、芳香第一胺類、有機(jī)氟化物類、無機(jī)金屬鹽類、有機(jī)酸鹽、無機(jī)酸鹽1.有機(jī)氟化物無機(jī)氟化物 茜素氟藍(lán) 硝酸亞鈰pH 4.3藍(lán)紫色絡(luò)合物二、一般鑒別試驗(yàn)二、一般鑒別試驗(yàn)2.水楊酸鹽FeCl3反應(yīng)弱酸性中性加稀HCl，即析出白色沉淀；分離，沉淀溶于醋酸銨溶液。二、一般鑒別試驗(yàn)3.酒石酸鹽 供試品中性

5、銀鏡試管水浴加熱氨制硝酸銀4.芳香第一胺類(例如：苯佐卡因）供試品稀鹽酸橙黃色到猩紅色溶解，放冷堿性萘酚亞硝酸鈉液5.托烷生物堿類托烷生物堿類均具有莨菪酸結(jié)構(gòu)，有以下反應(yīng)(Vitali反應(yīng))，顯紫色。托烷生物堿類發(fā)煙硝酸深紫色黃色殘?jiān)腆wKOH乙醇6.無機(jī)金屬鹽（1）焰色反應(yīng) ：掌握鈉、鉀、鈣的焰色反應(yīng)銨鹽NaOH試液濕潤硝酸亞汞試紙變黑NH3紅色石蕊試紙變藍(lán)（2）銨鹽：7、無機(jī)酸根1）氯化物 氯化物AgOH試液溶解白色稀硝酸氨試液稀硝酸白色MnO2KI試紙變藍(lán)Cl2硫酸潤濕， 2）硫酸鹽 硫酸鹽BaCl2試液HCl白色（不溶于鹽酸、硝酸)無白色沉淀生成PbAC2試液白色（溶于醋酸銨或NaOH

6、試液）三、專屬鑒別試驗(yàn)（Specific Identification Test）第二節(jié) 鑒別試驗(yàn)的項(xiàng)目依 據(jù)： 藥物分子中的特殊基團(tuán)或官能團(tuán)特殊反應(yīng)或典型的有機(jī)官能團(tuán)反應(yīng)。 在一般鑒別試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以區(qū)別同類或具有相同化學(xué)結(jié)構(gòu)的各個(gè)藥物單體。 第三節(jié) 鑒別試驗(yàn)的方法四、鑒 別 方 法化學(xué)鑒別法光譜鑒別法生物學(xué)法 HPLC、GC鑒別法 薄層色譜鑒別法 紙色譜鑒別法 呈色反應(yīng)鑒別法 紫外光譜鑒別法 紅外光譜鑒別法 沉淀生成反應(yīng)鑒別法 色譜鑒別法 氣體生成反應(yīng)鑒別法 測定生成物的熔點(diǎn)熒光反應(yīng)鑒別法 1.呈色反應(yīng)鑒別法 指供試品溶液中加入適當(dāng)?shù)脑噭┤芤?，在一定條件下進(jìn)行反應(yīng)，生成易于觀測的有色產(chǎn)物。

7、（1）三氯化鐵呈色反應(yīng)： 酚羥基或水解后產(chǎn)生酚羥基（2）重氮化-偶合顯色反應(yīng)： 用于芳伯氨基或潛在芳伯氨基（3）異羥肟酸鐵反應(yīng)： 多用于芳酸及其酯類、酰胺類（4）茚三酮呈色反應(yīng)： 用于結(jié)構(gòu)中含有自由氨基藥物2.沉淀生成反應(yīng)鑒別法 （1）與重金屬離子的沉淀反應(yīng)-如巴比妥類藥物與銅鹽、鈷鹽、銀鹽生成沉淀的反應(yīng)； （2）與碘化鉍鉀、硅鎢酸的沉淀反應(yīng)-如含氮雜環(huán)的藥物（3）其它沉淀反應(yīng)。常用的熒光發(fā)射形式：（1）藥物本身可發(fā)射熒光；硫酸奎寧（藍(lán)色熒光） （2）藥物溶液加硫酸后發(fā)射熒光；VB1的硫色素反應(yīng) （3）藥物和溴反應(yīng)后，于可見光下發(fā)射出熒光；3.熒光反應(yīng)鑒別法（4）藥物和間苯二酚反應(yīng)后，發(fā)射出熒

8、光及藥物經(jīng)其它反應(yīng)后，發(fā)射熒光。（1）大多數(shù)的胺（銨）類藥物、酰脲類藥物以及某些酰胺類藥物，可經(jīng)強(qiáng)堿處理后，加熱，產(chǎn)生氨（胺）氣。巴比妥類藥物（2）化學(xué)結(jié)構(gòu)中含硫的藥物，可經(jīng)強(qiáng)酸處理后，加熱，發(fā)生硫化氫氣體。硫鳥嘌呤 （3）含碘有機(jī)藥物，經(jīng)直火加熱，可生成紫色碘蒸氣。碘苷（4）含醋酸酯和乙酰胺類藥物，經(jīng)硫酸水解后，加乙醇可產(chǎn)生醋酸乙酯的香味。對乙酰氨基酚4.氣體生成反應(yīng)鑒別法二、光譜鑒別法1.紫外光譜鑒別法(Ultraviolet spectrophotometry)芳環(huán)、共軛雙鍵 測定max，或同時(shí)測定min 測定一定濃度的供試液在max處的A 規(guī)定和E 規(guī)定和A1/A2 經(jīng)化學(xué)處理后，測定

9、其反應(yīng)產(chǎn)物的吸收光譜特性。12 乙胺嘧啶 供試品在0.1mol/L鹽酸介質(zhì)中的紫外吸收在272nm處為峰,216nm處為谷. 兩性霉素在362nm、381nm、405nm波長處有最大吸收.規(guī)定362nm與381nm處吸收度比值不大于0.6、381nm與405nm波長比值不大于0.9.1.紫外光譜鑒別法(Ultraviolet spectrophotometry)二、光譜鑒別法2.紅外光譜鑒別法(Infrared spectrophotometry) 用于組分單一、結(jié)構(gòu)明確的原料藥，特別適合不易區(qū)別的同類藥物，專屬性強(qiáng)，應(yīng)用廣泛。 Ch.P和BP均采用標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照法 USP采用對照品法試樣制備方

10、法： 壓片法、糊法、膜法、溶液法1505cm-13505cm-3300cm-11590cm-13610cm-酚羥基醇羥基1615cm-1苯環(huán)的骨架振動(dòng)二、光譜鑒別法二、光譜鑒別法3.近紅外光譜法(Near-Infrared spectrophotometry)二、光譜鑒別法4.原子吸收法(Atomic Absorption) 利用原子蒸氣可以吸收由該元素作為陰極的空心陰極燈發(fā)出的特征譜線的特性，根據(jù)供試溶液在特征譜線處的最大吸收和特征譜線的強(qiáng)度減弱程度進(jìn)行定性、定量分析。5. 核磁共振（Nuclear Magnetic Resonance ，NMR） 6. 質(zhì)譜（Mass Spectrogra

11、ph ，MS ）二、光譜鑒別法四、色譜鑒別法 采用與對照品在相同條件下進(jìn)行色譜分離，并進(jìn)行比較，根據(jù)兩者比移值或保留時(shí)間是否一致來驗(yàn)證藥品的真?zhèn)?。三、X射線粉末衍射法 適用于復(fù)雜環(huán)境下藥物有效成分及雜質(zhì)鑒別,具有分離、分析同時(shí)進(jìn)行的特點(diǎn).四、色譜鑒別法 供試品斑點(diǎn)與對照品的Rf值及斑點(diǎn)的顏色應(yīng)一致。1.薄層色譜鑒別法 (Thin-Layer Chromatography)2.GC和HPLC鑒別法四、色譜鑒別法供試品和對照品色譜峰保留時(shí)間一致。四、色譜鑒別法3.質(zhì)譜鑒別法 (Mass Spectrometry) 利用微生物或?qū)嶒?yàn)動(dòng)物進(jìn)行鑒別的方法，主要用于抗生素、生化藥物及中藥的鑒別，包括免疫鑒別法、細(xì)胞生物學(xué)鑒別法、生物效價(jià)測定法、DNA遺傳標(biāo)記鑒別法等。五、生物學(xué)法1、儀器方法大大增加，尤其是紅外光譜和高效液相色譜。2、制劑廣泛采用紅外法鑒別。3、鑒別條目簡練，選擇專屬的方法進(jìn)行鑒別，平均每個(gè)品種收載2條左右。藥物鑒別新動(dòng)向（2）在維生素C的分子中