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文檔簡介

1、 PAGE 14哪些因素引起DNA的突變?簡要敘述生物體存在(cnzi)的修復方式。 突變引起的物理(wl)因素:輻射、紫外線等,化學因素:聚乙二醇,致癌物質(zhì)等,生物因素:仙臺病毒等。 修復(xif)方式:錯配修復 恢復錯配 切除修復(堿基、核苷酸) 切除突變的堿基和核苷酸片段 重組修復 復制后的修復,重新啟動停滯的復制叉 DNA直接修復 修復嘧啶二體或甲基化DNA SOS系統(tǒng) DNA的修復,導致變異描述乳糖操縱子的調(diào)控機制。(看不懂題目,亂寫的) 乳糖操縱子的調(diào)控屬于可誘導調(diào)節(jié)。在以乳糖為碳源的培養(yǎng)基中,在單個透過酶分子的作用下,少量乳糖分子進入細胞,又在單個-半乳糖苷酶分子作用下轉(zhuǎn)變成異構(gòu)

2、乳糖。某個異構(gòu)乳糖與結(jié)合在操縱區(qū)上的阻遏物結(jié)合后使后者失活離開操縱區(qū),開始了lac mRNA的生物合成。Lac mRNA翻譯后生成大量的透過酶和-半乳糖苷酶,加速了乳糖分子的轉(zhuǎn)變。當乳糖分子都被消耗完畢時,阻遏物仍在不斷被合成,有活性的阻遏物濃度超過了異構(gòu)乳糖濃度,使細胞重新建立起阻遏狀態(tài),導致lac mRNA合成被抑制。mRNA半衰期短,不到一個世代生長期,mRNA幾乎從細胞消失,透過酶和-半乳糖苷酶的合成也趨于停止。簡述DNA半保留復制的概念。 每個子代分子的一條鏈來自親代DNA,另一條鏈則是新合成的,這種復制方式被稱為DNA的半保留復制。對生物體轉(zhuǎn)錄和復制的特征進行說明比較?(網(wǎng)上找的)

3、 DNA復制和RNA轉(zhuǎn)錄在原理上是基本一致的,體現(xiàn)在:這兩種合成的直接前體是核苷三磷酸,從它的一個焦磷酸鍵獲得能量促使反應(yīng)走向合成;兩種合成都需要RNA聚合酶和四種核苷酸;兩種合成都是以DNA為模板;合成前都必須將雙鏈DNA解旋成單鏈;合成的方向都是5 3。DNA復制和RNA轉(zhuǎn)錄的不同點體現(xiàn)在:復制和轉(zhuǎn)錄所用的酶是不同的,復制用的是DNA聚合酶,而轉(zhuǎn)錄用的是RNA聚合酶;所用前體核苷三磷酸種類不同,DNA復制用四種脫氧核糖核苷三磷酸,即dATP、dGTP、dCTP、dTTP,而RNA轉(zhuǎn)錄用四種核糖核苷三磷酸,即ATP、GTP、CrP、UTP做前體底物;在DNA復制時是A與T配對,而RNA轉(zhuǎn)錄是

4、A與U配對;DNA復制時兩條鏈均做模板,而RNA轉(zhuǎn)錄時只以其中一條鏈為模板;DNA復制是半不連續(xù)的,可產(chǎn)生岡崎片段,而RNA轉(zhuǎn)錄是連續(xù)的;DNA復制時需RNA做引物,而RNA轉(zhuǎn)錄無需引物;DNA復制時需連接酶的參與,而RNA轉(zhuǎn)錄時不需要。 闡述蛋白質(zhì)生物合成途徑 氨基酸的活化(huhu)翻譯的起始(q sh)(核糖體結(jié)合mRNA且甲硫氨酰-tRNA*結(jié)合(jih)到核糖體)肽鏈的延伸(后續(xù)AA-tRNA與核糖體的結(jié)合,肽鍵生成,移位)肽鏈終止蛋白質(zhì)前體加工蛋白質(zhì)的折疊簡要敘述真核生物mRNA的轉(zhuǎn)錄后加工的方式,這些加工方式各有何意義RNA的編輯:某些RNA,特別是mRNA前體的一種加工方式,如

5、插入、刪除或取代一些核苷酸殘基, 導致DNA所編碼的遺傳信息的改變。因為經(jīng)過編輯的mRNA序列發(fā)生了不同于模板DNA的變化。生物學意義:校正作用 有些基因突變在突變過程中丟失的遺傳信息可能通過RNA的編輯得以回復 調(diào)控翻譯 通過編輯可以構(gòu)建或去除起始密碼子和終止密碼子,是基因表達調(diào)控的一種方式 擴充遺傳信息 能使基因產(chǎn)物獲得新的結(jié)構(gòu)和功能,有利于生物的進化最早證明DNA是遺傳物質(zhì)的經(jīng)典實驗是什么?如何用實驗證明DNA 的復制是以半保留的方式進行的? 肺炎雙球菌的轉(zhuǎn)化實驗和噬菌體侵染細菌實驗 證明DNA半保留方式復制的實驗:15N標記大腸桿菌DNA實驗15N氮源培養(yǎng)基15N-DNA14N氮源培養(yǎng)

6、基離心:14N-15N-DNA14N氮源培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)離心:14N-DNA,14N-15N-DNA列出你所知道的具有DNA外切酶活性的酶及它們在分子生物學研究中的應(yīng)用。 DNA聚合酶I 具有53和35外切酶活性 在切除因紫外線照射而形成的嘧啶二聚體中起著重要作用。也可以除去岡崎片段5端RNA引物,使岡崎片段間缺口消失,保證連接酶將片段連接起來。DNA聚合酶具有35外切酶活性起校正作用,修復DNADNA聚合酶(線粒體) 具有35外切酶活性 線粒體DNA的復制DNA聚合酶(核內(nèi)) 具有35外切酶活性 參與前導鏈和后隨鏈的合成DNA聚合酶(核內(nèi)) 具有35外切酶活性 除去RNA引物圖示多肽合成后的空

7、間輸送中信號肽的識別過程。 (課本145的圖可能是的)什么是DNA的半保留復制和半不連續(xù)復制?如何證明?真核細胞與原核細胞的DNA復制有何不同? 半保留復制:每個子代分子的一條鏈來自親代DNA,另一條鏈則是新合成的,這種復制方式被稱為DNA的半保留復制。半不連續(xù)復制:前導鏈的連續(xù)復制和后隨鏈的不連續(xù)復制稱為雙螺旋的半不連續(xù)復制。不同點:1.復制起點。原核生物只有一個復制起點,真核生物可以有多個。2.復制單元。原核生物有多個復制單元,可以一次復制多個;真核生物只有一個。3.復制叉移動速度。原核生物快,真核生物慢。4.復制子大小。原核生物大,真核生物小。簡述原核生物與真核生物mRNA的主要差別。原

8、核生物真核生物場所轉(zhuǎn)錄、翻譯在同一細胞空間且兩過程同步進行核內(nèi):前體RNA細胞質(zhì):加工修飾后的mRNA轉(zhuǎn)錄翻譯分2步進行編碼蛋白幾個多肽 多順反子mRNA 1個多肽起始密碼子AUGAUG GUG UUG 半衰期短5端無帽子結(jié)構(gòu)有帽子結(jié)構(gòu)3端較短的poly A尾巴或沒有有poly A 尾巴真核生物(shngw)蛋白質(zhì)的翻譯后加工有哪些?N端fMet或Met的切除(qich)二硫鍵的形成(xngchng)特定氨基酸的修飾(磷酸化,糖基化,甲基化,乙基化,羥基化,羧基化)切除新生肽鍵的非功能片段大腸桿菌乳糖操縱子的主要結(jié)構(gòu)和阻遏蛋白的作用機制是什么?大腸桿菌乳糖操縱子包含3個結(jié)構(gòu)基因:Z、Y、A,以

9、及啟動子、控制子、阻遏子等。阻遏蛋白作用機制:誘導物或異構(gòu)乳糖與阻遏蛋白結(jié)合,會改變其三維構(gòu)象,使之不能與操縱區(qū)結(jié)合,從而激發(fā)lac mRNA的合成。簡述原核生物與真核生物蛋白質(zhì)合成的區(qū)別 原核生物轉(zhuǎn)錄和翻譯可以同時進行,真核生物要先轉(zhuǎn)錄后翻譯。原核生物轉(zhuǎn)錄在擬核區(qū),真核生物轉(zhuǎn)錄在核內(nèi)。原核生物翻譯直接由核糖體完成,真核生物核糖體翻譯后還要進過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等加工。DNA聚合酶I有哪些催化活性?請說明其在E.coli DNA代謝中的作用。 DNA聚合酶活性和35外切酶活性 即可合成DNA鏈,又可以降解DNA,保證了DNA復制的準確性。53外切酶活性 在切除因紫外線照射而形成的嘧啶二聚體中起著

10、重要作用。也可以除去岡崎片段5端RNA引物,使岡崎片段間缺口消失,保證連接酶將片段連接起來。敘述大腸桿菌色氨酸操縱子調(diào)節(jié)(tioji)機制要點。 1 trp操縱子轉(zhuǎn)錄(zhun l)起始的調(diào)控是通過阻遏蛋白實現(xiàn)的。2 trp操縱子轉(zhuǎn)錄終止的調(diào)控是通過(tnggu)弱化作用實現(xiàn)的。大腸桿菌I型DNA聚合酶(DNA polymerase I)有幾種酶活性?它在體內(nèi)有些什么功能?舉出一個這種酶在分子生物學技術(shù)中的應(yīng)用例子。 (同44題)DNA聚合酶活性和35外切酶活性 即可合成DNA鏈,又可以降解DNA,保證了DNA復制的準確性。53外切酶活性 在切除因紫外線照射而形成的嘧啶二聚體中起著重要作用。也

11、可以除去岡崎片段5端RNA引物,使岡崎片段間缺口消失,保證連接酶將片段連接起來。扼要說明真核生物內(nèi)含子的類型和剪接方式。 GU-AG類(主要)和AU-AG類(次要)內(nèi)含子:通過形成剪接前體方式I類和II類內(nèi)含子:無剪接前體,主要通過轉(zhuǎn)酯反應(yīng)的方式簡述乳糖操縱子的調(diào)節(jié)方式。 (前面差不多)描述大腸桿菌細胞的“錯配修復”機制和功能。 機制:Dam甲基化酶能使位于5-GATC序列中的腺苷酸的N6位甲基化。一旦復制叉通過復制起始位點,母鏈就會在開始DNA合成錢的幾秒鐘至幾分鐘內(nèi)被甲基化。此后,只要兩條DNA鏈上堿基配對出現(xiàn)錯誤,錯配修復系統(tǒng)就會根據(jù)“保存母鏈,修正子鏈”的原則,找出錯誤堿基所在的DNA

12、鏈,并在對應(yīng)于母鏈甲基化腺苷酸上游鳥苷酸的5位置切開子鏈,再根據(jù)錯配堿基相對于DNA切口的方位啟動修復途徑,合成新的子鏈DNA片段。功能:充分反映了母鏈序列的重要性,對DNA復制忠實性有很大的貢獻。真核mRNA有哪些轉(zhuǎn)錄后修飾事件?詳細敘述大部分真核mRNA3末端的修飾過程。加5端帽子結(jié)構(gòu),3端poly A尾巴,進行mRNA剪接加poly A尾巴需要由內(nèi)切酶切開mRNA 3端的特定部位,然后由poly A合成酶催化多聚腺苷酸的反應(yīng)。真核RNA聚合酶有三種,它們分別是什么酶?它們的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物分別是什么? RNA聚合酶I rRNARNA聚合酶II hnRNAmRNARNA聚合酶III tRNA舉出三

13、種細胞內(nèi)DNA修復系統(tǒng)的例子(l zi),說明它們各自修復的DNA損傷類型。 錯配修復 復制過程(guchng)中發(fā)生錯配 切除修復(堿基、核苷酸) DNA鏈上相應(yīng)位置(wi zhi)的堿基或核苷酸發(fā)生損傷 重組修復 復制起始時尚未修復的DNA損傷部位進行修復 DNA直接修復 修復損傷的堿基 SOS系統(tǒng) DNA受到損傷或復制系統(tǒng)受到抑制的緊急情況下,細胞為求生存而產(chǎn)生的 一種應(yīng)急措施。在原核生物中,基因的表達通常以操縱子為單位進行調(diào)節(jié)。下列是一些基因調(diào)節(jié)的順式行為元件和反式行為因子,以及一些調(diào)控機制:啟動子;操縱基因;阻遏蛋白;終止子;弱化子;正調(diào)節(jié)作用;負調(diào)節(jié)作用;反饋抑制;反終止作用;CA

14、P;cAMP。請把這些名詞和相應(yīng)的操縱子相匹配。a,乳糖操縱子;b,色氨酸操縱子;c,阿拉伯糖操縱子乳糖操縱子:啟動子,阻遏蛋白,負調(diào)節(jié)作用,正調(diào)節(jié)作用,cAMP色氨酸操縱子:弱化子說出雙鏈DNA復制起始有關(guān)的五種重要的酶或蛋白并簡述它們的功能。拓撲異構(gòu)酶I 解開負超螺旋DNA解鏈酶 解開雙鏈SSB單鏈結(jié)合蛋白 保證被解鏈酶解開的單鏈在復制完成前保持單鏈結(jié)構(gòu)Rep蛋白 前導鏈模板35方向移動(與一般DNA解鏈酶相反)Dna蛋白 與解鏈酶共同作用使復制起點解開雙鏈簡述增強子的特點和性質(zhì)及作用機制。增強子(定義):指能使與它連鎖的基因轉(zhuǎn)錄頻率明顯增加的DNA序列。特點和性質(zhì):增強效應(yīng)十分明顯。增強

15、效應(yīng)與其(yq)位置和取向無關(guān)。大多為重復序列,一般(ybn)長為50bp,適合與某些蛋白因子結(jié)合。其增強效應(yīng)有嚴密的組織(zzh)和細胞特異性,說明增強子只有與特定蛋白質(zhì)(轉(zhuǎn)質(zhì)因子)相互作用才能發(fā)揮功能。沒有基因?qū)R恍?,可以在不同的基因組合上表現(xiàn)增強效應(yīng)。許多增強子還受外部信號的調(diào)控,如金屬硫蛋白基因啟動區(qū)上游所帶的增強子,就可以對環(huán)境中的鋅、鎘濃度做出反應(yīng)。 作用機制: 1.影響模板附近的DNA雙螺旋結(jié)構(gòu),導致DNA雙螺旋彎折或在反式因子的參與下,以蛋白質(zhì)之間的相互作用為媒介形成增強子與啟動子之間“成環(huán)”連接,活化基因轉(zhuǎn)錄 2.將模板固定在細胞核內(nèi)特定位置 3.增強子區(qū)可以作為反式作用因子

16、或RNA聚合酶II進入染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的“入口”簡述真核RNA聚合酶II的轉(zhuǎn)錄起始復合物裝配過程和轉(zhuǎn)錄起始 RNA聚合酶全酶識別啟動子逆性結(jié)合形成閉合復合物開放復合物(結(jié)合的DNA序列一小段雙鏈解開)與最初的2個NTP結(jié)合RNA聚合酶、DNA和新生RNA三元復合物盡快釋放亞基通過上游啟動子區(qū)(轉(zhuǎn)錄開始)簡述(或繪圖說明)真核細胞RNA聚合酶II轉(zhuǎn)錄的起始需要哪些基本轉(zhuǎn)錄因子及其裝配過程轉(zhuǎn)錄因子:TBP TFA TFB TFD TFE TFF TFH轉(zhuǎn)配過程:全酶二元閉合復合物二元開鏈復合物三元復合物RNA合成開始(課本74頁)簡述(或繪圖說明)色氨酸操縱子弱化的機制(課本251頁)當培養(yǎng)基中的色氨酸

17、濃度很低時,負載有色氨酸的tRNATrp也就少,這樣翻譯通過兩個相鄰色氨酸密碼子的速度就會很慢,當4區(qū)被轉(zhuǎn)錄完成時,核糖體才進行到1區(qū),這時的前導區(qū)結(jié)構(gòu)式2-3配對,不形成3-4配對的終止結(jié)構(gòu),所以轉(zhuǎn)錄可以繼續(xù)進行,直到將trp操縱子中的結(jié)構(gòu)基因全部轉(zhuǎn)錄。當培養(yǎng)基中色氨酸濃度高時,核糖體可以順利通過兩個相鄰的色氨酸密碼子,在4區(qū)被轉(zhuǎn)錄之前,核糖體就到達2區(qū),這樣使2-3不能配對,3-4區(qū)可以自由配對形成莖-環(huán)狀終止子結(jié)構(gòu),轉(zhuǎn)錄停止,trp操縱子中的結(jié)構(gòu)基因被關(guān)閉而不再合成色氨酸。簡述原核生物轉(zhuǎn)錄起始與轉(zhuǎn)錄終止過程中所涉及(shj)的主要蛋白質(zhì)和核酸結(jié)構(gòu)及其具體作用。RNA聚合酶全酶:轉(zhuǎn)錄(zh

18、un l)起始過程需要 因子(ynz)辨認起始點催化中心:和亞基可能與核心酶的組裝及啟動子識別有關(guān),并參與RNA聚合酶和部分調(diào)節(jié)因子的相互作用:亞基(沒找到轉(zhuǎn)錄終止的蛋白質(zhì)和酶)什么是操縱子(operon)?試說明色氨酸操縱子(Trp operon)在原核基因表達調(diào)控中的調(diào)控機制和重要作用。操縱子:指啟動基因、操縱基因和一系列緊密連鎖的結(jié)構(gòu)基因的總稱。調(diào)控機制: 1 trp操縱子轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)控是通過阻遏蛋白實現(xiàn)的。 2 trp操縱子轉(zhuǎn)錄終止的調(diào)控是通過弱化作用實現(xiàn)的。重要作用找不到請簡要解釋順式作用元件與反式作用因子,并舉二例加以說明它們的相互作用方式。順式作用元件:真核生物啟動子和增強子是由

19、若干DNA序列元件組成的,由于它們常與特定的功能基因連鎖在一起,因此被稱為順式作用元件。反式作用因子:是直接或間接地識別或結(jié)合在各類順式作用元件核心序列上,參與調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄效率的蛋白質(zhì)。試說明真核細胞與原核細胞在基因轉(zhuǎn)錄、翻譯及DNA的空間結(jié)構(gòu)方面存在的主要差異,表現(xiàn)在哪些方面?轉(zhuǎn)錄:原核生物和真核生物的RNA聚合酶在分子組成、種類和生物化學特性上有差異。且真核生物線粒體、葉綠體內(nèi)也存在RNA聚合酶。(課表69-72頁) 轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA也存在差異(詳見上表)。翻譯:起始氨基酸不一樣,原核生物的需要甲?;?翻譯的起始過程有差異,真核生物mRNA有帽子結(jié)構(gòu)和poly A尾巴 后期真核生物的多肽

20、鏈需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等加工,原核生物的不用DNA空間結(jié)構(gòu):原核生物DNA的高級結(jié)構(gòu)絕大部分原核的DNA都是共價封閉的環(huán)狀雙螺旋分子。在細胞內(nèi)進一步盤繞,并形成類核結(jié)構(gòu),以保證其以較致密的形式存在于細胞內(nèi)。在細菌基因組中,超螺旋可以相互獨立存在 真核生物DNA的存在形式在真核生物,DNA以非常致密的形式存在于細胞核中。在細胞周期的大部分時間里以分散的染色質(zhì)形式出現(xiàn)在細胞分裂期形成高度組織有序的染色體。原核生物的蛋白質(zhì)合成可分為(fn wi)哪些階段?簡述各階段的主要事件。氨基酸的活化(huhu)翻譯(fny)的起始肽鏈的延伸肽鏈的終止簡述RNA編輯(RNA editing)的機制及其對基因表達

21、的影響。RNA編輯機制:位點特異性脫氨基作用 引導RNA指導的尿嘧啶插入或刪除對基因表達的影響:校正作用 有些基因突變在突變過程中丟失的遺傳信息可能通過RNA的編輯得以回復調(diào)控翻譯 通過編輯可以構(gòu)建或去除起始密碼子和終止密碼子,是基因表達調(diào)控的一種方式擴充遺傳信息 能使基因產(chǎn)物獲得新的結(jié)構(gòu)和功能,有利于生物的進化核糖體是蛋白質(zhì)合成的主要機器 。請問原核生物有哪些亞基和分子組成?核糖體在蛋白質(zhì)翻譯過程中有哪些功能位點 ?起什么作用 ?RNA聚合酶全酶:轉(zhuǎn)錄起始過程需要 因子辨認起始點催化中心:和亞基可能與核心酶的組裝及啟動子識別有關(guān),并參與RNA聚合酶和部分調(diào)節(jié)因子的相互作用:亞基還有亞基 作用不明確功能位點:A點 P點 E點A點:讀取下一個密碼子 P點:A位上的AA-tRNA移到P位形成肽鍵E點:P位上的tRNA移到E點,離開核糖體簡述蛋白質(zhì)翻譯后的加工過程蛋白質(zhì)前體的

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