X小體和PAS整理教程文件

1、Good is good, but better carries it.精益求精，善益求善。X小體和PAS整理-人類X小體的檢測一實驗原理1.X小體的本質(zhì)：哺乳動物體細胞核中，除一條X染色體外，其余的X染色體發(fā)生異固縮，功能上處于失活狀態(tài)，將其稱為X小體（X染色質(zhì)，性染色質(zhì)，巴氏小體Barrbody），通常位于間期細胞核的核膜邊緣，染色深而致密如：甲苯胺藍人類正常的男女體細胞中，22對常染色體并無區(qū)別，但其性染色體分別為XY和XX。女性的兩條X染色體中，有一條在間期呈現(xiàn)濃縮狀態(tài)，可由適當?shù)娜玖巷@示。正常女性口腔黏膜上皮細胞中X小體陽性率10-30%。2.X小體的數(shù)目：X小體的數(shù)目=X染色體數(shù)目

2、1正常女性細胞：2條X染色體，X小體的數(shù)目為1正常男性細胞：1條X染色體，X小體的數(shù)目為0。有三個X染色體者X小體的數(shù)目為23.萊昂假說（Lyonhypothesis）（1）正常雌性哺乳動物體細胞中的兩個X染色體之一在遺傳性狀表達上是失活的。（2）X染色體的失活是隨機但恒定的。失活的X染色體可來源于雌性親本，也可來源于雄性親本。（3）失活現(xiàn)象發(fā)生在胚胎發(fā)育的早期，一旦出現(xiàn)則從這一細胞分裂增殖而成的體細胞克隆中失活的都是同一來源的染色體4.劑量補償（dosagecompensationeffect）女性有兩條X染色體，但所表達的絕大部分遺傳物質(zhì)與只有1個X染色體的男性是一樣多的。這種男女X連鎖基

3、因產(chǎn)物相等的現(xiàn)象在遺傳學上稱為劑量補償。5.X小體的應(yīng)用（1）鑒定個體的性別胎兒細胞性染色體檢查：羊水細胞，絨毛細胞，用于預(yù)防性染色體遺傳性疾病的發(fā)生，優(yōu)生。（2）診斷性染色體異常綜合征克氏（Klinefelters）綜合征，先天性睪丸發(fā)育不全綜合征，患者為男性但有一個巴氏小體，核型是47，XXY。特納氏（Turners）綜合征，先天性卵巢發(fā)育不全綜合征，患者為女性但卻無巴氏小體，核型是45，XO。超雌：XXX,XXXY有2個巴氏小體等。二實驗材料取材：女性口腔粘膜上皮細胞試劑：0.85%生理鹽水，低滲液0.075MKCl，Carnoy固定液（甲醇冰乙酸3l，現(xiàn)配），5M鹽酸，0.2%甲苯胺蘭

4、染液耗材：牙簽、離心管、載玻片、染色缸儀器：恒溫水浴箱，離心機，光學顯微鏡三實驗方法0.075MKCl1.取材：吸取5ml生理鹽水于離心管中，漱口后用牙簽鈍端從口腔兩側(cè)頰部刮取女性口腔粘膜上皮細胞4-5次，置入離心管的生理鹽水中洗脫下來，輕輕搖勻，1000r/min離心10min，棄上清。2.低滲：加入5ml預(yù)熱的低滲液，輕輕混勻，37低滲10min。甲醇冰乙酸3l，現(xiàn)配（低滲液的作用：低滲處理是憑借反滲透作用使細胞膨脹染色體鋪展，同時可使粘附于染色體的核仁物質(zhì)散開，以便能在一個平面上觀察所有染色體形態(tài)）3.固定：終止KCl進一步低滲（1）加入新鮮配制的Carnoy固定液1ml，混勻，室溫預(yù)固

5、定2min，1000r/min離心8min，棄上清（2）加入固定液5ml，吹打混勻，室溫固定15min，1000r/min離心10min，棄上清。（3）加入固定液0.5-1ml，混勻，制成細胞懸液。（固定液的作用：固定液的重要特性是能迅速穿透細胞，使蛋白凝固，終止細胞代謝過程，并保持細胞核染色體結(jié)構(gòu)的完整性，并且能夠增強染色體的嗜堿性，達到優(yōu)良的染色效果。）4.滴片：吸取細胞懸液自1020cm高垂直向下滴在一張預(yù)冷的載玻片上（2-3滴），標記，空氣風干或烘干。（目的：從高處向下滴片，讓液體分散開：形成細胞單層，使染色體分散，便于觀察。用冰片：是降低液體的表面張力。）課件上是細胞壁，我覺得應(yīng)該是

6、細胞膜5.水解：玻片放入鹽酸缸中，室溫水解10min后取出，自來水細水漂洗數(shù)秒鐘，洗去多余鹽酸，空氣風干或烘干。（水解可除去細胞間的果膠質(zhì)，使細胞壁軟化或部分分解，從而使細胞和染色體易于分散，同時可去除雜質(zhì)。）6.染色：玻片放入甲苯胺蘭染液缸中，染色3min后取出，自來水細水漂洗數(shù)秒鐘，空氣風干或烘干。（甲苯胺蘭是一種堿性染料，與細胞核蛋白（酸性）結(jié)合，染成紫藍）7.鏡檢：低倍鏡高倍鏡。四注意事項1.取材前需用水漱口數(shù)次，盡可能除去細菌和食物殘渣；用潔凈的牙簽鈍端從口腔兩側(cè)頰部刮取粘膜，為防止后面的離心損耗，應(yīng)盡量多取一些。2.棄上清時，用吸管吸取上清，棄去，接近下方沉淀時，應(yīng)小心吸取。3.加

7、入低滲液后，輕輕混勻，不能太用力，以防核膜破裂。4.固定液使用前需臨時配制，長時間放置影響固定效果。5.載玻片于臨用前在-20度冰箱中取出，現(xiàn)用現(xiàn)取，以防溫度上升。6.加熱時應(yīng)距離外焰一段距離（2-3cm），且來回擺動，以防過熱引起斷裂。五實驗結(jié)果1.實驗結(jié)果的觀察：低倍鏡：選擇輪廓清楚，不重疊，染色清晰，核膜完整，核質(zhì)中顆粒均勻的細胞，觀察到細胞核后轉(zhuǎn)到高倍鏡下觀察。高倍鏡：觀察X小體，大小約為1m，扁平狀、橢圓形或三角形，濃染，緊貼于細胞核核膜邊緣。2.X小體的形狀：3.X小體的陽性率：正常女性口腔粘膜上皮細胞中X小體陽性率約10%30%男性偶爾可見，陽性率2%，且形態(tài)不典型。糖原的顯色P

8、AS反應(yīng)（PPT內(nèi)容）石蠟切片法：以石蠟作包埋劑，用旋轉(zhuǎn)切片機將標本切成薄片，經(jīng)一系列處理制成永久切片是組織學常規(guī)制片技術(shù)中應(yīng)用最廣泛的一種方法制作過程：1.取材2.固定3.洗滌4.脫水5.透明6.浸蠟7.包埋8.切片9.貼片10.脫蠟復(fù)水11.染色12.脫水13.透明14.封片。（脫水的方法？透明所用的試劑？脫蠟復(fù)水的方法？HE染色原理？）取材：從人或動物體內(nèi)取下所需組織或器官，材料必須新鮮，組織塊不宜太大，以便固定劑穿透。固定：目的：迅速凝固蛋白質(zhì)，終止細胞一切代謝過程，防止組織自溶，保持其活體時結(jié)構(gòu)。固定劑：10%甲醛、80%酒精、混合固定劑（Bouin氏液、FAA液、Carnoy氏液）

9、。用量：必須充足，一般為材料塊的2030倍。固定時間：數(shù)小時至24小時。洗滌：目的：除去留在組織內(nèi)的固定液及其結(jié)晶沉淀，以免影響后面的染色效果。方法：多數(shù)用流水沖洗，少數(shù)用酒精。脫水：目的：固定或洗滌后的組織內(nèi)充滿水分，而水與石蠟不能互溶，所以必須將組織中的水分除去，才能進行石蠟包埋。脫水劑：酒精方法：從低濃度到高濃度梯度酒精脫水：30%50%70%80%90%95%100%各級酒精中放置1數(shù)小時。水酒精石蠟透明：目的：酒精與石蠟不相溶，還需用能與酒精和石蠟相溶的媒浸液，替換出組織內(nèi)的酒精。組織在這類媒浸液中浸漬，出現(xiàn)透明狀態(tài)，因此該過程稱透明。透明劑：二甲苯。方法：酒精二甲苯等量混合液（1：

10、1）15分鐘，二甲苯30分鐘。水酒精二甲苯石蠟浸蠟：目的：除去組織中的透明劑，使石蠟滲透到組織內(nèi)部，達到飽和程度以便包埋。方法：石蠟二甲苯等量混合15分鐘，石蠟、石蠟各30分鐘。浸蠟應(yīng)在高于石蠟熔點3左右的溫箱中進行，以利石蠟浸入組織內(nèi)（石蠟的熔點在5060之間）。包埋：目的：將浸蠟后的組織塊包埋于石蠟中。方法：取出組織塊，置于盛有融化石蠟的包埋框中，迅速放入冷水中冷卻，待石蠟完全凝固（約30min）后取出，即做成含有組織塊的蠟塊標本。切片：將蠟塊裝在切片機上，調(diào)整所需的切片厚度（410um），進行切片，切出一片接一片的蠟帶，用刀片割開蠟帶。貼片：目的：借助粘附劑將展平的蠟片粘附于載玻片上，以

11、免在以后的操作步驟中脫落。方法：在潔凈的載玻片上涂抹薄層粘附劑（如多聚賴氨酸），滴兩滴蒸餾水于載玻片上，把蠟片放于水滴上，略加溫使蠟片鋪展，將載玻片放入溫箱中干燥。脫蠟復(fù)水：目的：染色液多數(shù)為水溶液，因此染色前必須將組織中的蠟脫去，才能進行染色。方法：與脫水浸蠟過程正好相反：二甲苯、30min100%酒精90%酒精80%酒精70%酒精蒸餾水各2min。石蠟二甲苯酒精水染色：目的：使細胞組織內(nèi)的不同結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)不同的顏色以便于觀察。經(jīng)典的HE染色法：蘇木精（Hematoxylin）伊紅（Eosin）堿性染料酸性染料細胞核中的DNA、RNA等細胞質(zhì)、膜性結(jié)構(gòu)等嗜堿性物質(zhì)（本身酸性）嗜酸性物質(zhì)（本身堿性

12、）染成藍色染成紅色脫水透明封片:目的：去除水分，透明組織，便于觀察和長期保存標本。方法：脫水：95%酒精2分鐘100%酒精2分鐘透明：二甲苯I2分鐘二甲苯II2分鐘封片：將載玻片從二甲苯中取出放在吸水紙，迅速地在切片的中間滴一滴中性樹膠，拿起蓋玻片，緩慢傾斜放下，避免產(chǎn)生氣泡。其他制片技術(shù)：涂片（血涂片）鋪片（腸系膜可用）磨片（骨）石蠟切片與冷凍切片：石蠟切片的制作相對比較復(fù)雜，而冷凍切片的制作相對簡單，快。但是石蠟切片可以永久保存，而冷凍切片則不能。在考慮用哪一種方法時要看取材容不容易，是否保留等問題。組織化學技術(shù)（histochemistry）應(yīng)用化學反應(yīng)與物理反應(yīng)原理檢測組織或細胞內(nèi)某種

13、化學成分，并進行定位、定量及相關(guān)功能研究的一種實驗技術(shù)。免疫組織化學（immunohistochemistry）利用抗原（antigen,Ag），抗體（antibody）特異結(jié)合的原理，用已知抗體檢測未知抗原的一種方法。（標記物為熒光素、過氧化物酶或金顆粒）過碘酸-Schiff反應(yīng)（periodicacidSchiffreaction,PAS反應(yīng)）原理：PAS反應(yīng)是經(jīng)典的組織化學方法，用來顯示組織細胞中的多糖或糖蛋白。原理是含有乙二醇基的糖類，在過碘酸的作用下，經(jīng)氧化而產(chǎn)生雙醛基，醛基進而與亞硫酸品紅（Schiff試劑）結(jié)合，使無色液體變成紫紅色染料，并沉著于含有多糖或糖蛋白的細胞或組織結(jié)構(gòu)上

14、。PA（過碘酸）Schiff試劑（亞硫酸品紅）乙二醇醛基紫紅色沉淀（PAS陽性反應(yīng)）氧化應(yīng)用：可根據(jù)紫紅色的位置及深淺鑒定糖成分的分布及相對含量，用于心血管疾病、糖尿病以及某些腫瘤的診斷和研究PAS染色的方法1.脫蠟，石蠟切片于染色前經(jīng)二甲苯脫蠟30min2.復(fù)水，在濃度逐級降低的酒精內(nèi)分別停留數(shù)分鐘（100%90%80%70%）3.過碘酸氧化10分鐘4.蒸餾水洗3分鐘5.Schiff試劑避光染色10分鐘6.0.5%偏重亞硫酸鈉溶液浸洗3次（I、II、III），每次2分鐘7.自來水洗3次，每次1分鐘，蒸餾水洗1分鐘8.蘇木精染色1分30秒9.自來水洗3次，每次1分鐘，蒸餾水洗1分鐘10.梯度脫

15、水：95%酒精2分鐘100%酒精2分鐘，透明：二甲苯I2分鐘二甲苯II2分鐘11.中性樹膠封片，顯微鏡下觀察（低倍鏡高倍鏡）（結(jié)果：糖原顆粒被Schiff試劑染色呈紫紅色，細胞核被蘇木精染色呈藍色，其他背景呈淡粉紅色）觀察的標本：肝和肺：脾+，肝+（PAS染色不僅對多糖染色，而且對糖蛋白也染色，脾有少量糖蛋白，呈弱陽性。而肝是糖類合成的部位，因此陽性強，且在肝血管周圍呈放射狀分布）腸道桿菌、霍亂弧菌、3種厭氧菌一.肥達反應(yīng)原理：用已知傷寒沙門菌O、H抗原，以及引起副傷寒的甲型、乙型副傷寒沙門菌H抗原的診斷菌液與受檢血清作定量凝集試驗，測定受檢血清中有無相應(yīng)的抗體及其效價的試驗。用于輔助診斷傷寒

16、和副傷寒（H抗原：鞭毛蛋白，不穩(wěn)定。O抗原：LPS成分，穩(wěn)定）方法：倍比稀釋法：123456生理鹽水0.50.50.50.50.50.5血清0.5（吹打）0.50.50.50.50.5（棄）菌液0.5ml/管，從第6管到第1管加，振勻水浴43度，2h最終血清1：401：801：1601：3201：640對照稀釋度凝集強弱效價*吸管桶，試管鍋,標簽貼在試管上。結(jié)果判斷：以出現(xiàn)+凝集的血清最高稀釋倍數(shù)為該血清抗體效價O達到1：80，H達到1：160，H甲（PA）或H乙（PB）達到1：80或以上有診斷意義結(jié)合當?shù)亓餍胁W史、病程和抗體消長的意義進行判斷。第6管均勻混濁少量凝集細菌部分沉于管底液體半澄

17、清凝集呈顆粒狀大部分凝集，液體輕度混濁，凝集塊較大全部凝集，液體澄清，大片凝集塊針對O的抗體IgM,出現(xiàn)早，維持時間短，特異性差針對H的抗體IgG,出現(xiàn)遲，維持時間長，特異性強O高H高腸熱癥可能性大O低H低排除（也可能才感染23天）O高H低早期或有交叉反應(yīng)的其它沙門菌感染O低H高預(yù)防接種或曾患過傷寒二.腸道桿菌的鑒定（形態(tài)相似，主要用生化反應(yīng)和血清學反應(yīng)進行鑒別）1.SS培養(yǎng)基成分：膽鹽枸櫞酸鹽煌綠：可以抑制雜菌的生長乳糖：被非致病菌分解產(chǎn)酸蛋白胨：被致病菌分解產(chǎn)堿中性紅：酸性環(huán)境下為紅色，堿性環(huán)境下為黃色（作為SS培養(yǎng)基的指示劑）菌落紅色乳糖發(fā)酵陽性，非致病菌菌落黃色乳糖發(fā)酵陰性，致病菌2.

18、雙糖鐵培養(yǎng)基成分：上層：酚紅，乳糖，硫酸亞鐵下層：酚紅，葡萄糖，半固體（酚紅為指示劑，在酸性的環(huán)境下為黃色）下層為半固體，若有氣體產(chǎn)生，下層就會有空泡產(chǎn)生（固體難被壓縮，氣體產(chǎn)生不會有空泡）。上層為斜面，是固體培養(yǎng)基，可以使氣體不被排出，起封閉作用?？捎糜谟^察葡萄糖發(fā)酵試驗：若產(chǎn)酸，則下層為黃色，若產(chǎn)氣，下層則有空泡出現(xiàn)乳糖發(fā)酵試驗：若乳糖發(fā)酵試驗陽性，則上層為黃色，反之則為紅色硫化氫試驗：若陽性，則產(chǎn)生的硫化氫與亞硫酸鐵反應(yīng)產(chǎn)生硫化鐵而呈黑色(1).葡萄糖發(fā)酵試驗：產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，乳糖發(fā)酵試驗：陰性，硫化氫試驗：陰性（雙糖鐵培養(yǎng)基有一定的局限性：沙門菌屬和志賀菌屬表現(xiàn)相似，不能區(qū)分，需用生化反應(yīng)

19、管或肥達反應(yīng)來進行鑒別）(2).葡萄糖發(fā)酵試驗：產(chǎn)酸產(chǎn)氣，乳糖發(fā)酵試驗：陽性，硫化氫試驗：陰性（大腸桿菌）(3).葡萄糖發(fā)酵試驗：產(chǎn)酸產(chǎn)氣，乳糖發(fā)酵試驗：陰性，硫化氫試驗：陽性（變形桿菌）3.生化反應(yīng)管重要的生化反應(yīng)與鑒別：蔗糖發(fā)酵試驗：傷寒沙門菌屬陽性葡萄糖試驗：傷寒沙門菌屬產(chǎn)酸產(chǎn)氣，志賀菌屬產(chǎn)酸不產(chǎn)氣硫化氫試驗陽性（黑色）和尿素酶試驗陽性（大紅色）：變形桿菌吲哚試驗陽性（下層水溶，不紅；上層脂溶，玫瑰紅）：大腸桿菌生化反應(yīng)表（+為產(chǎn)酸，0為產(chǎn)氣）4.霍亂弧菌霍亂弧菌的形態(tài)：G-，弧形或逗點狀，有菌毛，一端有單鞭毛（一般見不到，要在電鏡或特殊染色的情況下才能看見）作活菌懸滴法置暗視野顯微鏡下

20、觀察，可見細菌流星穿梭運動5.炭疽芽胞桿菌炭疽芽胞桿菌的形態(tài)：致病菌中最大的G粗大桿菌,兩端平切、排列呈竹節(jié)狀；有莢膜，芽胞在有氧條件下形成，呈橢圓形，位于菌體中央（在實際的觀察中，有的有芽胞，有的沒有，而且芽胞的位置也各不相同）炭疽芽胞桿菌菌落形態(tài)：3035，在普通瓊脂培養(yǎng)基上形成灰白色粗糙型菌落，邊緣不整齊，在低倍鏡下觀察邊緣呈卷發(fā)狀6.厭氧菌（1）破傷風梭菌破傷風梭菌的形態(tài)：G；芽胞位于菌體頂端，大于菌體，使細菌呈鼓槌狀；菌體細長，有周身鞭毛菌落：厭氧血平板上的羽毛狀菌落培養(yǎng)基：皰肉培養(yǎng)基（牛肉）致病物質(zhì)：破傷風痙攣毒素（2）產(chǎn)氣莢膜梭菌產(chǎn)氣莢膜梭菌的形態(tài)：兩端幾乎平切的G粗大桿菌；芽胞

21、位于次極端，呈橢圓形，不大于菌體；在體內(nèi)有明顯的莢膜；無鞭毛生化反應(yīng)：血瓊脂平板上，雙層溶血環(huán)（、毒素），“靶樣溶血”兩種毒素分別引起內(nèi)環(huán)（完全）和外環(huán)（不完全）代謝活躍：高層瓊脂斷裂試驗：半固體培養(yǎng)基，產(chǎn)氣莢膜梭菌產(chǎn)生氣體將瓊脂網(wǎng)上沖，將塞子上頂皰肉培養(yǎng)基：分解肉渣中的糖類，產(chǎn)酸產(chǎn)氣，肉渣淡紅色（與破傷風梭菌相比，更活潑）牛乳培養(yǎng)基：洶涌發(fā)酵（分解乳糖產(chǎn)酸，牛奶中的酪蛋白凝固，同時產(chǎn)生大量的氣體，沖散凝固的酪蛋白）（3）肉毒梭菌肉毒梭菌的形態(tài)：G；芽胞呈橢圓形，粗于菌體，位于次極端，使細胞呈湯匙狀或網(wǎng)球拍狀；有鞭毛，無莢膜支原體、衣原體、立克次體、螺旋體、病毒1.支原體：“油煎蛋樣”菌落2.

22、沙眼衣原體：G-，專性細胞內(nèi)寄生細胞外：原體（感染型）細胞內(nèi)：始體（無感染型）發(fā)育周期：原體中間體始體原體包涵體：在易感細胞內(nèi)含繁殖的始體和子代原體的空泡（鏡下為大小不等的顆粒）3.立克次體：專性活細胞內(nèi)寄生，在胞漿中分散存在4.螺旋體：（1）梅毒螺旋體：鍍銀染色，末端平直，尚不能在無生命的人工培養(yǎng)基上生長繁殖（密螺旋體，8到14個螺旋）（2）鉤端螺旋體：鍍銀染色，末端鉤狀（3）回歸熱螺旋體：外周血涂片Giemsa染色，疏螺旋體（疏螺旋體，3到10個稀疏螺旋）5.病毒培養(yǎng)的方法：病毒動物接種法病毒雞胚尿囊腔接種法病毒組織培養(yǎng)法病毒細胞培養(yǎng)6.CPE（致細胞病變作用）許多病毒在細胞內(nèi)復(fù)制增殖中，

23、由于干擾細胞的正常代謝和損傷細胞結(jié)構(gòu)，引起細胞形態(tài)的變化，如細胞皺縮，出現(xiàn)空泡、斑塊、融合、變圓或壞死等現(xiàn)象，在光鏡下可見。7.內(nèi)基小體（Negribody）狂犬病毒在易感動物或人的中樞神經(jīng)細胞中增殖時，可在細胞質(zhì)內(nèi)形成嗜酸性，圓形或橢圓形的包涵體。鏡下觀察：Giemsa染色，在神經(jīng)元細胞核附近有均勻一致的紅色團塊（看不到顆粒），是病毒復(fù)制的證據(jù)，是病毒與神經(jīng)元相互作用的結(jié)果。8.小鼠腦內(nèi)接種腦炎病毒，乙肝病毒：鴨。HIV：猴9.病毒的雞胚接種：不能注射入胚點（頭部）與大血管，可注入卵黃囊，羊膜腔，尿囊10.病毒雞胚尿囊腔接種培養(yǎng)法材料：910日齡雞胚，新城雞瘟病毒方法：接種（1）照蛋燈下劃出

24、氣室、接種點（避開大血管）（2）碘酒、酒精標記處消毒（3）打孔器打孔：先氣室后接種部位（防止疝的發(fā)生）（4）注射器60度角插入雞胚尿囊23毫米，注入病毒0.2毫升（5）石蠟封口：先接種部位后氣室（6）雞胚上標記：周，上/下午，室，姓名（7）37度孵箱培養(yǎng)，72小時收獲消化道寄生吸蟲和線蟲線蟲：似蚓蛔線蟲（蛔蟲）十二指腸鉤口線蟲，美洲板口線蟲（鉤蟲）都不需要中間宿主，為土源性線蟲毛首鞭形線蟲（鞭蟲）蠕形住腸線蟲（蟯蟲）吸蟲：布氏姜片吸蟲1.線蟲概述：形態(tài)：雌雄異體（雌大雄?。﹫A柱長條形，不分節(jié)有原體腔或假體腔，內(nèi)有體液消化系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)發(fā)達（管狀結(jié)構(gòu)），雌性為雙管型，雄性為單管型生活史：蟲卵幼蟲

25、成蟲（蛻皮為幼蟲最重要特征，一般4次）直接發(fā)育型（腸道線蟲）和間接發(fā)育型（組織內(nèi)寄生線蟲）2.蛔蟲生活史：受精卵排出后發(fā)育成感染期卵，經(jīng)口進入小腸，移行至肺后再到小腸發(fā)育為成蟲（1）成蟲：活：淡紅色或微黃色。死：灰白色雌蟲雄蟲大小尾端鈍圓尾部向腹面卷曲有交合刺1對，鐮刀狀特點：頭頂端有三叉形口孔，周圍為3個唇瓣，呈品字形（2）受精卵與未受精卵的比較鑒別點受精卵未受精卵形狀寬橢圓形長橢圓形大小稍?。ǜ弑剁R）稍大（高倍鏡）顏色通常被膽汁染成棕黃色卵殼受精膜殼質(zhì)層蛔甙層表面為一層凹凸不平的蛋白質(zhì)膜（脫去蛋白膜后，卵殼無色透明）薄無薄內(nèi)容受精卵細胞兩端與卵殼間形成新月形空隙大小不等的屈光顆粒生活史：（

26、1）感染階段：感染性蛔蟲卵（含二期幼蟲的蟲卵）（2）感染途徑與方式：通過污染食物、飲水，經(jīng)手-口途徑感染（3）寄生部位（成蟲）：小腸（4）致病階段：成蟲、幼蟲（5）體外發(fā)育：蟲卵含幼蟲蟲卵卵內(nèi)幼蟲蛻皮1次含二期幼蟲的蟲卵（6）體內(nèi)移行：口小腸門靜脈肝臟右心肺臟（蛻皮2次）氣管咽食管胃小腸（第4次蛻皮）2.鉤蟲生活史：蟲卵第一期桿狀蚴第二期桿狀蚴感染期絲狀蚴（向溫向濕性）主要的感染途徑：經(jīng)皮膚移行過程：先經(jīng)毛細血管或淋巴管到右心肺，再到小腸兩種成蟲的鑒別（由于兩種鉤蟲的結(jié)構(gòu)相似，因此不能根據(jù)蟲卵鑒定蟲種）鑒別點十二指腸鉤蟲美洲鉤蟲大小較大較小體形呈C形呈S形口囊2對鉤齒1對板齒交合傘略圓，背輻肋

27、2、3分支略呈扇形，背輻肋2、2分支交合刺2根，末端分開一根末端形成倒鉤，與另一根末端合并鉤蟲蟲卵橢圓形；殼薄，無色透明；內(nèi)含24個卵細胞；卵殼與卵細胞之間有明顯的空隙（與脫去蛋白質(zhì)膜的蛔蟲卵進行鑒別）3.蟯蟲蟯蟲特殊的地方：多盲腸寄生；雌雄蟲交配后，雄蟲會死亡產(chǎn)卵部位：在腸外，肛周產(chǎn)卵蟯蟲卵不需要在土壤中孵化，而是在肛周，且孵化時間短（6h）兒童聚集處易發(fā)可以通過呼吸道吸入感染（蟯蟲卵輕，可以在空氣中漂?。┏上x：細小，乳白色，線頭狀蟲卵：略呈橢圓形，一側(cè)較平，一側(cè)稍凸，柿核狀；無色透明；卵殼厚；卵內(nèi)含有一個發(fā)育至蝌蚪期的胚4.鞭蟲（簡單）雌蟲：尾鈍圓雄蟲：尾卷曲成蟲的蟲體都是前細后粗，似馬鞭

28、蟲卵的形態(tài)：腰鼓狀，黃褐色，兩端各有一個透明栓，內(nèi)含一個卵細胞5.布氏姜片吸蟲布氏姜片吸蟲：雌雄同體生活史：成蟲寄生于小腸，蟲卵（在水中發(fā)育），毛蚴，經(jīng)中間宿主扁卷螺發(fā)育為胞蚴，母雷蚴，子雷蚴，尾蚴，在水生植物媒介（菱角，荸薺）上形成囊蚴（感染階段）成蟲不需要在鏡下觀察，肉眼觀察即可（最大吸蟲）主要觀察的結(jié)構(gòu)有：口吸盤，腹吸盤，腸支，子宮卵巢，睪丸（前后排列高度分支狀）蟲卵：最大的蠕蟲卵；橢圓形；淡黃色；卵殼薄而均勻，卵蓋小，不明顯；飽滿，內(nèi)含卵細胞1個，卵黃細胞2030個消化道寄生原蟲和絳蟲1.溶組織內(nèi)阿米巴致病：在結(jié)腸內(nèi)會導(dǎo)致阿米巴結(jié)腸炎（阿米巴痢疾），在結(jié)腸外會導(dǎo)致腸外膿腫（肝，肺腦）生

29、活史：好發(fā)部位：常見盲腸、升結(jié)腸，次為乙狀結(jié)腸和直腸感染期：四核包囊（成熟包囊）感染方式：經(jīng)口感染，吃入四核包囊污染的食物、水致病階段：滋養(yǎng)體滋養(yǎng)體和包囊未成熟包囊：存在成熟包囊沒有的結(jié)構(gòu)，糖原泡和擬染色體成熟包囊：有4個圓形核，囊壁厚病原學診斷成形便碘液染色法查包囊，確定帶蟲者膿血便生理鹽水涂片法查滋養(yǎng)體，注意保溫，確診患者鐵蘇木素染色法查滋養(yǎng)體和包囊體外培養(yǎng)查滋養(yǎng)體（溶組織內(nèi)阿米巴和迪斯帕內(nèi)阿米巴的包囊極其相似，在鏡下難以區(qū)分）2.結(jié)腸內(nèi)阿米巴為腔道共棲原蟲，一般不侵入人體組織，沒有臨床癥狀結(jié)腸內(nèi)阿米巴與溶組織內(nèi)阿米巴的區(qū)別比較溶組織內(nèi)阿米巴結(jié)腸內(nèi)阿米巴外形圓球形圓球形大小小大核數(shù)14個1

30、8個擬染色體棍棒狀，兩端鈍圓草束狀或碎片狀3.藍氏賈第鞭毛蟲病致?。簳?dǎo)致“旅行者腹瀉”生活史：演變過程：包囊（四核），滋養(yǎng)體，包囊感染期：包囊寄生部位：十二指腸或上端小腸滋養(yǎng)體和包囊的形態(tài)滋養(yǎng)體：好辨認包囊：有4個細胞核和軸絲病原學診斷：糞便檢查：生理鹽水涂片法查滋養(yǎng)體碘液涂片法查包囊（包囊形成有間歇性特點，需隔日檢查一次，連續(xù)3次以上）4.隱孢子蟲生活史：3個階段：裂體增殖（無性繁殖）、配子增殖、孢子增殖（有性繁殖）經(jīng)過的階段：卵囊，子孢子，滋養(yǎng)體，裂殖體，配子體，配子，合子寄生部位：小腸上皮細胞的刷狀緣納蟲空泡內(nèi)感染階段：卵囊厚壁卵囊和薄壁卵囊：厚壁卵囊：隨宿主糞便排出體外薄壁卵囊：子孢

31、子逸出，造成宿主自身體內(nèi)重復(fù)感染形態(tài)：卵囊呈圓形或橢圓形，直徑4-6m成熟卵囊含4個裸露的子孢子和一團由顆粒組成的殘留體，子孢子月芽形，含1個核（抗酸染色）5.豬肉絳蟲和牛肉絳蟲豬帯絳蟲牛帯絳蟲寄生部位成蟲：小腸上端囊尾蚴：腦，眼，皮下及肌肉小腸終宿主人人中間宿主豬，人牛，羊感染階段囊尾蚴，蟲卵（成蟲和囊尾蚴致?。┠椅豺剩ǔ上x致病，囊尾蚴不致病）囊尾蚴感染方式人吃進生的或半生的含囊尾蚴的豬肉人吃進生的或半生的含囊尾蚴的牛肉蟲卵感染方式異體感染自體外感染自體內(nèi)感染不感染人體形態(tài)：成蟲：乳白色、長而扁、帶狀、分節(jié)，雌雄同體由頭節(jié)、頸節(jié)和體節(jié)（幼節(jié)、成節(jié)、孕節(jié)）三部分組成蟲卵：六鉤蚴囊尾蚴兩種絳蟲形

32、態(tài)的鑒別豬帯絳蟲牛帯絳蟲體長長更長節(jié)片數(shù)目多更多頭節(jié)有頂突和小鉤無頂突和小鉤成節(jié)卵巢3葉卵巢2葉孕節(jié)子宮分支每側(cè)7-13支每側(cè)約15-30支囊尾蚴寄生人體,引起囊蟲病不寄生人體消化道（胃和腸）及肝的組織學和病理學一胃胃的四層結(jié)構(gòu)：粘膜（上皮層，固有層，黏膜肌層）粘膜下層肌層外膜（1）粘膜：縱行的皺襞胃小區(qū)胃小凹上皮：單層柱狀上皮（表面粘液細胞為主）功能：細胞間緊密連接，分泌含高濃度的HCO3的不可溶性粘液固有層：胃底腺（最重要）賁門腺幽門腺胃底腺的主要細胞：主細胞壁細胞頸粘液細胞內(nèi)分泌細胞（主細胞與壁細胞的區(qū)分）主細胞壁細胞形狀柱狀大，圓或圓錐形染色性弱嗜堿性明顯的嗜酸性功能分泌胃蛋白酶原分泌

33、胃酸，內(nèi)因子壁細胞：分泌小管，微管泡系統(tǒng)，豐富的線粒體幽門腺：還有G細胞，產(chǎn)生胃泌素粘膜肌層（2）粘膜下層：血管和結(jié)締組織（3）肌層：內(nèi)斜，中環(huán)，外縱環(huán)形肌在賁門和幽門部增厚，形成賁門、幽門括約?。?）外膜：漿膜二小腸小腸的四層結(jié)構(gòu)：粘膜粘膜下層肌層外膜（1）粘膜：環(huán)形的皺襞腸絨毛微絨毛（形成紋狀緣）腸絨毛（十二指腸：葉狀空腸：長指狀回腸：錐體形）上皮：單層柱狀上皮：主要有吸收細胞、杯狀細胞、少量的內(nèi)分泌細胞（小腸腺上皮還有Paneth細胞干細胞）吸收細胞：高柱狀消化吸收分泌IgA和腸致活酶（十二指腸和空腸的上端）杯狀細胞：分泌粘液，從十二指腸至回腸末端逐漸增多Paneth細胞：分泌防御素（隱

34、窩素）、溶菌酶形態(tài)特點：位于小腸腺的底部，三五成群，嗜酸性內(nèi)分泌細胞固有層：大量的小腸腺豐富的淋巴細胞，漿細胞，巨噬細胞，嗜酸性粒細胞，肥大細胞，平滑肌細胞中央乳糜管淋巴小結(jié)（十二指腸和空腸：孤立?；啬c：集合）M細胞：位置：在腸集合淋巴小結(jié)處，局部粘膜向腸腔呈圓頂狀突起，無絨毛和小腸腺，此部位上皮內(nèi)有散在的微褶皺細胞即M細胞形態(tài)：基底面質(zhì)膜內(nèi)陷形成較大的穹窿狀凹腔，內(nèi)含多個淋巴細胞功能：攝取腸腔抗原，發(fā)揮免疫功能粘膜肌層：內(nèi)環(huán)外縱（2）粘膜下層：較多的血管和淋巴管（十二指腸的粘膜下層還有十二指腸腺，可以分泌粘稠的堿性粘液和表皮生長因子）（3）肌層：內(nèi)環(huán)外縱（4）外膜：部分十二指腸為纖維膜（腹膜

35、外位器官），余均為漿膜（腹膜內(nèi)位器官）三大腸（盲腸、結(jié)腸、直腸）（與小腸相比較）（1）粘膜（與大腸相比較）小腸大腸粘膜有皺襞有絨毛形成紋狀緣有皺襞無絨毛不形成紋狀緣上皮單層柱狀上皮主要是吸收細胞，杯狀細胞單層柱狀上皮主要是吸收細胞，杯狀細胞固有層小腸腺有Paneth細胞沒有Paneth細胞大腸腺的特點：長、直、多，粗大量的杯狀細胞（分泌粘液，保護粘膜）粘膜肌層相同（2）粘膜下層（3）肌層：內(nèi)環(huán)外縱（增厚分別形成結(jié)腸袋和結(jié)腸帶）（4）外膜：漿膜：盲腸、橫結(jié)腸、乙狀結(jié)腸升降結(jié)腸前壁直腸上1/3段大部，中1/3段的前壁其余都為纖維膜四肝1.肝小葉（人的肝小葉分界不清）中央靜脈+肝細胞（肝板，肝索）+

36、肝血竇+膽小管2.門管區(qū)小葉間動脈+小葉間靜脈+小葉間膽管小葉間膽管與血管的區(qū)別：膽管：內(nèi)皮細胞為單層柱狀或立方形血管：靜脈腔大壁薄，動脈壁厚（多層）血流的方向：從小葉的周邊到中央靜脈五病理切片1.胃潰瘍分為四層：滲出層壞死層肉芽組織瘢痕層滲出層在切片上不易見到；壞死層沒有特定的結(jié)構(gòu)；肉芽組織有新生血管，炎細胞，纖維母細胞2.慢性萎縮性胃炎：粘膜萎縮腺體減少，化生淋巴組織3.慢性肝炎：（可見肝細胞變性壞死的多種表現(xiàn)）（1）肝細胞水腫：胞漿疏松化（2）氣球樣變：胞漿幾乎完全透明（3）毛玻璃樣肝細胞（4）嗜酸性變、嗜酸性壞死（嗜酸性小體）（5）炎細胞浸潤（單核細胞，Kupffer細胞，漿細胞等）（

37、6）壞死帶4.肝硬化（1）假小葉的形成，肝細胞團（2）中央靜脈偏位或缺如（3）炎癥細胞5.急性重型肝炎（發(fā)病快，死亡快）（1）肝體積迅速減小（2）大面積壞死（大塊壞死），但網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)還好（3）再生肝結(jié)節(jié)的特點：肝細胞有雙核，但很少不足以代償壞死的肝細胞（殘留的活的肝細胞很少有雙核）（4）有膽汁的淤積以及血竇的擴張和充血（急性黃色肝萎縮、急性紅色肝萎縮）6.亞急性重型肝炎（1）有明顯的壞死（亞大塊壞死）（2）有明顯的結(jié)節(jié)狀再生，有一定的代償能力。（與急性重型肝炎相區(qū)分）（3）有膽汁的淤積7.肝癌肝小葉的特征：形態(tài)不一，存在瘤巨細胞（雙核或四核）六大體標本1.食管癌（蕈傘狀食管癌、潰瘍型癌）2.胃潰

38、瘍（胃潰瘍良惡性的區(qū)分即潰瘍型胃癌與胃潰瘍的區(qū)分，病理書P244）十二指腸潰瘍小于1cm3.潰瘍型胃癌革囊胃（胃腔小，會導(dǎo)致反復(fù)嘔吐）4.直腸癌，與結(jié)腸癌相似，菜花狀惡性高潰瘍型結(jié)腸癌縮窄型結(jié)腸癌（常會導(dǎo)致腸梗阻）5.急性重型肝炎（體積明顯縮小，尤其是在左葉，有急性黃色肝萎縮和急性紅色肝萎縮，若存活，可恢復(fù)正常）6.亞急性重型肝炎（表面不光滑，有許多的結(jié)節(jié)，不能恢復(fù)正常，可能發(fā)展為壞死后肝硬化）7.小結(jié)節(jié)型肝硬化不完全分隔型肝硬化8.食管靜脈曲張（肝硬化的并發(fā)癥之一）9.小肝癌（注意小肝癌的定義，病理書P261，通常伴有肝硬化）巨塊型肝癌彌漫型肝癌（難與肝硬化區(qū)分，可見瘤栓，是肝內(nèi)轉(zhuǎn)移的表現(xiàn)）

39、泌尿生殖系統(tǒng)的組織學和病理學一.腎臟實質(zhì)性臟器：被膜+皮質(zhì)+髓質(zhì)被膜：紅染，薄皮質(zhì)：線條樣的結(jié)構(gòu)為髓放線，髓放線之間為皮質(zhì)迷路，之中有腎單位髓質(zhì)：有許多管血管球：細胞聚集成團，包括內(nèi)皮細胞，系膜細胞，足細胞腎小體（入球微動脈粗，出球微動脈細）腎單位：腎小囊：囊腔中有原尿，分臟層（足細胞）和壁層（單層扁平）腎小管如何在切片上區(qū)分近端小管和遠端小管？近端小管：細胞的胞質(zhì)嗜酸性，染色較深，界限不清，內(nèi)表面的刷狀緣在制片時被破壞，比較毛糙遠端小管：胞漿的染色較近端小管淡，界限較清，管腔大球旁細胞（由入球微動脈管壁中膜的平滑肌細胞轉(zhuǎn)變而成）球旁復(fù)合體致密斑（遠端小管靠近腎小體一側(cè)，細胞高柱狀，核橢圓，排

40、列緊密）球外系膜細胞（位于入球微動脈、出球微動脈和致密斑三者之間）二.睪丸實質(zhì)性臟器：被膜（白膜，厚）生精小管的各個不同的切面生精上皮：生精細胞+支持細胞生精小管界膜，生精小管之間為間質(zhì)（間質(zhì)中有間質(zhì)細胞，分泌雄激素）生精細胞：精原細胞+初級精母細胞+次級精母細胞+精子細胞+精子（由于次級精母細胞存在的時間比較短，因此在切片上一般是看不見的）精原細胞：緊靠界膜初級精母細胞：存在的時間比較長，粗線期常見，細胞體積最大（核大）染色質(zhì)纏繞形成毛球狀精子細胞：核最小，圓形，致密，染色深精子：變形中的精子：長形，延伸拉長，核高度濃縮完成變形的精子：小，呈梭形，頭部在支持細胞的胞質(zhì)中（殘余體被支持細胞所吞

41、噬）精子的尾部在管腔內(nèi)纏繞成絮狀支持細胞：高，但是在由于制片的原因，在切片中不見其胞質(zhì)，根據(jù)細胞核來進行判斷染色與生精細胞相比稍淡，并非規(guī)則的圓形，核仁明顯（能合成蛋白的細胞核仁明顯）支持細胞內(nèi)鑲嵌著各級生精細胞間質(zhì)細胞：核正圓，屬于內(nèi)分泌細胞，分泌類固醇激素，因此胞質(zhì)嗜酸性在電鏡下可以看見脂滴和線粒體三.卵巢實質(zhì)性臟器：被膜（?。?皮質(zhì)（不同時期的卵泡）+髓質(zhì)（結(jié)締組織和血管神經(jīng)）切片中成熟的卵泡不易見到卵泡的共同結(jié)構(gòu)：卵母細胞（一個）+卵泡細胞（很多）原始卵泡：靠被膜的下方，體積小。初級卵母細胞占了絕大部分，卵泡細胞小，單層扁平初級卵泡：在較深層，卵母細胞的體積增大卵泡細胞由扁平變?yōu)橹鶢?，單層變?yōu)槎鄬?，并出現(xiàn)透明帶次級卵泡：出現(xiàn)了卵泡腔（腔中為卵泡液）形成卵丘（透明帶周圍為放射冠，高柱狀，其余為顆粒層）由于切片時可能沒有切到卵丘而呈現(xiàn)空泡狀閉鎖卵泡：卵泡在較早階段退化：卵母細胞和卵泡細胞都退化引起透明帶塌陷，皺縮在一起，染色紅卵泡在較晚階段退化：卵母細胞退化，卵泡細胞層數(shù)多，卵泡性狀可維持一段時間與黃體類似，稱為假黃體（有透明帶，黃體則沒有）也有可能沒有切到透明帶而類似黃體四.子宮管腔樣臟