PCR檢測原理練習(xí)題

1、PCR檢測原理練習(xí)題1、PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA,需要的條件是(A)目的基因引物四種脫氧核苷酸DNA聚合酶等mRNA核糖體(正確答案)2、PCR的基本反應(yīng)過程包括（）變性、退火、延伸(正確答案)變性、延伸、退火退火、變性、延伸延伸、變性、退火3、在實(shí)際工作中，基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室污染類型包括（）A、擴(kuò)增產(chǎn)物的污染B、天然基因組DNA的污染C、試劑污染和標(biāo)本間交叉污染D、A、B、C都可能(正確答案)4、以下哪種物質(zhì)在PCR反應(yīng)中不需要（）TaqDNA聚合酶dNTPs也就是四種脫氧核苷酸DNA母鏈RNA酶(正確答案)5、PCR過程中，經(jīng)過n個(gè)循環(huán)的擴(kuò)增，拷貝數(shù)將增加（）n2nn二次方2的n次方(正確答案)6

2、、下列關(guān)于DNA復(fù)制的敘述，正確的是()DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA，只能從5端延伸DNA鏈DNA復(fù)制不需要引物引物與DNA母鏈通過堿基互補(bǔ)配對進(jìn)行結(jié)合(正確答案)DNA的合成方向總是從子鏈的3端向5端延伸7、PCR過程與細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過程相比，主要有兩點(diǎn)不同，它們是()PCR過程需要的引物是人工合成的單鏈DNAPCR過程不需要DNA聚合酶PCR過程中DNA的解旋不依靠解旋酶，而是通過對反應(yīng)溫度的控制來實(shí)現(xiàn)的PCR過程中，DNA不需要解旋，直接以雙鏈DNA為模板進(jìn)行復(fù)制(正確答案)8若要檢測一個(gè)人是否感染了艾滋病病毒，你認(rèn)為可以用PCR擴(kuò)增血液中的（）A白細(xì)胞DNAB病毒蛋白質(zhì)C血漿

3、抗體D病毒核酸(正確答案)9、TaqDNA聚合酶酶促反應(yīng)最快最適溫度為（）攝氏度A37B5055C7075(正確答案)D808510、PCR技術(shù)最突出的優(yōu)點(diǎn)是（）A、原理簡單B、原料易找C、TaqDNA聚合酶有耐熱性D、快速、高效、靈活、易于操作(正確答案)11、做PCR使用的微量離心管、槍頭、緩沖液及蒸餾水使用前必須進(jìn)行的關(guān)鍵步驟是（）A、反復(fù)洗滌B、不怕外源DNA污染C、高壓滅菌(正確答案)D、在20儲存12、下列有關(guān)PCR反應(yīng)的敘述，正確的是（）APCR反應(yīng)所需要的引物是RNABPCR反應(yīng)所需要的材料是核糖核苷酸CPCR反應(yīng)所需要的酶在60會變性DPCR反應(yīng)需要在一定的緩沖溶液中進(jìn)行(正

4、確答案)答案解析：PCR反應(yīng)需要的引物是DNA，反應(yīng)所需要的材料是脫氧核苷酸，PCR所需要的酶是耐高溫的，在60不會變性。13、PCR是引物、模版和4種脫氧核糖核苷酸存在的條件下依賴于DNA聚合酶的酶促反應(yīng)，其特異性決定因素為（）A模版B引物(正確答案)CdNTPD鎂離子答案解析：PCR技術(shù)中，第一次循環(huán)產(chǎn)生兩個(gè)DNA分子，每個(gè)DNA分子只有一條鏈具有引物。第二次循環(huán)產(chǎn)生四個(gè)DNA分子，其中兩個(gè)DNA分子只有一條鏈具有引物，另兩個(gè)DNA分子兩條鏈都具有引物。14、PCR引物設(shè)計(jì)原則C+G為（）A2030B3040C4060(正確答案)D6080答案解析：PCR擴(kuò)增產(chǎn)物可分為長產(chǎn)物片段和短產(chǎn)物片

5、段兩部分。短產(chǎn)物片段的長度嚴(yán)格地限制在兩個(gè)引物鏈之間，是需要擴(kuò)增的特定片段。進(jìn)入第二輪循環(huán)后，引物除與原始模板結(jié)合外，還要同新合成的鏈(即“長產(chǎn)物片段”)結(jié)合，引物在與新鏈結(jié)合時(shí)，由于新鏈模板的一端序列是固定的，這就等于這次延伸的子鏈片段被固定了終點(diǎn)，保證了新片段的起點(diǎn)和終點(diǎn)都限定于引物擴(kuò)增序列以內(nèi)，形成長短一致的“短產(chǎn)物片段”。15、DNA檢測技術(shù)可應(yīng)用于親子鑒定、遺傳病檢測等領(lǐng)域。DNA檢測離不開對樣品DNA的PCR擴(kuò)增。不同樣品DNA的擴(kuò)增過程或條件不同的是（）A引物(正確答案)BDNA聚合酶C四種脫氧核苷酸D預(yù)變性的溫度答案解析：不同的樣品DNA有不同的核苷酸序列，由于引物能與模板DN

6、A(樣品DNA)按照堿基互補(bǔ)配對原則結(jié)合，因此不同樣品DNA所需的引物有不同的核苷酸序列。16、DNA的合成方向總是_延伸（）A從DNA分子的左端向右端B從DNA分子的右端向左端C從子鏈的5端向3端(正確答案)D從子鏈的3端向5端答案解析：DNA分子的合成方向，也就是DNA聚合酶的移動(dòng)延伸方向，應(yīng)該為C項(xiàng)所述。17、PCR反應(yīng)的最大特點(diǎn)是具有較大擴(kuò)增能力與極高的靈敏性，但令人頭痛的問題是易污染，極其微量的污染即可造成假陽性的產(chǎn)生。防止污染的辦法不包括（）。A將樣品的處理、配制PCR反應(yīng)液、PCR循環(huán)擴(kuò)增及PCR產(chǎn)物的鑒定等步驟分區(qū)或分室進(jìn)行B吸樣槍吸樣要慢，吸樣時(shí)盡量一次性完成，槍頭小套、小離

7、心管應(yīng)一次性使用，以免交叉污染C所有的PCR試劑都應(yīng)放置于大瓶分裝，以減少重復(fù)加樣次數(shù)，避免污染機(jī)會(正確答案)DPCR試劑、PCR反應(yīng)液應(yīng)與樣品及PCR產(chǎn)物分開保存，不應(yīng)放于同一冰盒或同一冰箱答案解析：所有的PCR試劑都應(yīng)放置于小瓶分裝，一次性用完，避免因多次使用造成污染。18、PCR般要經(jīng)過三十多次循環(huán)，從第二輪循環(huán)開始，上一次循環(huán)的產(chǎn)物也作為模板參與反應(yīng)，下列相關(guān)敘述，正確的是（）A.由引物延伸而成的DNA單鏈作模板時(shí)，仍與引物結(jié)合進(jìn)行DNA子鏈的延伸B.由引物延伸而成的DNA單鏈作模板時(shí)，無需與引物結(jié)合，在酶的作用下從頭合成子鏈C.1個(gè)DNA片段經(jīng)過5次循環(huán)，會得到32個(gè)相同的DNA片段(正確答案)D.1個(gè)DNA片段作為模板，經(jīng)過2次循環(huán)，含引物的DNA單鏈占總鏈的比值為1/4答案解析：由引物延伸而成的DNA單鏈作模板時(shí)，與它互補(bǔ)的子鏈應(yīng)從另一端開始合成，即與引物結(jié)合延伸DNA子鏈，A、B錯(cuò)誤；經(jīng)過5次循環(huán)，DNA復(fù)制了5次，可以得到的DNA分子數(shù)是25=32個(gè)，C正確；1個(gè)DNA片段作為模板，經(jīng)過2次循環(huán)，會形成4個(gè)DNA片段，8條鏈，其中含有原始模板鏈(不含引物的)2條，另外6條鏈中含有引物的是3條，含有引物的是3條，即含引物的DNA單鏈占總鏈的比值為3/8，D錯(cuò)誤。