卵巢癌組織中尿激酶型纖溶酶原激活物與骨橋蛋白表達的臨床意義

1、卵巢癌組織中尿激酶型纖溶酶原激活物與骨橋蛋白表達的臨床意義【摘要】 目的 探討尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)和骨橋蛋白(osteopontin，OPN)在卵巢癌組織中的表達及其與卵巢癌的臨床病理特征的關系。方法 采用免疫組織化學法檢測uPA、OPN在卵巢癌組織以及卵巢良性腫瘤組織及正常卵巢組織中的表達。結(jié)果 uPA、OPN 在卵巢癌中的陽性表達率分別為59.70%和80.59%，uPA、OPN在卵巢癌組織中的表達與卵巢良性腫瘤、正常卵巢組織中的表達比較均有顯著性差異(P0.05)。卵巢癌組織中uPA和OPN的表達均與腫瘤臨床分期及病理分化程度有關，而與卵巢癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關。OPN與uPA的表

2、達呈顯著正相關(P0.05)。結(jié)論 OPN和uPA可能在卵巢癌的發(fā)生、進展中起重要作用，聯(lián)合檢測OPN、uPA可作為判斷卵巢癌患者預后和術(shù)后復發(fā)的重要指標。 【關鍵詞】 尿激酶型纖溶酶原激活物;骨橋蛋白;卵巢腫瘤惡性腫瘤的浸潤、轉(zhuǎn)移是個復雜的過程，包括腫瘤細胞的增殖、從原發(fā)部位脫落、黏附繼發(fā)部位、降解基質(zhì)、新生血管形成、轉(zhuǎn)移灶形成等。研究表明，尿激酶型纖溶酶原激活劑(uPA) 是一種絲氨酸蛋白酶，對細胞的遷移和腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移起著重要作用，其活性與腫瘤的惡性生物學行為密切相關1，2;而骨橋蛋白(osteopontin，OPN)是近年來發(fā)現(xiàn)的一種糖磷酸化蛋白，是一種與轉(zhuǎn)移相關的蛋白，能夠促進腫瘤組

3、織細胞的生存、增殖和遷移，參與腫瘤組織中毛細血管床的形成，在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮著重要作用35。本研究觀察卵巢腫瘤中uPA和OPN的表達，探討其與臨床病理特征的關系。1 材料與方法1.1 一般資料 選取卵巢癌患者的癌組織標本67例，年齡3371歲，平均(43.410.2)歲。其中黏液性囊腺癌28例，漿液性囊腺癌39例;按國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO，2000年)臨床分期期14例，期21例，期24例，期8例;高分化14例，中分化22例，低分化31例。所有標本均經(jīng)病理證實，且均未經(jīng)放療、化療或其他治療。同時選取卵巢良性腫瘤23例，正常卵巢組織20例。1.2 方法 標本均在癌灶中央常規(guī)取材，

4、福爾馬林固定，石蠟包埋，4 m厚連續(xù)切片4張，進行HE染色及免疫組化研究。兔抗人OPN多克隆抗體購自Neomarkers公司，兔抗人uPA多克隆抗體及SP免疫組化試劑盒購自武漢博士德生物技術(shù)有限公司，實驗操作按說明書進行。抗OPN和抗uPA按1100和150稀釋，每批染色均用已證實的OPN和uPA染色陽性乳癌切片作陽性對照，同時用PBS替代一抗作陰性對照。1.3 判定標準 采用低倍鏡和高倍鏡觀察切片。陽性反應判定：按切片中顯色癌細胞數(shù)比例計分：0分，無細胞顯色;1分，顯色細胞占細胞總數(shù)3分記為陽性，3分記為陰性。1.4 統(tǒng)計學處理 采用SPSS11.0統(tǒng)計軟件進行檢驗。2 結(jié) 果2.1 uPA

5、和OPN在不同卵巢組織中的表達及其相關性分析 見表1。OPN蛋白陽性顆粒主要位于腫瘤細胞的胞漿內(nèi)，uPA蛋白則主要定位于細胞膜或胞漿中，陽性物質(zhì)為黃棕色顆粒狀。uPA、OPN在卵巢癌中的陽性表達率分別為59.70%和80.59%，uPA、OPN在卵巢癌組織中的表達與卵巢良性腫瘤、正常卵巢組織中的表達比較均有顯著性差異(P0.05)。而OPN、uPA在卵巢漿液性囊腺癌及黏液性囊腺癌中的陽性表達率無統(tǒng)計學差異。表1 uPA及OPN蛋白在不同類型的卵巢組織中的表達與卵巢癌比較：1)P0.052.2 卵巢癌組織中uPA與OPN表達的關聯(lián)性分析 見表2。卵巢上皮癌中37例OPN與uPA同時表達，10例不

6、表達，OPN與uPA表達之間存在正相關(P0.05)。表2 卵巢上皮癌組織中OPN與uPA表達的關聯(lián)性分析2.3 uPA、OPN在卵巢癌中的表達與臨床病理特征的關系 見表3。uPA在組織學低分化組的表達明顯高于高中分化組(P0.05);但與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關，晚期(期)uPA表達的表達率高于早期(I期)(P0.05)。OPN在組織學低分化組的表達明顯高于高中分化組(P0.05);但與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關，OPN表達在臨床晚期(期)高于早期(I期)(P0.05)。表3 OPN、uPA在卵巢癌中的表達與臨床病理特征的關系n(%)與低分化比較：1)P0.05，與期比較：2)P0.053 討 論惡性腫瘤轉(zhuǎn)移過程

7、包括一系列相關步驟，其中以細胞外基質(zhì)及基底膜的降解為最關鍵，它需要一系列蛋白溶解酶參與1，2。uPA介導的纖溶酶原激活系統(tǒng)參與細胞的分化、遷移、組織重建、基質(zhì)降解等多種生理病理過程。腫瘤組織中uPA能特異激活纖溶酶原轉(zhuǎn)化為纖溶酶，降解腫瘤細胞外基質(zhì)和基底膜成分(纖維蛋白、纖維連接蛋白、蛋白多糖和Laminin)，使腫瘤細胞易發(fā)生侵襲、轉(zhuǎn)移1，2。本研究顯示，uPA在卵巢惡性腫瘤中的表達率均明顯高于良性和正常組織，良性組和正常組間無明顯差異，而且uPA在卵巢癌低分化組表達率程度明顯高于高中分化組，晚期(期)uPA表達的表達率高于早期(期),提示 uPA與卵巢惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展相關。此與已有的研究

8、相符6，7。OPN是一種具有多種生物學功能的分泌性、糖基化的磷酸蛋白，在細胞的黏附與遷移、組織修復、細胞的信號轉(zhuǎn)導中具有重要作用35。OPN廣泛分布于腎臟、甲狀腺、胃腸、乳腺、睪丸、骨、軟骨、子宮、胎盤、白細胞、平滑肌、激活的T細胞、巨噬細胞中，研究發(fā)現(xiàn)，OPN在胃癌、肝癌、肺癌、子宮內(nèi)膜癌、宮頸癌、卵巢癌等原發(fā)性腫瘤及轉(zhuǎn)移瘤組織中高表達，認為OPN的過度表達與腫瘤細胞生長、增殖和侵襲、轉(zhuǎn)移密切相關35。Kim等8研究發(fā)現(xiàn)，健康女性的卵巢上皮組織中OPN的表達水平明顯低于卵巢腫瘤組織;但同時發(fā)現(xiàn)，在漿液性、黏液性、透明細胞性和內(nèi)膜樣卵巢癌患者血清中OPN表達差異無顯著性，說明OPN在卵巢癌中的

9、表達與細胞的組織學類型無關，這與OPN在多數(shù)惡性腫瘤均高表達的現(xiàn)象吻合35。Coppola等5研究表明，在卵巢漿液性乳頭狀囊腺癌組織中表達強度和臨床分期相關。本研究發(fā)現(xiàn)，OPN在卵巢癌組織中的陽性表達明顯高于在卵巢良性腫瘤及正常卵巢組織中的陽性表達，OPN表達與組織學分化程度、臨床分期有關，而與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關。但卵巢漿液性囊腺癌及黏液性囊腺癌中的陽性表達率無統(tǒng)計學差異，提示OPN與卵巢癌腫瘤細胞生長、增殖相關。這與多數(shù)研究相一致3，8，9。Das等10研究發(fā)現(xiàn)，OPN與整合素v3結(jié)合后，通過PI3K/Akt/IKK信號途徑激活NFB，上調(diào)uPA mRNA，并使酶活性增加，從而降解細胞外質(zhì)，促進

10、腫瘤細胞浸潤、轉(zhuǎn)移。本研究顯示，OPN蛋白在卵巢癌中的表達與uPA蛋白一致，且兩者的表達呈正相關，提示二者在卵巢癌浸潤和轉(zhuǎn)移過程中起協(xié)同作用。聯(lián)合檢測OPN和uPA可以一方面探索卵巢癌浸潤和轉(zhuǎn)移的原因，另一方面為卵巢癌臨床治療的研究尋找靶作用點，以期提高腫瘤患者的生存期?！緟⒖嘉墨I】 1 Sidenius N，Blasi F.The urokinase plasminogen activator system in cancer：recent advances and implication for prognosis and therapyJ.Cancer Metastasis Rev，20

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