HIV實(shí)驗(yàn)室生物安全基本要求課件

1、HIV實(shí)驗(yàn)室生物安全基本要求重慶市疾病預(yù)防控制中心張 敏第1頁(yè)，共62頁(yè)。一 實(shí)驗(yàn)室生物安全的概念與范圍實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn)或試驗(yàn)的場(chǎng)所按學(xué)科領(lǐng)域可分為生物學(xué)、化學(xué)和物理實(shí)驗(yàn)室病原微生物實(shí)驗(yàn)室從事傳染性物質(zhì)操作活動(dòng)的實(shí)驗(yàn)室第2頁(yè)，共62頁(yè)。病原微生物實(shí)驗(yàn)室因?yàn)閷?shí)驗(yàn)活動(dòng)的特殊性，其生物安全問(wèn)題越來(lái)越引起人們的重視。病原微生物實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)活動(dòng)操作對(duì)象主要為細(xì)菌、真菌、病毒和寄生蟲等生物因子。其中的大部分生物因子能引起人或動(dòng)物的發(fā)病，有的還具有較強(qiáng)的傳染性。實(shí)驗(yàn)室因?qū)嶒?yàn)活動(dòng)所產(chǎn)生的污水、廢氣和固體廢物，如果不通過(guò)嚴(yán)格的處理或處置，可能引起傳染病的發(fā)生，對(duì)環(huán)境和人體健康造成嚴(yán)重危害第3頁(yè)，共62頁(yè)。 隨著

2、SARS 疫情的暴發(fā)，以及禽流感、O157：H7 大腸桿菌感染、豬鏈球菌感染、甲型H1N1流感等人畜共患病的不斷出現(xiàn)，各國(guó)對(duì)病原微生物的監(jiān)測(cè)越來(lái)越重視，對(duì)病原微生物實(shí)驗(yàn)室的需求越來(lái)越高第4頁(yè)，共62頁(yè)。實(shí)驗(yàn)室生物安全實(shí)驗(yàn)室生物安全條件和狀態(tài)不低于容許水平,可避免實(shí)驗(yàn)室人員、來(lái)訪人員、社區(qū)及環(huán)境受到不可接受的損害，符合相關(guān)法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)等對(duì)實(shí)驗(yàn)室安全責(zé)任的要求。實(shí)驗(yàn)室防護(hù)區(qū) 實(shí)驗(yàn)室的物理分區(qū)，該區(qū)域內(nèi)生物風(fēng)險(xiǎn)相對(duì)較大，需對(duì)實(shí)驗(yàn)室的平面設(shè)計(jì)、圍護(hù)結(jié)構(gòu)的密閉性、氣流，以及人員進(jìn)入、個(gè)體防護(hù)等進(jìn)行控制的區(qū)域。第5頁(yè)，共62頁(yè)。 生物安全實(shí)驗(yàn)室 指從事微生物和生物活性物質(zhì)相關(guān)研究、教學(xué)、檢測(cè)、診斷等活動(dòng)的實(shí)

3、驗(yàn)室。根據(jù)所操作的生物因子的危害程度和采取的防護(hù)措施，將生物安全防護(hù)水平分為4 級(jí)，1級(jí)防護(hù)水平最低，4級(jí)防護(hù)水平最高。以BSL-1、BSL-2、BSL-3和BSL-4表示實(shí)驗(yàn)室的相應(yīng)生物安全防護(hù)水平。第6頁(yè)，共62頁(yè)。第7頁(yè)，共62頁(yè)。第8頁(yè)，共62頁(yè)。生物危險(xiǎn)感染性的致病因子，無(wú)論是直接感染，還是間接地散播到環(huán)境中去，對(duì)人類、動(dòng)物或植物都是一個(gè)現(xiàn)實(shí)的或潛在的危險(xiǎn)。AnimalsHumansPlants第9頁(yè)，共62頁(yè)。實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染發(fā)生的原因傳染來(lái)源：感染性生物因子傳播途徑：徑口、經(jīng)皮膚、經(jīng)呼吸道易感人群：實(shí)驗(yàn)室操作人員及相關(guān)工作人員 生物因子 一切微生物和生物活性物質(zhì)。 實(shí)驗(yàn)相關(guān)感染以吸

4、入氣溶膠最為常見第10頁(yè)，共62頁(yè)。 實(shí)驗(yàn)室感染定義實(shí)驗(yàn)室操作人員出現(xiàn)與實(shí)驗(yàn)室病原微生物相關(guān)的臨床癥狀、體征或者疾病的；實(shí)驗(yàn)室操作人員出現(xiàn)的臨床癥狀、體征或者疾病尚不能排除實(shí)驗(yàn)室感染的；實(shí)驗(yàn)操作不當(dāng)或者其他原因造成非實(shí)驗(yàn)室人員感染或突發(fā)公共衛(wèi)生事件發(fā)生等實(shí)驗(yàn)室病原微生物泄漏的;第11頁(yè)，共62頁(yè)。 病原微生物導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)室感染是實(shí)驗(yàn)室生物安全的最大威脅，實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染大部分是由實(shí)驗(yàn)室工作人員的生物安全意識(shí)不強(qiáng)、人為操作錯(cuò)誤、實(shí)驗(yàn)室技術(shù)欠佳和儀器的錯(cuò)誤使用等原因造成的，所以良好的操作技術(shù)規(guī)范對(duì)于實(shí)驗(yàn)室生物安全至關(guān)重要。第12頁(yè)，共62頁(yè)。病原微生物的分類國(guó)家根據(jù)病原微生物的傳染性、感染后對(duì)個(gè)體或者

5、群體的危害程度，將病原微生物分為四類：第一類：是指能夠引起人類或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國(guó)尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。第二類：是指能夠引起人類或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物。第13頁(yè)，共62頁(yè)。第三類：是指能夠引起人類或者動(dòng)物疾病，但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。第四類：是指在通常情況下不會(huì)引起人類或者動(dòng)物疾病的微生物。 第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。第14頁(yè)，共62頁(yè)。從事病原微生物的操作,都應(yīng)遵循下列基本原則所

6、有操作人員必須經(jīng)過(guò)培訓(xùn)，通過(guò)考核，獲得上崗證書；在開始相關(guān)工作之前，應(yīng)對(duì)所從事的病原微生物及相關(guān)操作進(jìn)行危險(xiǎn)評(píng)估，根據(jù)國(guó)家對(duì)于各種微生物操作的危險(xiǎn)等級(jí)劃分和防護(hù)要求以及危險(xiǎn)評(píng)估的結(jié)果，制定全面、細(xì)致的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程和程序文件，對(duì)于關(guān)鍵的危險(xiǎn)步驟設(shè)計(jì)出可行的防護(hù)措施并對(duì)這些細(xì)節(jié)了然于胸；熟悉各級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行的一般規(guī)則，掌握各種儀器、設(shè)備、裝備的操作步驟和要點(diǎn)，對(duì)于各種可能的危害應(yīng)非常熟悉；應(yīng)掌握各種感染性物質(zhì)操作的一般準(zhǔn)則和技術(shù)要點(diǎn)。生物安全意識(shí)至關(guān)重要第15頁(yè)，共62頁(yè)。生物安全實(shí)驗(yàn)室污染定義 是指生物安全實(shí)驗(yàn)室內(nèi)發(fā)生與實(shí)驗(yàn)活動(dòng)相關(guān)的一切微生物和生物活性物質(zhì)對(duì)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)環(huán)境包括氣體、液體和各

7、種固體表面的污染。 生物安全實(shí)驗(yàn)室污染后果影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定及實(shí)驗(yàn)的科 學(xué)性和可信性 引起實(shí)驗(yàn)室感染或中毒事件 公共突發(fā)衛(wèi)生事件發(fā)生第16頁(yè)，共62頁(yè)。實(shí)驗(yàn)室的生物安全規(guī)范 實(shí)驗(yàn)室的運(yùn)行規(guī)范儀器設(shè)備的使用規(guī)范針對(duì)感染性材料的操作規(guī)范個(gè)人防護(hù)用品的使用規(guī)范 第17頁(yè)，共62頁(yè)。二、HIV檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室相關(guān)生物安全1、范圍 艾滋病實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)和職業(yè)暴露預(yù)防。適用于全國(guó)各級(jí)各類艾滋病實(shí)驗(yàn)室的安全防護(hù)和職業(yè)暴露預(yù)防。2、相關(guān)法律和標(biāo)準(zhǔn)微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則 (WS233-2002)衛(wèi)生部2003年8月1日起實(shí)施實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求 (GB19489-2008)2009年7月1日起實(shí)施第

8、18頁(yè)，共62頁(yè)。 全國(guó)艾滋病檢測(cè)工作管理辦法衛(wèi)疾控發(fā)子2006218號(hào)病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例 國(guó)務(wù)院第424號(hào)令可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定衛(wèi)生部第45號(hào)令醫(yī)務(wù)人員艾滋病病毒職業(yè)暴露防護(hù)工作指導(dǎo)原則(試行) 衛(wèi)生部頒布2004年6月1日起實(shí)施消毒技術(shù)規(guī)范(2008年版) 衛(wèi)生部發(fā)布第19頁(yè)，共62頁(yè)。3、HIV實(shí)驗(yàn)室的生物危害 第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。 人類免疫缺陷病毒（HIV）屬第二類病原微生物，是高致病性病原微生物。第20頁(yè)，共62頁(yè)。實(shí)驗(yàn)室主要生物危害微生物氣溶膠吸入刺傷、割傷皮膚、黏膜污染食入感染的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物咬傷 還有許

9、多不明原因的實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染 第21頁(yè)，共62頁(yè)。 風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估與控制 當(dāng)實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)涉及傳染或潛在傳染性生物因子時(shí)，應(yīng)進(jìn)行生物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估應(yīng)至少包括下列內(nèi)容：生物因子的種類、來(lái)源、傳染性、致病性、變異性、易感性、傳播途徑、潛伏期、在環(huán)境中的穩(wěn)定性、感染劑量、濃度、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、流行病學(xué)資料、預(yù)防和治療方案等。 風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估應(yīng)由適當(dāng)?shù)挠薪?jīng)驗(yàn)的專業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行。第22頁(yè)，共62頁(yè)。 4、 HIV相關(guān)檢測(cè)的生物安全級(jí)別 4.1 HIV抗體檢測(cè)（包括篩查和確證實(shí)驗(yàn)）、抗原檢測(cè)和相關(guān)的免疫學(xué)檢測(cè)應(yīng)在符合級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-2）要求的艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行4.2 HIV分離培養(yǎng)、濃縮、中和試驗(yàn)、細(xì)胞培養(yǎng)及研

10、究工作及其它需要應(yīng)用活病毒的研究工作，應(yīng)在級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-3）中進(jìn)行。 第23頁(yè)，共62頁(yè)。 4.3 HIV核酸提取和檢測(cè)均應(yīng)在符合級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-2）要求的艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。 4.4 HIV病毒株應(yīng)保存在符合級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-3）要求的艾滋病實(shí)驗(yàn)室；HIV陽(yáng)性樣品，包括全血、血清、血槳和其他組織（液）、核酸提取物應(yīng)保存在符合BSL-2要求的艾滋病實(shí)驗(yàn)室。第24頁(yè)，共62頁(yè)。5 生物安全保證措施5.1、建立安全制度 根據(jù)全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范（2009年修訂版）及相關(guān)的法律法規(guī)制訂本實(shí)驗(yàn)室的安全工作制度或安全標(biāo)準(zhǔn)操作程序，每年應(yīng)對(duì)其制度或程序及其實(shí)施情況進(jìn)行檢

11、查和修訂，并有記錄。 第25頁(yè)，共62頁(yè)。 生物安全責(zé)任制，明確實(shí)驗(yàn)室各崗位人員職責(zé)，實(shí)驗(yàn)室主任是實(shí)驗(yàn)室安全的第一責(zé)任人。 準(zhǔn)入制度 人員健康監(jiān)護(hù)制度 安全工作制度 實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)及實(shí)驗(yàn)室的清理和消毒 第26頁(yè)，共62頁(yè)。制定意外事故處理預(yù)案，主要是生物安全意外事故的處理、登記、調(diào)查和報(bào)告制度建立實(shí)驗(yàn)室安全操作行為程序。建立實(shí)驗(yàn)室廢棄物安全處理程序信息安全及保密制度： 與HIV/AIDS檢測(cè)相關(guān)的所有資料均應(yīng)嚴(yán)格保密 第27頁(yè)，共62頁(yè)。5.2 培訓(xùn)和管理 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)進(jìn)行全員安全培訓(xùn)并強(qiáng)化“普遍性防護(hù)原則”安全意識(shí)，所有的血液、未固定的組織和組織液樣品，均應(yīng)視為有潛在的傳染性，都應(yīng)以安全的方式進(jìn)

12、行操作。所有管理和檢測(cè)人員都應(yīng)接受省級(jí)以上艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室主持的安全培訓(xùn)，包括上崗前培訓(xùn)和復(fù)訓(xùn)，并接受管理人員的監(jiān)督。第28頁(yè)，共62頁(yè)。必須對(duì)新上崗人員進(jìn)行安全教育和培訓(xùn)，使他們清楚實(shí)驗(yàn)室工作的潛在危險(xiǎn)，通過(guò)考核等方式確認(rèn)他們具備安全操作的能力后方可單獨(dú)工作。從事HIV的工作人員必須經(jīng)過(guò)生物安全培訓(xùn)并取得相應(yīng)資質(zhì)，在身體健康狀態(tài)良好的情況下開展工作。對(duì)實(shí)驗(yàn)室其他相關(guān)人員，包括清潔人員、運(yùn)輸工、修理工等也要定期進(jìn)行培訓(xùn)，使他們熟悉工作環(huán)境，了解潛在的危害以及相應(yīng)的事故預(yù)防和緊急情況處理措施。第29頁(yè)，共62頁(yè)。實(shí)驗(yàn)室的進(jìn)入建立實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)入制度： 必須對(duì)新調(diào)入人員、外來(lái)合作、進(jìn)修和學(xué)習(xí)的人員進(jìn)行生

13、物安全培訓(xùn)，經(jīng)實(shí)驗(yàn)室主任批準(zhǔn)后，方可進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。 未經(jīng)批準(zhǔn)，任何人不得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域。兒童不得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域。可能增加獲得性感染的危險(xiǎn)性或感染后可能引起嚴(yán)重后果的人員不允許進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室或動(dòng)物房。第30頁(yè)，共62頁(yè)。BSL-2實(shí)驗(yàn)室門上應(yīng)標(biāo)有國(guó)際通用的生物危害警告標(biāo)志，包括通用的生物危險(xiǎn)性標(biāo)志，標(biāo)明傳染因子、生物安全水平、實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人或其他人姓名、電話（白天、家庭）、以及進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的特殊要求。實(shí)驗(yàn)室的門應(yīng)保持關(guān)閉。工作人員進(jìn)入動(dòng)物房應(yīng)當(dāng)經(jīng)過(guò)特別批準(zhǔn)。與實(shí)驗(yàn)室工作無(wú)關(guān)的動(dòng)物不得帶入實(shí)驗(yàn)室。第31頁(yè)，共62頁(yè)。 生物安全培訓(xùn)和監(jiān)督應(yīng)有客觀詳實(shí)的記錄。 實(shí)驗(yàn)室主任應(yīng)詳細(xì)了解所有工作人員的教育和培

14、訓(xùn)背景、特長(zhǎng)、性格特點(diǎn)等。要根據(jù)人員特點(diǎn)、工作種類、所涉及的生物材料合理安排工作區(qū)域。實(shí)驗(yàn)室的安全責(zé)任人要對(duì)工作和環(huán)境的安全負(fù)責(zé)，定期進(jìn)行安全檢查。所有工作人員都有責(zé)任保護(hù)自己和他人第32頁(yè)，共62頁(yè)。安全檢查 實(shí)驗(yàn)室管理層有責(zé)任確保安全檢查的執(zhí)行。每年應(yīng)對(duì)工作場(chǎng)所至少檢查一次，以保證： 應(yīng)急裝備、警報(bào)體系和撤離程序功能及狀態(tài)正常； 用于危險(xiǎn)物質(zhì)漏出控制的程序和物品狀態(tài)，包括緊急淋?。粚?duì)可燃易燃性、可傳染性、放射性和有毒物質(zhì)的存放進(jìn)行適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)和控制；去污染和廢棄物處理程序的狀態(tài)； 實(shí)驗(yàn)室設(shè)施、設(shè)備、人員的狀態(tài)。 第33頁(yè)，共62頁(yè)。5.3 個(gè)人保健和防護(hù)1）環(huán)境設(shè)施 三區(qū)劃分 設(shè)置洗手池（感

15、應(yīng)水龍頭） 沖眼器 自動(dòng)關(guān)閉門 ，實(shí)驗(yàn)室門應(yīng)有可視窗 足夠空間存儲(chǔ)物品及實(shí)驗(yàn)操作 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)通風(fēng)，如使用窗戶自然通風(fēng)，應(yīng)有防蟲紗窗第34頁(yè)，共62頁(yè)。 可靠電力供應(yīng)和應(yīng)急照明 黑暗中出口應(yīng)有可辨認(rèn)的標(biāo)識(shí) 2）設(shè)備設(shè)施 生物安全柜 高壓蒸汽滅菌器，并按期檢查和驗(yàn)證，以保證符合要求。 應(yīng)有適當(dāng)?shù)南驹O(shè)備 個(gè)人防護(hù)裝備，應(yīng)符合國(guó)家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求。（防護(hù)服、手套、防護(hù)鞋、帽子、口罩、防護(hù)鏡） 脫蓋機(jī)、移液器第35頁(yè)，共62頁(yè)。3）防護(hù)要求在實(shí)驗(yàn)室工作時(shí)，必須穿著合適的工作服或防護(hù)服。在進(jìn)行可能接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料或感染性動(dòng)物的操作時(shí)，應(yīng)戴上合適的手套。手套用完后，應(yīng)先消毒再摘除，隨

16、后必須洗手。禁止使用口腔吸液管，必須使用移液器來(lái)操作實(shí)驗(yàn)的所有液體。 第36頁(yè)，共62頁(yè)。遇有手部皮膚有開放性傷口及其他不適于工作的情況，不要進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作。嚴(yán)禁穿著實(shí)驗(yàn)室防護(hù)服離開實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域。不得在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)穿露腳趾的鞋。禁止在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域進(jìn)食、飲水、吸煙、化妝和處理隱形眼鏡。禁止在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域儲(chǔ)存食品和飲料。第37頁(yè)，共62頁(yè)。在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)用過(guò)的防護(hù)服不得和清潔的防護(hù)服及日常服裝放在同一柜子內(nèi)。在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室的同一個(gè)獨(dú)立安全區(qū)域內(nèi)，只能同時(shí)從事一種致病性病原微生物的相關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)使用螺旋帽的塑料管盛放含HIV的樣品,禁止使用Ep管,以防止在開啟管蓋時(shí)發(fā)生樣品迸濺,第38頁(yè)，共62頁(yè)。建立

17、員工健康檔案：工作人員上崗前必須進(jìn)行HIV抗體和乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒等肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)，應(yīng)接種乙肝疫苗。應(yīng)每年對(duì)工作人員采血檢測(cè)HIV抗體，血清應(yīng)長(zhǎng)期保留。應(yīng)指定專人監(jiān)督保持良好內(nèi)務(wù)的行為。工作區(qū)應(yīng)時(shí)刻保持整潔有序。禁止在工作場(chǎng)所存放可能導(dǎo)致阻礙和絆倒危險(xiǎn)的在量一次性材料。 所有用于處理污染材料的設(shè)備和工作表面在每班工作結(jié)束、有任何漏出或發(fā)生了其他污染時(shí)應(yīng)使用適當(dāng)?shù)脑噭┣鍧嵑拖?。?9頁(yè)，共62頁(yè)。5.4 安全操作1）試劑及樣品的管理 設(shè)有專門儲(chǔ)存陽(yáng)性血清、質(zhì)控品的低溫冰箱和/或血清庫(kù)、毒種庫(kù)，上鎖并由專人管理。對(duì)存放試劑和樣品的區(qū)域應(yīng)進(jìn)行監(jiān)控2）實(shí)驗(yàn)室的清潔和消毒 工作結(jié)束后及時(shí)消

18、毒工作臺(tái)面，有污染的地方要及時(shí)消毒處理。3） 樣品的采集和處理 采集血樣時(shí)要注意安全。離心樣品時(shí)要使用有密閉蓋的離心機(jī)。第40頁(yè)，共62頁(yè)。4）樣品的帶入、帶出和操作不得將非實(shí)驗(yàn)室物品帶入實(shí)驗(yàn)室。常規(guī)處理血液、體液樣品可在工作臺(tái)上進(jìn)行，如樣品有可能濺出，則應(yīng)戴手套、口罩和防護(hù)眼鏡，在生物安全柜中操作。 被污染或可能污染的材料在帶出實(shí)驗(yàn)室前應(yīng)進(jìn)行消毒。用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。接收樣品時(shí)要檢查樣品質(zhì)量，有無(wú)完整信息， 第41頁(yè)，共62頁(yè)。 用于國(guó)際空運(yùn)的樣品要按照國(guó)際空運(yùn)協(xié)會(huì)（IATA）的規(guī)則進(jìn)行包裝和標(biāo)記，并提交相應(yīng)的資料。 5）儀器設(shè)備的安全操作生物安全柜高壓消毒鍋離心機(jī)移液器冰箱第42頁(yè)，共6

19、2頁(yè)。生物安全柜的使用 戴手套防止手部被污染；在開始工作以前，將實(shí)驗(yàn)所必需的物品全部放進(jìn)安全柜內(nèi)，并對(duì)表面進(jìn)行消毒處理；對(duì)生物安全柜工作臺(tái)面，側(cè)壁表面以及后壁內(nèi)側(cè)進(jìn)行消毒處理；讓生物安全柜工作區(qū)排氣幾分鐘之后再開始工作；不要在工作區(qū)內(nèi)排放過(guò)多的物品；第43頁(yè)，共62頁(yè)。不要阻塞進(jìn)氣格柵；實(shí)驗(yàn)操作盡可能靠近安全柜內(nèi)部進(jìn)行；盡量減少手臂的移動(dòng)。移動(dòng)時(shí)要緩慢；移出手臂之前，表面消毒處理，然后緩慢移出；拿放物品一定要遵守從潔凈區(qū)到污染區(qū)的順序；生物廢棄物袋應(yīng)放在安全柜內(nèi)不能拿出安全柜；一旦實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)生溢出物，用消毒紙巾置于其表面吸附清理，應(yīng)在生物安全柜處于工作狀態(tài)下進(jìn)行處理。第44頁(yè)，共62頁(yè)。從安

20、全柜內(nèi)部拿取可能產(chǎn)生污染的物品時(shí)，一定要進(jìn)行表面消毒處理；將產(chǎn)生氣溶膠的器皿盡可能擺放在安全柜工作區(qū)靠里的位置；潔凈的物品應(yīng)放置在距離產(chǎn)生氣溶膠器皿至少150mm 外，降低交叉污染的可能性；禁止使用氣體火焰，以防影響安全柜內(nèi)部氣流；將會(huì)產(chǎn)生氣流震蕩的儀器，如混勻器，離心機(jī)等放置在靠近柜內(nèi)后壁1/3 處第45頁(yè)，共62頁(yè)。高壓消毒鍋的使用高壓滅菌是對(duì)實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行滅菌的最有效和最可靠的方法。為了利于蒸汽的滲透和空氣排出，物品裝載量不應(yīng)超過(guò)滅菌器內(nèi)總體積的80%。應(yīng)由受過(guò)良好培訓(xùn)的人員負(fù)責(zé)高壓滅菌器的操作和日常維護(hù)。在溫度下降到80以下再打開門并應(yīng)當(dāng)戴適當(dāng)?shù)氖痔缀兔嬲诌M(jìn)行防護(hù)。對(duì)高壓滅菌器的常規(guī)監(jiān)測(cè)

21、。第46頁(yè)，共62頁(yè)。吸管和移液器的使用為防止感染，嚴(yán)禁用嘴吸液。應(yīng)使用機(jī)械移液裝置。所有的吸管都應(yīng)該有棉塞以減少對(duì)移液器或吸球的污染。建議使用帶有濾芯的吸頭。在BSL-2及以上級(jí)別實(shí)驗(yàn)室中，最好避免使用玻璃吸管。對(duì)于感染性材料不能用吸管吹打來(lái)達(dá)到混勻的目的，操作時(shí)吸管應(yīng)放入操作液面下的三分之二處，以防止產(chǎn)生氣泡和氣溶膠。從吸管吹出液體時(shí)也不要太用力，吸管內(nèi)的液體應(yīng)自動(dòng)流出，不要強(qiáng)制性排出預(yù)留液。第47頁(yè)，共62頁(yè)。污染的吸管應(yīng)立即浸沒在含有適宜的消毒劑的防破碎的容器里。在處理之前，應(yīng)浸泡足夠長(zhǎng)的時(shí)間。盛裝廢棄吸管的容器應(yīng)放在生物安全柜里，而非外面。嚴(yán)禁用帶有注射針頭的注射器吸液。為防止從吸管

22、滴落的感染性物質(zhì)發(fā)生擴(kuò)散，工作臺(tái)表面應(yīng)放一塊具有吸收性能的材料，使用后應(yīng)按感染性廢棄物予以處理。第48頁(yè)，共62頁(yè)。離心機(jī)的使用離心分類 轉(zhuǎn)頭轉(zhuǎn)速（rpm） 微速離心 15,00 低/高速離心 2,00020,000 超速離心 120,000 第49頁(yè)，共62頁(yè)。離心可能造成的傷害途徑 離心機(jī)機(jī)械故障 實(shí)驗(yàn)器材故障，如離心管等 產(chǎn)生氣溶膠； 操作者失誤。第50頁(yè)，共62頁(yè)。所有的離心機(jī)應(yīng)處于正常的工作狀態(tài)并具有合格的機(jī)械性能，要根據(jù)廠家的說(shuō)明書進(jìn)行操作。離心機(jī)應(yīng)放到適宜的位置和高度，以使工作人員能看見離心桶并便于進(jìn)行各項(xiàng)操作。用于離心的離心管和標(biāo)本容器應(yīng)該根據(jù)廠家要求選用，最好使用塑料制品，而

23、且在使用前應(yīng)檢查有無(wú)破損。必須在安全柜內(nèi)打開蓋子。第51頁(yè)，共62頁(yè)。使用轉(zhuǎn)頭時(shí)應(yīng)注意轉(zhuǎn)頭蓋與轉(zhuǎn)頭型號(hào)是否匹配。操作病原微生物時(shí)，離心桶的裝載、平衡、密封和打開必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。空離心桶配平時(shí)應(yīng)該用蒸餾水或70乙醇、異丙醇，不應(yīng)使用鹽水和次氯酸鹽溶液。離心管內(nèi)液面水平距管口應(yīng)留出一定空隙，以確保離心過(guò)程中液體不會(huì)溢出，尤其是使用角轉(zhuǎn)頭時(shí)更要注意。應(yīng)該每天檢查在特定的轉(zhuǎn)速下，離心杯的內(nèi)表面有無(wú)污物。離心轉(zhuǎn)頭和離心桶應(yīng)每天檢查有無(wú)腐蝕點(diǎn)以及極細(xì)的裂縫，以確保安全。離心桶、轉(zhuǎn)頭和離心機(jī)腔每次用后都應(yīng)該消毒。每次用后，應(yīng)該把離心桶倒放，以排凈離心配平的液體第52頁(yè)，共62頁(yè)。 冰箱和速凍器的使用

24、和保養(yǎng)冰箱、低溫冰箱和固體干冰盒要定期除霜和清掃。其中所有的安瓿、凍存管等在貯存過(guò)程中已破裂的要及時(shí)拿走。在清掃的過(guò)程中應(yīng)配戴面部保護(hù)裝置并戴手套，清掃后，抽屜內(nèi)表面應(yīng)消毒處理。所有保存在冰箱里的容器等，都應(yīng)該有清楚的標(biāo)簽，并且標(biāo)簽上有內(nèi)容物的科學(xué)命名、貯存日期和貯存人姓名。無(wú)標(biāo)簽的和過(guò)期的材料應(yīng)高壓滅菌后丟棄。對(duì)于冰箱內(nèi)的儲(chǔ)存物應(yīng)有詳細(xì)的目錄。第53頁(yè)，共62頁(yè)。除非有防爆措施，嚴(yán)禁將易燃液體保存在冰箱里，冰箱的門上應(yīng)張貼這方面的注意事項(xiàng)。存放試劑和標(biāo)本的冰箱每個(gè)工作日必須記錄其溫度，以保證所用試劑和標(biāo)本的安全。溫度的記錄不能以冰箱數(shù)顯為準(zhǔn)，應(yīng)以校準(zhǔn)后的放入冰箱內(nèi)的溫度計(jì)顯示的度數(shù)為準(zhǔn)。第5

25、4頁(yè)，共62頁(yè)。5.5使用利器注意事項(xiàng) 應(yīng)盡量避免在實(shí)驗(yàn)室使用針頭、刀片、玻璃器皿等利器，以防刺傷。如果必須使用，在處理或清洗時(shí)應(yīng)采取措施防止刺傷或劃傷，并應(yīng)對(duì)用過(guò)的物品進(jìn)行消毒。 應(yīng)使用安全針具采血，如蝶形真空針，自毀性針具等，以降低直接接觸血液和刺傷的危險(xiǎn)性。應(yīng)將用過(guò)的銳器直接放入耐穿、防滲漏的利器盒，用過(guò)的針頭應(yīng)直接放入堅(jiān)固的容器內(nèi)，消毒后廢棄 禁止將使用后的一次性針頭重新套上針頭套。禁止用手直接接觸使用過(guò)的針頭、刀片等利器。第55頁(yè)，共62頁(yè)。6、污染物處理 應(yīng)按照實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求（GB 19489-2008）和消毒技術(shù)規(guī)范（2008年版）處置實(shí)驗(yàn)室廢棄物。艾滋病實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生的所有廢棄物，包括不再需要的樣品、培養(yǎng)物和其它物品，均應(yīng)視為感染性廢棄物，應(yīng)置于專用的密封防漏容器中，安全運(yùn)至消毒室，經(jīng)高壓消毒后再進(jìn)行處理