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1、第第1頁共 頁細胞液濃度大?。嘿|(zhì)壁分離實驗;細胞是否死亡:質(zhì)壁分離實驗、亞甲基藍溶液染色;甲狀腺激素作用:動物耗氧量、發(fā)育速度等;生長激素作用:生長速度(體重變化、身高變化);胰島素作用:動物活動狀態(tài)。 實驗條件的控制方法增加水中氧氣:泵入空氣或吹氣或放入綠色植物;減少水中氧氣:容器密封或油膜覆蓋或用涼開水;除去容器中CO2: NaOH溶液或KOH溶液;除去葉片中原有淀粉:置于黑暗環(huán)境一晝夜;除去葉片中葉綠素:酒精隔水加熱;除去光合作用對呼吸作用的干擾:給植株遮光;如何得到單色光:棱鏡色散或彩色薄膜濾光;防止血液凝固:加入檸檬酸鈉;DNA半保留復(fù)制方式探究:密度梯度離心;各種細胞器的提?。杭毎?/p>

2、勻漿離心。選修易錯點區(qū)分DNA連接酶和DNA聚合酶、限制性核酸內(nèi)切酶和解旋酶DNA連接酶連接兩個DNA片段,而DNA聚合酶只能將單個脫氧核苷酸添加到脫氧核 苷酸鏈上。限制性核酸內(nèi)切酶是切割某種特定的脫氧核苷酸序列,并使兩條鏈在特定的位置斷開,而解旋酶是將DNA的兩條鏈間的氫鍵打開形成兩條單鏈。啟動子工起始密碼;終止子工終止密碼 根據(jù)受體種類確定基因工程的受體細胞:植物:植物體細胞或受精卵動物:受精卵或體細胞微生物:細菌。 注:目的基因?qū)胧荏w細胞不是基因工程成功的標志,基因工程是否成功在于目的基因 是否成功表達。高考必記關(guān)鍵點植物組織培養(yǎng)的關(guān)鍵條件:離體,一定營養(yǎng)物質(zhì),激素(生長素、細胞分裂素

3、)等。培養(yǎng)基狀態(tài):固體培養(yǎng)基(需脫分化生根培養(yǎng)基及生芽培養(yǎng)基)。體內(nèi)細胞未表現(xiàn)全能性的原因:基因的表達具有選擇性。植物激素的使用 脫分化階段細胞分裂素比例較高,以促進細胞的分裂;再分化階段生長素比例較高,以 促進芽與根的形成。光照的使用 脫分化階段不需要給予光照,再分化階段需要給予光照,以利于葉綠素的形成。 植物體細胞雜交的關(guān)鍵酶解法 用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁。促融劑 聚乙二醇。雜種細胞的形成標志 新細胞壁的形成。培養(yǎng)雜種植株的技術(shù)植物組織培養(yǎng)。培養(yǎng)成功的原理 細胞全能性。 動物細胞培養(yǎng)的特殊條件(1)胰蛋白酶的兩次使用:首先用胰蛋白酶處理動物的器官或組織,以制備單細胞懸液; 培養(yǎng)過程中發(fā)

4、生接觸抑制時,同樣要用胰蛋白酶使細胞分散開。(2)避免雜菌污染的措施:培養(yǎng)液及培養(yǎng)用具滅菌處理,加入一定量的抗生素,定期更換r 、# 、亠培養(yǎng)液。特殊的營養(yǎng)條件:液體培養(yǎng)基。加入動物血清、血漿等。通入氧氣以滿足代謝的需要。通入二氧化碳以維持培養(yǎng)液的 pH。 克隆動物的技術(shù)手段動物細胞培養(yǎng)、核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植。易錯警示雜種細胞形成的標志:新的細胞壁的生成。雜種植株遺傳物質(zhì)的變化:雜種植株的變異類型屬于染色體變異,雜種植株的染色體 數(shù)目通常是兩親本體細胞染色體數(shù)目之和,雜種植株屬于異源多倍體。動物細胞融合形成雜交細胞,雜交細胞進行細胞培養(yǎng),獲得大量的克隆細胞,但沒有 形成生物體,因此動

5、物細胞融合的原理是細胞增殖和細胞膜的流動性,不包含細胞全能 性。動物細胞融合與單克隆抗體制備的歸納(1)制備單克隆抗體時選用一種抗原處理的 B 淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行細胞融合, 產(chǎn)生 雜交瘤細胞,雜交瘤細胞兼有兩個親本細胞的特性 在體外培養(yǎng)條件下能不斷增殖, 同時能產(chǎn)生出某種特異性的抗體。進行動物細胞的誘導(dǎo)融合,形成的雜種細胞有三種:AA型、BB型、AB型。只有AB型才是我們所需要的雜種細胞,所以需要 用選擇性培養(yǎng)基進行篩選。單克隆抗體制備過程中的兩次篩選第一次篩選:利用特定選擇培養(yǎng)基篩選,獲得雜交瘤細胞,即 AB型細胞(A為漿細胞,B為骨髓瘤細胞),篩選掉A、B、AA、BB型細胞。第二次篩選: 利用多孔板法和抗原 抗體雜交法篩選, 獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞。 胚胎工程區(qū)別 2 種標志受精的標志:看到兩個極體。受精完成的標志:雌雄原核膜融合。 把握“沖卵”的 2 個不同胚胎移植過程:沖出的是早期胚胎。體外受精過程:沖出的是卵子。 胚胎移植成功的關(guān)鍵(1)供體、受體同期發(fā)情處理。(2)供

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