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文檔簡介
1、細胞中DNA和RNA的顯示和觀察 (見P17-18)一 目的要求 1.掌握顯示細胞內(nèi)DNA和RNA的方法; 2.熟悉細胞內(nèi)DNA和RNA的分布位置。二 實驗原理(見P17)核酸(DNA和RNA)是酸性的,對于堿性染料(甲基綠和派洛寧)具有親和力。 DNA(聚合程度高)+甲基綠(+) DNA甲基綠(藍綠色) RNA(聚合程度低)+派洛寧(+) RNA派洛寧(紅色)DNA主要分布于細胞核內(nèi),細胞核故被染成藍綠色;RNA主要分布于細胞質(zhì)中,細胞質(zhì)故被染成紅色。三 操作(見P18).制備血涂片:取牛蛙血,每人制備一張血涂片。.固定:將血涂片浸入75%酒精中5-10分鐘,晾干。.染色:將血涂片放在染色架
2、上,甲基綠派洛寧混合液染色20分鐘。.沖洗:自來水沖洗。.分化:將血涂片浸入純丙酮中幾秒鐘。.觀察:細胞核被染成藍綠色,細胞質(zhì)被染成紅色。血涂片的制作 滴一滴血在載玻片右端,另拿一張邊緣光滑的載玻片,讓其一邊接觸血液,血液沿邊緣展開,使推血玻片與盛血玻片成30- 45角,迅速向前推移,使血液成薄層均勻分布。推片時要動作協(xié)調(diào),快慢一致,用力均勻。 圖 血涂片的推片姿勢及方法固定的目的 : 1.防止組織細胞產(chǎn)生自溶和腐敗 2.使細胞易于著色 3.使組織適度硬化分化的目的 : 增強對比度,使DNA和RNA更易于觀察四 作業(yè) 繪圖顯示你所觀察到的一個細胞,并標出細胞核和細胞質(zhì)呈現(xiàn)出的不同顏色及其說明的問題。 思考題1.簡述細胞內(nèi)DNA和RNA的染色原理。 2.細胞核中核
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