小肽飼料專題

1、小肽飼料專題主要內(nèi)容肽的概念及分類小肽營養(yǎng)理論的提出小肽的吸收機(jī)制、特點(diǎn)及影響因素蛋白質(zhì)品質(zhì)與肽的釋放小肽的代謝小肽的營養(yǎng)作用小肽的應(yīng)用研究生物活性肽小肽的制備方法一、肽的基本概念及分類肽：由兩個(gè)或兩個(gè)以上氨基酸通過肽鍵連接而成的化合物。肽鍵(peptide bond)： 一個(gè)氨基酸的-羧基與另一個(gè)氨基酸的-氨基脫去一分子水縮合形成的共價(jià)鍵/酰胺鍵稱為肽鍵。多肽(polypeptide)： 20個(gè)以上，分子量在10000道爾頓以下寡肽(oligopeptide)： 10-20個(gè)氨基酸小肽：10個(gè)氨基酸以下、基本概念、肽的分類（）按其來源可以分為:內(nèi)源性生物活性肽: 如內(nèi)啡肽、腦啡肽、胸腺肽等；

2、外源性生物活性肽：存在于天然蛋白質(zhì)中的氨基酸序列。、肽的分類外源性活性肽與內(nèi)源性活性肽的活性中心序列相同或相似，可通過體外生物技術(shù)被釋放或合成出來；外源性活性肽通過直接與腸道受體結(jié)合，參與機(jī)體的生理調(diào)節(jié)作用或被完整吸收進(jìn)入循環(huán)，從而發(fā)揮與內(nèi)源性活性肽相同的功能。（）按功能可分為：功能肽：具有生理活性的肽，包括抗微生物肽、如短桿菌肽、神經(jīng)活性肽、激素調(diào)節(jié)肽 如L一內(nèi)啡肽、氧化肽、免疫活性肽等 結(jié)構(gòu)肽：具有營養(yǎng)功能，參于細(xì)胞的代謝活動、細(xì)胞的構(gòu)建、蛋白質(zhì)的合成和細(xì)胞生長營養(yǎng)等。（）按其原料來源可分為：乳肽、大豆肽、玉米肽、花生蛋白肽、畜產(chǎn)肽、 水產(chǎn)肽、絲蛋白肽等等二、小肽營養(yǎng)理論的提出1、經(jīng)典蛋白

3、質(zhì)代謝理論 蛋白質(zhì)在消化道內(nèi)經(jīng)蛋白酶和肽酶的作用降解為小肽和游離氨基酸，而小肽必須進(jìn)一步降解為游離氨基酸才能被吸收利用。2、傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)代謝理論面臨挑戰(zhàn)大量的研究表明：不同來源的飼料，盡管氨基酸組成相同但利用率存在明顯差異（Elwell,1985). 動物對飼料中的氨基酸的利用率并不完全受單一限制性氨基酸含量的影響，即不遵循“木桶理論”。3、肽營養(yǎng)理論的提出當(dāng)動物采食按理想氨基酸平衡配制的純合日糧或氨基酸平衡的蛋白質(zhì)日糧時(shí)，并不能獲得最佳的生產(chǎn)性能；（Kephart,Sherritt,1991)因此，一些學(xué)者提出肽能被直接吸收的觀點(diǎn)，并且肽營養(yǎng)理論被越來越多的人所接受。肽營養(yǎng)代謝的理論依據(jù)Ag

4、ar(1953)首先觀察到腸道能完整地吸收轉(zhuǎn)運(yùn)雙甘肽；Neway and Smith(1960)發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)在小腸內(nèi)的消化產(chǎn)物除了氨基酸外，還有小肽，而且可以進(jìn)入腸粘膜細(xì)胞；Drekcoop等人（1962）在血漿中發(fā)現(xiàn)存在含有羥脯氨基酸的肽；Adibi（1971）用雙甘肽飼喂小鼠后，用同位素示蹤法在血漿中檢測到了這些肽；肽營養(yǎng)代謝的理論依據(jù)Hara等（1984）在兔小腸粘膜上發(fā)現(xiàn)了小肽載體；Fei（1992）克隆了小肽的I型載體；Adibi(1996)克隆了小肽的II型載體；Hong Chen等（2002）發(fā)現(xiàn)了雞的小肽載體(cPepT1);小肽轉(zhuǎn)運(yùn)載體的種類和功能小肽轉(zhuǎn)運(yùn)載體的種類 酸性小肽轉(zhuǎn)

5、運(yùn)載體 堿性小肽轉(zhuǎn)運(yùn)載體 中性小肽轉(zhuǎn)運(yùn)載體小肽轉(zhuǎn)運(yùn)載體的種類和功能小肽轉(zhuǎn)運(yùn)載體PepT1的性質(zhì)和功能 小肽載體對底物無選擇性轉(zhuǎn)運(yùn)，不論小肽含有酸性、堿性還是疏水性氨基酸，PepT1都能跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞。 三、小肽的吸收機(jī)制、特點(diǎn)及影響因素（一）、小肽吸收機(jī)制A、單胃動物小肽吸收機(jī)制三種形式：1.pH依賴性的H+和Na+轉(zhuǎn)運(yùn)體系，不消耗ATP。 小肽轉(zhuǎn)運(yùn)的動力來自質(zhì)子的電化學(xué)梯度，質(zhì)子向細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸產(chǎn)生的動力驅(qū)使小肽向細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸，由于小肽隨質(zhì)子進(jìn)入細(xì)胞，引起細(xì)胞內(nèi)pH值下降，從而活化了H+/Na+通道，H+被釋放到細(xì)胞外，細(xì)胞內(nèi)的pH值又恢復(fù)至原來的水平。 肽H+H+Na+Na+肽pH肽載體細(xì)胞內(nèi)細(xì)

6、胞外具有pH依賴性的Na+/H+ 交換轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制A、單胃動物小肽吸收機(jī)制2.依賴H+或Ca+2濃度的主動運(yùn)轉(zhuǎn)機(jī)制，需要消耗ATP. 在一定H+ 的濃度下，囊泡膜刷狀緣肽的主動轉(zhuǎn)運(yùn)加速,但在缺氧或在添加代謝抑制劑的情況下被抑制.A、單胃動物小肽吸收機(jī)制3.谷胱甘肽(GSH)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)，GSH的跨膜運(yùn)輸與Na+、K+、Ca2+、 Mn2+的濃度梯度有關(guān)。B、反芻動物小肽吸收機(jī)理：兩種不同途徑：即腸系膜系統(tǒng)和非腸系膜系統(tǒng)空腸、回腸、盲腸和結(jié)腸所吸收的物質(zhì)進(jìn)入腸系膜系統(tǒng)；其吸收機(jī)制與單胃動物吸收機(jī)制類似。瘤胃、網(wǎng)胃、瓣胃、皺胃和十二指腸吸收的物質(zhì)進(jìn)入非腸系膜系統(tǒng)。 瘤胃和瓣胃是反芻動物肽吸收的主要部位，對

7、小肽吸收是不飽和被動擴(kuò)散過程，瓣胃上皮細(xì)胞吸收能力要強(qiáng)于瘤胃上皮細(xì)胞B、反芻動物小肽吸收機(jī)理：動物腸系膜系統(tǒng)非腸系膜系統(tǒng)牛520130840羊494842774可見非腸系膜系統(tǒng)是反芻動物小肽吸收的主要途徑反芻動物的小肽吸收 單位:g/d（二）小肽吸收特點(diǎn)速度快耗能低不易飽和各種肽之間運(yùn)轉(zhuǎn)無競爭性與抑制性小肽能促進(jìn)氨基酸和氨基酸殘基的吸收（三）影響小肽吸收的因素1.日糧因素 不僅蛋白質(zhì)限飼(包括日糧限飼)，而且限飼期的長短及底物可影響氨基酸與肽的吸收水平。2、動物因素動物種類生理階段年齡腸道部位3、小肽本身因素肽鏈長度與肽的氨基酸組成氨基酸殘基構(gòu)型與載體肽鏈長度與肽的氨基酸組成Ress(1988

8、)試驗(yàn)觀察到二、三肽蛋白水解物吸收快于410肽的水解物。攝入腸道大于三肽以上的寡肽，腸道內(nèi)胰蛋白酶、肽酶對其進(jìn)一步水解似乎是吸收的主要限速步驟(Grimble和Silk,1989) 氨基酸組成肽的氨基酸組成也影響其吸收。Burston等(1972)報(bào)道，對以谷氨酰賴氨酸形式存在的谷氨基酸，大鼠腸道對其的吸收速度是以谷氨酰蛋氨酸形式存在時(shí)的兩倍。氨基酸殘基構(gòu)型與載體賴氨酸與甘氨酸形成二肽時(shí)，賴氨酸處于N末端要比處于C末端吸收更快。而賴氨酸與谷氨酸形成二肽時(shí)，賴氨酸處于C端吸收更迅速(Burston等，1972)。一般L型比D型、中性比酸堿性肽更易吸收。小肽載體也對其吸收有一定影響，它對疏水性、側(cè)

9、鏈體積大的底物，如含支鏈氨基酸、蛋氨酸或苯丙氨酸的肽，具有較高的親和力，而對親水性、帶電荷的小肽親和力較小(Matthews,1991)。4、保護(hù)劑的使用在湖羊日糧中添加乙酸鈉后，瘤胃肽濃度提高19.69%，山羊日糧中添加離子載體后，瘤胃中肽的保護(hù)率提高20%，氮的總體消化率也顯著改善(劉曉牧等，2000)。（四）寡肽吸收的研究方法1、體內(nèi)法腸瘺法靜脈（或腸道）灌注結(jié)合血管瘺法導(dǎo)管小腸提取食糜腸道安裝橋式瘺管分析食糜中標(biāo)記氨基酸的吸收率靜脈或腸道灌注被測物肝門靜脈安裝血管瘺研究寡肽吸收規(guī)律門靜脈導(dǎo)管門靜脈分離完成插入門靜脈導(dǎo)管固定導(dǎo)管和導(dǎo)線導(dǎo)管保護(hù)袋2、體外法體外腸環(huán)法體外外翻腸囊法做小腸環(huán)狀

10、物培養(yǎng)腸環(huán)中灌注待測物觀測其在腸環(huán)的吸收變化分割小腸片段外翻成囊狀物放在含待測小肽的培養(yǎng)液中培養(yǎng)取出測定小肽在腸道黏膜的消失率和漿膜液中的出現(xiàn)率四、蛋白質(zhì)品質(zhì)與肽的釋放氨基酸平衡的蛋白質(zhì)易產(chǎn)生數(shù)量較多的寡肽，而劣質(zhì)蛋白質(zhì)則產(chǎn)生大量游離氨基酸和少量分子量大的肽片段飼喂動物性蛋白有較大比例小肽，飼喂植物性蛋白有較多游離氨基酸飼料蛋白的小肽釋放量與有效氨基酸和堿性氨基酸呈正相關(guān) 相關(guān)研究報(bào)道樂國偉等(1996)對幾種不同動、植物性蛋白質(zhì)飼料的胃蛋白酶和胰蛋白酶水解產(chǎn)物分析表明，寡肽的釋放量由大到小依次為：酪蛋白、魚粉、蠶蛹、豆粕、豆餅、菜籽餅、玉米蛋白粉，飼料蛋白質(zhì)的寡肽釋放量與有效賴氨酸(Alys

11、)呈正相關(guān)。劉選珍等(1996)的試驗(yàn)也表明：飼料寡肽釋放量與堿性氨基酸含量相關(guān)的蛋白質(zhì)呈正相關(guān)。由這些試驗(yàn)可以看出，必需氨基酸含量高且平衡的優(yōu)質(zhì)蛋白在消化過程中容易水解生成分子量低而數(shù)量多的寡肽，而必需氨基酸缺乏、不平衡的飼料蛋白質(zhì)則產(chǎn)生數(shù)量少、分子量大的肽(Meister,1987)。 五、小肽的代謝.血液循環(huán)中小肽的來源消化道吸收（主要來源）體蛋白分解機(jī)體合成：肽類激素、腦啡肽等生理活性肽類腸外營養(yǎng)方式：皮下、肌肉、靜脈注射等2、肽對組織蛋白質(zhì)代謝的影響以小肽形式作為氮源的飼糧，其整體蛋白質(zhì)沉積效率高于相應(yīng)的以氨基酸或整體蛋白質(zhì)作為氮源的飼糧。小肽的快速吸收和繼而產(chǎn)生的代謝調(diào)節(jié)作用，是影

12、響組織蛋白質(zhì)代謝的重要原因六、小肽的營養(yǎng)作用.促進(jìn)蛋白質(zhì)的合成循環(huán)中的小肽能直接參與組織蛋白質(zhì)的合成。大鼠肌細(xì)胞、牛乳腺表皮細(xì)胞(Pan等，1996)以及羊肌源性衛(wèi)星細(xì)胞(Pan等，1998)均能有效利用含蛋氨酸的小肽作為氨基酸的來源，用于合成蛋白質(zhì)和細(xì)胞增殖。此外，肝臟、腎臟、皮膚和其它組織也能完整地利用小肽(Backwell等，1996；Hubl等，1994；Pierzynowski等，1997)，其中腎臟是消化循環(huán)肽和再捕獲氨基酸的主要場所(Adibi,1997)。.避免氨基酸之間的吸收競爭 Rubino(1971)發(fā)現(xiàn)，小肽與游離氨基酸不相互影響彼此的吸收。Pharagyn和Barle

13、y(1987)報(bào)道，當(dāng)賴氨酸與精氨酸以游離形式存在時(shí)，兩者相互競爭吸收位點(diǎn)，游離精氨酸有降低肝門靜脈賴氨酸的傾向；而后者以肽形式存在時(shí)，前者對其吸收則無影響。.對瘤胃微生物的營養(yǎng)作用 肽是瘤胃微生物合成蛋白質(zhì)的重要底物，肽對瘤胃微生物生長的主要效應(yīng)是加快微生物的繁殖速度，縮短細(xì)胞分裂周期。.提高生產(chǎn)性能 蛋白質(zhì)在消化酶作用下降解產(chǎn)生具有特殊生理活性的小肽，能夠直接被動物吸收，參與機(jī)體生理活動和代謝調(diào)節(jié)，從而提高其生產(chǎn)性能。Parisini等(1989)在生長豬日糧中添加少量的肽后，顯著地提高了豬的日增重、蛋白質(zhì)利用率和飼料轉(zhuǎn)化率。Pocius等(1981)發(fā)現(xiàn)，黑白花奶牛吸收的谷胱甘肽在乳腺G

14、TPase的作用下降解為Gly與Cys，可作為乳蛋白合成的原料，促進(jìn)乳蛋白合成。.促進(jìn)礦物質(zhì)元素的吸收利用 施用暉等(1996)報(bào)道，在蛋雞日糧中添加小肽制品后，血漿中的Fe2+、Zn2+的含量顯著高于對照組，蛋殼強(qiáng)度提高。Maria等(1995)報(bào)道，肉類水解物中的肽類能使亞鐵離子可溶性、吸收率提高飼養(yǎng)試驗(yàn)表明：母豬被飼喂小肽鐵后，母豬奶和仔豬血液中有較高的鐵含量，而有機(jī)鐵卻無能為力，這表明，小肽對鐵的吸收轉(zhuǎn)運(yùn)具有十分重要的作用。七、小肽的應(yīng)用研究1.小肽在單胃動物中的應(yīng)用研究1.1小肽與消化道消化酶活性能促進(jìn)仔豬消化道發(fā)育,刺激消化酶的分泌與活性相關(guān)研究報(bào)道研究報(bào)道斷奶仔豬Scheppac

15、h（1994）刺激小腸絨毛膜刷狀緣氨基肽酶和二肽酶活性上升，還能提高小肽載體數(shù)量，從而增強(qiáng)動物的采食與消化吸收王恬(1998)日糧中添加小肽使仔豬十二指腸食糜中淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶活性增強(qiáng)海鱸魚魚苗Zambonino Iufante（1997）絨毛膜中的胰凝乳酶和r-谷氨肽轉(zhuǎn)氨酶的活性提高，氨肽酶活性降低1.2小肽與動物腸道黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)實(shí)驗(yàn)動物作者研究結(jié)果斷奶仔豬張軍民（2000）日糧中添加Gln二肽顯著增加空腸DNA含量，但對回腸和腸道蛋白無顯著影響，可顯著增加35日齡仔豬黏膜厚度和49日齡空腸絨毛高度，對十二指腸絨毛高度和黏膜厚度無明顯影響。王恬(2002)日糧中添加小肽減輕斷奶仔豬小

16、腸絨毛萎縮和隱窩加深的程度，促進(jìn)腸道組織與功能發(fā)育。1.3 小肽與仔豬腹瀉率汪夢萍(2002)給仔豬飼喂“喂大快”,試驗(yàn)組豬下痢頭數(shù)明顯減少.黃冠慶等(2003)報(bào)道,日糧中添加適量Gly-Gln能明顯降低仔豬腹瀉率.1.4 小肽與動物生產(chǎn)性能實(shí)驗(yàn)動物作者研究結(jié)果斷奶仔豬汪夢萍（2002）試驗(yàn)組與對照組增重差異極顯著，飼料轉(zhuǎn)化率得到明顯改善。育肥豬Lootekhniga等（1994）日糧中添加小肽提高產(chǎn)肉率和瘦肉率。泌乳母豬奶質(zhì)量提高，減少母豬體重?fù)p失，使其泌乳量增加蛋雞施用暉等（1996）產(chǎn)蛋率、日產(chǎn)蛋量和飼料轉(zhuǎn)化率顯著提高，蛋殼強(qiáng)度增強(qiáng)肉仔鵪鶉曹光辛（1998）促生長，體增重和飼料報(bào)酬明顯

17、提高鰻魚王碧蓮（2001）餌料中分別添加2%和4%小肽，添加2%組比對照組生長率、攝食率和飼料效率都有提高。1.5 小肽與動物蛋白質(zhì)合成代謝 小肽可直接被動物胃腸道吸收進(jìn)入血液循環(huán),刺激胰島素的分泌,將血液中的葡萄糖迅速轉(zhuǎn)移到肝臟,提高蛋白質(zhì)的合成.Rerat等(1998)研究報(bào)道,向豬十二指腸灌注小肽后,血漿胰島素的濃度高于灌注游離氨基酸組.Backwell(1994)應(yīng)用同位素雙標(biāo)記技術(shù),灌注的肽標(biāo)記物能直接結(jié)合進(jìn)入乳蛋白1.6 小肽與動物脂肪代謝小肽能阻礙脂肪的吸收，促進(jìn)脂肪代謝1.7小肽與動物免疫功能正常小肽對細(xì)菌的屏障作用依賴于特殊因子（IgA）和非特殊因子（胃酸、腸蠕動、消化酶和正

18、常細(xì)菌群）張軍民（2000）報(bào)道，在飼糧中添加1%-2%的谷氨酰胺二肽可明顯降低早期斷奶仔豬35日齡血液毒素含量，增加腸黏膜中S-IgA的濃度，防止有害微生物和毒素的易位，減少腹瀉，增強(qiáng)機(jī)體應(yīng)激能力。Jolle等（1981）研究表明，-酪蛋白水解產(chǎn)生的肽類，可以促進(jìn)腹膜內(nèi)巨噬細(xì)胞的體外吞噬能力。2.小肽在反芻動物中的利用研究2.1 研究熱點(diǎn)2.1.1瘤胃微生物對肽的利用小肽主要是由瘤胃微生物的肽酶活性作用的結(jié)果（Wallace等1999）調(diào)控肽的降解速度，可使微生物更有效的利用氨基酸氮，對反芻動物氮存留率有利。肽分子量的大小影響其利用率：Broderick等1988研究報(bào)道，細(xì)菌對大分子肽的攝

19、取速度比對小分子肽和氨基酸的攝取速度快，大分子肽更易于轉(zhuǎn)化為微生物蛋白。肽的組成成分影響瘤胃微生物對其利用 含有色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、亮氨酸和纈氨酸殘基的疏水性肽在瘤胃液中代謝速度不快 含有大量帶電氨基酸如精氨酸、賴氨酸、谷氨酸和天冬氨酸的親水性肽的代謝比較穩(wěn)定2.2 研究前景由于小肽的特殊吸收機(jī)制和營養(yǎng)作用，小肽在蛋白質(zhì)營養(yǎng)中的作用越來越受到重視，但在反芻動物營養(yǎng)研究領(lǐng)域國內(nèi)報(bào)道較少。國外雖然對其吸收機(jī)制有了一些報(bào)道，但對不同來源蛋白質(zhì)飼料小肽在胃腸道消化、吸收和代謝規(guī)律以及對體氮沉積和體組織蛋白質(zhì)周轉(zhuǎn)研究較少。根據(jù)蛋白質(zhì)水解終產(chǎn)物的小肽和氨基酸組成及吸收利用效率來正確評價(jià)蛋白質(zhì)

20、飼料的營養(yǎng)價(jià)值，對于節(jié)約蛋白質(zhì)飼料資源、減少氮對環(huán)境的污染，充分發(fā)揮反芻動物生產(chǎn)潛力具有重要意義。八、生物活性肽（Biologically active peptides，BAPs）1、概念 簡稱活性肽或功能性肽，是一類分子量較小、在構(gòu)象上松散、具有多種生物活性作用的小分子肽類。2、生理作用調(diào)節(jié)動物的消化吸收提高動物免疫力提高動物抗感染能力促進(jìn)動物生長發(fā)育促進(jìn)礦物元素吸收3、生物活性肽的種類和來源（1）外源性生物活性肽1.1 阿片肽類研究最多最早的酪蛋白生物活性肽，是具有阿片活性的阿片肽。 Buantl等(1979)最先從-酪蛋白水解物中分離出了酪啡肽(-casomorphins)。它們是牛乳

21、-酪蛋白60-70氨基酸殘基，其中活性最強(qiáng)的是五肽Tyr-Pro-Phe-Pro-Gly。1.2 免疫活性肽免疫活性肽是繼牛乳提取物中發(fā)現(xiàn)阿片肽后,第二個(gè)被發(fā)現(xiàn)的活性肽從人酪蛋白的胰蛋白酶-糜蛋白酶降解產(chǎn)物中分離得到的(Jolls等，1981，1982；Parker等，1984)，是激活巨噬細(xì)胞吞噬功能的肽。1.3、酪蛋白磷酸肽酪蛋白磷酸肽(CPs)分布于牛乳蛋白的不同區(qū)域，其活性中心是磷酸絲氨酸和谷氨酸簇。由于CPs在中性和堿性pH時(shí)，通過磷酸絲氨酸與鈣、鋅、鐵等離子結(jié)合，由小腸腸壁細(xì)胞吸收后再釋放出來，從而有效地避免了鈣在小腸中性和偏堿性環(huán)境中被淀沉，促進(jìn)了鈣的吸收。 Sato用含有CPs

22、的食物飼喂大鼠，并在食物中加入同位素標(biāo)記的鈣，發(fā)現(xiàn)其大腿骨骼中的標(biāo)記鈣明顯高于對照組。此后通過對大鼠、小鼠、雞、豬的試驗(yàn)，都證明CPs具有促進(jìn)鈣、鐵、鋅吸收的功能(Hanson等，1997；Ashida等，1996)。 1.4、抗血凝肽Jolls等(1978)發(fā)現(xiàn)牛-酪蛋白與人纖維蛋白原-鏈具有結(jié)構(gòu)的同源性。纖維蛋白原具有雙重功能，它既參與血小板的凝集，又參與纖維蛋白的形成。1.5、抗高血壓肽體外試驗(yàn)表明，有抑制活性的肽，位于人-酪蛋白3952氨基酸片段和人-酪蛋白6365片段，其中，人-酪蛋白4352片段(Ser-Phe-Gln-Pro-Gln-Pro-Leu-Iso-Try-Pro)在體內(nèi)

23、活性最強(qiáng)。1.6、其它生物活性肽1.6.1 對環(huán)境有益的活性肽 谷物蛋白粉(CGM)經(jīng)蛋白酶降解得到CGH(谷物蛋白水解物),具有抑制雜草根生長的作用,被認(rèn)為是天然的除草劑.1.6.2 提高風(fēng)味的肽用商品酶(Alcalase)水解脫脂的大米麩皮,從水解溶液中分離出具有調(diào)味功能的肽.2.內(nèi)源性生物活性肽神經(jīng)活性肽腸道分泌的肽胃泌素生長激素抑制素生長因子九、 小肽的制備方法 酸或堿水解制備 從生物體內(nèi)分離提取 化學(xué)合成 DNA重組法 酶法分解 微生物發(fā)酵法酸或堿水解制備 優(yōu)點(diǎn):簡單價(jià)廉 缺點(diǎn):酸水解會破壞L-型氨基酸,使其轉(zhuǎn)變?yōu)镈-型氨基酸和有害物質(zhì)堿水解產(chǎn)物有異味,水解難以控制生物體分離法： 從

24、動物腺體中分離，原料受限，分離困難，價(jià)格貴，難以大量生產(chǎn)；化學(xué)合成 優(yōu)點(diǎn):發(fā)展較早,技術(shù)成熟, 廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)高價(jià)值的藥用肽固相和液相兩種分離方法 缺點(diǎn):成本高,副反應(yīng)和殘留化合物多生產(chǎn)效率低生產(chǎn)中使用大量有毒溶劑,對環(huán)境和健康有害DNA重組法 優(yōu)點(diǎn):避免了化學(xué)合成法的缺點(diǎn) 缺點(diǎn):在基因表達(dá)和回收上存在問題生產(chǎn)小肽的種類受到限制不適合制備短鏈肽酶法分解 優(yōu)點(diǎn):成本低所用基質(zhì)和反應(yīng)劑無害生產(chǎn)條件溫和、高效、對蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價(jià)值破壞小，無異味反應(yīng)具有空間立體性,產(chǎn)物沒有消旋化現(xiàn)象,反應(yīng)位點(diǎn)具有方向性，可定位生產(chǎn)特定的肽 缺點(diǎn):蛋白酶的水解作用會產(chǎn)生許多不必要的產(chǎn)物缺乏合適的蛋白酶,產(chǎn)率低微生物發(fā)酵法國家發(fā)明專利技術(shù)，一種理想的生產(chǎn)方法；微生物發(fā)酵法工藝流程菌種保藏 菌種復(fù)壯 菌種活化 斜面菌種 搖瓶種子 培養(yǎng)基配制 一級種子 滅 菌 二級種子 冷 卻 三級種子 培養(yǎng)基 發(fā)酵 濃 縮 粗分離 除渣 干 燥 分離 分析檢測 提取 包 裝 精制 （去除大分子 、去除小分子雜 質(zhì)、 離子交換、 活性炭脫 大豆肽產(chǎn)品 色、單肽提取、 濃縮 、干 燥）微生物發(fā)酵發(fā)明專利技術(shù)微生物發(fā)酵法生產(chǎn)大豆活性肽工藝技術(shù) 國家專利技術(shù)號:ZL 0