中國美味蘑菇馴化栽培及抗宮頸癌活性研究

1、中國美味蘑菇馴化栽培及抗宮頸癌活性研究宮頸癌不僅是全球第四大常見的惡性腫瘤, 而且是女性癌癥死亡的主要原因之一。許多欠發(fā)達(dá)國家宮頸癌的 3 年至 5 年生存率 50% 。雖然化療或新輔助化療已用于宮頸癌治療, 但化療對(duì)人體的毒性和耐藥性是顯而易見的。長期以來, 人們已經(jīng)確定來自食用和藥用真菌的抗氧化劑和其他活性化合物可能有助于預(yù)防癌癥, 來自食用和藥用真菌的天然化合物可被視為宮頸癌治療中的補(bǔ)充藥物。近年來 , 部分蘑菇屬的新品種被不斷發(fā)現(xiàn)和報(bào)道, 中國美味蘑菇(Agaricussinodeliciosus) 是蘑菇屬中近年來報(bào)道的一個(gè)新物種 , 是一種體型巨大的蘑菇 ,且已馴化栽培成功 , 若

2、能從中找到抗腫瘤的活性物質(zhì), 則可以在很大程度上解決藥物原材料不足的問題。 本研究的實(shí)驗(yàn)材料是采集于新疆的一種個(gè)體巨大的野生蘑菇 - “中國美味蘑菇” 。本文首先以中國美味蘑菇菌絲體為研究材料, 對(duì)中國美味蘑菇菌絲體生物學(xué)特性 , 馴化栽培以及營養(yǎng)成分進(jìn)行研究; 其次 , 以中國美味蘑菇野生子實(shí)體的粗提物為材料，通過細(xì)胞遷移、克隆、細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡、ROS勺釋放、PARP勺表達(dá)以及凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)等檢測來評(píng)價(jià)石油醚提取物和氯仿提取物的抗宮頸癌 Hela 細(xì)胞活性 , 并進(jìn)一步探究中國美味蘑菇提取物作用機(jī)制 , 研究發(fā)現(xiàn)中國美味蘑菇野生子實(shí)體的提取物對(duì)Hela 細(xì)胞有較好的抑制作用。 然而

3、, 中國美味蘑菇提取物是混合物 , 具有許多成分不明的活性物質(zhì), 且發(fā)揮主要活性作用單體物質(zhì)很難找到。因此 , 后續(xù)對(duì)石油醚提取物進(jìn)行分離鑒定, 并從中分離得到一種單體化合物麥角甾醇 , 并對(duì)其進(jìn)行抗宮頸癌活性評(píng)價(jià)。 主要結(jié)果如下:1. 葡萄糖為中國美味蘑菇菌絲生長的最適碳源, 大豆蛋白胨為中國美味蘑菇菌絲生長最適的氮源; 而最適合中國美味蘑菇菌絲生長的溫度是 25c ,中國美味蘑菇菌絲生長最適pH值為6初步馴化顯示, 蘆葦栽培基質(zhì)第一潮菇平均每棒產(chǎn)量為 0.245kg, 生物學(xué)效率達(dá)38.5%; 中國美味蘑菇不僅高蛋白質(zhì)、低脂肪, 膳食纖維和礦物質(zhì)豐富 , 還具有較高的保健價(jià)值, 是一種不可

4、多得的藥食兩用菌。 2. 石油醚提取物和氯仿提取物均能抑制 Hela 細(xì)胞的遷移 , 克隆形成 , 細(xì)胞的增值, 促進(jìn)細(xì)胞凋亡并且可促進(jìn)PARF白表達(dá)和RO滯放。其抑制宮頸癌 Hela 細(xì)胞增殖的作用機(jī)制主要是通過上調(diào) Bax,Bad,P53,AIF和 cleaved-caspase-3 蛋白的表達(dá)和下調(diào) Bcl2,pro-capase-3 蛋白的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的。3.采用HPLCf口 NMRJ法，來鑒定中國美味蘑菇石油醴提取物和氯仿提取物中起抗腫瘤作用的活性成分。經(jīng)鑒定石油醚提取物中的組分A 為麥角甾醇。 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)表明石油醚提取物和麥角甾醇對(duì)Hela 細(xì)胞均具有很強(qiáng)的抑制作用 , 并且石油醚提取物對(duì)Hela 細(xì)胞的抑制作用大于麥角甾醇。本研究掌握了中國美味蘑菇的生物學(xué)特性, 并且將其馴化栽培成功 ; 同時(shí)對(duì)中國美味蘑菇野生子實(shí)體提取物進(jìn)行抗腫瘤活性研究, 發(fā)現(xiàn)石油醚提取物和氯仿提取物對(duì) Hela 有較好的抑制作用 , 其作用機(jī)制主要是通過促進(jìn)細(xì)胞凋亡來調(diào)控的。從石油醚提取物中分離鑒定出一種活性物質(zhì)為麥角甾醇, 并且麥角甾醇也可以抑制 Hela 細(xì)胞增值。由此可見 , 此研究可為中國美味蘑菇今