同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科ISO15189體系文件12血清肌酸激酶（CK）測(cè)定

1、同濟(jì)大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院檢驗(yàn)科生化組項(xiàng)目操作指導(dǎo)書(shū)TJYYJYKSH/XMZ112第2版標(biāo)題：血清肌酸激酶（CK）測(cè)定第章 第12節(jié)第 PAGE 3 頁(yè) 共 NUMPAGES 3 頁(yè)1. 目的：保證CK檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、可靠2. 適用范圍：CK在全自動(dòng)生化分析儀上的檢測(cè)3. 項(xiàng)目名稱：CK4. 檢測(cè)方法：酶偶聯(lián)測(cè)定法 原理：CK催化磷酸肌酸（CrP）與二磷酸腺苷（ADP）反應(yīng)產(chǎn)生三磷酸腺苷（ATP）與肌酸（Cr）； 偶聯(lián)己糖激酶（HK）及葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）的催化反應(yīng)。HK催化葡萄糖（Glu）與ATP反應(yīng)，形成葡萄糖-6-磷酸（G6P），G6PD催化G6P氧化，形成6-磷酸葡萄糖內(nèi)酯（6

2、-PG） 及NADPH。NADPH生成的速率代表CK活力。其反應(yīng)式如下： CK CrP + ADP Cr + ATP pH6.7 HK ATP + Glu G-6-P + ADP G6PD G-6-P + NADP+ 6PG + NADPH + H+ 6. 試劑：6.1 檢測(cè)試劑：6.1.1 品牌：申能-德賽6.1.2 貨號(hào)：141 1607060 16.1.3 包裝規(guī)格：R1：580 ml + R2：520 ml6.1.4 試劑組成： 咪唑緩沖液：pH6.7，100mmol/L；肌酸磷酸：30 mmol/L；乙酸鎂：10mmol/L； 葡萄糖：20mmol/L；N-乙酰半胱氨酸：20 mmo

3、l/L；EDTA：2mmol/L；ADP：2mmol/L； AMP：5mmol/L；NADP：2mmol/L；五磷酸二腺苷：10umol/L； 葡萄糖-6-磷酸脫氫酶：1500U/L；己糖激酶：2500U/L 6.2 標(biāo)準(zhǔn)品：羅氏C.F.A.S.混合定標(biāo)液7. 儀器：HITACHI 7180 生化分析儀8. 操作：自動(dòng)生化分析儀測(cè)定，具體參數(shù)見(jiàn)附錄。線性范圍： 1000 U/L參考范圍：25 200U/L（測(cè)定溫度37）11. 臨床意義： CK主要存在于骨骼肌和心肌，在腦組織中也有存在。各種類型進(jìn)行性肌萎縮時(shí)，血清CK活性均可增高。神經(jīng)因素引起的肌萎縮如脊髓灰白質(zhì)炎時(shí)活力正常，皮肌炎時(shí)CK活性

4、可有輕度或中度增高。急性心肌梗塞后24小時(shí)就開(kāi)始增高，可高達(dá)正常上限的1012倍。CK對(duì)診斷心肌梗塞較AST、LD的特異性高，但此酶增高持續(xù)時(shí)間短，24天就恢復(fù)正常。病毒性心肌炎時(shí)也明顯升高，對(duì)診斷及預(yù)后有參考價(jià)值。CK增高還見(jiàn)于腦血管意外、腦膜炎、甲狀腺機(jī)能低下等患者。還應(yīng)注意到一些非疾病因素如劇烈運(yùn)動(dòng)、各種插管及手術(shù)、肌肉注射冬眠靈和抗生素等也可能引起CK活性增高。 標(biāo)本要求：血清、肝素抗凝血漿標(biāo)本。標(biāo)本須在12h內(nèi)完成測(cè)定，將蓋緊的容器放在陰暗處，活性在48能穩(wěn)定3天。13. 注意事項(xiàng)：13.1 超過(guò)測(cè)定線性范圍，更高活力的血清用已知CK活性正常的血清稀釋后再測(cè)。13.2 血清中存有內(nèi)源性的抑制劑，表現(xiàn)CK活力隨血清稀釋倍數(shù)增加而增加，故不宜用鹽水稀釋。13.3 最好用血清標(biāo)本，肝素血漿也可用。CK活性不穩(wěn)定，血清保存時(shí)易喪失，標(biāo)本采集后應(yīng)盡快將血清冷卻到4。13.4 紅細(xì)胞不含CK，輕度溶血無(wú)影響。14