原發(fā)性高血壓病不同證型PPARγ基因表達(dá)與頸動脈血管重構(gòu)的關(guān)系

1、原發(fā)性高血壓病不同證型PPAR基因表達(dá)與頸動脈血管重構(gòu)的關(guān)系【摘要】目的討論原發(fā)性高血壓EH證型與外周血淋巴細(xì)胞過氧化物酶體增殖物激活受體信使核糖核酸Perxiseprliferatr-ativatedreeptr，PPARRNA表達(dá)及頸動脈血管重構(gòu)的關(guān)系。方法50例EH患者分為陰虛陽亢型組，痰濕壅盛型組，每組各25例，另選25例安康體檢者為正常對照組。別離各組外周血淋巴細(xì)胞，采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反響法reversetransriptinplyerasehainreatin，RT-PR檢測各組PPARRNA表達(dá)，應(yīng)用彩色多普勒超聲診斷儀測量頸總動脈內(nèi)膜-中膜厚度。結(jié)果與正常對照組比擬，兩組患者

2、PPARRNA均表達(dá)下調(diào)，且頸動脈內(nèi)膜增厚P0.05。與陰虛陽亢型組比擬，痰濕壅盛型組PPARRNA表達(dá)下調(diào)及頸動脈內(nèi)膜增厚明顯P0.05。結(jié)論淋巴細(xì)胞PPARRNA表達(dá)可能與EH頸動脈重塑相關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】原發(fā)性高血壓；證型；過氧化物酶體增殖物激活受體信使核糖核酸；逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反響法原發(fā)性高血壓病essentialhypertensin，EH是一種多基因遺傳與環(huán)境因素交互作用而產(chǎn)生的以動脈血壓升高為特征的全身性疾玻近年來研究發(fā)現(xiàn)過氧化物酶體增殖物激活受體perxiseprliferatr-ativitedreeptr，PPARr與EH具有一定相關(guān)性1。PPAR存在于淋巴單核細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)

3、胞、血管平滑肌細(xì)胞，參與調(diào)節(jié)炎癥，細(xì)胞增殖/凋亡，動脈粥樣硬化等病理過程2。陰虛陽亢型和痰濕壅盛型是EH的常見證型。本研究采用通過觀察比擬此兩種證型PPAR基因表達(dá)及頸動脈內(nèi)膜-中膜厚度，為EH辨證分型提供分子程度根據(jù)，并且指導(dǎo)臨床用藥。1資料與方法1.1研究對象1.1.1病例選擇20222022年在石家莊市中醫(yī)院門診或病房首次確診為EH陰虛陽亢型25例設(shè)為陰虛陽亢組，痰濕壅盛型25例設(shè)為痰濕壅盛組，安康體檢者設(shè)為正常組25例。各組病例資料見表1。表1各組病例資料略1.1.2診斷標(biāo)準(zhǔn)西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)按照2022年?中國高血壓防治指南?修訂版中EH的診斷標(biāo)準(zhǔn)。中醫(yī)證候診斷標(biāo)準(zhǔn)參照中華人民共和國國家藥

4、品監(jiān)視管理局2002年制定公布的?中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原那么中藥新藥治療高血壓病的臨床研究指導(dǎo)原那么?中陰虛陽亢型或痰濕壅盛型的診斷標(biāo)準(zhǔn)。1.1.3納入標(biāo)準(zhǔn)西醫(yī)診斷為EH；中醫(yī)診斷為陰虛陽亢型或痰濕壅盛型。1.1.4排除標(biāo)準(zhǔn)年齡在45歲以下或70歲以上；繼發(fā)性高血壓；感染性疾病患者。1.2試劑及儀器人淋巴細(xì)胞別離液晶美公司、TrizlR公司、半定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈?zhǔn)椒错懺噭┖蠪erentas公司、PR試劑盒Ferentas公司、DNAarkerFerentas公司、PPAR引物上游引物：5-AAGAAATGTAAAG-3下游引物：5-TTTGTAGATTTGAG-3，上海生工工程技術(shù)效勞、-at

5、in引物上游引物：5-TAAAGATTATGAAAAGT-3下游引物：5-AGATGGAGGGGGGATAT-3，上海生工工程技術(shù)效勞、瓊脂糖Ares公司、EBSiga公司。低溫離心機(jī)Jurn公司、PR儀PXE0.2，Ther公司、電泳儀DYY-8型，北京市八一儀器廠、凝膠成像分析系統(tǒng)Vilberlurat公司、彩色多普勒超聲診斷儀PerVisin6000，日本東芝。1.3RT-PR法檢測外周血淋巴細(xì)胞PPAPRNA表達(dá)3抽清晨空腹肘靜脈肝素抗凝血，1000r/in離心1in，棄上清；鹽水與血等體積混勻稀釋；1l淋巴細(xì)胞別離液面上，用滴管沿壁緩慢加2l稀釋血；2000r/in離心20in；管內(nèi)

6、分為4層，吸出云霧層淋巴細(xì)胞；用5生理鹽水稀釋，1500r/in離心10in，重復(fù)1次，別離淋巴細(xì)胞。提取細(xì)胞總RNA，總RNA逆轉(zhuǎn)錄成DNA，PR擴(kuò)增，反響條件：94預(yù)變性5in，94變性30s，58退火45s，72延伸45s，共35個(gè)循環(huán)，72延伸5in。PR產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳，凝膠攝像系統(tǒng)采集電泳圖像，用PPAR條帶灰度與-atin標(biāo)準(zhǔn)條帶的比值進(jìn)展半定量分析。1.4彩色多普勒超聲測量頸總動脈內(nèi)膜-中膜厚度由專人操作將探頭置于頸部縱橫掃查，觀察頸總動脈，頸內(nèi)動脈、頸外動脈，測量頸總動脈內(nèi)膜-中膜厚度IT。1.5統(tǒng)計(jì)處理計(jì)量資料數(shù)據(jù)均用s表示，采用SPSS12.0軟件進(jìn)展分析，組間比擬用單

7、因素方差分析，以P0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2結(jié)果2.1各組PPARRNA表達(dá)與正常對照組0.770.11比擬，陰虛陽亢型組0.350.10及痰濕壅盛型0.220.11患者PPARRNA表達(dá)減弱，組間比擬具有顯著性差異P0.05。與陰虛陽亢型組比擬，痰濕壅盛組PPARRNA表達(dá)下調(diào)明顯P0.05。見表2。2.2各組頸動脈血管病變與正常對照組比擬，陰虛陽亢型和痰濕壅盛型高血壓患者IT增厚，組間比擬具有顯著性差異P0.05。與陰虛陽亢型組比擬，痰濕壅盛型IT增厚明顯P0.05。見表2。表2各組PPARRNA表達(dá)及IT變化略3討論動脈粥樣硬化是一種常見并多發(fā)病，是多種心腦血管疾病

8、的病理基矗高血壓是動脈粥樣硬化的重要危險(xiǎn)因素，可加速動脈粥樣硬化的發(fā)生和開展。用高頻探頭彩色多普勒超聲檢測頸動脈內(nèi)膜中層厚度已經(jīng)被公認(rèn)是當(dāng)代斷定動脈硬化程度最可靠的指標(biāo)。國內(nèi)外近年來大量臨床與流行病學(xué)研究提示頸動脈的厚度與冠心并腦血管病顯著相關(guān)4。本研究結(jié)果顯示，痰濕壅盛型和陰虛陽亢型EH患者血壓均高于正常對照組，且痰濕壅盛型增高較陰虛陽亢型明顯。同時(shí)痰濕壅盛型IT增厚較陰虛陽亢型明顯，說明高血壓是引起內(nèi)中膜厚度增加的重要因素，且血壓越高，內(nèi)中膜增厚越明顯。在中醫(yī)辨證分型中，痰濕壅盛型血管重構(gòu)較陰虛陽亢型明顯，提示作為病理產(chǎn)物和致病因素的痰濕在血管重構(gòu)中起重要作用。過氧化物酶體增殖物激活受體p

9、erxiseprliferatr-ativitedreeptrs,PPARs是一類由配體激活的核轉(zhuǎn)錄因子超家族成員，PPARs有3種亞型：PPAR、PPAR亦稱PPAR、PPAR。其中PPAR基因在人類位于3號染色體。PPAR至少有7種亞型，1和2是最主要的亞型，主要存在于脂肪組織，是參與調(diào)節(jié)糖、脂質(zhì)代謝的重要因子。近年發(fā)現(xiàn)PPAR還存在于血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、心臟組織，參與調(diào)節(jié)炎癥，細(xì)胞凋亡，平滑肌增殖，遷移及動脈粥樣硬化等病理過程。本研究結(jié)果顯示，安康人和EH患者外周血淋巴細(xì)胞均有PPAR基因表達(dá)，且痰濕壅盛型和陰虛陽亢型EH患者外周血淋巴細(xì)胞PPAR基因表達(dá)減弱，提示PPAR可能參與EH循環(huán)中淋巴細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)，參與頸動脈重構(gòu)。在中醫(yī)辨證分型中，痰濕壅盛型PPAR表達(dá)較陰虛陽亢型明顯減弱，提示PPAR表達(dá)的變化可作為高血壓辨證分型根據(jù)。【參考文獻(xiàn)】1付燕.PPARs與心血管疾病J.醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)雜志，2022，1(6)：376.2劉尊敬，劉運(yùn)海，楊期東.PPAR配體和相關(guān)血管