動物人工授精

1、關于動物人工授精第一張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 一、學習目標 1.掌握 （1）人工授精的概念、人工授精主要技術環(huán)節(jié) （2）采精（采精場地、采精準備、采精頻率） （3）稀釋液的主要成分及作用，稀釋液的配置與保存，精液稀釋的程序與方法 （4）精液的常溫保存、低溫保存以及冷凍保存的原理、程序與方法；冷凍精液解凍的程序與方法，冷凍精液的貯存與運輸方法 （5）輸精：輸精前準備，輸精要求與方法第二張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 2.理解 （1）人工授精的意義 （2）精液品質評價指標與方法 （3）影響輸精成功率的因素二、學習重點與難點 1.重點 采精與精液品質評價、精液稀

2、釋和保存、輸精 2.難點 精液冷凍保存原理第三張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 人工授精概述 一、自然交配(natural mating) 種公畜與發(fā)情母畜直接交配的配種方式稱為自然交配。 1.自由交配：公母畜混群飼養(yǎng)，公畜任意和發(fā)情母畜交配。原始交配方式，容易引起近親繁殖。 2.分群交配：在配種季節(jié)，把一頭或數(shù)頭經選擇的公畜放入一定數(shù)量的母畜群中進行交配，11020（一夫多妻）。 3.圍欄交配：與分群交配相同，配種時，在圍欄內放入一頭母畜與特定的公畜交配。公畜與母畜的比例為11。 4.人工輔助交配：公母畜平時隔離，交配時，選擇特定的公畜，人為控制交配，交配完成后公母畜即隔

3、離開來。第四張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月二、人工授精 人工授精（artificial insemination, AI）是指用特定的器械采集公畜的精液，通過檢查、稀釋、保存等適當處理后，再用器械把精液輸入到發(fā)情母畜的生殖道內，以代替公母畜自然交配而繁殖后代的一種繁殖技術。 1780年，意大利生理學家Spallanzani將公犬的精子注入母犬生殖道，獲得了3只小犬，這是人類第一次進行的人工授精嘗試。1899年，前蘇聯(lián)科學家開始研究家畜的人工授精技術，Ivanoff起初的研究對象是馬，但首次成功進行了牛和綿羊的人工授精。第五張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 我國家畜

4、的人工授精技術研究始于1935年的句容種馬場，到1951年以后，隨著我國畜牧業(yè)的迅速發(fā)展，人工授精技術得到推廣，主要在東北推廣馬的人工授精。奶牛的人工受精始于20世紀50年代中期，到70年代已經普及冷凍精液進行人工授精。 目前，我國各省、市、自治區(qū)都建有冷凍精液站，城郊和大型乳牛場采用凍精配種的奶牛幾乎為100%。其它家畜凍精人工授精工作也在一定的范圍內得到應用。第六張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月三、人工授精的意義 1.有效改變家畜的配種過程，提高優(yōu)良種公畜的配種效能和種用價值，充分發(fā)揮公畜繁殖潛力。 畜 種自然交配人工授精豬3060頭/年200400頭/年牛2040頭/年60

5、0012000頭/年羊3050只/年700010000只/年馬3050匹/年200400匹/年第七張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 2.加速家畜品種改良，促進育種工作進程。 人工授精大大提高了公畜的配種效能，就能選擇最優(yōu)秀的公畜用于配種，從而成為迅速增殖良種家畜的有效方法和改良畜種進行育種工作的有力手段。 3.減少了種公畜的飼養(yǎng)頭數(shù)，降低飼養(yǎng)管理費用。 4.配種時公母畜互不接觸，可防止某些生殖疾病的傳播。 由于人工授精必須嚴格遵守操作規(guī)程，只有健康的公母畜才能用作人工授精，因此可減少和防止因本交引起的傳染性疾病，如布氏桿菌病、毛滴蟲病、胎兒弧菌病、傳染性流產、馬媾疫等。第八張，P

6、PT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 5.克服公母畜體格懸殊不易交配的困難，有利于提高母畜受胎率。 人工授精所用精液都必須經過檢查，以保證質量；通過發(fā)情鑒定可以掌握適宜的配種時機并及時發(fā)現(xiàn)某些生殖疾病；可以克服因公、母畜體格相差太大或因生殖道異常造成交配困難引起的不孕，從而有利于提高母畜的受胎率。 6.克服時間和地域的限制，并可開展國際間的交流與貿易。 優(yōu)良公畜的精液可以長期冷凍保存，而且便于運輸，因此可以在任何時間(即使在公畜死后)、任何地點選用某頭公畜的精液輸精。對一些有特殊遺傳特性或即將絕跡的品種或個體的精液可以冷凍保存，建立精液基因庫，對家畜的遺傳、育種及動物多樣性的保存均具有重大

7、的科學價值。第九張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月四、人工授精技術的基本環(huán)節(jié) 人工授精技術的基本技術環(huán)節(jié)包括采精、精液品質檢查、精液的稀釋、精液的分裝、精液的保存（液態(tài)保存、冷凍保存）、精液的運輸、冷凍精液的解凍與檢查、輸精等。7.有利于精液的長期保存與利用8.為開展生殖生物技術科學研究提供了有效手段 項 目自然配種人工授精飼養(yǎng)公牛數(shù)需依母牛數(shù)決定少或無需飼養(yǎng)遺傳選擇性較低較高可配種時間較長較短同期配種較不易容易疾病控制較不易容易所需技術無需需配合相關技術小知識第十張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月第二節(jié) 采 精 采精(semen collection)就是精液的采集。

8、采精是人工授精的第一個環(huán)節(jié)，必須嚴格按照操作規(guī)程，以保證公畜正常、充分的性行為表現(xiàn)，采集到量多、質優(yōu)、無污染的精液。一、采精前的準備 （一）場地 采精應有專用場地，以便公畜建立穩(wěn)固的條件反射；要求寬敞、平坦、安靜、清潔，避免陽光直射，并有采精架保定公畜；在配種站立最好建立采精室，并與精液處理室相連，以方便正常工作，同時也可以控制溫度、濕度、光照等，便于消毒，保證精液質量。 室內采精場面積一般為1010m2。第十一張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 （二）臺畜 臺畜(dummy)的選擇必須滿足種公畜的要求，可利用活臺畜或者假臺畜。采精時用發(fā)情良好的母畜做臺畜效果最好，經過訓練的公母畜

9、皆可作為臺畜。第十二張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 對于活臺畜，指使用與公畜同種的母畜、閹畜或另一頭種公畜作臺畜?；钆_畜應健康、體壯、大小適中、性情溫順、四肢有力。 采精前，將臺畜保定在采精架內，臺畜的尾根部、外陰部、肛門應清洗干凈，采精時將尾巴纏在一側?；钆_畜第十三張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 假臺畜即采精臺，模仿母畜體型大小，選用金屬材料或木料做成的具有一定支撐力的支架。假臺畜要求大小適宜，堅實牢固，表面柔軟干凈，用畜皮、人造革等偽裝。牛采精架的構造采精用假臺畜第十四張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 在假臺畜的后軀涂抹發(fā)情母畜的陰道粘液或尿液

10、。其目的是刺激公畜性欲并引誘其爬跨假臺畜，經過幾次采精后即可調教成功。 以發(fā)情母畜誘性，在公畜達到性高潮時誘導爬跨假臺畜。在假臺畜旁邊牽一發(fā)情母畜，誘使其爬跨數(shù)次，但不使其交配，當公畜性欲達到高峰時迅速牽走母畜，令其爬跨假臺畜。公畜調教的基本方法 觀看調教好的公畜爬跨假臺畜。將需要調教的公畜拴系在假臺畜附近，讓其觀看另一頭已經調教好的公畜爬跨假臺畜采精，然后再誘導其爬跨假臺畜。第十五張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月公畜調教的注意事項1.調教過程中要反復進行訓練，耐心誘導，切勿強迫、恐嚇、抽打等，以防止性抑制而造成調教困難。2.調教時應注意公畜外生殖器的清潔衛(wèi)生。3.調教時間最好選

11、擇在早上，早上公畜精力充沛，性欲旺盛。4.調教時間、地點要固定，每次調教時間不宜過長。第十六張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 （三）性準備 公畜在采精前，空爬跨幾次臺畜，可以提高精子數(shù)量及精子活率，這個空爬跨過程叫性準備。 常采用以下方法來做好性準備： 1.改換臺畜 2.變換臺畜位置 3.觀摩其他家畜爬跨示范作用 4.自身空爬（注意：有的公畜有自淫現(xiàn)象，就不能性刺激）第十七張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 （四）藥液的準備 1.配制稀釋液 后講。 2.配制潤滑劑（向凡士林加入1/3的液體石蠟，高壓滅菌后涼冷，每周滅菌一次，并潤滑內胎）。 3.配制70%75%的酒精。

12、 4.配制小蘇打液。取小蘇打粉2g加溫開水100ml，消毒公畜包皮，母畜后軀及洗滌器械、桌面等。 5.煤酚皂液（來蘇兒）。取2ml加溫開水100ml，消毒母畜的外陰部。第十八張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 （五）器械的消毒 1.將清洗好的集精杯、貯精瓶、紗布、毛巾、潤滑劑等放入高壓滅菌器內，以1201kg左右的壓力持續(xù)1520分鐘，也可用一般的鋼筋鍋蒸汽消毒30分鐘。 2.溫度計、玻璃棒、長柄鉗子，用75%的酒精棉球消毒，晾干后，用滅菌稀釋液沖洗2遍。 3.輸精管等玻璃容器在清洗后，可放在鼓風干燥箱中加溫（160180）之間，維持20分鐘。第十九張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于

13、2022年6月二、采精方法 一種理想的采精方法，應具備以下四個條件或者遵循以下四個基本原則： 可全部收集公畜一次射出的精液 不影響精液品質 公畜生殖器官和性機能不會受到損傷或影響 器械用具簡單，使用方便 目前在生產中常用的采精方法有：假陰道法、手握法、按摩法和電刺激法，其中以假陰道法最為理想。第二十張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 (一)假陰道法 假陰道法是用模擬母畜陰道環(huán)境制成的人工陰道，誘導公畜在其中射精而獲取精液的方法。 1.假陰道的結構和具備條件 假陰道(artificial vagina)是一筒狀結構，主要由外殼、內胎、集精杯及其附件組成。外殼為筒狀，可用硬質塑料或鍍鋅

14、鐵皮制成；內胎為彈性強、薄而柔軟無毒的橡膠筒，裝在外殼內，構成假陰道內壁；集精杯由暗色玻璃或膠質制成，裝在假陰道的一端。固定內胎的膠圈，保定集精杯(牛)有三角保定帶，充氣用的活塞和雙連球，連接集精瓶(豬)或集精管(牛)的膠漏斗，以及為防止精液污染而敷設在假陰道入口處的泡沫塑料墊，用于固定龜頭(豬)用的螺旋橡膠圈等，稱為附件。第二十一張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十二張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 假陰道在使用時先安裝內胎，然后消毒、沖洗、注水、涂滑潤劑、調節(jié)溫度和壓力等步驟，使假陰道達到與母畜陰道環(huán)境相似的條件。 (1)適當溫度 注入相當假陰道容積2/3的溫

15、水，采精時保持3840。集精杯應保持3435。 (2)適當壓力 借助注入水和空氣來調節(jié)假陰道的壓力。以假陰道內胎入口處形成 Y 形為宜。 第二十三張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 (3)適當潤滑度 用消毒過的潤滑劑對假陰道內表面潤滑，涂抹部位是假陰道全長的1/21/3。 (4)無菌 凡是接觸精液的部分如內胎、集精杯及橡膠漏斗均須嚴格消毒。 (5)無破損漏洞 外殼、內胎、集精杯不得漏水或漏氣。第二十四張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 采精前，將假陰道入口處用消毒過的紗布24層蓋住，防止污染。一種最好方式是將裝好的假陰道放在4042的恒溫箱內，以免采精前溫度下降。 在安

16、裝假陰道時，不同品種的動物對上述條件的要求不同。 牛：38，其次是壓力和潤滑度。 羊：38，其次是壓力和潤滑度。 豬：主要是壓力，其次是潤滑度。 馬：主要是壓力，其次是潤滑度。標準壓力，用指頭粗的玻棒從假陰道中不掉下來。第二十五張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 2.采精操作 一種比較安全而簡單的方法是將假陰道安放在能夠調節(jié)假陰道角度的假臺畜后軀內，任由公畜爬跨而在假陰道內射精。A.安裝假陰道B.引導公畜至臺畜后面，誘導公畜爬跨C.及時將陰莖導入假陰道D.向下傾斜假陰道的集精杯端，收集精液E.當陰莖慢慢回縮自動脫出時，將假陰道直立、放氣、放水F.精液送化驗室進行檢查第二十六張，PP

17、T共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 公牛采精：采精員站在臺畜的右后側，右手握住假陰道，集精杯一端向上。當公畜爬跨時，使假陰道與公畜陰莖伸出方向成直線，迅速將陰莖導入假陰道內，公畜的后軀向前沖即射精，隨后將假陰道集精杯一端向下傾斜，以便使精液完全流入集精杯內。 當公畜爬下時，采精人員應持假陰道隨陰莖后移，打開開關，放出空氣，待陰莖自行軟縮脫出后，迅速取下假陰道，立即送往精液處理室檢查，取下集精杯，蓋上集精杯蓋。 第二十七張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十八張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 (二)手握法 手握法適宜于采集豬、犬、狐貍等的精液，具有設備簡單、操作方

18、便、能采集富含精子部分的精液等優(yōu)點，但其缺點是精液容易污染和受低溫打擊的影響。 手握法采精是模仿母豬子宮頸對公豬螺旋狀陰莖龜頭約束力而引起射精的生理刺激，以手握其陰莖龜頭呈節(jié)奏性松緊給予壓力進行刺激而采精。當公豬爬跨臺畜陰莖伸出后，采精員握在空拳中，使其陰莖抽動片刻后，手指握緊螺旋狀龜頭，然后順勢牽出整個陰莖，就可采精。第二十九張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 采精員蹲在假臺畜一側，戴上滅菌手套，待公豬爬跨臺畜后，用0.1%高錳酸鉀溶液將公豬包皮附近洗凈消毒，并用生理鹽水沖洗，然后將手捏成空拳，于公豬陰莖伸出同時，導入空拳內，一松一緊有節(jié)奏性地施加壓力，以不使陰莖滑脫為標準，待陰

19、莖充分勃起時即可引起公豬射精。另一只手持保溫的集精瓶(帶有過濾紗布)收集濃精部分的精液。公豬射精停止，可按上述法再次施加壓力，即可第2或第3次射精，待射精全部結束時再松開陰莖。第三十張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月分段采精：棄掉含副性腺分泌物多、精子較少、精液清亮白色的第一段和精液較稀、清亮、精子少的第三段，只收集精液濃、精子多、呈乳白色的第二段。第三十一張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 (三)按摩法 按摩法適用于無爬跨能力的公牛和禽類。對于牛，先將直腸宿糞排除，再將手伸入直腸約25cm處，按摩精囊腺和輸精管壺腹，使精液流出，同時由助手按摩陰莖S狀彎曲部使陰莖伸出，

20、便于收集精液。 雞采精時由助手兩手分握公雞兩腿，以自然寬度分開，尾部朝向術者，泄殖腔周圍剪毛消毒后，采精員右手拇指與食指在泄殖腔下部兩側抖動觸摸腹部柔軟處，然后迅速輕輕用力向上抵壓泄殖腔，使交配器翻出；固定在泄殖腔兩上側的左手拇指和食指微微擠壓，精液即可順利排出。第三十二張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月三、采精頻率 采精頻率(frequency of semen collection)是指每周內對公畜的采精次數(shù)。 1g睪丸組織每周大約生產5000萬精子。 牛：成年公牛一般每周采精2次，每次連續(xù)采精2遍。也可每周采精3次，隔日采精。牛每次射精約為100150億。 羊：附睪貯存量大而

21、射精量少，由于配種季節(jié)短，每天可采精多次而不影響精液品質。每次射精約為2030億。 豬：射精量大，很快使附睪內貯存精子徹底排空，成年公豬采精最好隔日1次。每次射精約為300500億。 馬：射精量大，很快使附睪內貯存精子徹底排空，采精最好隔日1次。每次射精約為100150億。第三十三張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 精液品質檢查的目的在于確定精液品質的優(yōu)劣，以此作為精液稀釋、保存的依據(jù)。同時，也反映種公畜飼養(yǎng)管理水平和生殖器官的機能狀態(tài)，以及精液在稀釋、保存、冷凍和運輸過程中的品質變化及處理效果。采得精液后，要迅速置于37條件下進行檢查。 現(xiàn)行評定精液品質的方法主要有外觀檢查法、顯

22、微鏡檢查法、生物化學法等。無論哪一種檢查法，都必須以受精力高低為依據(jù)。第三節(jié) 精液品質檢查第三十四張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月一、精液外觀和精液量 1.云霧狀 牛、羊、鹿、犬和狐的精液因精子密度大而混濁不透明。肉眼觀察剛采得的新鮮精液時，可看到如翻騰滾滾的霧狀，這是精子密度大而運動又非常活躍的表現(xiàn)。精液混濁度越大，云霧狀越顯著，精子密度和活率也就越高。云霧狀顯著者可用“+”表示；比較顯著用“+表示；不顯著用“+”表示；如果沒有云霧狀則用“-”表示。馬、豬的精子少，混濁度也較低，云霧狀不顯著。 2.氣味 公畜的精液略帶腥味。如有異常氣味，可能是混有尿液、膿液、塵土、糞渣或其他異

23、物的表現(xiàn)，應廢棄。色澤與氣味檢查可以結合進行，使鑒定結果更為準確。 第三十五張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月新鮮收集的羊、牛、馬、豬（從左到右）的射出精液 3.色澤 正常精液的顏色為乳白色和灰白色，且精子密度越高，乳白程度越濃，其透明度也就越低。正常牛、羊、鹿、犬和狐的精液均呈乳白色或灰白色，但有時呈乳黃色（多見于牛)；豬、馬、兔均為淡乳白色或淺灰白色。第三十六張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 4.射精量(semen volume) 公畜一次采精射出精液的容量。射精量因動物種類、品種及個體的不同而不同。同一個體也會因年齡、營養(yǎng)、性準備、采精方法、采精頻率而有所變化。

24、畜 種馬驢牛羊豬犬兔鹿狐平均射精量（ml）7050412505131正常范圍（ml）3010020802100.521505002150.22250.53第三十七張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月二、精子活率 精子活率（sperm motility）就是指精液中呈直線前進運動的精子數(shù)占總精子數(shù)的百分比。直線運動的精子是指精子近似直線地從一點移動或前進到另一點，也稱為有效精子。 精子的運動方式有擺動、旋轉、曲線前進和直線前進運動幾種。其中只有直線前進運動的精子才具有正常的生存和受精能力，與精子的受精力密切相關。精子活率的測定是評定精液品質優(yōu)劣的一個重要指標。一般在采精后、精液處理前后

25、、輸精前都應進行檢查。第三十八張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 精子活率一般采用十級評分法來表示。即按精子直線運動占視野中精子的估計百分比來表示。若精子100%呈直線前進運動，則評為1.0，90%即為0.9，依此類推。 一般新鮮精液活率為0.70.9左右。其中奶牛的精液比水牛高，驢的比馬的高，豬的濃精和牛相似。為了保證有較高的受胎率，用于輸精的精子活率應達到一定等級，液態(tài)保存的精液應在0.50.6以上，冷凍保存的精液在0.3以上。 精子活率的檢查通常是在200400倍顯微鏡下進行。由于精子受溫度的影響較大，檢查時應在37左右進行，最好用帶有電熱裝置的顯微鏡。 第三十九張，PPT共

26、一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月牛精子活力檢查的程序載玻片預溫精液稀釋取樣檢查鏡檢活力估測活力記錄將恒溫加熱板放在載物臺上，打開電源并調整控制溫度至37，然后放在載玻片 將生理鹽水與精液等溫后，按1:10稀釋 取10ul放在預溫后載玻片中間，蓋上蓋玻片 用100倍和400倍觀察 判斷視野中前進運動精子占的百分率 按10級制評分和記錄 第四十張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月三、精子密度 精子密度(sperm concentration)也稱精子濃度，指精液的單位容積(通常是1ml)內所含有的精子數(shù)目。目前測定精子密度的主要方法有目測法、血細胞計數(shù)法和光電比色法等。 1.目測法 在

27、顯微鏡下根據(jù)精子分布的稠密和稀疏程度，將精子大致分為“密”、“中”、“稀”三個等級。 密：表示在整個視野里精子密度很大，彼此之間空隙很小，很難看到單個精子運動情況，每毫升精液中含有精子數(shù)為10億以上。 中：表示精子間空隙明顯，彼此間距離約一個精子的長度，每毫升精液含精子數(shù)大約210億。第四十一張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 ?。罕硎揪臃稚⒃谝曇爸?，精子之間空隙超過一個精子的長度，每毫升含2億個以下。 畜 種精子密度密中稀牛1020億/ml810億/ml8億/ml以下羊25億/ml以上2025億/ml20億/ml以下豬、馬2億/ml以上12億/ml1億/ml以下第四十二張，PP

28、T共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 2.血細胞計數(shù)法 用血色素吸管吸取被測精液作100或200倍稀釋，稀釋液一般采用3% NaCl溶液。然后取一滴滴于計數(shù)板上的蓋玻片邊緣，使精液滲入到計數(shù)室內。在400600倍顯微鏡下統(tǒng)計出計數(shù)室的四角及中央共5個中方格內的80個小方格內的精子數(shù)（X），代入下列公式即為每毫升被測原精液所含的精子數(shù) X510稀釋倍數(shù)1000精子數(shù)/mL 簡化計算方法：5個大方格的精子數(shù)5萬稀釋倍數(shù) 為減少誤差，必須進行兩次精子計算，其誤差小于10%。第四十三張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月第四十四張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 3.光電比色計測

29、定法 目前較準確用來測定精子密度的一種簡便方法，適用于牛、羊的精液和除去精液膠樣物各種動物精液。其原理是精液中精子越多、其透光性越低。使用光電比色計通過反射光和透射光檢驗，能準確測定精液中精子的密度。檢測前需先繪制成查數(shù)表，其方法是：將原精液稀釋成不同比例，并以血細胞計數(shù)器測定各種稀釋比例的精子密度，制成標準管，再用光電比色計測定已知精子密度的各種標準透光度求出相差1%透光率的級差精子數(shù)，根據(jù)其不同透光度與其對應的精子數(shù)，制成精子查數(shù)表，也可繪成曲線圖。測定精液樣品時，只要將原精液按一定比例稀釋，根據(jù)其透光度查對精子查數(shù)表，即可得出精液樣品的精子密度。第四十五張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2

30、022年6月四、精子形態(tài) 精子形態(tài)是否正常與母畜的受胎率密切相關。精子形態(tài)檢查有畸形率和頂體異常率檢查兩個方面。 1.精子畸形率(abnormal spermrate) 畸形精子是形態(tài)和結構不正常的精子的統(tǒng)稱。精子畸形率是精液中畸形精子數(shù)占總精子數(shù)的百分率。根據(jù)精子的畸形部位，可分為4類。 第1類：頭部畸形，如頭部巨大、瘦小、細長、圓形、輪廓不清、皺縮、缺損、雙頭等； 第2類：頸部畸形，如頸部膨大、纖細、屈折、不全、帶有原生質滴、不鮮明、雙頸等； 第3類：中段畸形，如中段膨大、纖細、不全、帶有原生質滴、雙體等；第四十六張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 第4類：主段畸形，如主段彎曲

31、、屈折、回旋、短小、長大、缺陷、帶有原生質滴、雙尾等，以中段和主段畸形為多。 在正常精液中，一般以精子尾部畸形比較多見，頭部和頸部畸形較少。動物精液中畸形精子率一般不會超過20%。牛不超過18%，水牛不超過15%，羊不超過14%，豬不超過18%，馬不超過12%，狗和狐不超過20%。如果超過20%，則影響受精力，表示精子品質不良，不宜用作輸精。第四十七張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月1.將1滴精液滴在玻璃片上2.用另一玻片拉向液滴，使玻璃片邊緣附著精液3.將玻片推向另一端 第四十八張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 精子生成過程受阻 副性腺及尿道分泌物的病理變化 精液處

32、理不當，精子遭受外界不良影響的刺激。 畸形精子的檢查，可在計數(shù)死活精子數(shù)的同時進行，也可將精液制成抹片直接在顯微鏡下觀察，或用普通染色液（美藍）或紅藍墨水染色，水洗干燥后鏡檢。檢查的精子數(shù)不得少于200個，計算畸形百分比，即畸形率?；尉映霈F(xiàn)的主要原因為什么？第四十九張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 2.精子頂體異常率(abnormal spermacrosome) 精子頂體異常率是指精液中頂體異常的精子數(shù)占精子總數(shù)的百分率。頂體中含有多種酶類，在受精過程中具有重要作用，因此只有呈直線前進運動并具有完整頂體的精子才具有正常的受精能力。 在正常情況下，牛精子頂體異常率為5.9%，

33、豬為2.3%。如頂體異常率顯著增加，例如牛超過14%以上，豬超過4.3%以上，就會直接影響受精力。 頂體異常主要有膨脹、缺損、部分脫落、全部脫落等數(shù)種。頂體異常出現(xiàn)的原因可能與精子生成過程和副性腺分泌物異常有關，但更重要的可能是由于射出體外后精子受低溫打擊，特別是冷凍方法不當而造成。第五十張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 頂體異常率的常規(guī)檢查方法是：先同畸形精子檢查一樣制成抹片，待自然干燥后再在固定液中固定片刻，水洗后用姬姆薩緩沖液染色1.52.0h，再水洗干燥后，用樹脂封裝，置于1000倍以上顯微鏡或相差顯微鏡下觀察200個以上的精子，計算異常率。凡是含有卵黃、甘油成分稀釋液的

34、精液抹片，必須先要在含有甲醛的檸檬酸鹽液中固定，然后在37下干燥后，才能染色和鏡檢。第五十一張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月五、精子存活時間和存活指數(shù)精子存活時間是指精子在體外一定保存條件下的總生存時間。存活指數(shù)是指精子存活時間及精子活率變化的一項綜合指標，反映精子活率下降速度。檢查時，將稀釋后的精液置于一定的溫度下(05或者37)，間隔一定時間檢查活率，直至無活動精子或只有個別精子呈擺動活動為止。精子存活時間越長，指數(shù)越大，說明精子生活力越強，品質越好。 精子存活時間（h）：檢查間隔時間的總和最末兩次檢查間隔時間的一般 精子存活指數(shù)每前后相鄰兩次檢查精子活率的平均數(shù)與間隔時間乘

35、積的總和。第五十二張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月六、精子代謝能力 精子能量代謝的強弱在一定程度上反應了精子的生理特征及其受精潛能。在正常情況下，精子代謝主要利用生活環(huán)境中的外源性物質，其中以糖類為主，精子可通過糖酵解或呼吸作用而獲得能量?？梢姡哟x能力越強，消耗的糖和氧氣越多，表現(xiàn)活動力越強。 1.精子耗氧量測定 指以1億個精子在37 的條件下每小時內所消耗的氧氣的微升數(shù)。將已知精子密度的一定數(shù)量的精液置于37 的溫箱中孵育1h，用瓦氏呼吸器測定其耗氧量，則可計算出精子耗氧率。 2.精液果糖分解測定 精液中果糖分解能力與精子活率有密切的關系。果糖測定是以1億精子在37和嫌氧

36、條件下每小時消耗果糖的毫克數(shù)。第五十三張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 3.美藍褪色試驗 美藍是一種氧化還原劑，氧化后呈藍色，而還原后呈無色。精子在美藍溶液中，呼吸時氧化脫氫，美藍獲得氫離子后便由藍色還原為無色。因此，根據(jù)美藍溶液褪色時間的快慢，便可估測精子的活率和密度的高低。七、精液的細菌學檢查 精液中病原微生物及菌落數(shù)量已列入評定精液品質檢查的重要指標，并作為海關進出口精液的重要檢驗項目。精液中如果含有大量細菌微生物的存在，不僅會影響精子壽命和降低受精能力，而且還將導致有關疾病的傳播。 精液中如果含有病原微生物，每毫升精液中的細菌菌落數(shù)超過1000個，則視為不合格。第五十四張

37、，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月計算機輔助精子分析（computer assistant semen assay, CASA)第五十五張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月第五十六張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月一、精液稀釋的目的 精液稀釋(semen dilution)是在精液中加入一定量按特定配方配制的、適宜于精子存活并保持受精能力的稀釋液。 1.延長精子的存活時間。通過降低精液能量消耗，補充適量營養(yǎng)和保護物質，抑制精液中有害微生物活動，可延長精子的壽命。 2.擴大精液容量，提高配種率。即提高一次射精量可配母畜頭數(shù)。 3.便于精液長期保存和運輸。第四節(jié) 精

38、液的稀釋第五十七張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月二、稀釋液的主要成份及作用 稀釋液：為了擴大精液容量，延長精子的存活時間及受精能力，而加入精液中的等滲溶液。精液稀釋就是在精液中加入適宜于精子存活并保持受精能力的稀釋液。 （一）主要成份 1.奶類：牛奶、羊奶、奶粉，最好是各種鮮奶，其目的是為精子提供能量。鮮奶用前在9295的條件下，經10min的熱處理，除去其中的乳烴素，然后過濾，除去泡沫。 2.卵黃：含有卵磷酯，用1周以內的新鮮雞蛋，涼開水洗凈外殼，用75%的酒精消毒一次，晾干，打開后用注射器吸取卵黃。 第五十八張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月3.甘油（丙三醇）：三

39、個“OH”親水性強，具有抗凍作用。 4.Tris（三羥基甲基氨基甲烷，三基）：非電解胺化物。作用：調節(jié)pH值；保護精子具有受精能力和不被凍傷等。5.糖類（果糖、葡萄糖等）：抗凍；提供能量；降低電解質濃度。6.其它：丙二醇、生理鹽水、酶類、非電解質、激素、維生素等。第五十九張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 （二）稀釋液中各成份的作用 1.稀釋劑：擴大精液容量，要求必須是等滲溶液，例如奶類、糖類、生理鹽水等。 2.營養(yǎng)劑：為精子提供營養(yǎng)和能量等，補充精子在代謝過程中的能量消耗。精子代謝只是單純的分解作用，不能通過同化作用將外界物質轉變?yōu)樽陨沓煞帧Ｌ穷悾ㄆ咸烟?、果糖、乳糖等）、奶類、?/p>

40、黃等。 3.保護劑：保護精子的作用，以免受到各種不良外界環(huán)境的危害。第六十張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 降低精液中（精清）的電解質濃度（糖類、磷酸鹽、酒石酸鹽等） 精清中電解質濃度很高，生理上具有激發(fā)精子活動，有利于精子和卵子結合受精。但同時也能促進精子早衰，破壞精子脂蛋白膜，使精子失去電荷聚集能力，不利于精液保存。 一般常用的非電解質、弱電解質有各種糖類、氨基乙酸、甘氨酸等。 緩沖物質的作用：緩沖劑（檸檬酸鈉、酒石酸鉀鈉等） 緩沖物質是用以保持精液適當?shù)膒H值。常用的緩沖劑有檸檬酸鈉、酒石酸鉀鈉、磷酸二氫鉀以及三羥甲基氨基甲烷(Tris)等。第六十一張，PPT共一百一十二頁

41、，創(chuàng)作于2022年6月 防止冷休克（低溫打擊）的作用 當精子從體溫降到20時對其活力影響不大，當精液從2010，則有較大影響，會使精子遭受冷打擊而喪失活率。卵黃和奶類等含有卵磷脂，防止冷休克的發(fā)生。 當從10降到0（急劇降溫1020分鐘），就會造成精子的不可逆性死亡，即冷休克。這是因為精子含有的縮醛磷脂融點高，在低溫下容易凝結，而不能被精子利用，造成精子不可逆的冷休克。第六十二張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 抗凍作用：具有抗冷凍危害的作用。 精液在冷凍過程中，精子內外環(huán)境的水分，必須經歷液態(tài)和固態(tài)的過程，這種物態(tài)的轉化對精子具有極大的危害。而抗凍物質有助于減輕或消除這種危害。一

42、般常用于抗凍的保護物多采用甘油、糖類、二甲基亞砜（DMSO），TRIS等。 抗菌作用。在采精過程中即便在嚴格的操作下，也難免要受到某些細菌等有害微生物的污染，而精液和稀釋液又都是病原微物良好的培養(yǎng)基。常用的抗生素有青霉素、鏈霉素、氨苯磺胺素、林肯霉素、多粘菌素等。第六十三張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月4.其它類物質 酶類：乳酸脫氫酶，細胞色素氧化酶，琥珀酸脫氫酶，-葡萄糖苷酸酶，谷草轉氨酶，過氧化氫酶，粘蛋白酶等。 激素：催產素，PGE2，PGF2,T等。 維生素：VC,VB2,B12,VE等。 酶類、激素類、維生素類等，有助于調節(jié)和改善精子外在環(huán)境的理化特性，以及母畜生殖道的

43、生理機能，以利于提高受精機會，促進合子發(fā)育。 常溫保存時通入CO2可延長保存時間。 在顆粒精液中加入染料用作標志等。第六十四張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月三、稀釋液配制的注意事項 1.消毒：配制好的稀釋液，瓶口用硫酸紙包好，外用布蓋上，扎緊，置高壓鍋中，0.8kg、105的壓力維持30min；糖類稀釋液只能用0.5kg的壓力，或用水煮沸30min即可。 2.用于配制稀釋液以及封裝保存精液的一切用品，都必須消毒，使用前再用稀釋液沖洗23次。 3.稀釋液應新鮮、無菌，現(xiàn)用現(xiàn)配。 4.在稀釋液中加入卵黃、奶類及抗菌素等藥物應在稀釋液降溫到35以下時再加入。 5.稀釋液加入卵黃和抗菌素

44、前應過濾。0.020.2 m濾膜。 6.成本低，配制方便，精子存活率高，受胎率高。第六十五張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月四、精液的稀釋 （一）稀釋液的種類 根據(jù)性質和用途可分為4類。 1.現(xiàn)用稀釋液：適用于采精后立即授精，以單純擴大精液容量，增加輸精母畜頭數(shù)為目的。此類型稀釋液以簡單的等滲的糖類和奶類為主體。 2.常溫保存稀釋液：適用于精液在常溫下作短期保存，具有以糖類和弱酸鹽為主體的pH偏低的特點。 3.低溫保存稀釋液：適用于精液低溫保存，具有含卵黃或奶液為主體的抗冷休克特點。第六十六張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 4.冷凍保存稀釋液：適用于精液超低溫冷凍保存

45、，具有甘油、二甲亞砜等抗凍物質為主體特點，此類稀釋液比較復雜，有僅一種稀釋液組成，也有由多種稀釋液組成。第六十七張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 （二）精液稀釋的方法 1.先將稀釋精液所用的器具加溫到3035，并用等溫稀釋液沖洗23次（防止溫度和滲透壓的損害）。 2.新采集的精液及時稀釋，室溫低于20時，要用精液無菌保溫箱。精液放置時間過長則會降低精子活率，一般在0.5h內進行稀釋。 3.稀釋液與精液的溫度必須一致，可用消毒溫度計測量。采精時集精杯加保溫措施，稀釋液預先加溫到30左右，置于精液保溫箱中。 4.在稀釋精液時，將稀釋液沿杯壁緩緩加入精液中，一般將稀釋液與精液置于預定溫

46、度的保溫瓶中作等倍稀釋處理。然后輕輕轉動精液瓶或用滅菌棒攪動，使之混勻。第六十八張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 5.如果進行低倍稀釋（35倍）可一次完成，若高倍稀釋時則須分兩步進行，即先低倍稀釋，防止精子所處的環(huán)境突然改變，對精子造成打擊。間隔1.52h后，精液降至保存（平衡）溫度時，進行二次稀釋。 6.精液稀釋后，先靜置片刻，再做活率檢查，如果活率沒有變化，則分裝保存。如果活率下降，則說明稀釋或操作不當，不宜使用，并檢查原因。第六十九張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 （二）稀釋倍數(shù) 精液的稀釋應保證每輸精劑量所含直線前進運動的精子數(shù)不低于輸精標準要求。精液適宜的

47、稀釋液應根據(jù)以下依據(jù)決定： 1.稀釋液種類：糖類稀釋液低倍稀釋，奶類稀釋液高倍稀釋。 2.保存時間：時間長高倍稀釋，時間短低倍稀釋。 3.精液保存方法：冷凍保存稀釋倍數(shù)應低一些，而液態(tài)保存稀釋倍數(shù)可高些。 4.畜種：羊、牛、鹿精子密度大，稀釋的倍數(shù)應大一點，而豬、馬密度小，則不宜作高倍稀釋。第七十張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月（三）每次輸精保持受精力所需的最低有效精子數(shù)畜 種牛山羊豬馬稀釋倍數(shù)1040242423輸精量（mL）0.210.5130401530有效精子數(shù)20005000萬5000萬2億2.55億牛：射精量8ml，活率0.7，密度12億個/ml，每毫升精液中有效精子

48、數(shù)120.7=8.4億個，若每毫升稀釋后的精液中含有3000萬個有效精子，則每毫升可稀釋倍數(shù)8.4億0.3億=28倍?？上♂專?ml28=224ml，可供224頭母牛輸精。第七十一張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月一、保存目的 1.延長精子存活時間，保持其受精能力；2.擴大種公畜（優(yōu)良）精液利用率；3.方便運輸，擴大精液的利用范圍。二、保存方法 （一）常溫保存法 常溫保存是指在1525之間的溫度范圍內保存精液的方法。 1.原理：利用稀釋液的弱酸性（pH 6.26.4）環(huán)境抑制精子活動，以減少其能量消耗，使精子保持在可逆性的靜止狀態(tài)而不失去受精能力。即當精液pH值降低到一定的酸度時，

49、精子運動及代謝受到可逆性抑制，但當pH值恢復到精液正常的pH值時，精子可以復蘇，從而對精液進行保存的方法。第五節(jié) 精液的保存第七十二張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 2.調整pH的方法：為了使稀釋液的pH達到所需范圍，可以選用下面三種方法中的一種：（1）向稀釋液中輸入CO2，如伊里尼變溫稀釋液(IVT)。（2）利用精子在保存過程中自己產生的CO2，自行調節(jié)pH，如康奈大爾學稀釋液(CUE)。（3）在稀釋液中配有酸類物質和充以氮氣，如已酸稀釋液及一些植物汁液（椰汁稀釋液，CME）。牛冷凍精液稀釋液配方 海帶多糖0.025 0.2、葡萄糖 2 2.5、檸檬酸鈉0.9 1.5、蒸餾水6

50、5 75、白蛋白17 18、甘油7 10、青霉素8.5 10萬IU 果糖0.51.5、檸檬酸鈉12、TRIS 1.53、青霉素G鈉515萬IU、甘油58、低密度脂蛋白510%、去離子水9295 第七十三張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 3.稀釋液配制：牛的檸檬酸鉀鈉稀釋液（100ml）。配方： 檸檬酸鉀 0.11g 磺胺粉 0.3g 檸檬酸鈉 0.6g 卵黃 10ml 磷酸氫二鈉 0.15g 青鏈霉素各 10萬單位 葡萄糖 0.97g 蒸餾水加到 100ml 配制方法：將檸檬酸鉀、檸檬酸鈉、磷酸氫二鈉、葡萄糖和磺胺粉溶于蒸餾水，加熱煮開，并冷卻后加入卵黃和抗菌素，通入CO2 20

51、30min，控制pH在6.26.4。 稀釋液配方：葡萄糖25、檸檬酸鈉0.53.5、卵黃1050、青霉素G鈉515萬IU、雙氫鏈霉素210、甘油15、紅景天多糖11.5、去離子水5090 第七十四張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 （二）低溫保存法 低溫保存就是將稀釋過的精液置于05的低溫條件下保存。通常放在冰箱內或裝有冰塊的廣口保溫瓶中冷藏。 1.原理：在低溫（05）保存過程中，精子處于休眠狀態(tài)，代謝降到最低水平，并且在采精以及精液稀釋等操作過程中混入的細菌微生物的繁殖與危害也受到抑制，故精子能夠保存的時間相對較長。在輸精的時候，將溫度回升至37左右，精子又能逐漸恢復正常的代謝，

52、并保持其正常的受精能力。然而，精子對冷刺激，特別是溫度急劇下降至10以下時，會使精子發(fā)生不可逆的冷休克現(xiàn)象。因此，在稀釋液中須添加卵黃、奶類等抗休克物質，以提高精子的抗冷能力。第七十五張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 2.稀釋液 （1）牛精液低溫保存稀釋液 在05條件下，有效保存期可達7d之久。 牛的檸檬酸鈉卵黃稀釋液。 基礎液：取二水檸檬酸鈉2.9g，加水定溶于100ml。 稀釋液：基礎液75ml，卵黃25ml，青鏈霉素各1000IU/ml。 （2）豬精液低溫保存稀釋液 豬的濃份精液或離心后的精液，可在510條件下保存3d，且具有受精能力。在05下也可保存。 豬：取新鮮牛、羊奶

53、100ml，煮沸10min，去掉浮沫，冷卻過濾加入青鏈霉素1000單位/ml。第七十六張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 （3）馬和綿羊精液低溫保存稀釋液 由于精液本身的特性以及季節(jié)配種的影響，馬和綿羊精液的低溫保存效果不如其它家畜的效果好。因此，在生產中的應用并不普遍。 3.方法 （1）冰箱保存法：冷源是冰箱。 將稀釋好的精液裝入貯精瓶封裝后，用12層紗布或34層毛巾包裹，外用塑料薄膜用皮筋扎緊，先在室溫下降溫1h，再用815涼水冷卻1h，然后放入25的冰箱中逐漸冷卻（2h以上），嚴格控制溫度，并保持恒定。 （2）冰塊保存法。 （3）農村可用水井或窖進行保存。第七十七張，PPT共

54、一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 4.注意事項 (1)稀釋液必須含有卵黃或奶類；卵黃用量一般在1030%，牛奶適量。 (2)緩慢降溫 牛、羊、驢：2005，約12h，0.2/min 豬：301512h；15106h；100 23d 豬精液不宜冷凍保存或低溫保存。第七十八張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 （三）超低溫（冷凍）保存 精液冷凍(semen freezing)保存，是利用干冰(79)、液氮(196 )或其它制冷設備作為冷源，將精液經過特殊處理后，保存在低溫下，以達到長期保存精液的目的。 1.原理 精子具有受溫度變化直接影響其本身活動力和代謝能力的生物學特性。精子保存在超

55、低溫狀態(tài)下，其代謝活動完全受到抑制，生命以相對靜止狀態(tài)保持下來，一旦升溫又能復蘇而不失去受精能力。精子之所以能夠復蘇的關鍵在于精液在冷凍過程中，在冷凍劑的保護下，防止了精子水分冰晶化對精子的破壞，而盡可能形成玻璃化。第七十九張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 冰晶化是水在降溫過程中的一定溫度條件下，水分子重新按照幾何圖形排列形成冰晶的過程。冰晶改變了精子膜的溶質濃度和滲透壓，造成精子脫水，發(fā)生不可逆的化學毒害而死亡。冰晶化只有當溫度在060溫度范圍內緩慢降溫時形成，降溫越慢冰晶越大，1525形成冰晶最多。在冷凍精液過程中，只有避開060有害溫區(qū)，才有利于精子長期保存。 玻璃化的冰凍

56、狀態(tài)是水在超低溫下，水分子仍然保持原來自然的一種無次序的排列狀態(tài)，形成玻璃樣的堅硬而均勻的冰結。在此狀態(tài)下，精子不會發(fā)生細胞脫水，結構維持正常，解凍后可以復蘇。第八十張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 2.冷源 干冰：（-79），液N：（-196），液O：（-183），液H：（-253），液He：（-269）。 3.劑型 目前廣泛應用的劑型為細管型，在冷凍精液早期也曾使用過顆粒型和安瓿型。 （1）細管型 以長125133mm、容量為0.25或0.5ml的各種顏色的聚氯乙烯復合塑料細管，通過吸引裝置將平衡后的精液進行分裝、封口，置液氮蒸氣上冷卻，再浸入到液氮中保存。 細管型精液具有許

57、多優(yōu)點，適于快速冷凍，精液細管內徑小，每次凍制細管多，精液受溫均勻，冷凍效果好，精液不必暴露就可直接輸入母畜子宮內因而不受污染，劑量標準化，標記明顯，精液不易混淆，容積小，便于大量保存，精液消耗少，輸精母畜受胎率高。適用于機械化生產。第八十一張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月第八十二張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月第八十三張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 （2）顆粒型 將0.1ml精液滴凍在經液氮冷卻的聚乙烯氟板或金屬板上，制成顆粒。其優(yōu)點是方法簡便、易于制作，成本低，體積小，便于大量貯存。但缺點也較多，如劑量不標準，精液暴露在外容易受到污染，不易標記，

58、易混淆，大多需解凍液解凍等，故許多國家已不用這種方法。 （3）安瓿b型 采用硅酸鹽硬質玻璃制成的安瓿，盛裝精液劑量多為0.51ml。優(yōu)點是劑量標準，不受污染，標記明顯。缺點是生產工藝復雜，成本比較高；易破碎，體積和占用的空間比較大；解凍后需要轉移到輸精器內方可使用。 第八十四張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 4.精液冷凍保存的稀釋液 根據(jù)配制要求和稀釋的需要，可將冷凍保存稀釋液分別制成三種溶液。 A 基礎液：將糖類、鹽類，成批量的制成溶液，并密封保存。奶類經熱處理。 B I液：根據(jù)每次采精所需的冷凍稀釋液的量，在基礎液中加入一定量的卵黃和抗生素等配制成，用作第一次稀釋。基礎液+卵

59、黃+抗生素。 C II液：取需要量的I液，按照比例加入經滅菌的甘油，配制成含有甘油的II液，用作精液的第二次稀釋。液+甘油。 牛精液冷凍保存稀釋液，主要有卵黃檸檬酸鈉甘油液、卵黃糖類甘油、奶類甘油液3種稀釋液。第八十五張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月例：牛細管用冷凍稀釋液基礎液：2.9%的檸檬酸鈉液。液：取基礎液80mL，卵黃20mL，青霉素10萬單位。液：含7%甘油的液。牛顆粒用冷凍稀釋液基礎液：蔗糖（乳）12g，蒸餾水加至100mL。液：基礎液80mL+卵黃20mL+青霉素10萬單位。液：含7%甘油的液。第八十六張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月稀釋液成分與配比冷

60、凍保存稀釋液的成分 低溫保存劑 (卵黃、奶類) 防凍保護劑(甘油)維持滲透壓物質 (糖類、檸檬酸鈉等)抗菌素及其他添加劑牛精液冷凍保存稀釋液乳糖-卵黃-甘油 (乳卵甘液)蔗糖-卵黃-甘油 (蔗卵甘液)葡萄糖-卵黃-甘油 (葡卵甘液)葡萄糖-檸檬酸鈉-卵黃-甘油液 (葡檸卵甘液)第八十七張，PPT共一百一十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 國家標準規(guī)定：牛冷凍精液細管型容量為0.25ml,含直線前進運動的精子不低于1000萬個；顆粒型精液容量為0.1ml，含直線前進運動精子數(shù)不低于1200萬個。解凍后精子活力不低于0.3。 0.25ml細管型冷凍精液稀釋倍數(shù)應該為： X=直線前進運動精子數(shù)/ml預測精