動物細胞的基本形態(tài)觀察和細胞計數實驗原理及步驟

1、實驗一：動物細胞的基本形態(tài)觀察和細胞計數【課前預習】1細胞計數的基本原理？2細胞計數與細菌計數的異同點？【目的要求】制備不同細胞的臨時制片，觀察、了解細胞的基本形態(tài)；掌握細胞計數方法?！净驹怼考毎男螒B(tài)結構與功能相關是很多細胞的共同特點，在分化程度較高的細胞更為明顯，這種合理性是生物漫長進化過程所形成的。例如：具有收縮機能的肌細胞伸展為細長形；具有感受刺激和傳導沖動機能的神經細胞有長短不一的樹枝狀突起；游離的血細胞為圓形、橢圓形或圓餅形。不論細胞的形狀如何，細胞的結構一般分為三大部分：細胞膜、細胞質和細胞核。但也有例外。例如：哺乳類紅細胞成熟時細胞核消失。細胞計數一般用血細胞計數板，按白細

2、胞計數方法進行計數。細胞計數時，先將培養(yǎng)細胞或血細胞稀釋成細胞懸液，然后將細胞懸液滴入細胞計數板內，計數計數板上計數室四大格內的細胞數。根據計數室的容積及稀釋倍數，即可計算出細胞濃度。【實驗用品】1材料：雞一只2器材和儀器：顯微鏡、載片、蓋片、吸水紙、手術器材、解剖盤、血球計數板、小平皿、牙簽3試劑：0.85生理鹽水、Ringer 氏液【方法步驟】1制備10%的雞血細胞懸液。2雞血涂片的制備與觀察取雞血懸液，靠近一端滴在載片上將另一載片的一端呈45角緊貼在血滴的前緣，均勻用力向前推，使血液在載片上形成均勻的薄層 (圖l1)。晾干，顯微鏡下觀察。圖11 血涂片的制備3細胞計數1）制備雞紅細胞懸液

3、：用Ringer 液按確定的稀釋倍數制成雞紅細胞懸液。2）熟悉血細胞計數板：血細胞計數板呈長方形，有2 個計數室。每個計數室分為9 個大正方格，每個大格邊長為1mm ， 計數室的底與蓋玻片間的距離為0.1mm ， 及每大格的容積為1mm1mm0.1mm=0.1mm3。四角的每個大格被分為16 個中格；中央的大格被分為25 個中格，中央的每個中格又被分為16 個小格。3）滴片：每人取1 付血細胞計數板及1 張蓋玻片，用布將蓋玻片擦凈，把蓋玻片蓋在血細胞計數板槽上，然后用吸管將制備好的雞血細胞懸液混勻，吸取血細胞懸液，滴1 滴于血細胞計數板的蓋玻片一側邊緣，使細胞懸液自然流入計數室內。注意血細胞懸

4、液不可滴的過多，如溢出或蓋玻片內有氣泡必須重做，否則將影響計數結果。該吸管加完樣后不能再用。4）計數：在低倍鏡下按圖計算計數板的四角大方格（每個大方格又分16 個小方格）內的細胞數。計數時，只計數完整的細胞，若聚成一團的細胞則按一個細胞進行計數。數出計數板上計數室四角四大格中的細胞數，如細胞壓在格線上時，數上不數下，數左不數右。二次重復計數不應超過5?！緦嶒灲Y果】1雞血涂片的制備與觀察顯微鏡觀察可見雞紅細胞為橢球形，有核。白細胞數目少，為圓形。2細胞濃度計算 將四大格的細胞總數除以4，得出平均每大格的細胞數，每大格的容積為0.1mm3，乘以10000 即為1000mm3（1ml）。因此，不同稀

5、釋倍數細胞懸液的細胞濃度可用下式計算：細胞濃度（細胞數ml）（四大格的細胞數4）10000稀釋倍數【實驗報告】1繪圖：顯微鏡下觀察的各種細胞形態(tài)2計數每毫升細胞懸液中的細胞數（注意單位：個/ml）3為什么細胞計數時，細胞懸液逸出凹槽外或有氣泡時要重做？附： 必須注意的問題生物繪圖方法繪圖是生物實驗報告的一種重要形式，其基本要求如下：1準備好3H 鉛筆、橡皮、刀、尺子及繪圖紙，將繪圖紙放在觀察物的有邊、紙下不要墊書或紙張。2繪圖時，特別注意觀察物的形狀、各部分的位置、比例和毗鄰關系。3圖的位置、大小要適宜，圖占報告紙左上方2/3 的面積，并考慮注字的位置。4觀察清楚后，選擇典型的細胞或組織，左眼看顯微鏡，右眼配合右手，先用鉛筆在紙上輕輕描出輪廓，使形狀正確，然后再用清晰的線條繪出，線條粗細要均勻不要重復。5用圓小點表示明暗和立體感，點的大小要均勻，不能涂陰影。6圖繪好后，要在圖的右側注明各部分結構名稱，引線要直而平行，長短適度，各引線不能交叉，各線