兩種制備方法的紫癜方治療ITP模型小鼠的藥效研究

1、兩種制備方法的紫癜方治療ITP模型小鼠的藥效研究【摘要】觀察兩種制備方法的紫癜方對ITP模型小鼠的治療作用。方法采用免疫法建立ITP模型，設(shè)立正常組、模型組、醋酸潑尼松組D、血美安組X、紫癜水提組S和紫癜工藝組G，利用全自動多物種五分類動物血液分析儀于實驗前和實驗第14天檢測各組小鼠血小板數(shù)，實驗前、第7天和14天分別記錄各組小鼠體重，實驗完畢記錄各組小鼠皮下出血程度。結(jié)果造模前各組小鼠體重和血小板計數(shù)均無顯著性差異。實驗第7天，組小鼠體重低于組，有下降趨勢，但無顯著性差異；D組、X組、S組和G組小鼠體重高于組，有上升趨勢，但無顯著性差異；其它各組小鼠體重比擬，無顯著性差異。實驗第14天，組小

2、鼠體重和血小板計數(shù)明顯低于組，較組出現(xiàn)明顯瘀斑，D組、X組、S組和G組小鼠體重均低于組，血小板計數(shù)明顯低于組；D組、X組、S組和G組小鼠體重和血小板計數(shù)均明顯高于組，D組、S組和G組小鼠皮膚瘀斑較組明顯減輕，X組小鼠皮膚瘀斑與組比擬無顯著性差異；X組、S組和G組小鼠血小板計數(shù)明顯低于D組；S組和G組小鼠血小板計數(shù)明顯高于X組；其它各組小鼠體重和血小板計數(shù)比擬，無顯著性差異。結(jié)論紫癜方的兩種制備方法對其治療ITP的藥效作用無影響。【關(guān)鍵詞】特發(fā)性血小板減少性紫癜；紫癜方；制備方法；藥效研究QbjetiveTbservetheeffetsfZidianpresriptinextratedbytki

3、ndsfpressnITPie.ethdsUsingAPStinjetintietinduetheITPdel.ieeredividedint6grups:,D,X,SandGgrups.Thenuberfplateletn7thdayand14thdayereeasuredinie.eanhiletheEightn7thdayand14thdayandthedegreefsubutaneusbleedingerererded.ResultsThereisnsignifiantdiffereneinEIghtandthenuberfplateletinallgrupsbefretheexper

4、ient.parediththegrup,theeightisindntrendingrupn7thday,theeightandthenuberfplateleteredelinedingrupn14thday,thepetehiaasrelearlyingrup.parediththegrup,theeightisuptrendinD,X,SandGgrupsn7thday,theeightandthenuberfplateletareenhanedinD,X,SandGgrupsn14thday,thepetehiaasdereasedinD,SandGgrupssignifiantly

5、.parediththeDgrup,thenuberfplateletisdereasedinX,SandGgrups.parediththeXgrup,thenuberfplateletisinreasedinSandGgrups.nlusinZidianpresriptinextratedbytkindsfextratinpresshasanreedialeffetnITPuse.Thereisnsignifiantdifferenebeteenthetkindsfextratinpress.Keyrds:idipathithrbytpenipurpura;Zidianpresriptin

6、;extratinpress;pharadynaiatin特發(fā)性血小板減少性紫癜ITP是一種常見的出血性疾玻本文從藥效學(xué)指標(biāo)比擬兩種制備方法提取的紫癜方治療ITP的作用差異，從而明確紫癜方的制備方法對其效用的影響。材料與方法1材料1.1動物SPF級安康BALB/小鼠，體重為(1822)g，雌雄各半，動物答應(yīng)證號：SXK京20020003，由北京維通利華實驗技術(shù)提供。豚鼠，體重為(250350)g，普通級，46周齡，動物答應(yīng)證號：SXK吉20220004，由吉林省實驗動物質(zhì)量檢測中心提供。1.2藥物方劑紫癜方：由黃芪25g,制大黃15g,生曬參10g,阿膠25g,桃仁10g,生地10g,白芍20

7、g,仙鶴草15g,當(dāng)歸10g,甘草10g組成。全部藥材購自沈陽天益堂藥房。制備方法一紫癜水提方：方中藥物常規(guī)煎煮水提，加水1500l藥量的10倍量，浸泡30in，煎煮時間為25in，搜集藥液，取過濾后藥物加水1200l藥量的8倍量，按照前述方法再次煎煮，將兩次煎煮后的藥液混合濃縮成100%含生藥1g/l備用。制備方法二紫癜工藝方：方中大黃、人參5g和白芍用240l藥量的6倍量70%乙醇回流提取2次，每次2小時，回收乙醇至無醇味，形成藥液一；藥渣和黃芪、桃仁、生地、仙鶴草、當(dāng)歸和甘草加水1200l藥量的10倍量，浸泡30in，煎煮時間為25in，搜集藥液，取過濾后藥物加水900l藥量的8倍量，按

8、照前述方法再次煎煮，將兩次煎煮后的藥液混合為藥液二，將藥液一和藥液二合并，濃縮成100%含生藥1g/l的濃縮液；人參5g粉碎過100目篩兌入濃縮液；阿膠粉碎成粗粉加熱兌入。醋酸潑尼松片由天津太平洋制藥消費國藥準(zhǔn)字H12022809。將醋酸潑尼松片研成粉末，用生理鹽水配成混懸液0.3g/L。血美安膠囊由貴州正鑫藥業(yè)提供國藥準(zhǔn)字Z20224441。將血美安膠囊中顆粒狀內(nèi)容物用生理鹽水配配成混懸液32g/L。1.3試劑1.4儀器全自動多物種五分類動物血液分析儀，由英國DRESientifiIn.消費型號：HEAVET950FS。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2方法2.1動物分組與處理BALB/小鼠隨機(jī)分為6

9、組：正常組、模型組、醋酸潑尼松組D、血美安組X、紫癜水提組S和紫癜工藝組G，每組10只。除正常組外其余五組小鼠在實驗的1、3、5、7、9、11、13天，將豚鼠抗小鼠血小板血清APS按100l/20g體重的劑量注射于腹腔。給藥方法：各組小鼠從驗第一天開場灌胃。其中S組小鼠按25g/(kgd)給予紫癜水提方灌胃；G組小鼠按25g/kgd給予紫癜工藝方灌胃；D組小鼠按5g/kgd給予醋酸潑尼松混懸液灌胃；X組小鼠按0.8g/kgd給予血美安混懸液灌胃；其余各組小鼠灌服等容積的生理鹽水0.2l/20g體重。每日灌胃1次，連續(xù)灌胃14d。2.2指標(biāo)測定2.2.1皮下紫癜情況觀察實驗完畢前按照文獻(xiàn)2所述方

10、法記錄小鼠出血程度。級：注射部位輕度出血，其他部位有散在出血點。級：注射部位明顯出血，并見有其他部位瘀斑、瘀點。級：注射部位嚴(yán)重出血，皮膚大量瘀斑、瘀點，可見皮膚發(fā)黑或破潰。2.2.2體重檢測于造模前、實驗第7天和實驗第14天分別測量各組小鼠體重。2.2.3血小板數(shù)檢測于造模前和實驗第14天各組小鼠眶靜脈采血20l，滴入抗凝管中，用全自動多物種五分類動物血液分析儀檢測血小板數(shù)。2.3數(shù)據(jù)的統(tǒng)計處理3結(jié)果3.1紫癜方對ITP模型小鼠皮下紫癜情況的影響實驗完畢時各組小鼠皮下紫癜情況出血程度見表1。表1各組小鼠皮下紫癜情況略與正常組比擬，*P0.01，*P0.05；與模型組比擬，#P0.013.2紫

11、癜方對ITP模型小鼠不同時間點體重的影響造模前、實驗第7天和實驗第14天各組小鼠體重變化見圖1。3.3紫癜方對ITP模型小鼠不同時間點血小板數(shù)的影響造模前和實驗第14天各組小鼠血小板數(shù)的變化見表2。表2不同時間點各組小鼠血小板計數(shù)略與正常組比擬，*P0.01；與模型組比擬，#P0.01；與醋酸潑尼松組比擬，P0.01與血美安組比擬，P0.014討論以ITP中醫(yī)發(fā)病病機(jī)中關(guān)于“氣虛血瘀血熱的理論作為根底，并根據(jù)中醫(yī)臨床經(jīng)歷組成了治療ITP的中醫(yī)方劑紫癜方。該方由10味中藥組成：黃芪、制大黃、人參、當(dāng)歸、桃仁、阿膠、白芍、生地、仙鶴草和甘草。全方配伍有補(bǔ)氣養(yǎng)血，活血止血之功。本次研究比擬了兩種制備方法提取的紫癜方對ITP模型小鼠的治療作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，實驗完畢時紫癜水提組和紫癜工藝組小鼠血小板計數(shù)較血美安組小鼠明顯升高，但是較醋酸潑尼松組小鼠明顯降低，仍然沒有恢復(fù)到正常程度；紫癜水提組和紫癜工藝組小鼠血小板計數(shù)比擬沒有顯著性差異。提示紫癜方的水提取物具有升高ITP模型小鼠血小