《微生物學檢驗》課程教學大綱

1、微生物學檢驗實驗教學大綱課程代碼：MLTA1004課程名稱：微生物學檢驗英文名稱：Diagnostic Microbiology實驗室名稱：檢驗專業(yè)實驗室課程學時：90實驗學時：54一、本課程實驗教學目的與要求通過本課程的實驗教學，加深學生對臨床微生物學檢驗理論知識的理解和把握，對常見病原微生物的生物學特性、培養(yǎng)和鑒定方法有了更深刻和形象的認識。通過大量的實驗操作，使學生掌握無菌操作技術和樹立無菌觀念，提高學生的動手能力，培養(yǎng)學生分析問題和解決問題的能力，能熟練掌握微生物檢驗中基本檢驗程序、方法和技能。二、主要儀器設備及現有臺套數 1、高壓消毒鍋 1臺7、電子天平 1臺2、超凈工作臺 2臺8、

2、電熱恒溫水浴箱 1臺3、二氧化碳培養(yǎng)箱 1臺9、電磁爐 1臺4、電熱恒溫培養(yǎng)箱 1臺10、冰箱 1臺5、普通高速離心機 1臺11、顯微鏡 30臺6、電熱干燥箱 1臺三、實驗課程內容和學時分配序號實驗項目名稱目的、要求實驗內容學時分配實驗類型每組人數必開、選開1臨床微生物實驗室生物安全防護和實驗室守則了解實驗室生物安全相關內容，樹立無菌操作觀念正確洗手六步法3基礎性7必開細菌形態(tài)學檢查掌握細菌不染色標本檢查、細菌涂片制備和革蘭染色法；熟悉細菌特殊染色法（1）普通變形桿菌動力壓滴法顯微鏡觀察；（2）金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、枯草芽孢桿菌、卡他布蘭漢菌的細菌涂片制備和革蘭染色鏡檢；（3）細菌鞭毛染

3、色、莢膜染色和芽孢染色（多媒體示教）2細菌分離培養(yǎng)和保存技術掌握培養(yǎng)基的制備過程和高壓滅菌法原理；掌握細菌的分離培養(yǎng)和接種技術；了解菌種保存方法（1）常用培養(yǎng)基的配制；（2）細菌的分離培養(yǎng)和接種：1）平板的連續(xù)劃線法和四區(qū)劃線法；2）其他培養(yǎng)基的接種方法（斜面接種、液體接種、半固體接種）3基礎性7必開3細菌鑒定技術掌握細菌鑒定常用生化反應的原理、結果判讀和應用；了解數字編碼鑒定技術（API條）的原理和結果判讀（1）葡萄球菌屬常用鑒別試驗：觸酶（過氧化氫酶）試驗；氧化-發(fā)酵（O/F）試驗；（2）陰性桿菌常用鑒別試驗：氧化酶試驗；克氏雙糖鐵復合試驗；動力試驗；吲哚試驗（靛基質試驗）；甲基紅-VP試

4、驗；枸櫞酸鹽利用試驗；脲酶試驗；硝酸鹽還原試驗；苯丙氨酸脫氨酶試驗；氨基酸脫羧酶試驗6基礎性7必開4抗菌藥物敏感性試驗與細菌耐藥性檢測掌握紙片擴散法（K-B法）的原理、操作方法和結果判讀；熟悉微量液體稀釋法和E-Test法的原理、操作和結果判讀（1）用K-B法檢測金葡、大腸、銅綠對常用藥物的敏感性；（2）用頭孢西丁紙片法檢測MRSA和MRCoNS；（3）葡萄球菌屬克林霉素誘導耐藥的檢測（D-test）6綜合性7必開5球菌的培養(yǎng)和鑒定掌握葡萄球菌屬、鏈球菌屬、腸球菌屬的菌落特點、染色形態(tài)及鑒別實驗；了解其它球菌的菌落特點、染色形態(tài)及鑒別（1）金葡、表葡、肺炎鏈球菌、化膿性鏈球菌、無乳鏈球菌、糞腸

5、球菌的菌落形態(tài)觀察和革蘭染色形態(tài)描述；（2）上述六種細菌常見的鑒別實驗及結果判定6綜合性7必開6腸桿菌科細菌的培養(yǎng)和鑒定掌握常見腸桿菌科細菌菌落特點、染色形態(tài)及鑒別實驗；掌握沙門菌屬、志賀菌屬、弧菌屬在特殊培養(yǎng)基上的菌落特點及鑒別實驗（1）大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、粘質沙雷菌、奇異變形桿菌菌落形態(tài)觀察和特點描述；并進行生化反應鑒定和結果判讀；（2）沙門菌屬和志賀菌屬在選擇性培養(yǎng)基上的菌落特點描述；（3）副溶血弧菌在TCBS瓊脂上的菌落特點描述。6綜合性7必開7非發(fā)酵菌和其它革蘭陰性菌的培養(yǎng)和鑒定掌握常見非發(fā)酵菌的菌落特點、染色形態(tài)及鑒別實驗；掌握嗜血桿菌屬的菌落特點及鑒定銅綠假單胞菌、嗜麥芽窄

6、食單胞菌、洋蔥伯克霍爾德菌、鮑曼不動桿菌等菌落形態(tài)觀察和特點描述，并進行生化反應鑒定和結果判讀；流感嗜血桿菌和副流感嗜血桿菌在巧克力平板上的菌落形態(tài)觀察和特點描述，衛(wèi)星現象的原理、操作及結果判定。6綜合性7必開8結核分枝桿菌、厭氧菌及其它微生物掌握抗酸染色方法及臨床意義；熟悉厭氧菌培養(yǎng)方法；了解螺旋體、支原體、衣原體和立克次體檢驗方法（1）抗酸染色涂片觀察；（2）厭氧菌培養(yǎng)及鑒定流程（多媒體示教）；（3）螺旋體、支原體、衣原體和立克次體檢驗（多媒體示教）3綜合性7必開9臨床常見真菌的培養(yǎng)和鑒定掌握念珠菌孢子和假菌絲的鏡下形態(tài)；掌握乳酸酚棉蘭染色法和墨汁負染法；熟悉常見念珠菌的生化反應特性和鑒定

7、特點（1）各類真菌在沙氏培養(yǎng)基上的菌落特點觀察；（2）念珠菌孢子和假菌絲形態(tài)的識別和觀察；（3）乳酸酚棉蘭染色法觀察曲霉菌；（4）墨汁負染法觀察新型隱球菌；（5）常見念珠菌在科瑪嘉顯色培養(yǎng)基上的菌落特點描述3綜合性7必開10臨床常見病毒的培養(yǎng)和檢測掌握病毒分離培養(yǎng)的方法；熟悉病毒的檢測手段（1）常見病毒形態(tài)結構電鏡照片示教；（2）ELISA法檢測丙肝病毒抗體。3綜合性7必開11臨床常見標本的細菌學檢驗掌握各類臨床標本的接種方法和細菌學鑒定（1）各類臨床標本的細菌學檢驗流程和注意事項（理論教授）；（2）臨床標本的培養(yǎng)基接種、細菌鑒定和藥敏實驗。9設計性7必開四、考核方式1、實驗報告：實驗1：記錄

8、細菌涂片制備和革蘭染色操作步驟，觀察并記錄金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、枯草芽孢桿菌、卡他布蘭漢菌的革蘭染色形態(tài)。實驗2：記錄常用培養(yǎng)基的制備過程。實驗3：觀察和記錄細菌常見生化鑒定試驗的結果。實驗4：記錄紙片擴散法的操作步驟，測量并記錄各種細菌的藥敏檢測結果。實驗5：觀察和記錄金葡、表葡、肺炎鏈球菌、化膿性鏈球菌、無乳鏈球菌、糞腸球菌菌落特點和革蘭染色形態(tài)；記錄上述六種細菌常見的鑒別實驗及鑒定結果。實驗6：觀察和記錄大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、粘質沙雷菌、奇異變形桿菌菌落特點；并記錄常見的生化反應鑒別實驗和結果；觀察和記錄沙門菌屬、志賀菌屬、副溶血弧菌在選擇性培養(yǎng)基上的菌落特點。實驗7：觀察和記

9、錄銅綠假單胞菌、嗜麥芽窄食單胞菌、洋蔥伯克霍爾德菌、鮑曼不動桿菌菌落特點、生化反應鑒定結果；觀察流感嗜血桿菌和副流感嗜血桿菌的菌落特點，記錄衛(wèi)星現象的原理、操作及結果判定。實驗8：記錄抗酸染色的步驟和涂片觀察結果。實驗9：記錄念珠菌孢子和假菌絲直接鏡檢形態(tài)特征；記錄乳酸酚棉蘭染色法步驟和曲霉菌形態(tài)特征；記錄墨汁負染法步驟和新型隱球菌形態(tài)特征；記錄常見念珠菌在科瑪嘉顯色培養(yǎng)基上的菌落特點。實驗10：記錄ELISA法檢測丙肝病毒抗體的操作方法、結果判斷及臨床意義。實驗11：詳細記錄所提供臨床標本的接種步驟、細菌鑒定步驟（包括涉及的具體生化鑒定反應）和藥敏實驗檢測，并記錄生化鑒定結果和藥敏檢測結果并對結果進行分析討論。2、考核方式課程實驗的考核方式：實