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1、糖皮質(zhì)激素的抗炎作用實驗?zāi)康?.學(xué)習(xí)用蛋清致動物實驗性急性炎癥的方法。2.觀察蛋清的致炎作用和糖皮質(zhì)激素的抗炎作用。實驗原理 生理狀態(tài)下機體分泌的生理劑量糖皮質(zhì)激素主要影響物質(zhì)代謝過程,超生理劑量糖皮質(zhì)激素除影響物質(zhì)代謝外,還具有抗炎,免疫抑制,抗休克等藥理作用。蛋清作為一種異體蛋白進入大鼠足趾內(nèi)后,可在短時間內(nèi)引起炎癥:紅腫,腫脹。通過測定炎癥部位體積,觀察炎癥的發(fā)生及氫化可的松的抗炎作用。作用機制糖皮質(zhì)激素抗炎作用基本機制是基因效應(yīng)。當(dāng)其進入靶組織細胞后,立即與GR結(jié)合,形成激素受體復(fù)合物進入細胞核,與DNA基因上的激素反應(yīng)位點結(jié)合,通過RNA多聚酶和相關(guān)因子調(diào)節(jié)翻譯,最終mRNA被轉(zhuǎn)錄并
2、釋放到胞漿,相應(yīng)蛋白質(zhì)被合成,出現(xiàn)激素效應(yīng)。實驗材料實驗動物:大鼠實驗器材:大鼠后足容積測量器、注射器,燒杯。實驗藥品:新鮮蛋清、氫化可的松溶液、生理鹽水。實驗方法1.大鼠兩只,標(biāo)記,稱重,分別腹腔注射以下藥物 甲鼠:生理鹽水1ml/kg 乙鼠:氫化可的松溶液15ml/kg(0.5%溶液3ml/kg) 2.取帶有側(cè)管的大鼠后足容量測量器,將注射器與側(cè)管相連。盛入水,使液面與20ml的刻度平齊。 3.將甲、乙二鼠右踝關(guān)節(jié)的突起點處用圓珠筆劃圈作為測量標(biāo)志,依次將各鼠右后足放入容積測量器內(nèi),使后肢暴露在筒外,浸入的深度以劃圈處與20ml刻度重合為度。 該足進入液體以后,液面升高,液體自測管溢出流入
3、注射器中,溢出液體的ml數(shù)即為該鼠右后足的體積。依次測定甲、乙二鼠右后足的正常體積。各鼠腹腔注射藥物后15min,從右后足掌心向掌跖關(guān)節(jié)方向進針,皮下注射新鮮蛋清0.1ml。注射蛋清后20min、40min、60min、80min,分別測量右后足的體積,記錄溢出液體的ml數(shù)。各鼠注射致炎劑以后的體積,即為各個時間的右后足腫脹度。實驗結(jié)果糖皮質(zhì)激素的抗炎作用鼠號體重藥物及劑量正常體積ml20min60min40min80min注射蛋清后右后足的腫脹度注意事項測足腫脹時注意,一人捉持大鼠,將其右后肢足爪放入足容器中,不要讓水溢出,另一個人拉注射器,讓三線重疊(指足上標(biāo)記線,水平面與測量器上的標(biāo)記線重合),讀出注射器上
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