感冒止咳膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

1、感冒止咳膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究【摘要】目的建立感冒止咳膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法采用HPL法對(duì)感冒止咳膠囊中的黃芩苷進(jìn)展含量測(cè)定，流動(dòng)相為甲醇-0.4%磷酸55：45，檢測(cè)波長(zhǎng)277n。采用薄層色譜法對(duì)制劑中主要藥味黃芩、金銀花、葛根、青蒿、柴胡等進(jìn)展定性鑒別。結(jié)果黃芩苷的線性范圍為0.0492.040gr=0.99995，n=5，平均回收率為98.10%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏向?yàn)?.83%。薄層圖譜斑點(diǎn)明晰，可鑒別出黃芩、金銀花、葛根、青蒿對(duì)應(yīng)的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無干擾。結(jié)論可用于感冒止咳膠囊的質(zhì)量控制?！娟P(guān)鍵詞】感冒止咳膠囊；黃芩苷；高效液相色譜；薄層色譜法；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)Abstrat：bjetiveTestabli

2、shthequalityntrlstandardfGanaZhikeapsules.ethdsThententfbaialinintheapsulesasdeterinedbyHPLiththebilephasensistingfethanl0.4%phsphriaid(55:45)andUVdetetinavelengthat277n.Thin-layerhratgraphy(TL)aseplyedthekthesubsistentRadixSutellarlae,FlsLnieraeJapniae,RadixPuerariaeLbatae,HerbaArteisiaeAnnuae,Radi

3、xBupleuri.ResultsBaialinshedagdlinearityintherange0.0492.040gr=0.99995，n=5，theaveragereveryas98.10%andRSDas1.83%.TheTLulddetettherrespndinghratgraphisptsfRadixSutellarlae,FlsLnieraeJapniae,RadixPuerariaeLbatae,HerbaArteisiaeAnnuaeithuttheinterferenefnegativentrlgrup.nlusinTheethdanbeusedfrthequality

4、ntrlfGanaZhikeapsules.Keyrds：GanaZhikeapsules;Baialin;HPL;TL;Qualitystandard感冒止咳膠囊是由感冒止咳沖劑改劑型而得，原方收載于?衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑?第2冊(cè)，由黃芩、柴胡、金銀花等中藥組成，具有清熱解表、止咳化痰的成效。用于感冒發(fā)熱，頭痛鼻塞，傷風(fēng)咳嗽，咽喉腫痛，四肢怠倦，流行性感冒。黃芩為方中主藥，其所含黃芩苷為主要有效成分之一，也是其指標(biāo)性成分，本文為建立感冒止咳膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，采用HPL法測(cè)定方中黃芩的黃芩苷含量，同時(shí)對(duì)主要藥味黃芩、金銀花、葛根、青蒿進(jìn)展薄層鑒別。1儀器與試藥DINEXP680高效液相色譜

5、儀；島津L-10AT高效液相色譜儀；梅特勒-托利多電子天平AE100精細(xì)為0.0001g；梅特勒-托利多電子天平3精度為0.001g，PERKINELERLabda12型紫外掃描儀，數(shù)顯恒溫水浴鍋國華電器；甲醇、磷酸為色譜純，水為二次蒸餾水，其余試劑均為分析純。黃芩苷對(duì)照品批號(hào)110715-200212、綠原酸對(duì)照品批號(hào)110753-200212、葛根素對(duì)照品批號(hào)110752-200209、青蒿對(duì)照藥材批號(hào)121016-202203均購于中國藥品生物制品檢定所。感冒止咳膠囊市場(chǎng)購得，批號(hào)20220601，20220602，20220603，陰性樣品實(shí)驗(yàn)室自制。2方法與結(jié)果2.1薄層定性鑒別2.

6、1.1黃芩、金銀花的薄層定性鑒別1取樣品2粒，加50%甲醇10l，超聲處理20in，濾過，濾液作為供試品溶液。另取綠原酸、黃芩苷對(duì)照品，分別加50%甲醇制成每毫升各含0.2g的溶液，作為對(duì)照品溶液。按樣品制備方法制得缺黃芩、金銀花陰性對(duì)照溶液。照薄層色譜法2實(shí)驗(yàn)，汲取上述3種溶液各10l，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以醋酸丁酯-甲酸-水7:4:3的上層溶液為展開劑，預(yù)飽和30in后，展開，取出，晾干，置紫外光燈365n下檢視。供試品色譜中，在與黃芩苷、綠原酸對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯一樣顏色的熒光斑點(diǎn)。2.1.2葛根的薄層定性鑒別1樣品6粒，加醋酸乙酯25l超聲30i

7、n，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?.5l使溶解，作為供試品溶液。另取葛根素對(duì)照品，加甲醇制成每毫升含0.4g的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法2實(shí)驗(yàn)，汲取上述兩種溶液各5l，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水7:2.5:0.25為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365n下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯一樣顏色的熒光斑點(diǎn)。2.1.3青蒿的薄層定性鑒別取樣品2粒，加水20l超聲使溶解，濾過，濾液置分液漏斗中，用醋酸乙酯提取2次，20l/次，合并醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖?l使溶解，作為供試品溶液。另取青蒿對(duì)照藥材1g，加水15l，加熱回

8、流1h，濾過，濾液用醋酸乙酯10l提取，分取醋酸乙酯液，蒸干，殘?jiān)右掖?l使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法2實(shí)驗(yàn)，汲取上述2種溶液各10l，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以氯仿-醋酸乙酯17:3為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365n下檢視。供試品色譜中，在與青蒿對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯一樣顏色的熒光斑點(diǎn)。2.2含量測(cè)定2.2.1色譜條件色譜柱為AgilentKrasil18，流動(dòng)相：甲醇-0.4%磷酸5545，檢測(cè)波長(zhǎng)：277n，流速：1.000l/in，柱溫25，進(jìn)樣量10l，理論板數(shù)按黃芩苷計(jì)應(yīng)不低于2500。2.2.2樣品溶液的制備取樣品適量，

9、研細(xì)，取粉末約0.5g，精細(xì)稱定，置100l錐形瓶中，精細(xì)參加70%乙醇50l，稱定重量，超聲處理30in，放冷，稱定重量，用70%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，過濾，精細(xì)量取續(xù)濾液1l置10l量瓶中，加70%乙醇至刻度，搖勻，即得。2.2.3檢測(cè)波長(zhǎng)的選定精細(xì)稱取黃芩苷對(duì)照品，加甲醇溶解制成每毫升含黃芩苷對(duì)照品25g的溶液，于200400n范圍內(nèi)進(jìn)展紫外掃描，可以看到黃芩苷在277n處有最大吸收峰，應(yīng)選擇277n為檢測(cè)波長(zhǎng)。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2.2.4耐用性實(shí)驗(yàn)考察2.2.4.1液相色譜法流動(dòng)相組成比例：根據(jù)2022年版?中國藥典?中黃芩項(xiàng)下黃芩苷的含量測(cè)定條件以及預(yù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，分別進(jìn)展了甲

10、醇-0.4%磷酸5545、甲醇-0.4%磷酸5050、甲醇-0.4%磷酸6040組成比例的研究，對(duì)同一批批號(hào)：20220603樣品進(jìn)展了含量測(cè)定研究，結(jié)果說明當(dāng)組成為甲醇-0.4%磷酸5545時(shí)，保存時(shí)間適當(dāng)，峰形以及峰別離度較好。流動(dòng)相的pH值：取同一批樣品溶液批號(hào)：20220603，分別采用了0.1%磷酸、0.4%磷酸、0.5%磷酸作為流動(dòng)相，進(jìn)展了含量測(cè)定，結(jié)果說明流動(dòng)相的pH值對(duì)峰形和峰別離度的影響很大，但是甲醇-0.4%磷酸5545系統(tǒng)與甲醇-0.5%磷酸5545系統(tǒng)根本上沒有差異?？紤]到色譜柱的對(duì)酸、堿的耐受性以及使用壽命，選擇酸的濃度為0.4%磷酸，即流動(dòng)相為甲醇-0.4%磷酸5

11、545。檢測(cè)波長(zhǎng)：取同一批樣品溶液批號(hào)：20220603，經(jīng)選用272，277，282n作為檢測(cè)波長(zhǎng)，對(duì)樣品溶液進(jìn)樣測(cè)定分析，黃芩苷的平均含量為11.66g/粒，RSD為0.92%。柱溫：取同一批樣品溶液批號(hào)：20220603，經(jīng)選用20，25，30作為柱溫，對(duì)樣品溶液進(jìn)樣測(cè)定分析，黃芩苷的平均含量為11.62g/粒，RSD為0.62%。變動(dòng)色譜柱：取同一批樣品溶液批號(hào)20220603，經(jīng)選用漢邦Krasil18、漢邦Lihrspher18、AgilentKrasil18不同色譜柱，進(jìn)展含量測(cè)定，黃芩苷的平均含量為11.56g/粒，RSD為0.65%。穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)：取同一批樣品溶液批號(hào)20220

12、601，分別于0，2，4，8，12，24h進(jìn)樣10l測(cè)定，黃芩苷的平均峰面積為657425，RSD為1.42%。結(jié)果說明樣品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。2.2.4.2樣品溶液制備方法的考察取同一批樣品批號(hào)20220603，分別采用回流提取3h與超聲提取30in，測(cè)定黃芩苷的含量分別為，11.60g/粒。2.2.5線性關(guān)系考察精細(xì)稱取黃芩苷對(duì)照品，分別制成0.0049，0.02450，0.0510，0.1020，0.2040g/l的溶液，各精細(xì)汲取10l注入高效液相色譜儀，測(cè)定峰面積，以對(duì)照品進(jìn)樣量g，X為橫坐標(biāo)、峰面積Y為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果說明黃芩苷進(jìn)樣量在0.0492.040g的范圍內(nèi)，峰面

13、積與進(jìn)樣量呈良好的線性關(guān)系，回歸方程為：y=51.188x0.5467，r=0.99995n=5。2.2.6準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)采用加樣回收法，取含量的同批批號(hào)20220602樣品約0.5g，研細(xì)，精細(xì)稱定6份，每份各精細(xì)參加黃芩苷對(duì)照品約10g，按樣品溶液的制備方法進(jìn)展操作，測(cè)定。黃芩苷的平均回收率為98.10%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏向?yàn)?.83%。結(jié)果見表1。表1黃芩苷含量測(cè)定準(zhǔn)確度測(cè)定結(jié)果略2.2.7精細(xì)度實(shí)驗(yàn)重復(fù)性：取同一批樣品批號(hào)20220603約0.5g，研細(xì)，精細(xì)稱定6份，按樣品溶液的制備方法進(jìn)展操作，測(cè)定。結(jié)果說明黃芩苷的平均含量為11.65g/粒，RSD為1.03%。中間精細(xì)度：取同一批樣品溶液

14、批號(hào)20220603，分別采用DINEXP680高效液相色譜儀和島津L-10AT高效液相色譜儀測(cè)定，黃芩苷含量為11.62g/粒和11.57g/粒。重現(xiàn)性：取3批樣品溶液批號(hào)20220601，20220602，20220603，分別在兩個(gè)不同單位用HPL法測(cè)定，3批樣品黃芩苷含量平均值+偏向?yàn)?0.620.11，11.240.12，11.540.21g/粒，結(jié)果說明，重現(xiàn)性良好。2.2.8專屬性實(shí)驗(yàn)按處方比例制備不含黃芩藥材的感冒止咳膠囊樣品，按樣品溶液的制備方法制備陰性對(duì)照溶液。分別精細(xì)汲取黃芩苷對(duì)照品溶液、樣品溶液、陰性對(duì)照溶液各10l，注入高效液相色譜儀，結(jié)果說明，陰性對(duì)照無干擾。見圖1。2.2.9范圍考察考察本品含量測(cè)定方法的范圍的低限為限度的-50%供試品溶液的制備的取樣量為0.25g，高限為限度的+50%供試品溶液的制備的取樣量為0.75g。在范圍的高、低限，對(duì)同一批號(hào)的樣品批號(hào)：20220603分別考察了精細(xì)度和準(zhǔn)確度，結(jié)果說明：低限為-50%，高限為+50%時(shí)，本品含量測(cè)定方法精細(xì)度和準(zhǔn)確度較好，精細(xì)度RSD值從低限到高限分別為0.81%，1.03%，0.93%，準(zhǔn)確度RSD值從低限到高限分別為2.84%，2.94%。2.2.10樣品的含量測(cè)定按照上述方法測(cè)定3批樣品中黃芩苷的含量。結(jié)果見表2。表2含量測(cè)定結(jié)果