中藥制劑檢測技術(shù) 第七章 中藥制劑檢測新技術(shù)課件

1、第一節(jié) 毛細(xì)管電泳法第二節(jié) 中藥指紋圖譜第三節(jié) 電感耦合等離子體質(zhì)譜法第七章 中藥制劑檢測新技術(shù)紀(jì)從蘭老師編寫 毛細(xì)管電泳法（CE）又稱高效毛細(xì)管電泳（HPCE），是20 世紀(jì)80年代發(fā)展起來的一類高效快速的分離分析方法，是經(jīng)典電泳技術(shù)和現(xiàn)代微柱分離相結(jié)合的產(chǎn)物。 第一節(jié) 毛細(xì)管電泳法毛細(xì)管電泳儀一、概述 （一）基本原理 以彈性石英毛細(xì)管為分離通道，以高壓直流電場為驅(qū)動力，依據(jù)供試品中各組分的淌度(單位電場強度下的遷移速度)和(或)分配行為的差異而實現(xiàn)各組分分離的一種分析方法。第一節(jié) 毛細(xì)管電泳法電滲流（二）特點 高效 低耗 快速 廣譜第一節(jié) 毛細(xì)管電泳法HPCE與HPLC的比較 1. 柱效更

2、高，理論板數(shù)可達(dá)105106/m，主要是由于該法無固定相，不存在傳質(zhì)差異，整個流體就像塞子似的以勻速向前流動。2. 分析速度更快，幾十秒至十幾分鐘內(nèi)即可完成一個試樣的分析。3.溶劑和樣品消耗極少，樣品用量僅為納升（nl）級。不需高壓泵輸液，毛細(xì)管價格低廉，因此工作成本更低。4.通過改變操作模式和緩沖溶液的成分，該法有很大的選擇性，可對各種成分進(jìn)行有效的分離。例如，中性有機分子、無機離子、蛋白質(zhì)等高分子化合物，甚至整個細(xì)胞或病毒。第一節(jié) 毛細(xì)管電泳法HPCE和HPLC柱中溶液流型的比較 2.毛細(xì)管凝膠電泳（CGE） 該法在毛細(xì)管中裝入單體和引發(fā)劑引發(fā)聚合反應(yīng)生成凝膠，該方法主要用于分析蛋白質(zhì)、D

3、NA等生物大分子。另外還可利用聚合物溶液，如葡聚糖等的篩分作用進(jìn)行分析，稱為毛細(xì)管無膠篩分。有時將它們統(tǒng)稱為毛細(xì)管篩分電泳，下分為凝膠電泳和無膠篩分兩類。第一節(jié) 毛細(xì)管電泳法 3. 毛細(xì)管等速電泳(CITP) 該法采用前導(dǎo)電解質(zhì)和尾隨電解質(zhì)，在毛細(xì)管中充入前導(dǎo)電解質(zhì)后，進(jìn)樣，電極槽中換用尾隨電解質(zhì)進(jìn)行電泳分析，帶不同電荷的組分遷移到各個狹窄的區(qū)帶，然后依次通過檢測器。4. 毛細(xì)管等電聚焦電泳(CIEF) 將毛細(xì)管內(nèi)壁涂覆聚合物減小電滲流，再將樣品和兩性電解質(zhì)混合進(jìn)樣，兩個電極槽中分別加入酸液和堿液，施加電壓后，毛細(xì)管中的操作電解質(zhì)溶液逐漸形成pH梯度，各溶質(zhì)在毛細(xì)管中遷移至各自等電點（pI）時

4、變?yōu)橹行?，形成聚焦的區(qū)帶，而后用壓力或改變檢測器末端電極槽儲液的pH值的辦法使溶質(zhì)通過檢測器。第一節(jié) 毛細(xì)管電泳法毛細(xì)管等電聚焦分離示意圖 對于常用的陰離子表面活性劑十二烷基硫酸鈉（SDS），進(jìn)樣后極強親水性組分不能進(jìn)入SDS膠束，隨操作緩沖液流過檢測器（容量因子k=0）；極強憎水性組分則進(jìn)入SDS膠束的核中不再回到水相，最后到達(dá)檢測器（k=）。第一節(jié) 毛細(xì)管電泳法 MECC的分離原理示意圖二、儀器設(shè)備（一）毛細(xì)管電泳儀的基本結(jié)構(gòu) 第一節(jié) 毛細(xì)管電泳法 1.電極槽和進(jìn)樣系統(tǒng) 2.清洗系統(tǒng) 3.毛細(xì)管 4.檢測器 5.鉑電極 6.電極槽 7.恒溫系統(tǒng) 8.記錄和數(shù)據(jù)處理6. 毛細(xì)管電色譜(CEC

5、)該法是在毛細(xì)管電泳技術(shù)不斷發(fā)展和液相色譜理論日益完善的基礎(chǔ)上逐漸興起的。它是將細(xì)粒徑固定相填充到毛細(xì)管中或在毛細(xì)管內(nèi)壁涂覆固定相以電滲流驅(qū)動操作緩沖液（有時再加輔助壓力）進(jìn)行分離的，包含了色譜和電泳兩種機制，其中以色譜為主，但對荷電溶質(zhì)兼有電泳作用。 第一節(jié) 毛細(xì)管電泳法 2.直流高壓電源 一般采用030kV（或相近）可調(diào)節(jié)直流電源，可供應(yīng)約300A電流，具有穩(wěn)壓和穩(wěn)流兩種方式可供選擇。第一節(jié) 毛細(xì)管電泳法3. 電極和電極槽 兩個電極槽里放入操作緩沖液，分別插入毛細(xì)管的進(jìn)口端與出口端以及鉑電極，鉑電極接至直流高壓電源，正負(fù)極可切換。多種型號的儀器將樣品瓶同時用做電極槽。 4.沖洗進(jìn)樣系統(tǒng) 每

6、次進(jìn)樣之前毛細(xì)管要用不同的溶液沖洗，選用自動沖洗進(jìn)樣儀器較為方便。進(jìn)樣方法有壓力進(jìn)樣、負(fù)壓進(jìn)樣、虹吸進(jìn)樣和電動進(jìn)樣等。進(jìn)樣時通過控制壓力、電壓或時間來控制進(jìn)樣量。第一節(jié) 毛細(xì)管電泳法5. 檢測系統(tǒng)紫外檢測器，熒光檢測器，電化學(xué)檢測器，質(zhì)譜儀等均可作為CE的檢測器。其中紫外檢測器應(yīng)用最廣，它是將毛細(xì)管接近出口端的外層聚合物剝?nèi)ゼs2mm一段，使石英管壁裸露，毛細(xì)管兩側(cè)各放置一個石英聚光球，使光源聚焦在毛細(xì)管上，透過毛細(xì)管到達(dá)光電池對溶質(zhì)進(jìn)行檢測。第一節(jié) 毛細(xì)管電泳法三、基本操作（一）準(zhǔn)備工作按照儀器操作手冊開機，預(yù)熱，輸入各項參數(shù)，如毛細(xì)管溫度、操作電壓、檢測波長、沖洗程序等。操作緩沖液須過濾和脫

7、氣。沖洗液、緩沖液等放置于樣品瓶中，依次放入進(jìn)樣器。第一節(jié) 毛細(xì)管電泳法（二）毛細(xì)管的處理毛細(xì)管處理的好壞對測定結(jié)果影響很大。未涂層新毛細(xì)管要用較濃堿液在較高溫度（例如1mol/L氫氧化鈉液在60）沖洗，使毛細(xì)管內(nèi)壁生成硅羥基，再依次用0.1mol/L 氫氧化鈉、水、 操作緩沖液沖洗分?jǐn)?shù)分鐘。兩次進(jìn)樣中間可僅用緩沖液沖洗，但若發(fā)現(xiàn)分離性能改變，則開始用0.1mol/L氫氧化鈉沖洗，甚至要用濃氫氧化鈉液升溫沖洗。第一節(jié) 毛細(xì)管電泳法（三）進(jìn)樣測試 將待測樣品溶液瓶置于進(jìn)樣器中，設(shè)定操作參數(shù)，如進(jìn)樣壓力（電動進(jìn)樣電壓）、進(jìn)樣時間、正極端或負(fù)極端進(jìn)樣、操作電壓或電流、檢測器參數(shù)等，開始分析。根據(jù)初試

8、的電泳譜圖調(diào)整儀器和操作緩沖液以獲得優(yōu)化結(jié)果。而后用優(yōu)化條件正式分析。第一節(jié) 毛細(xì)管電泳法（四）數(shù)據(jù)處理 有關(guān)CE的計算方法、公式等可參照中國藥典高效液相色譜法的有關(guān)規(guī)定，將保留時間（tR）改為遷移時間(tm)即可。（五）結(jié)束工作 分析完成后用水沖洗毛細(xì)管，注意將毛細(xì)管兩端浸入水中保存，如果長久不用應(yīng)將毛細(xì)管用氮吹干，最后關(guān)機。第一節(jié) 毛細(xì)管電泳法（六）注意事項 由于進(jìn)樣方法的限制，目前毛細(xì)管電泳的精密度比用定量閥進(jìn)樣的高效液相色譜法差，故定量測定以采用內(nèi)標(biāo)法為宜。用加壓或減壓法進(jìn)樣時，樣品溶液黏度會影響進(jìn)樣體積，應(yīng)注意保持試樣溶液和對照品溶液黏度一致。用電動法進(jìn)樣時，被測組分因電荷不同的電歧

9、視現(xiàn)象和溶液離子強度會影響待測組分的遷移量，也要注意其影響。第一節(jié) 毛細(xì)管電泳法 四、系統(tǒng)適用性試驗?zāi)康脑谟诳疾焖渲玫拿?xì)管分析系統(tǒng)和設(shè)定參數(shù)是否適用。系統(tǒng)適用性測試項目和方法與高效液相色譜法或氣相色譜法相同，相關(guān)計算和要求也相同。第一節(jié) 毛細(xì)管電泳法（一）儀器與試劑 Unimicro毛細(xì)管電泳儀 毛細(xì)管60cm（有效長度45cm）75m 沒食子酸對照品 肉桂酸對照品 95%乙醇 硼砂（分析純） 去離子水 市售山茱萸 六味地黃丸（水蜜丸）第一節(jié) 毛細(xì)管電泳法（二）實驗條件 操作緩沖溶液為20mmol/L硼砂溶液 檢測波長271nm 重力進(jìn)樣（10cm5s） 工作電壓20kV 電泳溫度20 每

10、次運行前依次用0.1mol/L氫氧化鈉溶液、去離子水、操作緩沖溶液沖洗3min。第一節(jié) 毛細(xì)管電泳法2山茱萸供試品溶液的制備 將山茱萸藥材剪碎，稱取5g，加95%乙醇50ml，浸泡12小時，加熱回流提取2小時，過濾，濾渣重復(fù)提取2次，合并提取液，減壓濃縮至10ml。 移至50ml量瓶中，加95%乙醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取2ml并加入內(nèi)標(biāo)溶液1ml，95%乙醇稀釋定容至5ml，搖勻，即得。3六味地黃丸供試品溶液的制備 取六味地黃丸粉碎后，稱取5g，提取方法同山茱萸藥材，減壓濃至10ml，以下操作同山茱萸供試品溶液的制備，即得。第一節(jié) 毛細(xì)管電泳法（四）系統(tǒng)適用性試驗 在山茱萸的測定中，沒食子

11、酸的理論板數(shù)n=179820，在六味地黃丸的測定中，沒食子酸的理論板數(shù)n=167388，沒食子酸與周圍組分分離良好，無干擾組分存在。第一節(jié) 毛細(xì)管電泳法山茱萸、六味地黃丸樣品和對照品的電泳圖譜 山茱萸（A）、六味地黃丸（B）和對照品（C）的電泳圖譜 (1.肉桂酸；2.沒食子酸）第一節(jié) 毛細(xì)管電泳法（五）方法學(xué)考察線性范圍 精密量取沒食子酸對照品溶液0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.6mL、0.8ml、1.0ml、2.0ml于5ml量瓶中，各加入肉桂酸內(nèi)標(biāo)液1mL，95%乙醇定容至刻度，以沒食子酸對照品峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值對其質(zhì)量濃度作圖，其線性回歸方程為Y=0.0167X+0.13

12、33，相關(guān)系數(shù)r=0.9993（n=7）。精密度 山茱萸和六味地黃丸峰面積的RSD分別為2.9%和2.1%（n=5）準(zhǔn)確度 山茱萸和六味地黃丸加樣回收率分別為97.4%98.6%和99.3%102.4%。第一節(jié) 毛細(xì)管電泳法（六）樣品中沒食子酸的含量測定 取山茱萸供試品溶液和六味地黃丸供試品溶液分別測定，山茱萸中沒食子酸含量為0.225%；六味地黃丸中沒食子酸的含量為0.055%。第二節(jié) 中藥指紋圖譜 中藥指紋圖譜（fingerprints of Traditional Chinese Medicine）是指中藥材、飲片及其制劑經(jīng)適當(dāng)處理后，采用一定的分析方法與技術(shù)所精力的能夠標(biāo)識其化學(xué)特征的

13、色譜圖或光譜圖。特點：中藥指紋圖譜是一種綜合的，可量化的檢驗技術(shù)，它是建立在中藥化學(xué)成分系統(tǒng)研究的基礎(chǔ)上，主要用于評價中藥及其制劑質(zhì)量的真實性、優(yōu)良性和穩(wěn)定性。“整體性”和“模糊性”為其顯著特點。第二節(jié) 中藥指紋圖譜一、指紋圖譜的分類（一）按研究與應(yīng)用對象分類中藥材指紋圖譜中藥原料（包括飲片、中藥提取物）指紋圖譜中間體（工藝生產(chǎn)過程中的中間產(chǎn)物）指紋圖譜以及中藥制劑指紋圖譜。（二）按研究方法、手段分類中藥化學(xué)指紋圖譜中藥生物學(xué)指紋圖譜第二節(jié) 中藥指紋圖譜二、中藥指紋圖譜建立的原則和研究思路（一）中藥指紋圖譜建立的原則 中藥指紋圖譜的建立，應(yīng)以系統(tǒng)的化學(xué)成分研究和藥理學(xué)研究為依托，體現(xiàn)系統(tǒng)性、特

14、征性和穩(wěn)定性三個基本原則。第二節(jié) 中藥指紋圖譜1系統(tǒng)性 是指指紋圖譜中反映的化學(xué)成分應(yīng)包括該中藥有效部位所含大部分成分，或指標(biāo)性成分的全部，如中藥兩頭尖中抗腫瘤的有效成分為皂苷類化合物，則其指紋圖譜應(yīng)盡可能地反映其中的皂苷類成分；銀杏葉的有效成分是黃酮類和銀杏內(nèi)酯類，則其指紋圖譜可采用兩種方法，針對這兩類成分分別分析，達(dá)到系統(tǒng)全面的目的。2特征性 是指指紋圖譜中反映的化學(xué)信息（如保留時間）應(yīng)具有較強的選擇性，這些信息的綜合結(jié)果，將能特征性地區(qū)分中藥的真?zhèn)闻c優(yōu)劣，成為中藥自身的“化學(xué)條碼”。 3穩(wěn)定性 是指所建立的指紋圖譜在規(guī)定的方法、條件下的耐用程度，即不同操作者、不同實驗室所重復(fù)做出的指紋圖

15、譜應(yīng)在所允許的誤差范圍內(nèi)，以體現(xiàn)其通用性和實用性。因而要求包括樣品制備、分析方法、實驗過程、數(shù)據(jù)采集、處理、分析等全過程都要規(guī)范化操作，同時，還應(yīng)建立相應(yīng)的評價機構(gòu)，對其進(jìn)行客觀評價。第二節(jié) 中藥指紋圖譜第二節(jié) 中藥指紋圖譜 （二）中藥指紋圖譜研究思路 中藥指紋圖譜構(gòu)建的一般程序包括：設(shè)計方案、樣品采集、方法建立、數(shù)據(jù)分析、樣品評價、方法檢驗和建立標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜及其技術(shù)參數(shù)。中藥指紋圖譜構(gòu)建思路示意圖第二節(jié) 中藥指紋圖譜 中藥指紋圖譜的建立可針對不同用途，選用不同的分析方法。如對于藥品進(jìn)行質(zhì)量控制，應(yīng)考慮生產(chǎn)企業(yè)和藥檢部門常規(guī)配備的儀器，方法耐用，一般以光譜法、氣相色譜法和高效液相法為主。若用于

16、配伍理論或新藥研究，特別是化學(xué)成分與藥理、藥效相關(guān)性研究，可考慮聯(lián)用技術(shù)。方法檢驗室是在方法確立后的一段時間內(nèi)對更多未知樣品進(jìn)行檢驗分析，進(jìn)一步考察方法的可行性和耐用性。第二節(jié) 中藥指紋圖譜 天然藥物指紋圖譜技術(shù)是世界范圍內(nèi)被廣泛認(rèn)可的質(zhì)量控制手段。英國草藥典(1996)、印度草藥典(1998)、加拿大藥用及芳香植物學(xué)會、德國藥用植物學(xué)會、WHO草藥評價指南(1996)、美國草藥典(19992001,Monographs)均接受色譜指紋圖譜。美國食品和藥品管理局(FDA)于2000年8月發(fā)布的“植物藥產(chǎn)品行業(yè)指南(征求意見草案)”中,指出特定植物藥品種用色譜指紋圖譜來進(jìn)行質(zhì)量控制是可以接受的。

17、我國食品藥品監(jiān)督管理局(SFDA)于2000年發(fā)布了“中藥注射劑指紋圖譜研究的技術(shù)要求(暫行)”,首次以中藥指紋圖譜作為中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的一個新概念列入了藥品管理法規(guī)。知識鏈接第二節(jié) 中藥指紋圖譜三、中藥色譜指紋圖譜建立的方法與技術(shù)要求(一)樣品的收集 為了確保指紋圖譜的系統(tǒng)性，必須廣泛收集具有代表性的樣品。一般要求不少于10批樣品的收集數(shù)量（藥材的批次是指不同產(chǎn)地、不同渠道或不同時間獲取的獨立樣品，與成品的批次不同，要注意區(qū)分），每批供試品中取樣量應(yīng)不少于三次檢驗量，同時要有詳實記錄。第二節(jié) 中藥指紋圖譜原藥材盡可能固定產(chǎn)地(來自GAP基地藥材或地道藥材)、采收期、炮制方法。對光線穩(wěn)定，療效穩(wěn)定

18、，無臨床不良反應(yīng)的藥材批次應(yīng)重點選擇。還應(yīng)收集不同產(chǎn)地、不同采收期的藥材，以便進(jìn)行指紋圖譜的比較研究。中間體、注射劑樣品的收集應(yīng)重點選擇工藝穩(wěn)定，療效恒定，無不良反應(yīng)的批次。留樣應(yīng)不少于實驗用量的3倍。第二節(jié) 中藥指紋圖譜（二）供試品溶液的制備 供試品制備的每一步驟均必須標(biāo)準(zhǔn)化操作，以保證樣品分析具有良好的精密度、重現(xiàn)性、準(zhǔn)確性及樣品間的可比性，主要操作過程及數(shù)據(jù)應(yīng)詳細(xì)記錄。（三）參照物的制備一般選取樣品中容易獲得且含量較高的一個主要活性成分或指標(biāo)成分作為參照物。參照物主要用于指紋圖譜技術(shù)參數(shù)的確定，如特征峰（共有峰）的相對保留時間，峰面積比值等；并有助于圖譜的穩(wěn)定性、重現(xiàn)性的考查。第二節(jié) 中

19、藥指紋圖譜（四）實驗方法和條件的選擇中藥指紋圖譜的建立與應(yīng)用關(guān)鍵在于分析方法，包括測定方法、儀器、試劑、測定條件等，應(yīng)根據(jù)分析試樣中所含化學(xué)成分的理化性質(zhì)選擇適宜的測定方法。以色譜法最常用，一般首選HPLC法，對于易揮發(fā)性成分選用GC法，對于生物大分子可采用凝膠色譜法、CE或HPLC-MS；對于成分復(fù)雜的試樣，必要時可以考慮采用多種測定方法，建立多個指紋圖譜。第二節(jié) 中藥指紋圖譜（五）中藥指紋圖譜的方法驗證1精密度試驗主要考察儀器的精密度。2重現(xiàn)性試驗主要考察實驗方法的重現(xiàn)性。3穩(wěn)定性試驗主要考察供試品的穩(wěn)定性。第二節(jié) 中藥指紋圖譜（六）色譜指紋圖譜的建立和辨認(rèn)試驗條件確立后，將獲得的所有樣品

20、的指紋圖譜逐一研究比較，首先找出藥材色譜具有指紋意義的各個峰，給以編號，將藥材、半成品和成品之間的圖譜比較，如有缺峰，則缺號，要保持峰的編號不變，便于清楚地考察相互之間的相關(guān)性。指紋圖譜的辨認(rèn)應(yīng)注意指紋特征的整體性。第二節(jié) 中藥指紋圖譜（七）指紋圖譜的校驗與復(fù)核應(yīng)對所建立的指紋圖譜按有關(guān)規(guī)定要求進(jìn)行實驗條件、方法及結(jié)果的校驗與復(fù)核。（八）指紋圖譜的分析與評價根據(jù)指紋圖譜所獲取的信息，建立指紋圖譜分析比較的重要參數(shù)（共有峰、重疊率、N強峰、特征指紋等），計算特征指紋的相似度，進(jìn)行指紋圖譜的評價。請分析指紋圖譜技術(shù)與傳統(tǒng)的定性及定量分析方法有何顯著差異?分析色譜及光譜技術(shù)在指紋圖譜研究中地位差異？

21、作為指紋圖譜原始數(shù)據(jù)的獲取來源，紫外光譜法存在哪些優(yōu)劣方面？課堂互動第三節(jié) 電感耦合等離子體質(zhì)譜法 電感耦合等離子體質(zhì)譜法（ICP-MS）是將被測物質(zhì)用電感耦合等離子體離子化后，按離子的質(zhì)荷比分離，用于元素和同位素分析以及元素價態(tài)分析的一種新方法。一、儀器組成及其工作原理進(jìn)樣系統(tǒng)電感耦合等離子體（ICP）離子源接口及離子光學(xué)系統(tǒng)質(zhì)量分析器和檢測器第三節(jié) 電感耦合等離子體質(zhì)譜法二、儀器與試劑電感耦合等離子體質(zhì)譜儀微波消解儀洗瓶及量瓶標(biāo)準(zhǔn)溶液第三節(jié) 電感耦合等離子體質(zhì)譜法三、操 作 方 法（一）標(biāo)準(zhǔn)品儲備液的制備分別精密量取鉛、砷、鎘、汞、銅單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用10硝酸溶液稀釋制成每1ml分別含

22、鉛、砷、鎘、汞、銅為1g、0.5g、1g、1g、10g的溶液，即得。第三節(jié) 電感耦合等離子體質(zhì)譜法（二）標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備精密量取鉛、砷、鎘、銅標(biāo)準(zhǔn)品儲備液適量，用10硝酸溶液稀釋制成每1ml含鉛、砷0ng、1ng、5ng、10ng、20ng，含鎘0ng、0.5ng、2.5ng、5ng、10ng，含銅0ng、50ng、100ng、200ng、500ng的系列濃度混合溶液。另精密量取汞標(biāo)準(zhǔn)品儲備液適量，用10硝酸溶液稀釋制成每1ml分別含汞0ng、0.2ng、0.5ng、ng、2ng、5ng的溶液，本液應(yīng)臨用配制。第三節(jié) 電感耦合等離子體質(zhì)譜法（三）內(nèi)標(biāo)溶液的制備 精密量取鍺、銦、鉍單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液

23、適量，用水稀釋制成每1ml各含1g的混合溶液，即得。（四）供試品溶液的制備取供試品于60干燥2小時，粉碎成粗粉，取約0.5g，精密稱定，置耐壓耐高溫微波消解罐中，加硝酸510ml（如果反應(yīng)劇烈，放置至反應(yīng)停止）。密閉并按各微波消解儀的相應(yīng)要求及一定的消解程序進(jìn)行消解。第三節(jié) 電感耦合等離子體質(zhì)譜法消解完全后，冷卻消解液低于60，取出消解罐，放涼，將消解液轉(zhuǎn)入50ml量瓶中，用少量水洗滌消解罐3次，洗液合并于量瓶中，加入金單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（1gml）200l，用水稀釋至刻度，搖勻，即得（如有少量沉淀，必要時可離心分取上清液）。除不加金單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液外，其余同法制備試劑空白溶液。第三節(jié) 電感耦合等離子體質(zhì)譜法（五）測定法測定時選取的同位素為63Cu、75As、114Cd、20