紫外線殺菌效果實驗設(shè)計

1、實驗設(shè)計：紫外殺菌效果的檢測原理：紫外線主要是通過對微生物（細(xì)菌、病毒、芽孢等病原體）的輻射損傷和破壞核酸的功能使微生物致死，從而達到消毒的目的。紫外線對核酸的作用可導(dǎo)致鍵和鏈的斷裂、股間交聯(lián)和形成光化產(chǎn)物等，從而改變了的生物活性，使微生物自身不能復(fù)制，這種紫外線損傷也是致死性損傷。真空紫外光穿透能力極弱，燈管和套管需要采用極高透光率的石英。不同種類的微生物對紫外線的敏感性不同,消毒時必須使用能殺滅目標(biāo)微生物所需的照射劑量,其抵抗力由大到小排列次序為真菌孢子細(xì)菌芽抱細(xì)菌繁殖體。殺滅細(xì)菌繁殖體時照射劑量應(yīng)達到|JWs/cm2;殺滅細(xì)菌芽抱時應(yīng)達到|JWs/cm2。病毒對紫外線的抵抗力介于細(xì)菌繁殖

2、體和芽抱之間,真菌抱子的抵抗力比細(xì)菌芽抱更強有時需照射劑量達到JWs/cm2o在消毒目標(biāo)微生物不詳時照射劑量不應(yīng)低于JWs/cm2。紫外線燈的輻射強度隨距燈管距離的增加而降低。紫外線殺菌效率還受到溫度和濕度的影響，作用各有不同，有待進一步的探討研究。主要儀器設(shè)備：實驗一（菌種和殺菌時間、溫度不同紫外線殺菌效率不同）實驗裝置外圍為特制的透明玻璃器皿溫度35C和濕度都保持平衡不變外圍為特制的透明玻璃器皿溫度35C和濕度都保持平衡不變實驗二（距離不同紫外線殺菌效率不同）實驗裝置高壓蒸汽滅菌鍋、恒溫培養(yǎng)箱、電熱干燥箱、振蕩培養(yǎng)箱、試管、三角瓶、燒杯、量筒、玻璃棒、天平、藥匙、試紙、橡膠塞、棉塞、記號筆

3、、皮筋、報紙、培養(yǎng)皿（中）、移液管（）、玻璃珠、吸水紙、電爐、接種環(huán)、鑷子、搪瓷杯、酒精燈、菌落計數(shù)器、放大鏡、一些遮陽傘的布料、報紙藥品及試劑：營養(yǎng)瓊脂（或牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、瓊脂粉、，）大腸桿菌（革蘭氏陰性菌，441）0、枯3草芽孢桿菌（芽孢桿菌，110）、6金黃色葡萄球菌（革蘭氏陽細(xì)菌，）新的紫外燈實驗路線方法（實驗方案）：一、實驗前的準(zhǔn)備1、玻璃器皿的準(zhǔn)備玻璃器皿在實驗前必須洗滌干凈，根據(jù)實驗要求準(zhǔn)備相應(yīng)數(shù)量，移液管、培養(yǎng)皿等包裝好后滅菌?？刹捎酶蔁釡缇ㄌ幚怼?、培養(yǎng)基的準(zhǔn)備1）稱量：直接稱量一定量的營養(yǎng)瓊脂2）熔化：在沸水浴鍋中加熱熔化。）調(diào)：，調(diào)至-4）分裝：將溶化的固體培養(yǎng)

4、基趁熱加至漏斗上，裝試管時，裝量不超過試管的/注意管口不要沾上培養(yǎng)基。5）加塞：試管應(yīng)先捆成一捆，然后再于棉塞外包扎牛皮紙，貼上標(biāo)簽，注明培養(yǎng)基名稱、日期、組別。6）將培養(yǎng)基、無菌水放入高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)，濕熱滅菌。3、無菌水的制備用量筒量取自來水于帶玻璃珠三角瓶中，塞上棉塞，包扎報紙（4層）。二、菌種的活化從大腸桿菌的樣菌中用接種環(huán)在無菌操作下接種到斜面培養(yǎng)基上放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時左右，菌種長得比較好。再次將菌接種到新的斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)24小時。金黃葡萄球菌和枯草芽孢桿菌重復(fù)上述操作。三、菌種稀釋取出經(jīng)過兩次接種培養(yǎng)的大腸桿菌，用接種環(huán)刮下一點點放入盛有無菌水的帶有玻璃珠的三角瓶中，入

5、振蕩培養(yǎng)箱中振蕩搖勻m使菌種和水充分混合，取支無菌移液管從三角瓶中吸?。ù瞬僮饕鬅o菌操作），加入另一盛有無菌水的試管中,混合均勻，以此類推分別制成0.、10.0、10.0、001.00等0不1同稀釋度的土壤溶液。將不同稀釋倍數(shù)的菌液進行稀釋平板法后培養(yǎng)一段時間，將菌液計數(shù)，找到數(shù)量在數(shù)目間的稀釋倍數(shù)的菌液。二、做樣板將數(shù)量在適宜范圍內(nèi)的稀釋后的菌液，用0.5ml的無菌移液管在無菌操作和環(huán)境下將菌液移到無菌平皿里，再將融化的培養(yǎng)基冷卻到室溫后在無菌操作下倒入平皿中，然后放在平穩(wěn)的桌面上進行緩慢的順時針的旋轉(zhuǎn)直至培養(yǎng)基凝固。按上述方法做32個樣板。金黃葡萄球菌和枯草芽孢桿菌重復(fù)上述操作，但都只做

6、10個樣板。三、實驗一1、實驗前，將裝置一的紫外燈打開一段時間進行裝置內(nèi)的消毒2、將大腸桿菌平板分成5組，放在不同層，其中一組帶著皿蓋還包著一層遮陽傘的布料放入其中，其他四組a/b/c/d分別打開皿蓋放入裝置內(nèi)，待一分鐘后將a組蓋上皿蓋和布料，2min后b組，7min后c組，20min后關(guān)掉紫外燈。3、將枯草芽孢桿菌和金黃葡萄球菌依次重復(fù)2操作，得到平板。4、將裝置的溫度改成5C,取10個大腸桿菌的平板，重復(fù)操作2,得到平板。4、將平板取出做上相應(yīng)的標(biāo)記后，放入35C的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時后，進行菌落數(shù)的計數(shù)。四、實驗二1、實驗前，將裝置二的紫外燈打開較長的一段時間2、在裝置里紫外燈中心距

7、其0、0.4、0.8、1.6、3.2米的地方上打開皿蓋放置平行樣板，再在其中心線上距其任一位置上放置一組帶有皿蓋并包裹了遮陽傘材料的平行樣，要求其溫度恒溫在35C,讓紫外線照射10min.3、取出平板放入恒溫培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)24h，數(shù)出菌數(shù)并計算出殺菌率。五、試驗臺清理將所有廢棄的培養(yǎng)基都放到指定的地方，清理好儀器并擺放整齊。實驗結(jié)果：（表格）按以下公式計算殺菌率：未經(jīng)照射的菌落數(shù)/皿一照射后菌落數(shù)/皿殺滅率=100%*未經(jīng)照射的菌落數(shù)/皿實驗一：溫度為25C,濕度30%溫度5C,濕度30%溫度35C,濕度30%距離0m0.4m0.8m1.6m3.2m未照射大腸桿菌菌落數(shù)殺菌率結(jié)果討論：不同的菌，紫外線的殺菌時間不同，對于一般的細(xì)菌只要很短的時間，對于有芽孢的菌，它本身抗逆性非常強，因此殺滅的時間會相對更長一些。對于水處理中，這個時間會很重要，它意味著菌是否殺干凈了。不同溫度對于紫外線殺菌效果是否相同，這也有必要驗證。我查閱的資料說在溫度低于10CH寸，紫外燈的殺菌率會明顯變化。如果實驗結(jié)果是這樣，那么在一些特殊的環(huán)境，紫外燈滅菌就不適用了。我們都知道距陽光越遠(yuǎn)我們所感受到的熱量就越低，這說明距離對于紫外線殺菌也會有一定的影響，這就會有一個殺菌效率高的距離。對于一些想要用紫外燈來滅菌的處理廠而言，