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文檔簡(jiǎn)介

1、血液部分血液標(biāo)本全血:用于細(xì)胞計(jì)數(shù)、分類、形態(tài)觀察;血漿:全血去除血細(xì)胞,用于血栓止血檢測(cè);血清:全血自然凝固后析出的液體,用于生物化學(xué)、免疫學(xué)檢測(cè)等。血液標(biāo)本采集方法:一、毛細(xì)血管采血法:用于微量檢測(cè) 部位:耳垂或手指末梢,主要是中指或無(wú)名指尖內(nèi)側(cè),半歲以下拇指或足部,特殊人員視情況而定 所用器材:采血針、吸管二、靜脈采血法:用于血沉、免疫、生化等檢測(cè)項(xiàng)目 部位:主要是肘靜脈。還可以在:手背部手腕部等部位采血,幼兒可采用頸外靜脈采血。 采血器材:一次性注射器,檢驗(yàn)用真空定量采血裝置。抗凝:用物理或化學(xué)方法除去或抑制血 液中的某些凝血因子的活性,以阻止血液凝固,稱為抗凝。一、草酸鹽,抗凝原理:

2、與血液中鈣離子形成沉淀;使用方法:草酸鈉0.1mol/L和血液1:9。優(yōu)點(diǎn):溶解性好,價(jià)廉。缺點(diǎn):對(duì)凝血因子保護(hù)功能差,影響凝血因子;形成草酸鈣沉淀物,影響自動(dòng)凝血儀器的使用。使用范圍:逐步被淘汰。二、檸檬酸鈉(枸櫞酸鈉),抗凝原理:與鈣離子生成可溶性的鰲合物。使用方法:配成109mmol/L的濃度和血液1:9(用于凝血試驗(yàn));106mmol/L的濃度和血液1:4(用于血沉)。優(yōu)點(diǎn):對(duì)凝血因子有很好的保護(hù)作用。缺點(diǎn):血液中溶解度低,抗凝作用較弱。使用范圍:止血學(xué)檢驗(yàn)、血沉、輸血保養(yǎng)液(毒性?。?。三、乙二胺四乙酸(EDTA)鹽,抗凝原理:與鈣離子生成可溶性的鰲合物。使用方法:15g/L EDTA

3、和血液1:10。優(yōu)點(diǎn):對(duì)紅細(xì)胞和白細(xì)胞形態(tài)影響小。缺點(diǎn):影響血小板的聚集。使用范圍:全血細(xì)胞分析和血細(xì)胞比容測(cè)定,但不適用于出凝血實(shí)驗(yàn)和血小板功能。四、肝素,抗凝原理:加強(qiáng)抗凝血酶作用,阻止凝血酶形成。使用方法:肝素鈉1g/L與血液1:10。優(yōu)點(diǎn):抗凝能力強(qiáng)、不影響血細(xì)胞體積、不易溶血、能耐高溫。缺點(diǎn):引起白細(xì)胞聚集,使白細(xì)胞計(jì)數(shù)降低,不利于制備血涂片,價(jià)格昂貴。使用范圍:血漿生化/免疫項(xiàng)目,紅細(xì)胞脆性實(shí)驗(yàn),科學(xué)研究等。亞鐵血紅素:血紅蛋白色素部分,由鐵原子及原卟啉區(qū)組成。 血涂片的制備1、用途:血細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)、網(wǎng)織紅、異常細(xì)胞檢驗(yàn)、寄生蟲檢驗(yàn)。2、制備步驟:(手工推片法)將推玻片向1的方向

4、稍抽回,當(dāng)血液充滿推玻片的寬度后,以一定均勻的速度向2的方向滑動(dòng)。3、質(zhì)量評(píng)價(jià):均勻、厚薄、頭體尾、邊緣、兩側(cè)注意:血滴大,速度快、角度大-血膜厚瑞氏染色法原理:分兩相進(jìn)行,第一相是酸性伊紅與細(xì)胞中的堿性物質(zhì)如血紅蛋白、嗜酸性顆粒結(jié)合;堿性染料天青B與細(xì)胞中的酸性物質(zhì)如核染色質(zhì)、特異中性顆粒、血小板結(jié)合。第二相是天青B和伊紅結(jié)合在適宜條件下形成紫色的天青B-伊紅復(fù)合物,結(jié)果使白細(xì)胞核染色質(zhì)成紫色(瘧原蟲的染色質(zhì)成紅色),中性粒細(xì)胞的顆粒及血小板顆粒區(qū)成紫色。試劑1. Wright染液:瑞氏染粉0.1g,甲醇60.0ml甲醇:有強(qiáng)大的脫水力,可將細(xì)胞固定為一定形態(tài),并使蛋白質(zhì)沉淀為顆粒狀、網(wǎng)狀等

5、結(jié)構(gòu),增加細(xì)胞與染料接觸表面積,提高對(duì)染料的吸附作用,增強(qiáng)染色效果。2.磷酸鹽緩沖液(PBS):磷酸二氫鉀(無(wú)水)0.3g,磷酸氫二鈉(無(wú)水)0.2g, 蒸餾水加到1000ml。配好后用磷酸鹽溶液校正pH(6.4-6.8),塞緊瓶口備用。方法:a. 用蠟筆在血膜兩頭劃線,平放于染色架上。b. 加瑞氏染液覆蓋血膜,固定1min。c. 滴加等量或稍多的緩沖液,混勻,染色5-10分鐘。d. 用清水沖洗,待干后鏡檢。紅細(xì)胞計(jì)數(shù):測(cè)定單位體積血液中紅細(xì)胞的數(shù)量【技數(shù)方法】顯微鏡計(jì)數(shù)法:用等滲稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)后,滴入血細(xì)胞計(jì)數(shù)盤,然后于顯微鏡下,計(jì)數(shù)一定范圍內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù),經(jīng)過(guò)換算即可求得每升血液中

6、的紅細(xì)胞數(shù)?!緟⒖贾怠砍赡昴行裕海?. 0 5. 5) 1012/L成年女性:(3. 5 5. 0) 1012/L新生兒:(6. 0 7. 0) 1012/L低于3.51012/L可診斷為貧血,低于1.51012/L應(yīng)考慮輸血。網(wǎng)織紅細(xì)胞網(wǎng)織紅細(xì)胞是未完全成熟的紅細(xì)胞,是晚幼紅細(xì)胞脫核后到完全成熟的紅細(xì)胞之間的過(guò)渡型(未成熟)紅細(xì)胞?!居?jì)數(shù)方法】顯微鏡計(jì)數(shù)法:(活體染色) 染料煌焦油蘭:常用,染色效果好,但沉渣較多。 新亞甲蘭:WHO推薦的,染色效果好,但試劑昂貴。試驗(yàn)方法試管法:染色時(shí)間長(zhǎng)(30min),效果好,易重復(fù)計(jì)數(shù)。玻片法:染色時(shí)間短,水分易蒸發(fā),結(jié)果偏低。制薄片,不復(fù)染,油鏡下計(jì)數(shù)

7、1000個(gè)RBC中Ret數(shù)(縮小視野法或Miller窺盤)?!緟⒖贾怠砍扇耍?.0050.015或(24-84)109/L兒童:0.020.06血紅蛋白(Hb)是在人體有核紅細(xì)胞及網(wǎng)織紅細(xì)胞內(nèi)合成的一種含色素輔基的結(jié)合蛋白質(zhì),是紅紅細(xì)胞內(nèi)的運(yùn)輸?shù)鞍??!緳z測(cè)原理】血液在血紅蛋白轉(zhuǎn)化液中溶血后,除SHb外各種血紅蛋白均可被高鐵氰化鉀氧化成高鐵血紅蛋白(Hi),Hi與氰化鉀的氰根(CN-)生成穩(wěn)定的棕紅色氰化高鐵血紅蛋白(HiCN),HiCN在540nm有吸收峰。在特定的實(shí)驗(yàn)條件下,可測(cè)得吸光度并計(jì)算Hb(G/L)。但在實(shí)際工作中,一般實(shí)驗(yàn)室的分 光光度計(jì)達(dá)不到WHO規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)條件,所以利用Hb參考

8、液制備標(biāo)準(zhǔn)曲線,換算出Hb(G/L)?!緟⒖贾怠砍赡昴行裕?20-160 g/L成年女性:110-150 g/L新生兒:170-200 g/L70歲以上老年男性:94.2-122.2 g/L70歲以上老年女性:86.5-111.8 g/L貧血:?jiǎn)挝蝗莘e循環(huán)血液中紅細(xì)胞、血紅蛋白、血細(xì)胞比積低于參考值下限,稱為貧血。臨床上通常以血紅蛋白為標(biāo)準(zhǔn):輕度貧血:男性120g/L,女性90g/L中度貧血:9060 g/L重度貧血:6030 g/L極度貧血:3個(gè)/HP,稱為。血紅蛋白尿:血管內(nèi)溶血時(shí),血漿游離血紅蛋白增多,超過(guò)珠蛋白結(jié)合能力(約1.3g/L),可通過(guò)腎小球?yàn)V出而形成的暗紅、棕紅甚至醬油色的尿

9、液,稱為。肌紅蛋白尿:當(dāng)肌肉組織廣泛損傷、變性時(shí)血漿肌紅蛋白含量增高,經(jīng)腎臟排出,產(chǎn)生的粉紅色或暗紅色尿液。乳糜尿:由于泌尿系統(tǒng)淋巴管破裂火神不淋巴管阻塞致使乳糜液或淋巴液進(jìn)入尿液,尿液呈乳白色渾濁,稱為。膿細(xì)胞:在炎癥過(guò)程中被破壞、變性或壞死的中性粒細(xì)胞。其外形多變不規(guī)則,胞質(zhì)內(nèi)常充滿顆粒,胞核模糊不清,常聚集成團(tuán),邊界不清。膿尿:由于含有大量白細(xì)胞,外觀呈黃白色或白色的尿液。1、鏡下膿尿:尿液白細(xì)胞5個(gè)/HP。2、肉眼膿尿:尿液中含大量白細(xì)胞而呈乳白色,甚至出現(xiàn)塊狀,稱為相關(guān)內(nèi)容:閃光細(xì)胞:低滲尿液中,中性粒細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)顆粒呈布朗運(yùn)動(dòng),在油鏡下由于光的折射可見灰藍(lán)色發(fā)光現(xiàn)象,運(yùn)動(dòng)似星狀閃光,

10、故名。尿比重:指尿液在4時(shí)與同體積純水的質(zhì)量之比,是尿液中所含溶質(zhì)濃度的指標(biāo)??纱致苑从衬I臟的濃縮稀釋功能。1、低滲尿/低比重尿:尿液比重常低于1.015;2、等滲尿:尿液比重固定在1.0100.003,與腎小球?yàn)V過(guò)液的比重接近【參考區(qū)間】成人:隨機(jī)尿1.0031.030;晨尿1.020。新生兒:1.0021.004尿滲量:指尿液中具有滲透活性的全部溶質(zhì)微粒的總數(shù)量,與顆粒大小及所帶電荷無(wú)關(guān),反映了溶質(zhì)和水的相對(duì)排出速度。在評(píng)價(jià)腎臟濃縮稀釋功能時(shí)較尿比重優(yōu)越?!緟⒖紖^(qū)間】尿滲量:6001000mmol/kg H2O(相當(dāng)于尿比重1.0151.025)。最大范圍401400mmol/kg H2O

11、。尿滲量/血漿滲量為(3.04.7):1.0。尿液氣味的【參考區(qū)間】為微弱芳香氣味,源自尿液中酯類與揮發(fā)性酸。若尿液標(biāo)本久置,則因?yàn)槟蛩胤纸饪沙霈F(xiàn)氨臭味。尿液酸堿度的【參考區(qū)間】正常飲食條件下:晨尿pH5.56.5,平均6.0.隨機(jī)尿pH4.58.0.尿液可滴定酸度:2040mmol/24小時(shí)尿。終尿中的蛋白質(zhì)含量很少,僅為30130mg/24h。蛋白尿:當(dāng)尿液中的蛋白質(zhì)超過(guò)150mg/24h(或超過(guò)100mg/L)時(shí),蛋白定性試驗(yàn)呈陽(yáng)性,稱為?!拘≈R(shí)點(diǎn)】檢測(cè)蛋白尿的方法有:試帶法(定性或半定量),磺基水楊酸法(定性或半定量,靈敏度為0.050.1 g/L),加熱乙酸法(經(jīng)典方法,靈敏度為0

12、.15g/L)。參考值: 定性:陰性。定量:0.1g/L或0.15g/24h尿。生理性蛋白尿:因機(jī)體內(nèi)外環(huán)境因素的變化所產(chǎn)生的蛋白尿,稱為。1、功能性蛋白尿:泌尿系統(tǒng)無(wú)器質(zhì)性病變,尿液內(nèi)暫時(shí)出現(xiàn)少量蛋白質(zhì),稱為。2、體位性蛋白尿:又稱直立性蛋白尿,在直立時(shí)出現(xiàn)蛋白尿而臥位則消失,且無(wú)血尿、高血壓、水腫等現(xiàn)象。3、偶然性蛋白尿:又稱假性蛋白尿。由于尿液中混入血液、膿液、黏液、生殖系統(tǒng)分泌物或月經(jīng)血等,導(dǎo)致尿蛋白定性試驗(yàn)陽(yáng)性的蛋白尿。病理性蛋白尿1、腎小球性蛋白尿:腎小球?yàn)V過(guò)膜因炎癥、免疫、代謝等因素?fù)p傷后,慮過(guò)膜孔徑增大、斷裂和(或)靜電屏障作用減弱,血漿蛋白特別是白蛋白濾出,超出近端腎小管重吸

13、收能力而形成的蛋白尿。(腎小球性蛋白尿中蛋白含量常大于2g/24h尿,通常以清蛋白為主,約占70%80%,另外,2微球蛋白也可輕度增多)2、腎小管性蛋白尿:指腎小管受到感染、中毒損傷或繼發(fā)于腎小球疾病時(shí),重吸收的能力降低或抑制而出現(xiàn)的以相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)為主的蛋白尿。(特點(diǎn)是以2微球蛋白、溶菌酶等增多為主,清蛋白正?;蜉p度增高。單純性腎小管性蛋白尿,尿蛋白含量較低,一般低于1g/24h尿)3、混合性蛋白尿:病變同時(shí)或相繼累及腎小球和腎小管而產(chǎn)生的蛋白尿,兼具以上兩種蛋白尿的特點(diǎn)。(低相對(duì)分子質(zhì)量的2微球蛋白及中相對(duì)分子質(zhì)量的清蛋白同時(shí)增多)4、溢出性蛋白尿:(腎小球/腎小管功能均正常)因

14、血漿中相對(duì)分子質(zhì)量較小或陽(yáng)性電荷蛋白異常增多,經(jīng)腎小球?yàn)V過(guò),超過(guò)腎小管重吸收能力所形成的蛋白尿,即。5、組織性蛋白尿:指來(lái)源于腎小管代謝產(chǎn)生的、組織破壞分解的、炎癥或藥物刺激泌尿系統(tǒng)分泌的蛋白質(zhì),進(jìn)入尿液而形成的蛋白尿。還可按其發(fā)生的部位分為腎前性、腎性和腎后性蛋白尿。健康人的尿液中可有微量葡萄糖,一般2.8mmol/24h,普通方法檢測(cè)為陰性。血糖濃度超過(guò)8.88mmol/L(1.6g/L)時(shí),尿液中卡是開始出現(xiàn)葡萄糖糖尿:尿糖定性試驗(yàn)呈陽(yáng)性的尿液,取決于血糖濃度、腎血流量和腎糖閥。一般指葡萄糖尿。腎糖閾:尿中開始出現(xiàn)葡萄糖時(shí)最低血糖濃度,稱為。【小知識(shí)點(diǎn)】檢測(cè)尿糖的方法有:試帶法,班氏法,

15、薄層層析法。參考值:定性:陰性。定量:2.8mmol/24h(0.10.8mmol/L)。酮體:是乙酰乙酸(占20%)、-羥基丁酸(占78%)和丙酮(占2%)的總稱,它們是機(jī)體脂肪氧化代謝產(chǎn)生的中間產(chǎn)物。血漿酮體濃度一旦超過(guò)腎閾值,就會(huì)產(chǎn)生酮尿。尿中膽色素包括膽紅素、尿膽原及尿膽素,俗稱尿三膽。膽紅素:紅細(xì)胞破壞后的代謝產(chǎn)物,可分為游離膽紅素和結(jié)合膽紅素。1、游離膽紅素不溶于水,在血中與蛋白質(zhì)結(jié)合,不能通過(guò)腎小球?yàn)V出;2、結(jié)合膽紅素相對(duì)分子質(zhì)量小,溶解度高,可通過(guò)腎小球?yàn)V出。正常人血中結(jié)合膽紅素含量很低,因此尿中不能檢出膽紅素。尿膽原:是膽紅素在腸道中被細(xì)菌還原所產(chǎn)生,尿膽原經(jīng)空氣氧化及光線照

16、射后轉(zhuǎn)變成黃色的尿膽素(糞膽素)?!緟⒖贾怠磕蚰懺憾ㄐ裕宏幮曰蛉蹶?yáng)性(120稀釋后陰性)。定量:男性:0.303.55mol/L;女性:0.002.64mol/L;兒童:0.132.30mol/L。尿膽素:陰性。黃疸類型尿膽紅素尿膽原正常 陰性 陰性弱陽(yáng)性梗阻性黃疸 顯著增加 陰性溶血性黃疸 陰性 顯著增加肝細(xì)胞性黃疸 中度增加 輕度增加健康人的尿液清蛋白一般小于20mg/L,大于30mg/L時(shí)即提示異常。微量白蛋白尿:是指尿中清蛋白含量超過(guò)健康人水平,但常規(guī)尿蛋白試驗(yàn)為陰性的低濃度清蛋白。本周蛋白:實(shí)質(zhì)是免疫球蛋白輕鏈或其聚合物?!拘≈R(shí)點(diǎn)】檢測(cè)方法:對(duì)甲苯磺酸沉淀篩選實(shí)驗(yàn)(靈敏度3mg/

17、L)、免疫固定電泳(最佳方法)。臨床意義:多發(fā)性骨髓瘤、原發(fā)性巨球蛋白血癥。尿沉渣:尿液排出體外并經(jīng)離心沉淀后,能在顯微鏡下看得到的有形成分。是尿液中有形沉淀成分的統(tǒng)稱。離心尿液直接涂片法取新鮮尿標(biāo)本1015ml,以10001500rpm離心35分鐘,取出離心管,用吸管慢慢將上清液棄掉,切勿弄混沉渣,最終留取0.2ml,混勻后滴在載玻片上,用18mm18mm蓋玻片鏡檢。觀察時(shí)先用低倍鏡觀察有形成分全貌和管型,然后用高倍鏡鑒定細(xì)胞成分,細(xì)胞用高倍鏡觀察10個(gè)視野,管型用低倍鏡觀察20個(gè)視野,記錄結(jié)果。管型:是蛋白質(zhì)、細(xì)胞及其崩解產(chǎn)物在腎小管、集合管內(nèi)凝固而形成的圓柱形蛋白凝聚體。形成管型的必要條

18、件是:原尿中有少量的白蛋白和由腎小管分泌的T-H蛋白是構(gòu)成管型的基質(zhì);腎小管有使尿液濃縮和酸化能力;要有可供交替使用的腎單位。結(jié)晶:酸性尿液內(nèi)的結(jié)晶包括草酸鈣結(jié)晶、尿酸結(jié)晶、非晶形尿酸鹽,硫酸鈣結(jié)晶及馬尿酸結(jié)晶等。尿液中是否出現(xiàn)結(jié)晶,取決于這些物質(zhì)在尿液中的溶解度、濃度、pH、溫度及膠體狀況等因素。當(dāng)促進(jìn)與抑制結(jié)晶析出的動(dòng)態(tài)平衡被打破時(shí),就可見結(jié)晶析出。結(jié)晶多來(lái)自飲食,一般無(wú)重要臨床意義。糞便部分糞便組成:細(xì)菌(占干重的1/3)、消化道分泌物和有形成分、未消化的食物、食物分解產(chǎn)物其中3/4是水,1/4是固體物質(zhì)。標(biāo)本的采集與處理1、容器干凈,標(biāo)志明顯,大小適宜,盛便后不漏不溢,不吸收水份,最好

19、是一次性的塑料盒。2、標(biāo)本的要求a、標(biāo)本務(wù)必新鮮,不可混人尿液。b、采集標(biāo)本時(shí)應(yīng)用干凈竹簽挑取糞便含有粘液或膿血部分,外觀無(wú)異常的糞便應(yīng)從不同部位淺、深處糞便多處取材;c、一般檢查留取少量糞便即可(至少有5克大小),稀便2ml,濃集卵時(shí)至少要取雞蛋大小糞便,3、及時(shí)檢查標(biāo)本采集后應(yīng)在1h內(nèi)檢查完畢,否則因pH及消化酶等影導(dǎo)致有形成分破壞。4、特殊檢查標(biāo)本應(yīng)按規(guī)定進(jìn)行檢查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應(yīng)于排便后立即送檢,寒冷季節(jié)時(shí)標(biāo)本送驗(yàn)及檢查時(shí)應(yīng)需保溫。糞便顏色:健康成人糞便應(yīng)為黃褐色,嬰兒為金黃色。為糞膽素導(dǎo)致。各種生理性因素和病理性變化可以使其顏色發(fā)生變化。1、黑色或柏油色:見于上消化道出血、服用鐵劑、

20、食用豬血等。產(chǎn)生機(jī)制:紅細(xì)胞被破壞,血紅蛋白在細(xì)菌作用下被分解,降解為血紅素、鐵、卟啉。鐵與腸道分解生成的硫化氫形成黑色的硫化鐵。2、白陶土色:見于阻塞性黃疸、膽道梗阻,食用脂肪過(guò)量、鋇餐后。糞便性狀:健康成人為成形軟便,便秘者為球形硬塊。嬰兒為糊狀。糞便的pH:變化范圍6.9-7.2。細(xì)菌性痢疾、血吸蟲病時(shí)堿性,8 .0左右。阿米巴痢疾、病毒性腸炎為酸性,6.1-6 . 6左右。糞便的量:健康成人每日糞便為100-300g。隨食物種類、進(jìn)食量和消化系統(tǒng)功能而變化。粗糧或纖維豐富的,糞便量;細(xì)糧或肉類較多,糞便較少。糞便顯微鏡檢查:手工鹽水涂片鏡檢操作方法:取一清潔玻片,滴加2滴生理鹽水,用竹

21、簽挑取糞便中的異常部份,與鹽水均勻混合制成薄涂片,蓋上蓋片,其涂抹厚度以透過(guò)標(biāo)本看清字跡為宜。先用低倍觀察蟲卵、原蟲和其它異物,再用高倍鏡仔細(xì)觀察各種異常成分。細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí),至少應(yīng)檢查10個(gè)以上的高倍視野。糞便隱血:是指消化道出血量少(每日出血量5ml),糞便中無(wú)可見的血液,且紅細(xì)胞被消化破壞,顯微鏡下也見不到紅細(xì)胞,這種肉眼及顯微鏡均不能證明,需用化學(xué)法、免疫法才能證實(shí)的微量出血稱為隱血。隱血試驗(yàn)(OBT)是指用化學(xué)或免疫學(xué)的方法證實(shí)微量血液的試驗(yàn)。【相關(guān)內(nèi)容】檢測(cè)方法1)化學(xué)法:這類方法種類很多,根據(jù)色原物質(zhì)不同分為:鄰聯(lián)甲苯胺法、鄰甲苯胺法、聯(lián)苯胺法、無(wú)色孔雀綠法、愈創(chuàng)木酯法、還原酚酞法等

22、;根據(jù)反應(yīng)試劑狀態(tài)或試劑載體不同又分為濕化學(xué)和干化學(xué)試紙法。其實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理基本相同,此類方法簡(jiǎn)便易行,成本低廉,目前實(shí)驗(yàn)室常用。靈敏度:a、鄰聯(lián)甲苯胺、鄰甲苯胺、還原酚酞法最靈敏,可檢出0.21.0mg/L的血紅蛋白,只要消化道有15ml出血就可檢出。其中鄰聯(lián)甲苯胺法是在1983年中華醫(yī)學(xué)會(huì)全國(guó)臨床檢驗(yàn)方法學(xué)學(xué)術(shù)討論會(huì)推薦的方法,但易出現(xiàn)假陽(yáng)性。b、中度靈敏的試驗(yàn)有聯(lián)苯胺法、匹拉抗米酮法及無(wú)色孔雀綠法,可檢出15mg/L的血紅蛋白,消化道有510ml出血即為陽(yáng)性。為了減少假陽(yáng)性和假陰性,臨床上宜采用中度靈敏方法。2)免疫學(xué)法:免疫學(xué)法常用的方法有ELISA和膠體金等方法,此類方法所使用的抗體為

23、抗人血紅蛋白單克隆抗體。免疫法操作簡(jiǎn)便、快速、靈敏度高(一般血紅蛋白為0.2mg/L即可獲陽(yáng)性結(jié)果)、特異性強(qiáng),飲食和藥物等均對(duì)結(jié)果無(wú)影響,目前被認(rèn)為是大腸癌普查最適用試驗(yàn)。臨床意義1、對(duì)消化道出血有診斷價(jià)值:消化道潰瘍、藥物致胃粘膜損傷、腸結(jié)核、潰瘍性結(jié)腸炎、結(jié)腸息肉、鉤蟲病、流行性出血熱及消化道惡性腫瘤所致消化道出血時(shí),隱血試驗(yàn)常呈陽(yáng)性反應(yīng)。2、為消化道潰瘍與腫瘤出血的鑒別提供依據(jù):消化道腫瘤病人,由于腫瘤直接或間接侵犯、破壞消化器官中的血管,隱血試驗(yàn)呈持續(xù)性陽(yáng)性;胃腸道潰瘍病人僅在發(fā)病時(shí)有出血的表現(xiàn),隱血試驗(yàn)結(jié)果呈間斷性陽(yáng)性。3、可作為消化道惡性腫瘤普查的1個(gè)篩選指標(biāo):隱血試驗(yàn)對(duì)消化道腫

24、瘤的診斷陽(yáng)性率可達(dá)95%,其中早期胃癌診斷符合率為20%,晚期符合率達(dá)95%,對(duì)50歲以上的無(wú)癥狀者,每年做1次糞便隱血試驗(yàn),對(duì)早期消化道惡性腫瘤有重要價(jià)值。早期大腸癌病灶僅限于粘膜層或粘膜下層時(shí),往往無(wú)癥狀,糞便中帶有微量的出血是早期診斷大腸癌唯一可查出的異常指標(biāo)。精液精液主要由精子和精漿(精囊液、前列腺液、尿道球腺、旁腺液)組成。標(biāo)本的采集1.采集標(biāo)本前要禁欲(包括無(wú)遺精或手淫)37天(30歲以下23天,3040禁欲35天,40以上禁欲57天)2.要將精液全部排入潔凈的干燥容器中。天冷時(shí)要注意保溫,盡快送檢(30-60min)精液的量精液量為2.06.0ml,平均為3.5ml,少于1.5m

25、l或大于8.0ml可視為異常。無(wú)精液癥:精液量減少至12滴,甚至排不出,稱為無(wú)精液癥。精液的外觀(顏色和透明度)灰白色或乳白色,久未射精者可呈淡黃色,微渾濁,液化后半透明樣。精液的氣味正常精液具有栗花和石楠花的特殊氣味,由前列腺液產(chǎn)生。精液的粘稠度剛排出的精液迅速凝成膠凍狀,然后逐漸液化。正常精囊分泌的凝固蛋白使得精液凝固。pH正常精液呈現(xiàn)弱堿性,為7.2-8.0。測(cè)定應(yīng)在標(biāo)本留取后1小時(shí)內(nèi)完成。精液的液化時(shí)間:精液由膠胨狀態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)榱鲃?dòng)狀態(tài)所需的時(shí)間稱為精液液化時(shí)間。精液液化主要是由于前列腺分泌的精液蛋白分解酶所致。剛射出的精液具有高度的粘稠性,液化時(shí)間30min.。精液延遲液化癥:新鮮精液標(biāo)

26、本在室溫下超過(guò)60min不液化,稱為,常見于前列腺炎。精子活動(dòng)率指活精子的數(shù)量,以“活”精子比率表示。1、濕片法:在高倍鏡下觀察100個(gè)精子,計(jì)數(shù)活動(dòng)精子與不活動(dòng)精子的比例來(lái)表示精子活動(dòng)率。該法簡(jiǎn)便、快速、應(yīng)用廣泛,但該法較主觀,且影響因素多,結(jié)果誤差較大,重復(fù)性較差。2、活體染色法(也稱為精子存活率):檢測(cè)正常活動(dòng)的精子數(shù),是測(cè)定活精子和死精子的定量方法。用染料對(duì)精子染色。該法操作較為復(fù)雜,費(fèi)時(shí),但較客觀反映死活精子比例,結(jié)果準(zhǔn)確、可靠、重復(fù)性好,試劑易配制,易保存,是檢測(cè)精子功能簡(jiǎn)便方法?!緟⒖贾怠繚衿ǎ?0%(精液離體3060min內(nèi))。伊紅染色法:75%(精液離體3060min內(nèi))精

27、子活率檢查主要用于男性不育癥的診斷。正常精液排出后60min內(nèi),精子活動(dòng)率為80%90%,至少60%,曾認(rèn)為精子數(shù)在60109/L以上才能受孕,現(xiàn)認(rèn)為只要有活動(dòng)力的精子達(dá)45%,即使精子數(shù)0.5109/L,仍能受孕。精子活動(dòng)率:指精子向前運(yùn)動(dòng)的能力,是直接反映精子質(zhì)量的一項(xiàng)指標(biāo)。WHO將活力分4級(jí)(書上分為三級(jí)),用百分率表示。a:快速前向運(yùn)動(dòng) ,精子活動(dòng)力良好b:慢或呆滯的前向 ,精子活動(dòng)力較好c:非前向,在原地打轉(zhuǎn)或抖動(dòng),精子活動(dòng)力不良d:不動(dòng) ,死精子檢測(cè)方法:顯微鏡檢查:取液化后精液1d 于玻片上,在高倍鏡下觀察5-10個(gè)視野,計(jì)數(shù)100個(gè)精子并進(jìn)行活動(dòng)分級(jí)用百分率來(lái)表示。連續(xù)攝影法:

28、將液化的精液直接充入記數(shù)池當(dāng)中,在顯微鏡下200倍視野下,調(diào)節(jié)精子濃度大約每視野10-15個(gè),然后顯微攝影,在同一張膠片上對(duì)同一個(gè)視野的精子進(jìn)行6次暴光攝影,1s/次,可以得到精子的運(yùn)動(dòng)軌跡,死精子位置則始終不變。精子質(zhì)量分析儀測(cè)定:利用光束通過(guò)少量精液,檢測(cè)精子運(yùn)動(dòng)帶來(lái)的光密度變化。簡(jiǎn)單迅速,重復(fù)性好。【參考值】射精60min內(nèi),a級(jí)精子應(yīng)25%;或a和b級(jí)精子之和50%。精子活動(dòng)力與受精的關(guān)系十分密切,若連續(xù)檢查,精子活率不足40%,且以c級(jí)活動(dòng)力精子為主,則可能為男性不育的原因之一。精子計(jì)數(shù)【方法】1、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板檢測(cè);2、Makler精子計(jì)數(shù)板檢測(cè):專門用于精子檢驗(yàn),池深為10um,不

29、影響精子的正常運(yùn)動(dòng),但是只使用于相差顯微鏡和暗視野顯微鏡;3、Macro計(jì)數(shù)板檢測(cè):可以用于普通顯微鏡檢測(cè)?!緟⒖贾怠烤訚舛龋海?0100)109/L;WHO:20109/L。精子總數(shù):40106/次一般認(rèn)為20109/L為不正常,連續(xù)3次檢查皆低下者可確定為少精癥,多次未查到精子為無(wú)精癥。但臨床上亦可見到精子濃度20109/L仍能生育,因此估計(jì)一個(gè)男性的生育能力應(yīng)將精子濃度與精液其他參數(shù)結(jié)果綜合考慮分析。正常精子形態(tài):正常精子外形似蝌蚪狀,由頭、體(頸、中段)、尾(主、末段)構(gòu)成。頭部正面觀呈卵圓形,側(cè)面觀呈扁平梨形,長(zhǎng)約4.05.0m,頭部輪廓規(guī)則,頂體覆蓋頭部表面的1/3以上。體部輪廓

30、直而規(guī)則,長(zhǎng)約57m。尾部細(xì)長(zhǎng),彎而不卷曲呈鞭毛狀,長(zhǎng)約5060m。檢查方法涂片染色:HE染色、Giemsa染色,相差顯微鏡檢查【參考值】 正常精液中異常精子數(shù)20%。精子形態(tài)檢查是反映男性生育能力的1項(xiàng)重要指標(biāo)。如正常形態(tài)精子40%,即會(huì)影響精液質(zhì)量,50%??芍虏挥?。精子形態(tài)異常與睪丸、附睪的功能異常密切相關(guān)未成熟生殖細(xì)胞:是指各階段發(fā)育不完全的生精細(xì)胞,包括精原、初級(jí)精母、次級(jí)精母和發(fā)育不完全的精子細(xì)胞。正常精液未成熟生殖細(xì)胞1%,根據(jù)生精細(xì)胞的類型可進(jìn)一步衡量睪丸生精功能,分析睪丸病因,為無(wú)精癥、少精癥的病因分析提供科學(xué)依據(jù)。同時(shí),動(dòng)態(tài)觀察精液生精細(xì)胞的變化,可作為男性不育癥療效觀察和

31、判斷預(yù)后的指標(biāo)之一。精漿果糖:由精囊產(chǎn)生,它是精子活動(dòng)的主要能源,正常濃度9.1117.67mmol/L精漿中富含果糖,由精囊腺將血糖轉(zhuǎn)化為分泌而來(lái),是精子能量的主要來(lái)源,其含量高低直接影響精子的活力。精漿中ACP來(lái)自于前列腺,屬前列腺酸性磷酸酶,含量明顯高于其他體液?;钚愿叩涂梢苑从城傲邢俚墓δ?。測(cè)定方法有磷酸苯二鈉【參考值48.8208.6U/ml】和b-硝基酚比色法?!九R床意義】精漿中的ACP測(cè)定有助于了解前列腺功能和前列腺疾病的診斷。如前列腺炎時(shí)功能低下酶活性下降,前列腺肥大和前列腺癌時(shí),酶活性升高。ACP測(cè)定是法醫(yī)鑒定有無(wú)精液最靈敏的指標(biāo)。精子頂體酶:是一種蛋白水解酶,存在于精子頂體

32、內(nèi),經(jīng)常以無(wú)活性酶原形式存在,當(dāng)精子頭部進(jìn)入卵細(xì)胞透明帶時(shí),才被激活,水解卵細(xì)胞透明帶,使精子與卵子融合,在受精過(guò)程中起重要作用。【比色法參考值:48.2217.7IU/10-6】抗精子抗體:當(dāng)生殖系統(tǒng)炎癥、阻塞、免疫系統(tǒng)遭到破壞等病理改變時(shí),精子作為一種獨(dú)特的抗原與機(jī)體免疫系統(tǒng)接觸,產(chǎn)生自身或同種抗精子抗體(AsAb)。血液或生殖道分泌液中有AsAb,可引起免疫性不育。精漿免疫球蛋白:主要是IgA、IgG,相當(dāng)于血清中的。精漿中的IgG由血清滲透于前列腺而來(lái),精漿中的IgA主要來(lái)自前列腺?!緟⒖贾怠縄gG:28.616.7mg/L。IgA:90.357.7mg/L。IgM:2.31.9mg/

33、L。AsAb陽(yáng)性者,IgG、IgM增高;正常人精漿中分泌性IgA含量很低,生殖道炎癥時(shí),分泌性IgA增高;生殖道感染早期IgM增高。陰道分泌物陰道分泌物:是女性生殖道分泌的液體,主要由宮頸腺體、前庭大腺、子宮內(nèi)膜及陰道粘膜的分泌物混合而成,俗稱“白帶”。陰道分泌物一般由婦產(chǎn)科醫(yī)務(wù)人員采集,根據(jù)不同檢查目的可從不同部位取材,一般采用消毒棉拭子自陰道深部或陰道穹后部、宮頸管處取材,用生理鹽水涂片。取材前24h內(nèi),禁止性交、盆浴、陰道灌洗和局部用藥等,不可使用潤(rùn)滑劑。一般性狀正常陰道分泌物為白色、絮狀、帶有粘性的液體,無(wú)氣味,量多少不等,性狀與雌激素水平及生殖器充血情況有關(guān)。1、臨近排卵期量多,清澈

34、透明、稀薄似蛋清;2、排卵23d后量減少,混濁粘稠;3、行經(jīng)前量又增加;妊娠期,白帶量較多。清潔度檢查檢查方法有濕片法及涂片染色法。濕片法簡(jiǎn)便、快速,臨床常用,但對(duì)細(xì)菌觀察結(jié)果較差。涂片染色檢查,對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)和細(xì)菌觀察清楚,結(jié)果準(zhǔn)確客觀,但較復(fù)雜、費(fèi)時(shí)、少用?!緟⒖贾怠?III度。陰道毛滴蟲:是寄生在女性陰道以及尿道和男性尿道和前列腺等部的鞭毛蟲檢查方法有濕片法、涂片染色法、膠乳凝集試驗(yàn)及體外培養(yǎng)法等。濕片法簡(jiǎn)便易行,快速,為臨床實(shí)驗(yàn)室常用方法,不足之處是受送檢時(shí)間、溫度、涂片厚度及檢驗(yàn)者水平影響,陽(yáng)性率較低。涂片染色檢查能用油鏡觀察蟲體結(jié)構(gòu),可提高檢出率。但受涂片及染色等多種因素影響,如蟲體可

35、不典型,大小懸殊,要求檢驗(yàn)者經(jīng)驗(yàn)豐富。乳膠凝集試驗(yàn)有試劑盒供應(yīng),操作簡(jiǎn)便、快速、靈敏度和特異性高,優(yōu)于濕片法和培養(yǎng)法,適用于臨床常規(guī)應(yīng)用,但陰道分泌物為粘性時(shí)可出現(xiàn)非特異性反應(yīng)。培養(yǎng)法陽(yáng)性率高,但操作復(fù)雜,主要用于癥狀較輕帶蟲者或慢性病人的檢查以及作為診斷和治療觀察的依據(jù)。漿膜腔積液人體的胸腔、腹腔、心包腔等統(tǒng)稱為漿膜腔。在正常情況下僅有少量液體,主要起潤(rùn)滑作用。正常人漿膜內(nèi)少量液體來(lái)自壁層漿膜毛細(xì)血管內(nèi)的血漿濾出,并通過(guò)臟層漿膜的淋巴管和小靜脈的回吸收?!菊V怠啃厍灰?0ml,腹腔液50ml,心包腔液約為10-30ml,關(guān)節(jié)腔液0.1-0.2ml。漿膜腔積液:當(dāng)漿膜有炎癥、循環(huán)障礙,惡性腫

36、瘤等病變時(shí),漿膜腔液生成增多并積聚在漿膜腔內(nèi),其性質(zhì)也發(fā)生變化,此時(shí)稱為。漏出液:一般為非炎癥性積液,在正常情況下,組織液不斷被重吸收,液體在毛細(xì)血管內(nèi)外移動(dòng)的方向取決于四個(gè)因素:1、毛細(xì)血管血壓;2、組織液膠體滲透壓;3、血漿膠滲壓;4、組織液靜水壓;有效濾過(guò)壓=( 毛細(xì)血管血壓+組織液膠體滲透壓)-(血漿膠滲壓+組織液靜水壓)則漏出液的形成原因:1、毛細(xì)血管血壓升高;2、血管內(nèi)膠體滲透壓下降;3、淋巴回流受阻;4、水、鈉儲(chǔ)留:滲出液:多為炎癥性積液,炎癥時(shí)由于病原微生物的毒素,缺氧以及炎癥介質(zhì)作用使血管內(nèi)皮細(xì)胞受損,血管通透性增加,致使液體、血管內(nèi)大分子物質(zhì)(如白蛋白、球蛋白、纖維蛋白等)

37、和各種細(xì)胞成分等從血管內(nèi)滲出到血管外和組織間隙及漿膜腔,形成積液。1、感染性:如化膿性細(xì)菌、分枝桿菌、病毒或支原體等。2、惡性腫瘤:產(chǎn)生血管活性物質(zhì),使?jié){膜毛細(xì)血管通透性增加3、其他:如外傷、化學(xué)性刺激(血液、尿液、膽汁和胃液)、風(fēng)濕性疾病等也可引起積液。標(biāo)本的采集一般由臨床醫(yī)生行漿膜腔穿刺術(shù)獲得;采集標(biāo)本分4管留取,第1管細(xì)菌學(xué);第2管化學(xué)和免疫學(xué);第3管細(xì)胞學(xué),第4管觀察凝固現(xiàn)象。常規(guī)及細(xì)胞學(xué)檢查宜用EDTA-K2抗凝,化學(xué)檢查肝素抗凝。注意:送檢和檢測(cè)必須及時(shí);如不能檢查應(yīng)該加無(wú)水乙醇放置于冰箱保存。漿膜腔積液的量正常胸腔、腹腔和心包腔內(nèi)均有少量的液體,但在病理情況下,液體增多,其增多的

38、程度與病變部位和病情嚴(yán)重程度有關(guān)??梢詮膸缀辽龜?shù)千毫升不等。顏 色正常胸腔液、腹腔液和心包腔液為清亮、淡黃色的液體,病理情況下可出現(xiàn)不同的顏色變化。一般滲出液顏色深,漏出液顏色淺。透明度(清澈、微渾、渾濁)正常胸腔液、腹腔液和心包腔液為清晰透明的液體。積液的透明度常與其所含的細(xì)胞、細(xì)菌、蛋白質(zhì)等程度有關(guān)。滲出液呈不同程度的混濁,乳糜液因含有大量脂肪也呈混濁;漏出液一般清晰透明。凝固性漏出液一般不凝固,滲出液往往可以自行凝固或有凝塊出現(xiàn)。原因:纖維蛋白原作用,滲出液中含有纖溶酶時(shí)可降解纖維蛋白。比重取決于蛋白質(zhì)含量,漏出液小于1.015,滲出液大于1.018。pH隔絕空氣,及時(shí)送檢漏出液:7.455-7.465滲出液:

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