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文檔簡介

1、“將知識裝進(jìn)大腦,將垃圾打包帶走”組織學(xué)與胚胎學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院形態(tài)學(xué)教研室 程艷華Histology and Embryology第1章 緒 論重點:組織學(xué)的定義 人體的基本組織 石蠟切片術(shù) HE染色考試模式實驗考試:20分 期中考試:20分 100分期末考試:60分機體細(xì)胞、組織、器官、系統(tǒng)方法利用顯微鏡觀察組織切片構(gòu)成人體的基本組織有四大類 上皮組織神經(jīng)組織肌組織結(jié)締組織研究內(nèi)容 細(xì) 胞 (cell)細(xì)胞間質(zhì) 組 織(tissue)上皮組織 (epithelial tissue)結(jié)締組織 (connective tissue)肌肉組織 (muscle tissue)神經(jīng)組織 (nerve ti

2、ssue)器官、系統(tǒng)有機體細(xì) 胞細(xì)胞膜細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核線粒體內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核糖體高爾基復(fù)合體溶酶體微體中心體細(xì)胞骨架糖元脂滴色素常染色質(zhì)異染色質(zhì)核膜-核孔核仁核基質(zhì)染色質(zhì)細(xì)胞器細(xì)胞基質(zhì)包涵物核被膜染色質(zhì)核 仁核基質(zhì)細(xì) 胞 核核外膜 核周隙核內(nèi)膜核孔核質(zhì)側(cè)核纖層(支架)核液核骨架細(xì)絲顆粒相隨染色質(zhì)常染色質(zhì)功能活躍異染色質(zhì)功能靜止遺傳物質(zhì)DNA和組蛋白在細(xì)胞間期的形態(tài)二、組織學(xué)常用研究技術(shù)(一)一般光學(xué)顯微鏡技術(shù)(簡稱光鏡 light microscopy, LM ) 分辨率為0.2 m 可將組織放大1500倍左右。 顯微鏡的構(gòu)造目鏡物鏡載物臺粗細(xì)調(diào)節(jié)螺旋光源聚光器鏡臂鏡座 顯微鏡鏡下觀察組織,必須制作成組織

3、標(biāo)本載玻片組織標(biāo)本蓋玻片標(biāo)簽石蠟切片:取材固定脫水透明浸蠟包埋切片 染色 封片最常用的染色方法是:蘇木精-伊紅染色( HE染色) 蘇木精(hematoxylin): 堿性染料,能將細(xì)胞核染成藍(lán)紫色。 伊紅(eosin): 酸性染料,能將細(xì)胞質(zhì)染成紅色。組織結(jié)構(gòu)的嗜色性嗜堿性:對于堿性染料親和力強的性質(zhì)。 可被蘇木精染成藍(lán)紫色。嗜酸性:對于酸性染料親和力強的性質(zhì)。 可被伊紅染成紅色。中 性:對于兩種燃料親和力 都不強的性質(zhì)。 HE染色著色淡。HE染色其他染色: 硝酸銀染色:組織經(jīng)硝酸銀處理,呈棕黑色,主要用于神經(jīng)組織和內(nèi)分泌細(xì)胞研究重鉻酸鹽染色法異染性 : 肥大細(xì)胞中的顆粒經(jīng)甲苯胺藍(lán)等藍(lán)色染料染

4、色 后,呈紫紅色,稱為異染性。其他常用的制片方法 冰凍切片涂片、鋪片 磨片其它光學(xué)顯微鏡技術(shù):熒光顯微鏡相差顯微鏡暗視野顯微鏡激光掃描共聚焦顯微鏡 透射電鏡術(shù) (transmission electron microscopy, TEM) 觀察組織細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)掃描電鏡術(shù) (scanning electron microscopy, SEM) 觀察組織細(xì)胞表面的立體結(jié)構(gòu)冰凍蝕刻 (freeze etching method) 觀察細(xì)胞斷裂表面的形態(tài)結(jié)構(gòu)分析電鏡 X-射線顯微分析術(shù)(analytical electron micro-scope) 研究細(xì)胞、組織內(nèi)元素種類分布和含量TEM,漿細(xì)胞

5、 SEM ,纖毛1.電子密度高(electron dense) 電子束投射到密度大的樣品,電子散射多,投射到熒光屏上的電子少而呈暗像,電鏡照片上則呈黑色,稱電子密度高。2.電子密度低(electron lucent) 反之,稱電子密度低。透射電子顯微鏡(三)、組織化學(xué)和細(xì)胞化學(xué)技術(shù) 糖類顯示法PAS反應(yīng):過碘酸Schiff反應(yīng),簡稱PAS反應(yīng)(periodic acid Schiff reaction) 檢測組織活細(xì)胞中有無多糖存在。原理: 酶類顯示法 脂類顯示法 核酸顯示法多糖醛紫紅色沉淀氧化試劑PASchiffPAS反應(yīng),小腸上皮杯狀細(xì)胞的粘原顆粒(四)、免疫組織化學(xué)和細(xì)胞化學(xué)技術(shù) 利用抗

6、原(antigen, Ag),抗體(antibody)特異 結(jié)合的原理,用已知抗體檢測未知抗原的一種方法。辣根過氧化物酶標(biāo)記熒光素標(biāo)記(五)、原位雜交技術(shù)(in situ hybridization) 特異性核酸組織化學(xué)術(shù)檢測基因(DNA片段)的有無、及在轉(zhuǎn)錄水平檢測基因的活性(mRNA)。原理:用帶標(biāo)記物的已知堿基順序的核酸探針與細(xì)胞內(nèi)待測核酸按堿基配對原則進(jìn)行特異性原位結(jié)合(雜交),并通過對標(biāo)記物的顯示而獲知待測核酸的有無及相對量常用標(biāo)記物有放射性核素和地高辛(六)、細(xì)胞培養(yǎng)實驗中的組織工程耳(七)、共焦激光掃描顯微鏡(八) 、放射自顯影術(shù)(autoradiography)(九) 、圖像分析術(shù)(image analysis): 又稱體視學(xué)(十) 、組織工程術(shù)(tissue engineering)三、組織胚胎學(xué)在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)中的地位組織學(xué)=顯微解剖學(xué) 大體 to 微細(xì)不同組織的功能 生理學(xué)(physiology)正常與異常 病理學(xué)(pathology)臨床課的基礎(chǔ)For a good doctor needed in future 四、組織學(xué)的學(xué)習(xí)方法1.盡可能多地觀察切片、插圖、圖譜、網(wǎng)上圖庫等。注意觀察角度、倍率、染色方法 2.深入思考,注意三個關(guān)

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