醫(yī)學(xué)微生物學(xué) 第19章 支原體課件

支原體Mycoplasma南華大學(xué)醫(yī)學(xué)院吳移謀教授第19章第一節(jié)概述定義缺乏細(xì)胞壁形態(tài)上呈高度多形性能通過(guò)除菌濾器在無(wú)生命培養(yǎng)基中能生長(zhǎng)繁殖最小的原核細(xì)胞型微生物能形成有分支的長(zhǎng)絲，故稱(chēng)支原體柔膜體綱支原體目肺炎支原體，人型支原體，生殖支原體，穿透支原體，發(fā)酵支原體，梨支原體脲脲原體支原體分類(lèi)支原體科無(wú)膽甾原體科螺原體科支原體屬脲原體屬一、生物學(xué)性狀（一）形態(tài)

0.3～0.5

μm

無(wú)細(xì)胞壁

高度多形性：球、桿、絲狀和分枝狀等

一般Giemsa染色較好，染為淡紫色（二）結(jié)構(gòu)

內(nèi)外兩層為蛋白質(zhì)及糖類(lèi)，中層為脂類(lèi)（磷脂為主），凡作用于膽固醇的物質(zhì)，如皂素、毛地黃甙、二性霉素B等均能破壞細(xì)胞膜致其死亡。

特殊的頂端結(jié)構(gòu)：粘附宿主上皮

細(xì)胞表面，與支原

體的致病有關(guān)。固體培養(yǎng)基：

2～7天長(zhǎng)出直徑約10～600

μm的典型的“荷包蛋樣”菌落：低倍鏡下見(jiàn)菌落呈圓形，心致密隆起，深入瓊脂，外周由顆粒包繞。液體培養(yǎng)基：

清亮，用顏色變化單位（CCU）表示。需用放大鏡/低倍顯微鏡觀察支原體典型菌落

支原體葡萄糖精氨酸尿素吸附細(xì)胞致病性

肺炎支原體+——紅細(xì)胞肺炎、支氣管炎人型支原體—+——泌尿生殖道感染生殖器支原體+———泌尿生殖道感染穿透支原體++—紅細(xì)胞條件感染

CD4+T細(xì)胞多見(jiàn)于艾滋病巨噬細(xì)胞溶脲脲原體——+—泌尿生殖道感染

流產(chǎn)及不孕不育

生化反應(yīng)（四）抗原結(jié)構(gòu)

?補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)可檢測(cè)糖脂類(lèi)抗原

?ELISA試驗(yàn)可檢測(cè)蛋白質(zhì)類(lèi)抗原

?血清抗體可用生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)（growth

inhibitiontest,GIT）和代謝抑制試驗(yàn)

（metabolicinhibitiontest,MIT）以

鑒定（五）抵抗力

?對(duì)化學(xué)消毒劑敏感，對(duì)結(jié)晶紫、

醋酸鉈、亞碲酸鉀有抵抗力；

?對(duì)影響細(xì)胞壁合成的抗生素如青

霉素類(lèi)天然耐受，但對(duì)干擾蛋白

質(zhì)合成的抗生素如強(qiáng)力霉素、交

沙霉素等敏感。（二）所致疾病

?存在廣泛，多不致病

?肺炎支原體引起原發(fā)性非典型性肺炎

?溶脲脲原體、人型支原體和生殖支原

體可引起泌尿生殖系統(tǒng)感染和不育癥?穿透支原體和發(fā)酵支原體為艾滋病的輔助致病因素二、致病性與免疫性（三）免疫性

?體液免疫：抗膜蛋白的抗體包括

IgM、IgG和SIgA

?細(xì)胞免疫：主要是特異性CD4＋Th1

細(xì)胞分泌細(xì)胞因子二、致病性與免疫性（一）致病性

1.主要經(jīng)飛沫傳播，但大多數(shù)發(fā)生于夏

末秋初，5～15歲青少年發(fā)病率最高。

2.含特殊的頂端結(jié)構(gòu)：P1表面蛋白（170

kDa）和P30（32

kDa）為主要的粘附蛋白，使肺炎支原體黏附于呼吸道上皮。

3.肺炎支原體具有超抗原作用，能刺激炎癥細(xì)胞在感染部位釋放大量的淋巴因子（如TNF-α、IL-1、IL-6）引起組織損傷。二、致病性與免疫性（二）所致疾病

原發(fā)性非典型性肺炎（primaryatypicalpneumonia），臨床以咳嗽、發(fā)熱、頭痛、咽痛和肌肉痛為主，有時(shí)并發(fā)支氣管肺炎、皮疹、心血管和神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。二、致病性與免疫性（三）免疫性

血清特異性IgM、IgG及SIgA和致敏的淋巴細(xì)胞；

呼吸道局部黏膜產(chǎn)生的SIgA對(duì)防止再感染有較強(qiáng)保護(hù)作用；

出現(xiàn)IgE介導(dǎo)的I型超敏反應(yīng)，促使哮喘病急性發(fā)作

（一）分離培養(yǎng)

痰或咽拭子接種在SP-4培養(yǎng)基，挑選可疑菌落，經(jīng)形態(tài)學(xué)、糖發(fā)酵、溶血性、血細(xì)胞吸附試驗(yàn)進(jìn)行初步鑒定，進(jìn)一步鑒定需用特異性抗血清做GIT與MIT實(shí)驗(yàn)。三、微生物學(xué)檢查法三、微生物學(xué)檢查法（二）血清學(xué)檢查

冷凝集試驗(yàn)：

即用病人血清與人O型血紅細(xì)胞或自身紅細(xì)胞混合，4℃過(guò)夜時(shí)可發(fā)生凝集，而在37℃時(shí)這種凝集又分散解離開(kāi)，但僅50％左右的患者才出現(xiàn)

陽(yáng)性。此反應(yīng)為非特異性。

快速診斷

ELISA：檢測(cè)P1和P30蛋白mAbs

PCR：從痰標(biāo)本中檢測(cè)16SrRNA或

P1蛋白基因防治原則

大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)藥物

喹諾酮類(lèi)藥物四、防治原則（一）致病機(jī)制

-粘附于宿主細(xì)胞表面，引起細(xì)胞膜損傷；

-產(chǎn)生毒性代謝產(chǎn)物如NH3，對(duì)宿主細(xì)胞有

急性毒性作用；

-磷脂酶損傷宿主的細(xì)胞膜。二、致病性與免疫性二、致病性與免疫性

（二）所致疾病

非淋菌性尿道炎、前列腺炎、附睪炎等泌尿生殖道疾病，還與自然流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎和男性不孕有關(guān)。核酸檢測(cè)

PCR檢測(cè)：

檢測(cè)尿素酶基因、多帶抗原（MB-Ag）基因和16S

rRNA基因。此法快速、特異，適宜于大批量標(biāo)本檢測(cè)。三、微生物學(xué)檢查法加強(qiáng)宣傳教育，注意性衛(wèi)生，切斷傳播途徑。四環(huán)素類(lèi)、喹諾酮類(lèi)藥物治療，但有耐藥株產(chǎn)生。四、防治原則第四節(jié)人型支原體-分解精氨酸，不分解尿素和葡萄糖。最適pH7.2～7.4。固體培養(yǎng)基上形成200～300

μm的較大菌落，呈典型的“油煎蛋”狀。-寄居于泌尿生殖道，通過(guò)性接觸傳播，可引起附睪炎、盆腔炎、產(chǎn)褥熱等。-微生物學(xué)檢測(cè)和防治原則同解脲脲原體。人型支原體對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素不敏感，對(duì)1:2000醋酸鉈與紅霉素（100

mg/L）不敏感。第五節(jié)生殖支原體-生殖支原體基本形態(tài)為燒瓶狀，能發(fā)酵葡萄糖使培養(yǎng)基變酸，不分解尿素和精氨酸。-培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)，須在無(wú)醋酸鉈SP-4培養(yǎng)基生長(zhǎng)但緩慢，菌落呈典型的“油煎蛋”狀。-頂端結(jié)構(gòu)有粘附素MgPa，140

kDa，與肺炎支原，能粘附在人泌尿生殖道上皮，主要引起尿道炎。-較難培養(yǎng)，生長(zhǎng)慢，不適宜于常規(guī)實(shí)驗(yàn)室分離培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)室最好的診斷方法是核酸檢測(cè)。第六節(jié)穿透支原體

1991年Lo首次從1例艾滋病患者尿中分離出一種新支原體，其形態(tài)為桿狀或長(zhǎng)燒瓶狀，一端為頂端結(jié)構(gòu)，具有粘附與穿入的作用。穿透支原體發(fā)酵葡萄糖，分解精氨酸，不分解尿素，在SP-4培養(yǎng)基上生長(zhǎng)較慢，形成典型的“油煎蛋”狀菌落。