Chap20生物制品分析概論課件

Chap20生物制品分析概論整理課件Chap20生物制品分析概論整理課件1第一節(jié)概述中國(guó)藥典2010版第一部收載藥材及飲片、植物油脂和提取物、成方制劑和單味制劑等。第二部收載化學(xué)藥品、抗生素、生化藥品、放射性藥品以及藥用輔料等。第三部收載生物制品，首次將《中國(guó)生物制品規(guī)程》并入藥典。整理課件第一節(jié)概述中國(guó)藥典2010版整理課件2生物藥物(bio-pharmaceutics)生化藥物(biochemicaldrugs)生物合成藥物(biosyntheticdrugs)生物制品(biologicalproducts)基本概念整理課件生物藥物(bio-pharmaceutics)基本概念整理3利用生物體、生物組織或組成生物體的各種成分，綜合運(yùn)用生物學(xué)、生物化學(xué)、微生物學(xué)、免疫學(xué)、物理化學(xué)和藥學(xué)的原理與方法制得的一大類藥物。包括從動(dòng)物、植物和微生物等生物體中直接制取的各種天然生物活性物質(zhì)以及人工合成或半合成的天然物質(zhì)類似物。生物藥物(bio-pharmaceutics)整理課件利用生物體、生物組織或組成生物體的各種成生物藥物(bio-p4指從動(dòng)物、植物及微生物提取的，亦可用生物-化學(xué)半合成或用現(xiàn)代生物技術(shù)制得的生命基本物質(zhì)，及其衍生物、降解物及大分子的結(jié)構(gòu)修飾物等。如氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、酶、多糖、脂質(zhì)和核苷酸等。如：氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、酶等。生化藥物(BiochemicalDrugs)整理課件指從動(dòng)物、植物及微生物提取的，亦可用生物-生化藥物(Bioc5由微生物代謝所產(chǎn)生的藥物和必須利用微生物及其酶轉(zhuǎn)化反應(yīng)共同完成的半合成藥物。如：維生素、抗生素、氨基酸、某些酶等。生物合成藥物（biosyntheticdrugs）整理課件由微生物代謝所產(chǎn)生的藥物和必須利用微生物生物合成藥物（bio6是應(yīng)用普通的或以基因工程、細(xì)胞工程、蛋白質(zhì)工程、發(fā)酵工程等生物技術(shù)獲得的微生物、細(xì)胞及各種動(dòng)物和人源的組織和液體等生物材料制備，用于人類疾病預(yù)防、治療和診斷的藥品。參見《中國(guó)生物制品規(guī)程》生物制品的一個(gè)顯著特點(diǎn)：全程質(zhì)量控制。生物制品(BiologicalProducts)整理課件是應(yīng)用普通的或以基因工程、細(xì)胞工程、蛋白質(zhì)生物制品(Biol7（1）疫苗類(Vaccines)（2）抗毒素及抗血清類(AntitoxinandAntiserum)（3）血液制品(BloodProducts)（4）細(xì)胞因子(Cytokines)及重組DNA產(chǎn)品(RecombinantDNAProducts)（5）診斷制品(DiagnosticReagents)（6）其他制品(ElseProducts)整理課件（1）疫苗類(Vaccines)整理課件8生物制品的特點(diǎn)1．分子量大，分子量不是定值2.結(jié)構(gòu)確證難3.全過程的質(zhì)量控制4.生物活性檢查5.安全性檢查6.效價(jià)(含量)測(cè)定整理課件生物制品的特點(diǎn)1．分子量大，分子量不是定值整理課件9生物制品的全程質(zhì)量控制2005版中國(guó)藥典各論內(nèi)容一般包括：①品名②定義、組成及用途③基本要求④制造⑤檢定⑥保存運(yùn)輸及有效期⑦使用說明整理課件生物制品的全程質(zhì)量控制2005版中國(guó)藥典各論內(nèi)容一般包括：整10第二節(jié)質(zhì)量控制的基本程序與方法

一、鑒別試驗(yàn)二、雜質(zhì)檢查

三、安全性檢查四、含量(效價(jià))測(cè)定整理課件第二節(jié)質(zhì)量控制的基本程序與方法一、鑒別試驗(yàn)整理課件11一、鑒別試驗(yàn)理化鑒別化學(xué)、UV、HPLC生化鑒別酶法、電泳法生物鑒別法血清學(xué)法生物學(xué)法（小鼠驚厥試驗(yàn)）整理課件一、鑒別試驗(yàn)理化鑒別化學(xué)、UV、HPLC整理課件12二、雜質(zhì)檢查一般雜質(zhì)特殊雜質(zhì)安全性檢查整理課件二、雜質(zhì)檢查一般雜質(zhì)整理課件13安全性檢查

熱原檢查法（家兔法）細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法異常毒性試驗(yàn)過敏試驗(yàn)降壓物質(zhì)檢查法無菌試驗(yàn)基因工程藥物中可能雜質(zhì)與污染物檢查致突變?cè)囼?yàn)生殖毒性試驗(yàn)整理課件安全性檢查熱原檢查法（家兔法）無菌試驗(yàn)整理課件14

家兔法

本法是將一定劑量的供試品，靜脈注入家兔體內(nèi)，以其體溫升高的程度，判定該供試品中所含熱原是否符合規(guī)定。

熱原檢查法(Testforpyrogen)整理課件家兔法熱原檢查法(Testforpyrogen)整15細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法(TestforBacterialEndotoxin)本法系利用鱟試劑與細(xì)菌內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的機(jī)理，以判斷供試品中細(xì)菌苗內(nèi)毒素的限量是否符合規(guī)定的一種方法。整理課件細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法本法系利用鱟試劑與細(xì)菌內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的機(jī)16鱟整理課件鱟整理課件17用一定劑量的藥物按指定的操作方法和給藥途徑給予規(guī)定體重的某種試驗(yàn)動(dòng)物，觀察其急性毒性反應(yīng)。反應(yīng)的判斷以試驗(yàn)動(dòng)物死亡與否為終點(diǎn)。異常毒性試驗(yàn)(TestforUndueToxicity)整理課件用一定劑量的藥物按指定的操作方法和給藥途異常毒性試驗(yàn)(Tes18過敏試驗(yàn)是檢查異性蛋白的試驗(yàn)。藥物中若夾雜有異性蛋白，在臨床使用時(shí)易引起病人多種過敏反應(yīng)，輕者皮膚出現(xiàn)紅斑或丘疹，嚴(yán)重者可出現(xiàn)窒息、發(fā)結(jié)、血管神經(jīng)性水腫、血壓下降，甚至休克和死亡。過敏試驗(yàn)整理課件過敏試驗(yàn)是檢查異性蛋白的試驗(yàn)。藥物中若夾過敏試驗(yàn)整理課件19降壓物質(zhì)是指某些藥物中含有的能導(dǎo)致血壓降低的雜質(zhì)，包括組胺、類組胺或其他導(dǎo)致血壓降低的物質(zhì)。降壓物質(zhì)檢查法(TestforDepressorSubstances)整理課件降壓物質(zhì)是指某些藥物中含有的能導(dǎo)致血壓降低降壓物質(zhì)檢查法整理20無菌試驗(yàn)基因工程藥物中可能雜質(zhì)與污染物檢查外源性DNA測(cè)定、宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)致突變?cè)囼?yàn)生殖毒性試驗(yàn)整理課件無菌試驗(yàn)整理課件21第三節(jié)常用定量分析法

整理課件第三節(jié)常用定量分析法整理課件22整理課件整理課件23整理課件整理課件24整理課件整理課件251．反相高效液相色譜法(RP-HPLC)以(C4、C8、C18)烷基硅烷鍵合相為柱填料，以甲醇-水、乙腈-水或甲醇、乙腈與緩沖液構(gòu)成的溶液為流動(dòng)相，以紫外、熒光或電化學(xué)檢測(cè)器為檢測(cè)手段，這種色譜體系在生化藥物(例如肽類、氨基酸、蛋白質(zhì)、多糖等)定量分析中應(yīng)用廣泛。

色譜法整理課件1．反相高效液相色譜法(RP-HPLC)色譜法整理課件262.高效離子交換色譜法(HPIEC)HPIEC是蛋白質(zhì)、多肽分離分析中常見的方法之一。具有較高質(zhì)量的活性回收。3.高效凝膠過濾色譜法(HPGFC)HPGFC可用于多肽和蛋白質(zhì)等生化藥物的分離及其分子量的測(cè)定。整理課件2.高效離子交換色譜法(HPIEC)整理課件27整理課件整理課件28整理課件整理課件29電泳法醋酸纖維素薄膜電泳法瓊脂糖凝膠電泳法SDS毛細(xì)管電泳用于蛋白質(zhì)類生物制品的分析整理課件電泳法醋酸纖維素薄膜電泳法用于蛋白質(zhì)類生物制品的分析整理課件301.原理毛細(xì)管電泳是以彈性石英毛細(xì)管為分離通道，以高壓直流電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力，依據(jù)樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實(shí)現(xiàn)分離的電泳分離分析方法。

高效毛細(xì)管電泳法（HPCE）（Highperformancecapillaryelectrophoresis）整理課件1.原理高效毛細(xì)管電泳法（HPCE）整理課件31電泳：電解質(zhì)中帶電粒子在電場(chǎng)力作用下，以不同的速度向電荷相反方向遷移的現(xiàn)象。電泳淌度：帶電粒子在毛細(xì)管中定向移動(dòng)的速度與所在電場(chǎng)強(qiáng)度之比。電滲流：毛細(xì)管內(nèi)壁表面的電荷所引起的管內(nèi)液體的整體流動(dòng)，來源于外加電場(chǎng)對(duì)管壁溶液雙電層的作用。幾個(gè)概念整理課件電泳：電解質(zhì)中帶電粒子在電場(chǎng)力作用下，以不同的速度向電荷相反32電滲流作用整理課件電滲流作用整理課件33毛細(xì)管電泳裝置示意圖整理課件毛細(xì)管電泳裝置示意圖整理課件34－－－－－－－－－－－－－－－－－－(－)(+)++++++++++++++++----------------毛細(xì)電泳中不同組分的遷移示意圖整理課件－－－－－－－－－－－－－－－－－－(－)(+)++++++35流出順序正離子、中性粒子、負(fù)離子電滲流的速度是泳流速度的5-7倍整理課件流出順序整理課件36目前，毛細(xì)管電泳的分離模式主要有以下3種：(1)毛細(xì)管區(qū)帶電泳：用以分析帶電溶質(zhì)。為了降低電滲流和吸附現(xiàn)象，可將毛細(xì)管內(nèi)壁涂層。(2)毛細(xì)管凝膠電泳：在毛細(xì)管中裝入單體，引發(fā)聚合形成凝膠，主要用于測(cè)定蛋白質(zhì)、DNA等大分子化合物。整理課件目前，毛細(xì)管電泳的分離模式主要有以下3種：整理課件37(3)膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜在緩沖液中加入離子型表面活性劑如十二烷基硫酸鈉，形成膠束，被分離物質(zhì)在水相和膠束相(準(zhǔn)固定相)之間發(fā)生分配并隨電滲流在毛細(xì)內(nèi)遷移，達(dá)到分離。本模式能用于中性物質(zhì)的分離。整理課件(3)膠束電動(dòng)毛細(xì)管色譜整理課件38柱效高理論板數(shù)數(shù)萬至數(shù)千萬速度快250秒分離10種蛋白質(zhì)試劑消耗少數(shù)ml緩沖液進(jìn)樣量小nL級(jí)進(jìn)樣高效毛細(xì)管電泳法優(yōu)點(diǎn)整理課件柱效高理論板數(shù)數(shù)萬至數(shù)千萬高效毛細(xì)管電泳法優(yōu)點(diǎn)整理課39HPCE的應(yīng)用毛細(xì)管電泳技術(shù)可檢測(cè)多種樣品，如血清、血漿、尿樣、腦脊液、紅細(xì)胞、體液或組織及其實(shí)驗(yàn)動(dòng)物活體實(shí)驗(yàn)；且可分離分析多種組分，如核酸/核苷酸、蛋白質(zhì)/多肽/氨基酸、糖類/糖蛋白、酶、堿氨基酸、微量元素、小的生物活性分子等的快速分析，以及DNA序列分析和DNA合成中產(chǎn)物純度測(cè)定等。

整理課件HPCE的應(yīng)用毛細(xì)管電泳技術(shù)可檢測(cè)多種樣品，如血清、血漿、尿40Chap20生物制品分析概論整理課件Chap20生物制品分析概論整理課件41第一節(jié)概述中國(guó)藥典2010版第一部收載藥材及飲片、植物油脂和提取物、成方制劑和單味制劑等。第二部收載化學(xué)藥品、抗生素、生化藥品、放射性藥品以及藥用輔料等。第三部收載生物制品，首次將《中國(guó)生物制品規(guī)程》并入藥典。整理課件第一節(jié)概述中國(guó)藥典2010版整理課件42生物藥物(bio-pharmaceutics)生化藥物(biochemicaldrugs)生物合成藥物(biosyntheticdrugs)生物制品(biologicalproducts)基本概念整理課件生物藥物(bio-pharmaceutics)基本概念整理43利用生物體、生物組織或組成生物體的各種成分，綜合運(yùn)用生物學(xué)、生物化學(xué)、微生物學(xué)、免疫學(xué)、物理化學(xué)和藥學(xué)的原理與方法制得的一大類藥物。包括從動(dòng)物、植物和微生物等生物體中直接制取的各種天然生物活性物質(zhì)以及人工合成或半合成的天然物質(zhì)類似物。生物藥物(bio-pharmaceutics)整理課件利用生物體、生物組織或組成生物體的各種成生物藥物(bio-p44指從動(dòng)物、植物及微生物提取的，亦可用生物-化學(xué)半合成或用現(xiàn)代生物技術(shù)制得的生命基本物質(zhì)，及其衍生物、降解物及大分子的結(jié)構(gòu)修飾物等。如氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、酶、多糖、脂質(zhì)和核苷酸等。如：氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、酶等。生化藥物(BiochemicalDrugs)整理課件指從動(dòng)物、植物及微生物提取的，亦可用生物-生化藥物(Bioc45由微生物代謝所產(chǎn)生的藥物和必須利用微生物及其酶轉(zhuǎn)化反應(yīng)共同完成的半合成藥物。如：維生素、抗生素、氨基酸、某些酶等。生物合成藥物（biosyntheticdrugs）整理課件由微生物代謝所產(chǎn)生的藥物和必須利用微生物生物合成藥物（bio46是應(yīng)用普通的或以基因工程、細(xì)胞工程、蛋白質(zhì)工程、發(fā)酵工程等生物技術(shù)獲得的微生物、細(xì)胞及各種動(dòng)物和人源的組織和液體等生物材料制備，用于人類疾病預(yù)防、治療和診斷的藥品。參見《中國(guó)生物制品規(guī)程》生物制品的一個(gè)顯著特點(diǎn)：全程質(zhì)量控制。生物制品(BiologicalProducts)整理課件是應(yīng)用普通的或以基因工程、細(xì)胞工程、蛋白質(zhì)生物制品(Biol47（1）疫苗類(Vaccines)（2）抗毒素及抗血清類(AntitoxinandAntiserum)（3）血液制品(BloodProducts)（4）細(xì)胞因子(Cytokines)及重組DNA產(chǎn)品(RecombinantDNAProducts)（5）診斷制品(DiagnosticReagents)（6）其他制品(ElseProducts)整理課件（1）疫苗類(Vaccines)整理課件48生物制品的特點(diǎn)1．分子量大，分子量不是定值2.結(jié)構(gòu)確證難3.全過程的質(zhì)量控制4.生物活性檢查5.安全性檢查6.效價(jià)(含量)測(cè)定整理課件生物制品的特點(diǎn)1．分子量大，分子量不是定值整理課件49生物制品的全程質(zhì)量控制2005版中國(guó)藥典各論內(nèi)容一般包括：①品名②定義、組成及用途③基本要求④制造⑤檢定⑥保存運(yùn)輸及有效期⑦使用說明整理課件生物制品的全程質(zhì)量控制2005版中國(guó)藥典各論內(nèi)容一般包括：整50第二節(jié)質(zhì)量控制的基本程序與方法

一、鑒別試驗(yàn)二、雜質(zhì)檢查

三、安全性檢查四、含量(效價(jià))測(cè)定整理課件第二節(jié)質(zhì)量控制的基本程序與方法一、鑒別試驗(yàn)整理課件51一、鑒別試驗(yàn)理化鑒別化學(xué)、UV、HPLC生化鑒別酶法、電泳法生物鑒別法血清學(xué)法生物學(xué)法（小鼠驚厥試驗(yàn)）整理課件一、鑒別試驗(yàn)理化鑒別化學(xué)、UV、HPLC整理課件52二、雜質(zhì)檢查一般雜質(zhì)特殊雜質(zhì)安全性檢查整理課件二、雜質(zhì)檢查一般雜質(zhì)整理課件53安全性檢查

熱原檢查法（家兔法）細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法異常毒性試驗(yàn)過敏試驗(yàn)降壓物質(zhì)檢查法無菌試驗(yàn)基因工程藥物中可能雜質(zhì)與污染物檢查致突變?cè)囼?yàn)生殖毒性試驗(yàn)整理課件安全性檢查熱原檢查法（家兔法）無菌試驗(yàn)整理課件54

家兔法

本法是將一定劑量的供試品，靜脈注入家兔體內(nèi)，以其體溫升高的程度，判定該供試品中所含熱原是否符合規(guī)定。

熱原檢查法(Testforpyrogen)整理課件家兔法熱原檢查法(Testforpyrogen)整55細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法(TestforBacterialEndotoxin)本法系利用鱟試劑與細(xì)菌內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的機(jī)理，以判斷供試品中細(xì)菌苗內(nèi)毒素的限量是否符合規(guī)定的一種方法。整理課件細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法本法系利用鱟試劑與細(xì)菌內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的機(jī)56鱟整理課件鱟整理課件57用一定劑量的藥物按指定的操作方法和給藥途徑給予規(guī)定體重的某種試驗(yàn)動(dòng)物，觀察其急性毒性反應(yīng)。反應(yīng)的判斷以試驗(yàn)動(dòng)物死亡與否為終點(diǎn)。異常毒性試驗(yàn)(TestforUndueToxicity)整理課件用一定劑量的藥物按指定的操作方法和給藥途異常毒性試驗(yàn)(Tes58過敏試驗(yàn)是檢查異性蛋白的試驗(yàn)。藥物中若夾雜有異性蛋白，在臨床使用時(shí)易引起病人多種過敏反應(yīng)，輕者皮膚出現(xiàn)紅斑或丘疹，嚴(yán)重者可出現(xiàn)窒息、發(fā)結(jié)、血管神經(jīng)性水腫、血壓下降，甚至休克和死亡。過敏試驗(yàn)整理課件過敏試驗(yàn)是檢查異性蛋白的試驗(yàn)。藥物中若夾過敏試驗(yàn)整理課件59降壓物質(zhì)是指某些藥物中含有的能導(dǎo)致血壓降低的雜質(zhì)，包括組胺、類組胺或其他導(dǎo)致血壓降低的物質(zhì)。降壓物質(zhì)檢查法(TestforDepressorSubstances)整理課件降壓物質(zhì)是指某些藥物中含有的能導(dǎo)致血壓降低降壓物質(zhì)檢查法整理60無菌試驗(yàn)基因工程藥物中可能雜質(zhì)與污染物檢查外源性DNA測(cè)定、宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)致突變?cè)囼?yàn)生殖毒性試驗(yàn)整理課件無菌試驗(yàn)整理課件61第三節(jié)常用定量分析法

整理課件第三節(jié)常用定量分析法整理課件62整理課件整理課件63整理課件整理課件64整理課件整理課件651．反相高效液相色譜法(RP-HPLC)以(C4、C8、C18)烷基硅烷鍵合相為柱填料，以甲醇-水、乙腈-水或甲醇、乙腈與緩沖液構(gòu)成的溶液為流動(dòng)相，以紫外、熒光或電化學(xué)檢測(cè)器為檢測(cè)手段，這種色譜體系在生化藥物(例如肽類、氨基酸、蛋白質(zhì)、多糖等)定量分析中應(yīng)用廣泛。

色譜法整理課件1．反相高效液相色譜法(RP-HPLC)色譜法整理課件662.高效離子交換色譜法(HPIEC)HPIEC是蛋白質(zhì)、多肽分離分析中常見的方法之一。具有較高質(zhì)量的活性回收。3.高效凝膠過濾色譜法(HPGFC)HPGFC可用于多肽和蛋白質(zhì)等生化藥物的分離及其分子量的測(cè)定。整理課件2.高效離子交換色譜法(HPIEC)整理課件67整理課件整理課件68整理課件整理課件69電泳法醋酸纖維素薄膜電泳法瓊脂糖凝膠電泳法SDS毛細(xì)管電泳用于蛋白質(zhì)類生物制品的分析整理課件電泳法醋酸纖維素薄膜電泳法用于蛋白質(zhì)類生物制品的分析整理課件701.原理毛細(xì)管電泳是以彈性石英毛細(xì)管為分離通道，以高壓直流電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力，依據(jù)樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實(shí)現(xiàn)分離的電泳分離分析方法。

高效毛細(xì)管電泳法（HPCE）（Highperformancecapillaryelectrophoresis）整理課件1.原理高效毛細(xì)管電泳法（HPCE）整理課件71電泳：電解質(zhì)中帶電粒子在電場(chǎng)力作用下，以不同的速度向電荷相反方向遷移的現(xiàn)象。電泳淌度：帶電粒子在毛細(xì)管中定向移動(dòng)的速度與所在電場(chǎng)強(qiáng)度之比。電滲流：毛細(xì)管內(nèi)壁表面的電荷所引起的管內(nèi)液體的整體流動(dòng)，來源于外加電場(chǎng)對(duì)管壁溶液雙電層的作用。幾個(gè)概念整理課件電泳：電解質(zhì)中帶電粒子在電場(chǎng)力作用下，以不同的速度向電荷相反72電滲流作用整理課件電滲流作用