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臨床查驗(yàn)技師微生物查驗(yàn)(2019)講義第十五章弧菌科及查驗(yàn)臨床查驗(yàn)技師微生物查驗(yàn)(2019)講義第十五章弧菌科及查驗(yàn)16/16臨床查驗(yàn)技師微生物查驗(yàn)(2019)講義第十五章弧菌科及查驗(yàn)第十五章弧菌科及查驗(yàn)本章內(nèi)容一、弧菌屬(一)霍亂弧菌(二)O139型霍亂弧菌(三)副溶血性弧菌(四)其余弧菌二、氣單胞菌屬與鄰單胞菌屬(一)氣單胞菌屬(二)鄰單胞茵屬革蘭陰性直桿菌或弧菌有極端鞭毛氧化酶陽(yáng)性動(dòng)力陽(yáng)性發(fā)酵葡萄糖弧菌屬——分類依據(jù)細(xì)菌的抗原性、生化特點(diǎn)、DNA同源性、致病性和耐鹽性等將弧菌分為四類:①O1群霍亂弧菌;②不典型O1群霍亂弧菌:能被O1群血清凝聚但不產(chǎn)生致病毒素;③非O1群霍亂弧菌;④其余弧菌:包含副溶血性弧菌、溶藻弧菌、河弧菌、創(chuàng)傷弧菌、麥?zhǔn)匣【蛿M態(tài)弧菌。大部分為非病原菌,對(duì)人類致病的主要有霍亂弧菌和副溶血性弧菌,分別惹起霍亂和食品中毒?;魜y弧菌——生物學(xué)特點(diǎn)形態(tài)與構(gòu)造形態(tài):弧形或逗點(diǎn)狀,“魚(yú)群狀”。人工培育后呈桿狀。染色:G-。特別構(gòu)造:有菌毛,無(wú)芽胞,部分有莢膜。一端有一根粗而長(zhǎng)的鞭毛,懸滴察看可見(jiàn)穿越樣或流星狀第1頁(yè)共8頁(yè)運(yùn)動(dòng)?!づ嘤攸c(diǎn)營(yíng)養(yǎng)要求:不高,可無(wú)鹽生長(zhǎng)。氣體環(huán)境:兼性厭氧。菌落特點(diǎn):耐堿不耐酸。pH8.5的堿性蛋白胨水:培育6~9h,增菌形成菌膜。堿性瓊脂平板:較大圓形扁平、無(wú)色透明或半透明似水滴狀菌落。硫代硫酸鹽-檸檬酸鹽-膽鹽-蔗糖瓊脂平板(TCBS):較大黃色菌落。亞碲酸鉀瓊脂平板:復(fù)原亞碲酸鉀成金屬碲,使菌落中心呈灰褐色。慶大霉素瓊脂:形成的菌落中心呈灰褐色?!た乖ぷ儺愋裕河行螒B(tài)變異、菌落變異、溶血性變異和毒力變異?!さ謸趿Γ簩?duì)熱、干燥、日光、酸、消毒劑很敏感。但耐堿力較強(qiáng)。第2頁(yè)共8頁(yè)霍亂弧菌——微生物查驗(yàn)及判斷·標(biāo)本收集:以糞便(米泔水樣便)為主,盡可能在用藥以前采納。實(shí)時(shí)接種適合培育基。常用的保存或運(yùn)送培育基有堿性蛋白胨水、文-臘二氏保留液和卡-布運(yùn)送培育基等。·形態(tài)學(xué)檢查:①動(dòng)力察看:米泔水樣糞便懸滴察看可見(jiàn)流星或穿越狀運(yùn)動(dòng)的細(xì)菌。②制動(dòng)試驗(yàn):加霍亂多價(jià)診療血清后弧菌凝聚,運(yùn)動(dòng)停止。③涂片染色:革蘭染色,察看革蘭染色陰性呈魚(yú)群狀擺列的弧菌?!し謩e培育增菌:堿性蛋白胨水。弱選擇培育基:堿性瓊脂和堿性膽鹽瓊脂。強(qiáng)選擇培育基:慶大霉素瓊脂、4號(hào)瓊脂和TCBS瓊脂等?!ど错慜NPG霍亂多黏菌素B氧化酶硝酸鹽復(fù)原吲哚動(dòng)力V-P糖類發(fā)酵試驗(yàn)試驗(yàn)明膠液化試驗(yàn)試驗(yàn)紅反敏感試驗(yàn)試驗(yàn)試驗(yàn)試驗(yàn)試驗(yàn)應(yīng)分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、+++++++麥芽糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣古典生-+物型EITor+-生物型·霍亂的病原菌,一種急性烈性腸道傳患病,發(fā)病急,傳染性強(qiáng),死亡率高。副溶血弧菌——生物學(xué)特點(diǎn)·形態(tài)與構(gòu)造形態(tài):多形性。染色:G-;兩極濃染。特別構(gòu)造:一端有單鞭毛,運(yùn)動(dòng)開(kāi)朗。無(wú)芽胞、無(wú)莢膜。第3頁(yè)共8頁(yè)培育特點(diǎn)營(yíng)養(yǎng)要求:不高;嗜鹽性弧菌。氣體環(huán)境:需氧。溫度環(huán)境:pH為7.0~9.5,最適pH為7.7。菌落特點(diǎn):35g/LNaCl瓊脂平板:延伸生長(zhǎng),菌落邊沿不齊整,突出圓滑潤(rùn)濕不透明。副溶血性弧菌專用選擇培育基:形成稍隆起污濁無(wú)黏性綠色菌落。羊血瓊脂平板:形成圓形隆起潤(rùn)濕灰白色菌落,某些可形成α/β溶血。TCBS瓊脂:不發(fā)酵蔗糖,菌落綠色??乖壕逴抗原、H抗原及K抗原,以O(shè)抗原定群,以O(shè)抗原、K抗原組合定型。抵擋力:不耐熱,不耐冷,不耐酸,對(duì)常用消毒劑抵擋力衰。副溶血弧菌——微生物查驗(yàn)及判斷標(biāo)本收集:患者的糞便、可疑食品、炊事器具的沖刷液等。形態(tài)學(xué)檢查分別培育:無(wú)鹽培育基中不生長(zhǎng)。在70g/LNaCl培育基中生長(zhǎng),在100g/LNaCl培育基中不生長(zhǎng)。40g/LNaCl蛋白胨水中,培育增菌。接種副溶血弧菌選擇培育基,培育18~24h。菌落潤(rùn)濕、污濁無(wú)黏性,呈綠色。生化反響硫化神奈氧化酶甲基紅V-P試驗(yàn)動(dòng)力試吲哚試尿素酶試糖類發(fā)酵試驗(yàn)氫試試驗(yàn)驗(yàn)驗(yàn)驗(yàn)川試試驗(yàn)驗(yàn)驗(yàn)分解葡萄糖、麥芽糖、甘露醇、淀粉、阿拉伯糖;不分解乳糖、-++-++-+蔗糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣副溶血弧菌——致病性及臨床意義致病物質(zhì):黏附因子(主要為菌毛)、毒素(如耐熱性溶血素)。所致疾病為食品中毒及急性胃腸炎,常為被污染的海產(chǎn)品及鹽腌制品所惹起;此菌尚可惹起淺表創(chuàng)傷感染、敗血癥等。其余弧菌1.擬態(tài)弧菌常惹起胃腸炎,但不惹起暴發(fā)流行。2.創(chuàng)傷弧菌該菌惹起的疾病最為嚴(yán)重,病程進(jìn)展特別快且致命。3.溶藻弧菌是弧菌屬中耐鹽性最強(qiáng)的致病菌。河弧菌弗尼斯弧菌霍利斯弧菌其余弧菌第4頁(yè)共8頁(yè)氣單胞菌屬——分類主要有10種。有臨床意義:嗜水氣胞菌、豚鼠氣單胞菌、溫平易單胞菌、維隆氣單胞菌、舒伯特氣單胞菌、簡(jiǎn)達(dá)氣單胞菌和易損氣單胞菌。無(wú)臨床意義:殺鮭氣單胞菌、中間氣單胞菌、嗜泉?dú)鈫伟?。氣單胞菌屬——生物學(xué)特點(diǎn)形態(tài)與構(gòu)造形態(tài):短桿菌,兩頭鈍圓。-染色:G。特別構(gòu)造:?jiǎn)螛O鞭毛,運(yùn)動(dòng)極為開(kāi)朗。無(wú)芽胞,有窄的莢膜。培育特點(diǎn)營(yíng)養(yǎng)要求:不高;生長(zhǎng)不需要NaCl。氣體環(huán)境:兼性厭氧。溫度環(huán)境:0~45℃;最適30℃。菌落特點(diǎn)一般培育基:形成微白色半透明的菌落。血瓊脂:形成灰白圓滑潤(rùn)濕突出菌落,多半有β溶血環(huán)。腸道選擇培育基:大部分形成乳糖不發(fā)酵菌落,TCBS瓊脂上生長(zhǎng)不良。氣單胞菌屬——微生物查驗(yàn)及判斷標(biāo)本收集:收集糞便、血液、膿汁、腦脊液、尿液等。形態(tài)學(xué)檢查:革蘭陰性短桿菌;運(yùn)動(dòng)開(kāi)朗。分別培育:血液標(biāo)本經(jīng)肉浸液或胰化酪蛋白大豆肉湯內(nèi)增菌后轉(zhuǎn)種血瓊脂平板或含氨芐西林血平板;膿汁、分泌物等直接接種血瓊脂平板;糞便標(biāo)本接種腸道選擇培育基。氣單胞菌屬——微生物查驗(yàn)及判斷生化反響硫化氫試硝酸鹽復(fù)原試氧化酶試觸酶試動(dòng)力試吲哚試尿素酶試糖類發(fā)酵試驗(yàn)驗(yàn)驗(yàn)驗(yàn)驗(yàn)驗(yàn)驗(yàn)驗(yàn)發(fā)酵葡萄糖,產(chǎn)酸或產(chǎn)酸-+++++-產(chǎn)氣氣單胞菌屬——致病性及臨床意義寬泛散布于自然界,可從水源、土壤以及人的糞便中分別。氣單胞菌可惹起腹瀉,并可惹起傷口味染及菌血癥,有時(shí)惹起心內(nèi)膜炎、腦膜炎、肺炎、脊髓炎、腹膜炎、關(guān)節(jié)炎、血栓性靜脈炎和膽囊炎。鄰單胞菌屬生長(zhǎng)不需要NaCl。第5頁(yè)共8頁(yè)只有一個(gè)種即類志賀鄰單胞菌??扇瞧鹚畼痈篂a和食品中毒;在機(jī)體免疫力降低時(shí),可惹起蜂窩織炎、骨髓炎、腦膜炎和敗血癥?;魜y弧菌經(jīng)人工培育傳代后,顯微鏡下察看是桿狀球形C.橢圓形D.弧形纖絲狀『正確答案』A『答案解析』霍亂弧菌人工培育后呈桿狀??捎米骰魜y弧菌的運(yùn)輸保留的培育基是堿性蛋白胨水、V平板C.SS瓊脂D.EC肉湯E.GN增菌液『正確答案』A『答案解析』霍亂弧菌需在堿性環(huán)境中生長(zhǎng),應(yīng)用堿性蛋白胨水運(yùn)輸保留。在堿性培育基中生長(zhǎng)優(yōu)秀的細(xì)菌是葡萄球菌霍亂弧菌C.大腸埃希菌D.結(jié)核分枝桿菌厭氧菌『正確答案』B『答案解析』在堿性培育基中生長(zhǎng)優(yōu)秀的細(xì)菌是霍亂弧菌。患者男,30歲。在小飯館就餐后出現(xiàn)腹痛腹脹,強(qiáng)烈腹瀉,呈水樣便伴嘔吐1天,頭暈無(wú)力,無(wú)腹痛,無(wú)里急后重。查體:血壓80/60mmHg,容顏疲備,皮膚廢弛,有口干舌燥感,眼窩內(nèi)陷,首選的檢查是尿常例檢查取外周血進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù)C.堿性蛋白胨水接種D.大便常例檢查糞便標(biāo)本立刻進(jìn)行直接懸滴檢查『正確答案』E『答案解析』患者癥狀思疑霍亂弧菌感染,取患者糞便作懸滴察看,可見(jiàn)穿越樣或流星狀運(yùn)動(dòng)。用于培育霍亂弧菌的選擇性培育基是麥康凱培育基B.SS瓊脂C.LB瓊脂D.慶大霉素瓊脂蛋白胨水第6頁(yè)共8頁(yè)『正確答案』D『答案解析』用于培育霍亂弧菌的弱選擇培育基包含堿性瓊脂和堿性膽鹽瓊脂,強(qiáng)選擇培育基包含慶大霉素瓊脂、4號(hào)瓊脂和TCBS瓊脂等。不屬于霍亂弧菌生物學(xué)性狀的是A.曾惹起7次世界大流行可用活菌懸滴法直接察看其動(dòng)力C.本菌首次分別平常用堿性蛋白胨水D.運(yùn)動(dòng)開(kāi)朗,周生鞭毛患者糞便常呈米泔水樣『正確答案』D『答案解析』霍亂弧菌有單鞭毛,運(yùn)動(dòng)開(kāi)朗。不屬于霍亂弧菌培育特點(diǎn)的是怕酸耐堿,可用堿性蛋白胨水增菌生物型弧菌在血平板上可出現(xiàn)β溶血C.在TCBS平板上霍亂弧菌形成綠色較大菌落D.霍亂弧菌在液體培育基中大批生長(zhǎng),可形成菌膜E.慶大霉素瓊脂,形成的菌落中心呈灰褐色『正確答案』C『答案解析』霍亂弧菌在TCBS平板上霍亂弧菌形成黃色較大菌落。對(duì)于霍亂弧菌,表達(dá)錯(cuò)誤的選項(xiàng)是A.O1群有古典生物型和EITor生物型之分B.慶大霉素平板上不生長(zhǎng)C.多黏菌素B敏感試驗(yàn)可用于古典生物型和EITor生物型的鑒識(shí)D.營(yíng)養(yǎng)要求不高,在一般營(yíng)養(yǎng)瓊脂上生長(zhǎng)優(yōu)秀感染門(mén)路主假如經(jīng)過(guò)污染的水源或食品經(jīng)口攝取『正確答案』B『答案解析』霍亂弧菌在慶大霉素瓊脂上生長(zhǎng)為灰褐色的菌落中心?;魜y弧菌的主要致病物質(zhì)是內(nèi)毒素外毒素C.一般菌毛D.莢膜抗原『正確答案』B『答案解析』霍亂弧菌的主要致病物質(zhì)是外毒素。弧
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