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免疫寄生蟲實(shí)訓(xùn)報(bào)告2010年6月26日第三組組員:實(shí)訓(xùn)前期準(zhǔn)備病例一患者李某,男,32歲,江蘇人。因發(fā)熱,腹痛,拍膿血便1個(gè)月余就診。患者3個(gè)月前乘船到湖南農(nóng)村,由于天氣炎熱多次在河里洗澡,當(dāng)時(shí)手腳及身體皮膚有米粒大小的紅色丘疹出現(xiàn),發(fā)癢,有時(shí)有風(fēng)疹塊,未予重視,幾天后出現(xiàn)咳嗽、發(fā)熱、食欲減退,給予感冒片治療好轉(zhuǎn)。1個(gè)月前患者又出現(xiàn)發(fā)熱、腹瀉、膿血便,3~4次/d,上腹部疼痛,消瘦,到當(dāng)?shù)蒯t(yī)院給予抗生素治療無效。體檢:T39.2℃,消瘦面容,神志清,心肺(-),腹部稍膨脹,肝劍突下3cm,有壓痛,脾可觸及。血常規(guī):白細(xì)胞升高,嗜酸性粒細(xì)胞增多。胸片:正常1、病原學(xué)檢查:⑴糞便檢查①直接涂片法:主要只用于急性血吸蟲病患者,此法操作簡(jiǎn)單,但檢出率低,取粘液血便可提高檢出率。②自然沉淀法:操作麻煩,檢出率較高。③尼龍袋集卵法:此法比較自然沉淀法簡(jiǎn)單,檢出率相近或稍高,適用于大規(guī)模普查,但尼龍袋要嚴(yán)格清洗干凈,防止交叉污染,用孔徑略大或小于日本血吸蟲卵的兩個(gè)尼龍篩率除糞便中的糞渣,能較快、較好地收集血吸蟲卵。必須進(jìn)行的試驗(yàn):2、免疫學(xué)診斷:①膠體金試驗(yàn):㈠將反應(yīng)板平放于實(shí)驗(yàn)臺(tái)面上,于小孔內(nèi)滴加待測(cè)血清標(biāo)本1~2滴,待完全滲入;㈡于小孔內(nèi)滴加金標(biāo)血吸蟲抗體試劑1~2滴,待完全滲入;㈢于小孔內(nèi)滴加洗滌液2~3滴,待完全滲入;㈣判斷結(jié)果在膜中央有清晰的淡紅色斑點(diǎn)顯示者判為陽性反應(yīng);反之則為陰性反應(yīng)。斑點(diǎn)呈色的深淺相應(yīng)地提示陽性強(qiáng)度。②環(huán)卵沉淀試驗(yàn)(COPT):此法操作簡(jiǎn)便、快速、敏感性高、特異性強(qiáng),是目前日本血吸蟲病的重要輔助診斷技術(shù)之一。常用于流行病學(xué)調(diào)查,疫情監(jiān)測(cè)及療效考核。常規(guī)方法為在載玻片上加待測(cè)者血清2滴,用針尖挑取血吸蟲新鮮蟲卵或凍干蟲卵約10~150個(gè)至血清,混勻。覆蓋24mm×24mm蓋玻片,石蠟封蓋玻片四周,置37℃溫箱48h,低倍鏡觀察結(jié)果。此外,免疫學(xué)診斷方法還包括:ELISA⑴取糞便標(biāo)本20~30g放入燒杯內(nèi),加入10~20倍的清水充分混勻后靜置20~30分鐘;⑵緩慢傾去上清液,重新加滿水,靜置10~15分鐘,再傾去上清液,連續(xù)2~3次;⑶取沉渣直接涂片鏡檢病例二患者張某,男性,46歲,浙江人。近1月來發(fā)熱,咳嗽,咳痰,痰中帶血,伴胸痛、乏力、皮疹、消瘦,曾在當(dāng)?shù)蒯t(yī)院對(duì)癥治療無效。因發(fā)現(xiàn)右上腹部腫塊,前來就診。詢問病史,有食“醉蟹”史。體檢:一般情況可,心肺無異常,無肝脾腫大。右上腹部腫塊,大小約為2.5×3cm,質(zhì)中等硬度,無壓痛,時(shí)有移行。實(shí)驗(yàn)室檢查:白細(xì)胞11×10∧9/L,嗜酸性粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)2.84×10∧9,。痰抗酸桿菌(-)。胸片:肺紋理增粗,有小囊樣及隧道樣改變病原學(xué)檢查:①痰液檢查:⒈直接涂片法:取生理鹽水1~2滴于玻片并加入痰液,蓋上蓋玻片進(jìn)行鏡檢,若未見蟲卵,但見夏科—雷登結(jié)晶或嗜酸性粒細(xì)胞則須改用消化沉淀法。⒉消化沉淀法:此法檢出率較高,但較耗時(shí)。②糞便檢查:⒈重力沉淀法:⑴取糞便標(biāo)本20~30g放入燒杯杯內(nèi),加入10~20倍的清水沖充分混勻后靜置20~30分鐘;⑵緩慢傾去上清液,重新加滿水,靜置10~15分鐘,傾去上清液,連續(xù)2~3次;⑶取沉渣直接涂片鏡檢⒉離心沉淀法必須進(jìn)行的試驗(yàn):①金標(biāo)試驗(yàn)中試劑的用量以及標(biāo)本中抗原的含量和實(shí)驗(yàn)者的觀察、肉眼的結(jié)果判定,均可造成結(jié)果不準(zhǔn)確出現(xiàn)假性。②在重力沉淀法操作過程中上清的傾去這一過程十分關(guān)鍵,若過度傾去會(huì)導(dǎo)致蟲卵的丟失,導(dǎo)致顯微鏡檢出現(xiàn)假陰性。③在生理鹽水直接涂片法過程中,涂片的厚薄均勻程度以及實(shí)驗(yàn)者觀察部位的選擇,均可影響鏡檢的準(zhǔn)確性出現(xiàn)漏檢。④同時(shí)亦受檢驗(yàn)者的細(xì)心程度及觀察力的影響。分
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