化學(xué)發(fā)光介紹課件

化學(xué)發(fā)光介紹

二零零九年元月化學(xué)發(fā)光免疫分析方法簡介化學(xué)發(fā)光免疫分析（ChemiluminescenceImmunoassay，CLIA）是近十年來在世界范圍內(nèi)發(fā)展非常迅速的非放射性免疫分析。它具有高靈敏度、檢測范圍寬、操作簡便快速、標(biāo)記物穩(wěn)定性好、無污染、儀器簡單經(jīng)濟等優(yōu)點。它是放射性免疫分析與普通酶免疫分析的取代者，是免疫分析重要的發(fā)展方向。CLIA發(fā)展迅猛，已占各種免疫分析的首位，是目前放射免疫分析和酶聯(lián)免疫分析最佳的取代者。

化學(xué)發(fā)光免疫測定是目前世界公認先進的標(biāo)記免疫測定技術(shù)，化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)具有高度的準(zhǔn)確性和特異性，成為檢驗方法中最為重要的技術(shù)之一?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)作為疾病診斷的主要手段已被廣泛用于機體免疫功能、傳染性疾病、內(nèi)分泌功能、腫瘤標(biāo)志物、性激素、甲狀腺功能等方面的體外診斷實驗中?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析的優(yōu)勢

靈敏度高靈敏度高是化學(xué)發(fā)光免疫分析關(guān)鍵的優(yōu)越性，其靈敏度可達10-22mol/L（RIA為10-12mol/L）?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析能夠檢出放射免疫分析和酶聯(lián)免疫分析等方法無法檢出的物質(zhì)，對疾病的早期診斷具有十分重要的意義。寬的線性動力學(xué)范圍

發(fā)光強度在4～6個量級之間與測定物質(zhì)濃度間呈線性關(guān)系。這與顯色的酶免疫分析吸光度（OD值）為2.0的范圍相比，優(yōu)勢明顯。雖然RIA也有較寬的線性動力學(xué)范圍，但放射性限制了其應(yīng)用。光信號持續(xù)時間長輝光型的CLIA產(chǎn)生的光信號持續(xù)時間可達數(shù)小時甚至一天。簡化了實驗操作及測量。分析方法簡便快速絕大多數(shù)分析測定均為僅需加入一種試劑（或復(fù)合試劑）的一步模式。結(jié)果穩(wěn)定、誤差小樣品系直接自己發(fā)光，不需要任何光源照射，免除了各種可能因素（光源穩(wěn)定性、光散射、光波選擇器等）給分析帶來的影響，使分析結(jié)果靈敏穩(wěn)定可靠。安全性好及使用期長免除了使用放射性物質(zhì)。到目前為止，還未發(fā)現(xiàn)其危害性；試劑穩(wěn)定，保存期可達一年。目前化學(xué)發(fā)光開展的項目1、乙肝兩對半（表面抗原、表面抗體、E抗原、E抗體、核心抗體）6、肝纖維化檢測（HA,LN,PCIII,CIV,FN）2、腫瘤標(biāo)志物（AFP,CEA,PSA,FPSA,FER,CA199,CA125,CA153,B-2MG…）7、不育不孕類（AOA,AEA,ASA,ATB.ACA.ZB,HCG）3、性激素系列（LH,FSH,TSH,E2,PRO,PRL,TES,HCG,B-HCG…）8、優(yōu)生優(yōu)育類（TOX,CMV,HSVI,HSVII,RUB）4、甲狀腺功能（T3,T4,FT3,FT4,TSH,TM,TG,TPO…）9、其他類（ALB,一些藥物測試等）5、糖尿病系列（C肽，INS,INS-AB,GAD,PINS,ICA…）10、不斷發(fā)展中的其他臨床檢測項目。。。一、化學(xué)發(fā)光極大地提高了檢測靈敏度

HBsAg是HBV感染的特異標(biāo)志，HBsAg的出現(xiàn)就可作為乙肝的早期診斷，絕大多數(shù)HBV感染者外周血可出現(xiàn)HBsAg?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析檢測HBsAg靈敏度可達0.2ng/ml，而酶標(biāo)（EIASA）檢測的靈敏度為2ng/ml，放射免疫（RIA）靈敏度為1ng/ml，化學(xué)發(fā)光免疫分析極大地提高檢測的靈敏度。因此，在急性乙肝早期化學(xué)發(fā)光免疫分析檢測能及早檢出HBsAg，縮短窗口期的時間，而酶標(biāo)檢測在乙肝早期往往HBsAg呈陰性；其次，可發(fā)現(xiàn)低濃度HBsAg攜帶者；在部分慢性乙肝患者中，由于機體缺乏對HBV包膜蛋白的免疫應(yīng)答，HBsAg表達較低，酶標(biāo)檢測可出現(xiàn)HBsAg和表面抗體（HBsAb）均陰性的情況，化學(xué)發(fā)光免疫分析檢測的高靈敏度則可避免這些情況的發(fā)生，為正確判斷病情提供依據(jù)。并且目前病毒性肝炎和其他病因所致的肝病甚多，而且臨床癥狀、體征及肝功能無特殊改變差異，故只有依靠高靈敏度的病原學(xué)鑒別診斷。二、兩對半定量可動態(tài)觀察療效和病情監(jiān)測

疾病的發(fā)生、發(fā)展、療效、預(yù)后是一個動態(tài)的變化過程，化學(xué)發(fā)光免疫分析定量檢測乙肝“兩對半”各項標(biāo)志物的濃度變化可對乙肝的病程、治療、預(yù)后起動態(tài)監(jiān)測的作用，能夠讓醫(yī)生對病情療效作出合理的解釋提供依據(jù)，指導(dǎo)治療。1、定量檢測HBsAg，對肝炎病人動態(tài)療效觀察很有價值。HBsAg和HBsAb濃度的變化，可以預(yù)見急性乙肝是否處于恢復(fù)期。如HBsAg濃度降低，HBsAb的濃度逐漸升高，可說明病情正往恢復(fù)期發(fā)展。反之，HBsAg濃度處于較高水平或上升趨勢，而HBsAb一直處于較底水平，則容易發(fā)展為慢性乙肝或攜帶者。2、定量測定HBeAg和HBeAb濃度的變化，可以反映病情變化和治療效果。明確測定HbeAg向抗-Hbe轉(zhuǎn)換的時期，即表現(xiàn)為HbeAg濃度下降和抗-Hbe濃度升高的過程。高濃度的HbeAg還可間接提示病毒處于高復(fù)制狀態(tài)，具有較高的傳染性。高濃度的抗-Hbe一方面提示病情的好轉(zhuǎn)，而在某些時候（如肝功能指標(biāo)很差）可能與肝壞死、肝硬化、肝癌有關(guān)。3、HBcAb濃度的高低可以反映病毒感染的狀態(tài)，高濃度的HBcAb提示乙肝急性感染；低濃度一般為恢復(fù)期或既往感染。有利于對慢性肝炎活動性和非活動性的判斷。慢性乙肝呈抗-Hbc持續(xù)高濃度，故可以用于慢性乙肝的分類。4.有利于對慢性肝炎活動性和非活動性的判斷。非活動性慢性乙肝各項指標(biāo)相對穩(wěn)定，活動性往往呈進行性變化。四、降低科室成本

大家都知道進口試劑因試劑價格昂貴,并且標(biāo)準(zhǔn)品等要單買，從而使乙肝“兩對半”定量難以普及。乙肝“兩對半”進口化學(xué)發(fā)光試劑價格較高，國產(chǎn)化學(xué)發(fā)光試劑價格比進口試劑的低的多。國家已實行了同一種方法學(xué)統(tǒng)一收費標(biāo)準(zhǔn)，不分國產(chǎn)或進口試劑，上海、浙江等城市已執(zhí)行國產(chǎn)、進口化學(xué)發(fā)光試劑檢測項目同一個收費標(biāo)準(zhǔn)。用質(zhì)量、性能與進口乙肝“兩對半”試劑相當(dāng)?shù)膰a(chǎn)試劑，可以降低科室成本?；瘜W(xué)發(fā)光與常用免疫分析方法對比方法優(yōu)點缺點化學(xué)發(fā)光操作簡單，成本較低，靈敏度較高，試劑較穩(wěn)定進口試劑成本較高，國產(chǎn)試劑合理放射免疫試劑成本低，靈敏度較高操作復(fù)雜，放射性污染，有效期短酶聯(lián)免疫試劑成本低，操作簡單靈敏度低，適用于定性和半定量時間分辨靈敏度較高，試劑較穩(wěn)定操作復(fù)雜，反應(yīng)時間長，試劑成本較高電化學(xué)發(fā)光靈敏度較高，試劑較穩(wěn)定試劑成本高，儀器維護費用較高，有本底干擾化學(xué)發(fā)光免疫分析法作為非放射性的免疫分析法，具有靈敏度高、所需時間短、無污染、檢測范圍寬等特點，隨著各種自動發(fā)光分析儀器面市，以及不同類型的化學(xué)發(fā)光免疫分析試劑盒的不斷推出，使得檢測項目更多，檢測速度提高，這些勢必推動化學(xué)發(fā)光免疫分析的迅速發(fā)展，成為時間分辨、放射免疫和酶聯(lián)免疫分析的取代者，已成為檢驗的主流,使實驗室更好、更快地為臨床服務(wù)。顯著的經(jīng)濟效益對醫(yī)院：增加了設(shè)備、患者多了一種選擇，增加了盈利的渠道對科室：改進了方法，科室收益上升，科室地位得到提高對醫(yī)生：擺脫了患者投訴的煩惱，增加了臨床病情的判斷能力?；瘜W(xué)發(fā)光和酶法對比項目名稱收費標(biāo)準(zhǔn)(元)每月標(biāo)本量每年毛收入(萬元)每年成本(萬元)年凈收入/萬元(保守估計)乙肝兩對半18015*22天71.28

23.76每人份60元

47.52化學(xué)發(fā)光免疫僅乙肝五項年凈收入總計47.52萬元

乙肝兩對半25

15*22天