如何看抗體檢測(cè)結(jié)果及檢測(cè)應(yīng)用課件

如何看抗體檢測(cè)結(jié)果及抗體檢測(cè)應(yīng)用隋海亮2014年7月5日文檔密級(jí)：內(nèi)部公開一、豬瘟ELISA原理——阻斷（競(jìng)爭(zhēng)）ELISA

抗體抗原加入樣品洗滌+酶標(biāo)記物洗滌+底物藍(lán)色淡藍(lán)色終止讀數(shù)阻斷（競(jìng)爭(zhēng)）ELISA原理例如：CSFV-Ab、PRV-gI、PRV-gB豬瘟疫苗的免疫評(píng)估—關(guān)注兩點(diǎn)陽(yáng)性率：豬瘟抗體（阻斷率（Blocking）≥40%，判為陽(yáng)性結(jié)果；30%＜Blocking＜40%，判為可疑結(jié)果；Blocking≤30%，判為陰性結(jié)果）；免疫合格率：阻斷率（Blocking）≥50%的，即為免疫合格。免疫合格的比例即為免疫合格率。

豬瘟檢測(cè)的應(yīng)用免疫評(píng)估：商品豬：豬瘟二免后4-6周，要求：陽(yáng)性率≥80%,CV≤40%種豬群（公豬和母豬）：豬瘟免疫后4-6周，要求：免疫合格率≥80%（嚴(yán)格一點(diǎn)，要≥90%）,CV≤40%后備豬（全群檢測(cè)）：進(jìn)入隔離舍后1-2周、進(jìn)入配種舍前1個(gè)月（6-6.5月齡），要求：Blocking≥40%，陰性豬補(bǔ)打疫苗，3周后復(fù)檢，不合格淘汰。豬瘟檢測(cè)的應(yīng)用仔豬首免日齡的確定：選30-60頭仔豬，日齡和體重相近，每窩1-2頭，確認(rèn)沒有野毒感染的風(fēng)險(xiǎn)，不接種豬瘟疫苗連續(xù)采血：出生后7天、14天、21天、28天、35天、42天檢測(cè)抗體水平要求：CSFAbBlock≤30%仔豬占20%-40%時(shí)為首免日齡(依據(jù)感染壓力和平均阻斷率而定)。二、藍(lán)耳ELISA原理——間接ELISA

抗體抗原加入樣品洗滌+酶標(biāo)記物洗滌+底物藍(lán)色無(wú)色終止讀數(shù)間接ELISA原理結(jié)果判斷結(jié)果判定：藍(lán)耳抗體（S/P≥0.4，判為陽(yáng)性結(jié)果；S/P<0.4，判為陰性結(jié)果）免疫豬群0.4＜S/P≤2.5；對(duì)于過(guò)高抗體種豬，隔離飼養(yǎng)，2周后采血檢測(cè)，若抗體處于上升趨勢(shì)的種豬則淘汰非免疫豬群S/P值≥0.4淘汰或隔離飼養(yǎng)應(yīng)用動(dòng)態(tài)檢測(cè)4周齡、10周齡豬群，每次20-30樣本主要是：分析藍(lán)耳感染狀態(tài)，判斷豬群是否穩(wěn)定，(對(duì)于不穩(wěn)定群體,延遲轉(zhuǎn)群或免疫等)，如果S/P≥2.5的比例超過(guò)5%，則判斷該場(chǎng)藍(lán)耳不穩(wěn)定，有感染；沒有則穩(wěn)定。豬群PRV感染狀況的普查采樣要求公豬群：全部采樣生產(chǎn)母豬群：隨機(jī)采樣30個(gè)樣本15周齡后的生長(zhǎng)豬（母源抗體消失）：隨機(jī)采樣20-30個(gè)樣本檢測(cè)方法IDEXXPRVgIELISAS/N≤0.6陽(yáng)性，S/N＞0.7陰性0.6<S/N≤0.7隔離2周后重復(fù)檢測(cè)普查結(jié)果分析：低感染群：種豬陽(yáng)性率10%以下，可做凈化高感染群：種豬陽(yáng)性率10%以上，低于30%，可做凈化；高于30%，通過(guò)疫苗控制，來(lái)穩(wěn)定豬群偽狂犬的評(píng)級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：偽狂犬gE抗體全陰性，則為陰性場(chǎng)偽狂犬gE抗體陽(yáng)性，但檢測(cè)15周齡豬，gE抗體轉(zhuǎn)陰，則為陽(yáng)性穩(wěn)定場(chǎng)偽狂犬gE抗體陽(yáng)性，但檢測(cè)15周齡豬，gE抗體陽(yáng)性率達(dá)到20%以上，則為陽(yáng)性不穩(wěn)定穩(wěn)定場(chǎng)應(yīng)用—凈化母豬群,公豬群(全部)過(guò)去6-12個(gè)月沒有使用全病毒滅活苗或非gE基因缺失弱毒疫苗

若S/N≤0.6則淘汰（對(duì)于懷孕母豬:可以先隔離,產(chǎn)后2周淘汰）;若0.6<S/N≤0.7淘汰或隔離2周后重復(fù)檢測(cè),陽(yáng)性者淘汰;間隔6,12個(gè)月重復(fù)檢測(cè)全群,若前后兩次檢測(cè)全部為陰性，則后續(xù)檢測(cè)不需要全群采樣,可以按季度檢測(cè):每群隨機(jī)采樣15-20份;若季度檢測(cè)時(shí)出現(xiàn)陽(yáng)性豬只,其所在豬舍則需要全部檢測(cè),陽(yáng)性淘汰商品群隨機(jī)抽樣檢測(cè)（如