醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論

醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測

廣西區(qū)疾病預(yù)防控制中心

消毒與媒介防制科

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醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第1頁!醫(yī)院消毒效果監(jiān)測的意義

醫(yī)院消毒滅菌是預(yù)防醫(yī)院內(nèi)感染的重要措施之一，消毒效果的監(jiān)測是評價(jià)其消毒設(shè)備運(yùn)轉(zhuǎn)是否正常、消毒藥劑是否有效、消毒方法是否合理、消毒效果是否達(dá)標(biāo)的唯一手段，因而在醫(yī)院消毒、滅菌工作中必不可少。

醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第2頁!

一、醫(yī)院消毒效果監(jiān)測的原則

監(jiān)測人員需經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)，掌握一定的消毒知識，熟悉消毒設(shè)備和藥劑性能，具備熟練的檢驗(yàn)技能；選擇合理的采樣時(shí)間和順序遵循嚴(yán)格的無菌操作醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第3頁!三、醫(yī)院消毒效果監(jiān)測分類

消毒滅菌效果監(jiān)測：使用中消毒液或無菌器械保存液滅菌設(shè)備（壓力蒸汽滅菌器、環(huán)氧乙烷滅菌器）紫外線燈滅菌物品環(huán)境衛(wèi)生學(xué)監(jiān)測：空氣物表醫(yī)務(wù)人員手

醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第4頁!（1）Ⅰ類環(huán)境Ⅰ級手術(shù)室布點(diǎn)方法

Ⅰ級手術(shù)室布點(diǎn)方法：13個(gè)點(diǎn)。其中：手術(shù)區(qū)5個(gè)點(diǎn)（雙對角線布點(diǎn)），周邊區(qū)8個(gè)點(diǎn)（每邊內(nèi)2點(diǎn)）。++++

+++++++++醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第5頁!（1）Ⅰ類環(huán)境Ⅲ級手術(shù)室布點(diǎn)方法

Ⅰ類環(huán)境Ⅲ級手術(shù)室共布7個(gè)點(diǎn)。其中：手術(shù)區(qū)3個(gè)點(diǎn)（單對角線布點(diǎn)），周邊區(qū)4個(gè)點(diǎn)（每邊內(nèi)1點(diǎn)）。+

++++++醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第6頁!（2）Ⅱ、Ⅲ類環(huán)境布點(diǎn)、采樣方法

依據(jù)《消毒技術(shù)規(guī)范》(衛(wèi)生部2002年版)3.17.8。室內(nèi)面積≤30M2，設(shè)內(nèi)、中、外對角線3點(diǎn)，內(nèi)、外點(diǎn)布點(diǎn)部位距墻壁1M處；室內(nèi)面積>30M2，設(shè)4角及中央5點(diǎn)（雙對角線），4角的布點(diǎn)部位距墻壁1M處。將普通營養(yǎng)瓊脂平皿(直徑為9cm)放在室內(nèi)各采樣點(diǎn)處，采樣高度距地面1.5米（GB15982-1995：0.8～1.5米），采樣時(shí)將平皿蓋打開，扣放于平皿旁，暴露5分鐘，蓋好立即送檢，于37℃培養(yǎng)48小時(shí)，計(jì)數(shù)平板菌落數(shù)，并計(jì)算出空氣細(xì)菌菌落總數(shù)。

醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第7頁!4、結(jié)果判定

Ⅰ類區(qū)域結(jié)果判定：

等級

手術(shù)室名稱

空氣潔凈度級別

細(xì)菌最大平均濃度(個(gè)30min)

手術(shù)區(qū)周邊區(qū)手術(shù)區(qū)周邊區(qū)Ⅰ特別潔凈手術(shù)室100級1000級0.20.4Ⅱ標(biāo)準(zhǔn)潔凈手術(shù)室1000級10000級0.751.5Ⅲ一般潔凈手術(shù)室10000級100000級24Ⅳ準(zhǔn)潔凈手術(shù)室300000級5醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第8頁!空氣采樣時(shí)的注意事項(xiàng)

1、（消毒前）前提將放置平皿的采樣臺準(zhǔn)備好。

2、開門方式：自動(dòng)門,推拉式彈簧門,有把手的門。

3、行走路線（盡可能少在室內(nèi)走動(dòng)）動(dòng)作要輕。先布皿后開蓋。

4、動(dòng)態(tài)環(huán)境

5、同一房間空氣、物表采樣，先采空氣，后采物表；最好由同一人操作。

54321醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第9頁!五、物體表面消毒效果監(jiān)測

3、檢測方法：（1）細(xì)菌總數(shù)檢測：檢測方法按《消毒技術(shù)規(guī)范》3.17.6.3（1）執(zhí)行。小型物體表面的結(jié)果計(jì)算，用cfu/件。（2）致病菌檢測：檢測方法按《消毒技術(shù)規(guī)范》3.17.15原則執(zhí)行。

4、結(jié)果判定

Ⅰ、Ⅱ類區(qū)域：細(xì)菌總數(shù)≤5cfu/cm2，并未檢出致病菌為消毒合格。

Ⅲ類區(qū)域：細(xì)菌總數(shù)≤10cfu/cm2，并未檢出致病菌為消毒合格。

Ⅳ類區(qū)域：細(xì)菌總數(shù)≤15cfu/cm2，并未檢出致病菌為消毒合格。醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第10頁!六、手消毒效果監(jiān)測

1、采樣時(shí)間：消毒后立即采樣。

2、采樣方法：被檢人五指并攏，用浸有含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液的棉拭子在雙手指屈面從指根到指端往返涂擦2次(一只手涂擦面積約30cm2)，并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)采樣的棉拭子，剪去操作者手接觸部位，將棉拭子投入10ml含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液試管內(nèi)，進(jìn)行細(xì)菌菌落總數(shù)和致病菌檢測。醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第11頁!4、結(jié)果判定

Ⅰ、Ⅱ類區(qū)域工作人員：細(xì)菌總數(shù)≤5cfu/cm2，并未檢出金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌為消毒合格。

Ⅲ類區(qū)域：細(xì)菌總數(shù)≤10cfu/cm2，并未檢出金黃色葡萄球菌、大腸桿菌為消毒合格。

Ⅳ類區(qū)域：細(xì)菌總數(shù)≤15cfu/cm2，并未檢出金黃色葡萄球菌、大腸桿菌為消毒合格。母嬰同室、嬰兒室、新生兒科及兒科病房的工作人員手上，不得檢出沙門氏菌、大腸桿菌、溶血性鏈球菌、黃色葡萄球菌。醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第12頁!七、使用中消毒液或無菌器械保存液監(jiān)測

1、使用中消毒液有效成分的測定

2、使用中消毒液或無菌器械保存液染菌量的測定（1）涂抹法：（2）傾注法：用無菌吸管吸取消毒液1.0ml，加入到9ml含相應(yīng)中和劑的無菌生理鹽水采樣管中混勻，分別取0.5ml放入2只滅菌平皿內(nèi)，加入已溶化的45℃～48℃的營養(yǎng)瓊脂15ml～18ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，一平板置20℃培養(yǎng)7天，觀察霉菌生長情況；另一個(gè)平板置36℃±1℃溫箱培養(yǎng)72h，計(jì)數(shù)菌落數(shù)。同時(shí)按3.17.15檢測致病菌。使用中消毒液或無菌器械保存液染菌量（cfu/ml）=每個(gè)平板上的菌落數(shù)×20

結(jié)果判定：消毒液染菌量≤100cfu/ml，并未檢出致病菌為合格。醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第13頁!八、滅菌物品消毒效果監(jiān)測

1、采樣時(shí)間：在滅菌處理后，存放有效期內(nèi)采樣。

2、采樣方法：按《消毒技術(shù)規(guī)范》3.17.5.2原則執(zhí)行

3、結(jié)果判定：陽性對照在24小時(shí)內(nèi)應(yīng)有菌生長，陰性對照在培養(yǎng)期間應(yīng)無菌生長,如需-厭氧菌及霉菌培養(yǎng)管內(nèi)均為澄清或雖顯渾濁但經(jīng)證明并非有菌生長，判為滅菌合格；如需-厭氧菌及霉菌培養(yǎng)管中任何1管顯渾濁并證實(shí)有菌生長，應(yīng)重新取樣，分別同法復(fù)試2次，除陽性對照外，其他各管均不得有菌生長，否則判為滅菌不合格。醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第14頁!九、滅菌器滅菌效果監(jiān)測1、監(jiān)測方法：工藝監(jiān)測化學(xué)監(jiān)測（化學(xué)指示卡、指示膠帶）生物監(jiān)測2、常用滅菌器種類壓力蒸汽滅菌器環(huán)氧乙烷滅菌器3、生物指示物嗜熱脂肪桿菌芽胞（ATCC7953）,壓力蒸汽滅菌器枯草桿菌黑色變種芽胞（ATCC9372）環(huán)氧乙烷滅菌器醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第15頁!4、生物指示菌片布點(diǎn)方法

生物指示菌片布放方法（《現(xiàn)代醫(yī)院消毒》）（1）將兩個(gè)嗜熱脂肪桿菌芽胞菌片分別裝入滅菌小紙袋內(nèi)，置于標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包中心部位。（2）0.5M3以上的大滅菌柜在上層和中層中央部位，下層前、中、后等五個(gè)部位各放一個(gè)試驗(yàn)包。小型滅菌柜（兩層）在上層中央部位和下層前、后等三個(gè)部位各放一個(gè)試驗(yàn)包；小型滅菌柜（三層）在上、中、下層中央各放一個(gè)試驗(yàn)包手提式或臺式滅菌器在下層（底部）放一個(gè)試驗(yàn)包。醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第16頁!環(huán)氧乙烷滅菌器滅菌效果監(jiān)測

枯草桿菌黑色變種芽胞（ATCC9372）菌片事先放入一次性注射器中（每個(gè)注射器中放1個(gè)菌片），然后封裝在一剝離式包裝袋內(nèi)。菌片在滅菌器內(nèi)布放的數(shù)量應(yīng)足夠多，應(yīng)放在那些在性能鑒定時(shí)發(fā)現(xiàn)是最難滅菌的部位，并均勻分布于整個(gè)滅菌物品中。上、中、下層對角線前、中、后各布放一個(gè)菌片，排氣口上方放置一個(gè)菌片，共放置10個(gè)菌片。醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第17頁!十、紫外線消毒效果監(jiān)測

紫外線燈管輻照度值的測定，一般采用紫外線輻照計(jì)測定法。開啟紫外線燈5分鐘后，將測定波長為253.7nm的紫外線輻照計(jì)探頭置于被檢紫外線燈下垂直距離1m的中央處，待儀表穩(wěn)定后，所示數(shù)據(jù)即為該紫外線燈的輻照度值。結(jié)果判定：普通30W直管型紫外線燈，新燈輻照強(qiáng)度≥90μW/cm2為合格；使用中紫外線燈輻照強(qiáng)度≥70μW/cm2為合格；30W高強(qiáng)度紫外線燈輻照強(qiáng)度≥180μW/cm2為合格；醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第18頁!醫(yī)院消毒效果監(jiān)測

現(xiàn)場采樣物品清單1、原始記錄表（含紫外燈監(jiān)測記錄）2、白大褂、帽子、口罩、鞋套3、廣口瓶、75%酒精（手消毒液）4、記號筆5、定時(shí)鐘6、試管架7、酒精燈、無水酒精、打火機(jī)8、輻照計(jì)、防護(hù)服、防護(hù)眼睛9、污物缸10、橡皮筋醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第19頁!

二、醫(yī)院消毒效果監(jiān)測范圍

日常監(jiān)測重點(diǎn)科室（手術(shù)室、層流潔凈病房、ICU、產(chǎn)房、新生兒科、母嬰同室病房、透析室、血液病房、燒傷病房、供應(yīng)室、內(nèi)鏡室、治療室、換藥室發(fā)生醫(yī)院內(nèi)感染時(shí)應(yīng)在發(fā)生感染的科室及相關(guān)科室采樣監(jiān)測

醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第20頁!四、空氣消毒效果監(jiān)測

1、采樣時(shí)間：消毒處理后、操作前進(jìn)行采樣。

2、布點(diǎn)及采樣方法：（1）Ⅰ類環(huán)境布點(diǎn)、采樣方法：依據(jù)《醫(yī)院潔凈手術(shù)部建筑技術(shù)規(guī)范》(GB50333-2002)10.3.13、手術(shù)區(qū)：需要特別保護(hù)的手術(shù)臺及其周圍區(qū)域。

Ⅰ級手術(shù)室的手術(shù)區(qū)是指手術(shù)臺兩側(cè)邊至少各外推0.9m、兩端至少各外推0.4m后（包括手術(shù)臺）的區(qū)域；

Ⅱ級手術(shù)室的手術(shù)區(qū)是指手術(shù)臺兩側(cè)邊至少各外推0.6m、兩端至少各外推0.4m后(包括手術(shù)臺)的區(qū)域；

Ⅲ級手術(shù)室的手術(shù)區(qū)是指手術(shù)臺四邊至少各外推0.4m后（包括手術(shù)臺）的區(qū)域。

Ⅳ級手術(shù)室不分手術(shù)區(qū)和周邊區(qū)。周邊區(qū)：潔凈手術(shù)室內(nèi)除去手術(shù)區(qū)以外的其他區(qū)域。醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第21頁!（1）Ⅰ類環(huán)境Ⅱ級手術(shù)室布點(diǎn)方法

Ⅱ級手術(shù)室布點(diǎn)方法：9個(gè)點(diǎn)。其中：手術(shù)區(qū)3個(gè)點(diǎn)（單對角線布點(diǎn)），周邊區(qū)6個(gè)點(diǎn)（長邊內(nèi)2點(diǎn)，短邊內(nèi)1點(diǎn)）。++

++

+++++醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第22頁!

Ⅰ類環(huán)境采樣方法

將普通營養(yǎng)瓊脂平皿（直徑為9cm）放在室內(nèi)手術(shù)區(qū)和周邊區(qū)各采樣點(diǎn)處，采樣高度離地面≤0.8米，采樣時(shí)將平皿蓋打開，扣放于平皿旁，暴露30分鐘，蓋好，于37℃培養(yǎng)24小時(shí)，分別計(jì)數(shù)手術(shù)區(qū)和周邊區(qū)的平均菌落數(shù)。醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第23頁!3、空氣樣品檢測方法

依據(jù)《消毒技術(shù)規(guī)范》2.1.3要求進(jìn)行。平板暴露法結(jié)果計(jì)算公式：細(xì)菌總數(shù)(cfu/m3)=50000N/(A×T)

式中A為平板面積（cm2）；T為平板暴露時(shí)間（min）；N為平均菌落數(shù)（cfu）；醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第24頁!4、結(jié)果判定

Ⅱ類區(qū)域結(jié)果判定：細(xì)菌總數(shù)≤200cfu/m3，未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格。

Ⅲ類區(qū)域結(jié)果判定：細(xì)菌總數(shù)≤500cfu/m3，未檢出金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌為消毒合格。醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第25頁!五、物體表面消毒效果監(jiān)測

1、采樣時(shí)間：消毒處理后進(jìn)行采樣。

2、采樣方法：用5cm×5cm的標(biāo)準(zhǔn)滅菌規(guī)格板，放在被檢物體表面，用浸有含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返均勻涂擦各5次，并隨之轉(zhuǎn)棉拭子，連續(xù)采樣4個(gè)，剪去手接觸部位后，投入10ml含相應(yīng)中和劑的無菌洗脫液試管內(nèi)，進(jìn)行細(xì)菌菌落總數(shù)和致病菌檢測。門把手等不規(guī)則物體表面用棉拭子直接涂擦采樣醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第26頁!采樣注意事項(xiàng)

1、空氣、物表采樣由同一人操作。

2、物表采樣應(yīng)由近及遠(yuǎn)，兼顧上下中左右

3、母嬰同室、血透室屬Ⅱ類環(huán)境

4、樣品標(biāo)識一定要清楚，能朔源、追蹤，以便整改。

5、致病菌包括金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、溶血性鏈球菌（產(chǎn)房、新生兒科、母嬰同室加測沙門氏菌）

6、采樣棉簽在現(xiàn)場要做空白對照。

醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第27頁!3、手消毒效果監(jiān)測檢測方法

（1）細(xì)菌總數(shù)檢測：將采樣管在混勻器上振蕩20秒或用力振打80次，用無菌吸管吸取1.0ml待檢樣品接種于滅菌平皿，每一樣本接種2個(gè)平皿，內(nèi)加入已溶化的45℃～48℃的營養(yǎng)瓊脂15ml～18ml，邊傾注邊搖勻，待瓊脂凝固，置36℃±1℃溫箱培養(yǎng)48h，計(jì)數(shù)菌落數(shù)。采樣結(jié)果計(jì)算方法：細(xì)菌總數(shù)（cfu/cm2）=

（2）致病菌檢測：按《消毒技術(shù)規(guī)范》3.17.15原則執(zhí)行。

平板上菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)

采樣面積（cm2）醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第28頁!

注意事項(xiàng)

1、分清普通衛(wèi)生洗手和外科洗手衛(wèi)生手消毒。外科洗手標(biāo)準(zhǔn)值?Ⅱ類環(huán)境：金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌(產(chǎn)房、母嬰同室、新生兒科加測沙門氏菌、溶血性鏈球菌)Ⅲ類環(huán)境：金黃色葡萄球菌、大腸桿菌醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第29頁!注意事項(xiàng)：1、必須是使用中消毒液或無菌器械保存液。

2、要求采樣后1h內(nèi)檢測，實(shí)際工作中由于各種原因做不到，采5ml樣品放在滅菌試管中（試管中不放中和劑）帶回實(shí)驗(yàn)室。

3、樣品名稱一定要標(biāo)識清楚，不僅要注明采樣地點(diǎn)，而且要注明消毒液的名稱、有效濃度等，例：勁康消毒劑、0.1%健之素消毒液、80%漂白粉溶液、0.5%洗必泰等標(biāo)識都是不正確的。

4、消毒液細(xì)菌菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)值≤100cfu/ml，無菌器械保存液細(xì)菌菌落總數(shù)標(biāo)準(zhǔn)值是不得檢出。

5、致病菌檢測包括金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、沙門氏菌、溶血性鏈球菌。醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第30頁!4、滅菌物品消毒效果監(jiān)測注意事項(xiàng)1、無菌檢驗(yàn)應(yīng)在潔凈度為100級單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行，最好把滅菌包帶回在百級實(shí)驗(yàn)室打開。應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，避免微生物污染。

2、應(yīng)采有效期內(nèi)的樣品（高壓滅菌：一般是兩周；還氧乙烷：兩年）醫(yī)院消毒滅菌效果監(jiān)測總論共36頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第31頁!4、壓力蒸汽滅菌器滅菌效果監(jiān)測

檢測方法

生物指示菌片布放方法（《消毒技術(shù)規(guī)范》）（1）將兩個(gè)嗜熱脂肪桿菌芽胞