高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修

專題2微生物的培養(yǎng)與應用專題2微生物的培養(yǎng)與應用讀讀教材基礎(chǔ)讀讀教材基礎(chǔ)一、微生物的實驗室培養(yǎng)1．培養(yǎng)基(1)概念：人們按照微生物對________的不同需求，配制出供其生長繁殖的________。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修2．無菌技術(shù)(1)含義：指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法。(2)關(guān)鍵：________。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修(3)措施條件結(jié)果常用的方法消毒較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)________消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學藥劑消毒法滅菌強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子________滅菌、干熱滅菌、________滅菌(3)措施條件結(jié)果常用的方法消毒較為溫和的物理或化學方法僅殺3.純化大腸桿菌以及菌種的保藏(1)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟：計算→稱量→溶化→________→________。(2)純化大腸桿菌①原理：在培養(yǎng)基上將細菌稀釋或分散成________，使其長成單個的菌落，這個菌落就是一個純化的細菌菌落。②方法：________、________。3.純化大腸桿菌以及菌種的保藏(3)菌種的保藏①短期保存：________上4℃保存，菌種易被污染或產(chǎn)生變異。②長期保存：________中－20℃在冷凍箱中保藏。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修為什么在倒平板時，等平板冷卻后要將平板倒置？高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修二、土壤中分解尿素的細菌的分離和計數(shù)1．菌種篩選：使用尿素是唯一氮源的選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)。2．統(tǒng)計菌落數(shù)目：常用方法有________、顯微鏡直接計數(shù)法。3．細菌分離與計數(shù)的實驗流程：土壤取樣→配制________→微生物的培養(yǎng)與觀察→細菌的計數(shù)。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修三、分解纖維素的微生物的分離1．纖維素酶(1)組成：纖維素酶是一種復合酶，它包括___________________________________________________________________________________。(2)作用三、分解纖維素的微生物的分離2．菌種篩選(1)方法：_________________________________。(2)原理2．菌種篩選3．篩選流程土壤取樣：富含________的環(huán)境↓選擇培養(yǎng)：用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的數(shù)量↓梯度稀釋↓涂布平板：將樣品涂布于含CR的鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上↓挑選產(chǎn)生透明圈的菌落：產(chǎn)生________的菌落周圍出現(xiàn)透明圈3．篩選流程一、1.(1)營養(yǎng)物質(zhì)營養(yǎng)基質(zhì)(3)固體培養(yǎng)基2.(2)防止外來雜菌的入侵(3)煮沸灼燒高壓蒸汽3.(1)滅菌倒平板(2)①單個細胞②平板劃線法稀釋涂布平板法(3)①固體斜面培養(yǎng)基②甘油瓶二、2.稀釋涂布平板法3.培養(yǎng)基三、1.(1)C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶2.(1)剛果紅染色法(2)是否產(chǎn)生透明圈3.纖維素纖維素酶[想一想]提示：將平板倒置的目的是防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠滴落到平板上造成污染。一、1.(1)營養(yǎng)物質(zhì)營養(yǎng)基質(zhì)(3)固體培養(yǎng)基21．教材第17頁倒平板操作的討論(1)培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度？可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時，就可以進行倒平板了。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修(2)為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。(3)平板冷凝后，為什么要將平板倒置？平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。(4)在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物。(2)為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？2．教材第18頁平板劃線操作的討論(1)為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。2．教材第18頁平板劃線操作的討論(2)在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。(3)在作第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？劃線后，線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修3．教材第22頁兩位同學用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數(shù)，在對應稀釋倍數(shù)106的培養(yǎng)基中，得到以下兩種統(tǒng)計結(jié)果：1.第一位同學在該濃度下涂布了一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)為230；2.第二位同學在該濃度下涂布了三個平板統(tǒng)計的菌落數(shù)分別為20、200、239，并且取平均值153作為統(tǒng)計結(jié)果。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修第一位同學只涂布了一個平板，沒有設置重復組，因此結(jié)果不具有說服力。第二位同學考慮到設置重復組的問題，涂布了3個平板，但是，其中1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差太遠，說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤，因此，不能簡單地將3個平板的計數(shù)值用來求平均值。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修研研核心要點研研核心要點1．培養(yǎng)基的成分(1)碳源①含義：能提供碳元素的物質(zhì)。②作用：構(gòu)成生物體的物質(zhì)，異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修③主要來源無機物：CO2、NaHCO3。有機物：糖類、脂肪酸、石油、花生粉餅等。(2)氮源①含義：能提供氮元素的物質(zhì)。②作用：合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮代謝產(chǎn)物。③主要來源無機物：N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽。有機物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等。③主要來源(3)生長因子①含義：生長不可少的微量有機物。②作用：酶和核酸的成分。③主要包括：維生素、氨基酸、堿基等。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修(4)水①含量：在生物體內(nèi)含量很高，在低等生物體內(nèi)含量更高。②作用：不僅是優(yōu)良的溶劑，而且可維持生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定。③主要來源：培養(yǎng)基、大氣、代謝產(chǎn)物等。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修(5)無機鹽①含義：為微生物提供除C、H、O以外的各種重要元素，包括大量元素和微量元素。②作用：細胞內(nèi)的組成成分，生理調(diào)節(jié)物質(zhì)；某些化能自養(yǎng)菌的能源、酶的激活劑。③主要來源：培養(yǎng)基、大氣等。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修2．常見的消毒和滅菌方法內(nèi)容種類主要方法應用范圍滅菌灼燒滅菌法酒精燈火焰灼燒微生物接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬用具等，接種過程中試管口或瓶口等干熱滅菌法干熱滅菌箱160℃～170℃加熱1h～2h玻璃器皿(如吸管、培養(yǎng)皿等)、金屬用具等凡不適合用其他方法滅菌而又能耐高溫的物品高壓蒸汽滅菌法121℃維持15min～30min培養(yǎng)基及多種器材、物品消毒巴氏消毒法70℃～75℃煮30min或80℃煮15min牛奶、啤酒、果酒和醬油等不宜進行高溫滅菌的液體煮沸消毒法100℃煮沸5min～6min日常食品、罐裝食品紫外線消毒法紫外線照射30min接種室、接種箱等化學藥物消毒法用體積分數(shù)為70%～75%的酒精、碘酒涂抹，來蘇水噴灑等用于皮膚、傷口、動植物組織表面消毒、手術(shù)器械、塑料或玻璃器皿等2．常見的消毒和滅菌方法內(nèi)容種類主要方法應用范圍滅菌灼燒滅酒自養(yǎng)微生物與異養(yǎng)微生物所需的營養(yǎng)物質(zhì)不同(1)自養(yǎng)微生物所需的碳源、氮源來自含碳、含氮的無機物，而異養(yǎng)微生物需要的碳源、氮源來自含碳、含氮的有機物，因此可根據(jù)培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)判斷微生物的代謝類型。(2)含氮無機物不但能給自養(yǎng)微生物提供氮源，也能作為能源物質(zhì)，提供能量，如NH3既作為硝化細菌的氮源也作為能源。自養(yǎng)微生物與異養(yǎng)微生物所需的營養(yǎng)物質(zhì)不同[師說·一語破天機]該考點在高考中主要考查微生物的消毒和滅菌，在2011年全國課標卷中做了重點考查，預計在2014年高考中還有可能考查。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修[選題·典型中選秀]例1：[2011·新課標全國卷]有些細菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染，某同學欲從污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株?；卮饐栴}：(1)在篩選過程中，應將土壤樣品稀釋液接種于以________為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修(2)純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即________和________。(3)為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降解能力________。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修(4)通常情況下，在微生物培養(yǎng)過程中，實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、________和________。無菌技術(shù)要求實驗操作應在酒精燈________附近進行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修[破題·分層揭秘密](一)明確解題思路實驗目的是為了篩選出可以分解原油的高效菌株，因此在篩選的時候選擇培養(yǎng)基的碳源為原油。純化分離微生物的方法有兩種：平板劃線法和稀釋涂布平板法；滅菌的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修(二)調(diào)動和運用知識解題(1)原油選擇(2)平板劃線法稀釋涂布平板法(3)強(4)干熱滅菌高壓蒸汽滅菌火焰高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修(三)同類互動探究(1)若在該培養(yǎng)基中加入青霉素，能更好地起到篩選作用嗎？提示：不能。分析：青霉素培養(yǎng)基往往是真菌選擇培養(yǎng)基，在加青霉素的培養(yǎng)基中，細菌生長被抑制，因而不能篩選出能高效降解原油的菌株(細菌)。(三)同類互動探究(2)細菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理方法，這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌？提示：培養(yǎng)基、手、接種環(huán)。分析：高壓蒸汽滅菌的設備，通常用于培養(yǎng)基的滅菌。用酒精擦拭雙手是消毒的一種方法?；鹧孀茻梢匝杆購氐椎販缇?，適用于微生物的接種工具，如接種環(huán)。(2)細菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種1.原理：在培養(yǎng)基上將細菌稀釋或分散成單個細胞，使其長成單個的菌落，這個菌落就是純化的細菌菌落。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修2．微生物接種方法(1)平板劃線法：平板劃線法中細胞的分離和稀釋過程發(fā)生在接種環(huán)在固體平板表面上的劃線和移動過程中。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成純種的單個菌落。(如下圖)2．微生物接種方法(2)稀釋涂布平板法10倍系列稀釋操作①將分別盛有9mL水的6支試管滅菌，并按101～106的順序編號。②用移液管吸取1mL培養(yǎng)的菌液，注入101倍稀釋的試管中。用手指輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸3次，使菌液與水充分混勻。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修③從101倍稀釋的試管中吸取1mL稀釋液，注入102倍稀釋的試管中，重復②步混勻操作。依次類推，直到完成最后1支試管的稀釋。③從101倍稀釋的試管中吸取1mL稀釋液，注入102倍稀釋平板劃線法純化大腸桿菌時不同階段灼燒接種環(huán)的目的不同(1)第一次操作：殺死接種環(huán)上原有的微生物。(2)每次劃線之前：殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端。(3)劃線結(jié)束后：殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。平板劃線法純化大腸桿菌時不同階段灼燒接種環(huán)的目的不同[師說·一語破天機]本考點內(nèi)容常以環(huán)境污染為背景考查微生物的生存條件及分離、純化和培養(yǎng)條件等，復習中引起關(guān)注。

高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修[選題·典型中選秀]例2：從自然界微生物中篩選某菌種的一般步驟是：采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→性能測定。(1)不同微生物的生存環(huán)境不同，獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化、培養(yǎng)噬鹽菌的菌樣應從________環(huán)境中采集。[選題·典型中選秀](2)富集培養(yǎng)指創(chuàng)設僅適合待分離微生物旺盛生長的特定環(huán)境條件，使其群落中的數(shù)量大大增加，從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。對產(chǎn)耐高溫淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)應選擇________的培養(yǎng)基，并在________條件下培養(yǎng)。(3)接種前要對培養(yǎng)基進行________處理。在整個微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在________條件下進行。

(2)富集培養(yǎng)指創(chuàng)設僅適合待分離微生物旺盛生長的特定環(huán)境條件(4)如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖，請分析接種的具體方法。獲得圖A效果的接種方法是________，圖B效果的接種方法是________。一同學在純化土壤中的細菌時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是________________，應當怎樣操作才可避免此種現(xiàn)象？_______________________________________________。(4)如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果(5)如果探究溫度對纖維素酶活性的影響，自變量是________，應該保持________等不變(至少答兩項)。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修[破題·分層揭秘密](一)明確解題思路(1)篩選菌種應從適于目的菌種生長、繁殖的環(huán)境中尋找，故培養(yǎng)噬鹽菌應從高鹽環(huán)境中采集。(2)富集培養(yǎng)時培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件應能促進目的菌的生長、繁殖。(3)微生物的分離及培養(yǎng)中必須保證無菌，包括培養(yǎng)基的滅菌和操作過程的滅菌等。[破題·分層揭秘密](4)純化培養(yǎng)中接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，前一種方法形成的菌落分布較均勻，后一種方法形成的菌落分布不均勻，先劃線的部分菌落密集甚至相連，后劃線的部分菌落分布稀疏。(5)探究溫度對酶活性的影響時，溫度為自變量，酶活性為因變量，其他變量如底物和酶的用量、pH、反應時間等均為無關(guān)變量。(4)純化培養(yǎng)中接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，前一種(二)調(diào)動和運用知識解題(1)海灘等高鹽(2)以淀粉為唯一碳源高溫(3)高壓蒸汽滅菌

無菌(4)稀釋涂布平板法

平板劃線法

菌液濃度過高

增大稀釋倍數(shù)(或培養(yǎng)過程被雜菌污染

嚴格無菌操作；或用接種環(huán)劃下一區(qū)域前接種環(huán)沒有滅菌

每劃一個新區(qū)域前都要對接種環(huán)進行滅菌處理)(原因與操作要對應)(5)溫度

纖維素的量與濃度、反應時間、pH(二)調(diào)動和運用知識解題(三)同類變式訓練如圖表示平板劃線法分離純化細菌示意圖。根據(jù)所學生物學知識，完成下列問題。(三)同類變式訓練(1)微生物所需的營養(yǎng)成分一般包括________、________、水和無機鹽。(2)培養(yǎng)微生物時，除考慮微生物生長所需的營養(yǎng)外，還要考慮微生物生長所需的溫度、______以及是否需要O2等。(3)對培養(yǎng)基進行滅菌時，多采用________法，而對接種環(huán)或涂布器滅菌時則用________法。(4)平板劃線時，為保證每次劃線都從上次劃線末端的微生物濃度開始，所以每次劃線前都要________，平板劃線結(jié)束后，最后一次劃的線不能與第一次劃的線________。(1)微生物所需的營養(yǎng)成分一般包括________、____(5)脲酶可以將尿素分解為NH3，從而使尿素溶液pH升高，這可用________試劑來檢驗。用纖維素作唯一碳源的培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物，得到的纖維素分解菌中可能還混有________。答案：(1)碳源氮源(2)pH(3)高壓蒸汽滅菌灼燒滅菌(4)對接種環(huán)灼燒滅菌相交(相接、相連、交叉等)(5)酚紅自養(yǎng)微生物(硝化細菌)(5)脲酶可以將尿素分解為NH3，從而使尿素溶液pH升高，這解析：(1)(2)培養(yǎng)基中一般含有水、無機鹽、碳源、氮源等物質(zhì)；培養(yǎng)基中除含有營養(yǎng)物質(zhì)外還需提供適宜的溫度、pH、O2等。(3)培養(yǎng)基常采用高壓蒸汽滅菌，玻璃器皿常采用干熱滅菌，接種環(huán)等金屬器具常采用灼燒滅菌。(4)考查平板劃線法的操作方法，如果劃線相重合則不能分離出純種。(5)酚紅可檢驗堿性溶液，用纖維素作唯一碳源的培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物，得到纖維素分解菌，但自養(yǎng)微生物可以利用空氣中的CO2作為碳源，也能生存，需要進一步分離。解析：(1)(2)培養(yǎng)基中一般含有水、無機鹽、碳源、氮源等物1．篩選菌株(1)原則：人為提供有利于目的菌生長的條件，同時抑制或阻止其他微生物的生長。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修(2)菌株篩選原理的比較土壤中分解尿素的細菌分解纖維素的微生物①選擇培養(yǎng)基的成分：尿素作為唯一的氮源②鑒定方法：在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變紅，pH升高，說明細菌能分解尿素①選擇培養(yǎng)基的成分：纖維素作為唯一的碳源②鑒定方法：剛果紅染色法，即剛果紅與纖維素形成紅色復合物，當纖維素被分解后，培養(yǎng)基出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈(2)菌株篩選原理的比較土壤中分解尿素的細菌分解纖維2.統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法(1)顯微鏡直接計數(shù)法①原理：利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。②方法：用計數(shù)板計數(shù)。③缺點：不能區(qū)分死菌與活菌。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修(2)間接計數(shù)法(活菌計數(shù)法)①原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。②計算公式：每克樣品中的菌株數(shù)＝(C÷V)×M，其中，C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)。(2)間接計數(shù)法(活菌計數(shù)法)③操作：設置重復組，增強實驗的說服力與準確性。同時為了保證結(jié)果準確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修

選擇培養(yǎng)基的選擇方法(1)在培養(yǎng)基中加入某種化學物質(zhì)。例如，加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌；加入高濃度的食鹽可以得到金黃色葡萄球菌。這里的加入是在主要營養(yǎng)成分完整的基礎(chǔ)上加入。(2)改變培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分。例如缺乏氮源時可以分離出固氮微生物；石油作為唯一碳源時，可以分離出消除石油污染的微生物。(3)改變微生物的培養(yǎng)條件。例如，將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境下培養(yǎng)，可以得到耐高溫的微生物。選擇培養(yǎng)基的選擇方法[師說·一語破天機]本部分知識常與前面兩考點綜合在一起考查，單科試卷中多有涉及，理綜考試中多以填空形式出現(xiàn)。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修[選題·典型中選秀]例3：下面是探究如何從土壤中分離自生固氮菌與計數(shù)的實驗，完成下列問題：實驗原理：農(nóng)田的表層土壤中，自生固氮菌的含量比較多。將用表層土壤制成的稀泥漿，接種到無氮培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。在這種情況下，只有自生固氮菌才能生長繁殖。用這種方法，可以將自生固氮菌與其他細菌分離。[選題·典型中選秀]材料用具：農(nóng)田的表層土壤、無氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、盛有9mL無菌水的試管、無菌吸管、無菌涂布器、無菌培養(yǎng)皿、盛有90mL無菌水的錐形瓶、恒溫箱。(1)方法步驟：①倒平板：分別將無氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基倒平板，應在________操作。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修②制備土壤稀釋液：取土樣10g加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中，充分搖勻。用無菌吸管吸取上清液1mL，轉(zhuǎn)至盛有9mL的無菌水的試管中，依次稀釋到107稀釋度。③涂布：按照由107～103稀釋度的順序分別吸取0.1mL進行平板涂布，每個稀釋度下，無氮培養(yǎng)基應至少涂布________個平板，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基涂布________個。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修④培養(yǎng)：放入恒溫箱內(nèi)，在28℃～30℃下培養(yǎng)3d～4d。⑤細菌的計數(shù)：當菌落數(shù)目穩(wěn)定時，選取菌落數(shù)在________的平板進行計數(shù)。如果測定的平均值為50，則每克樣品中的菌落數(shù)是________。(稀釋度是105)高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修(2)預期結(jié)果：相同稀釋度下，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落數(shù)________(填“多于”或“少于”)無氮培養(yǎng)基上的數(shù)目。原因是________________________________________________________________________________________________________________。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修[破題·分層揭秘密](一)明確解題思路在酒精燈火焰旁倒平板，可以減少雜菌污染。為了保證結(jié)果準確，一般設置3～5個平板，選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)，并取平均值，則每克樣品中的菌落數(shù)為(50÷0.1)×105＝5×107。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對照，以消除無關(guān)變量對實驗結(jié)果的影響，該培養(yǎng)基適合其他細菌生存，所以，它比無氮培養(yǎng)基上的菌落數(shù)目多。[破題·分層揭秘密](二)調(diào)動和運用知識解題(1)①酒精燈火焰旁

③3

1

⑤30～300

5×107(2)多于

無氮培養(yǎng)基上只有土壤中的自生固氮菌生存繁殖，而牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上幾乎允許土壤中所有菌類生存高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修(三)同類互動探究(1)據(jù)上題可知，在稀釋涂布平板法中，為何需涂布三個平板？提示：對照作用、減少實驗誤差等。分析：一是作為對照實驗，判斷實驗操作的準確性；二是作為重復實驗，統(tǒng)計時取平均值，以減少實驗誤差。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修(2)用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目，其結(jié)果與實際值相比如何？提示：比實際值低。分析：培養(yǎng)基上的一個菌落也可能由相連的兩個或多個菌體繁殖而來，因此統(tǒng)計的活菌數(shù)要少于菌體實際值。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修隨堂對點練習隨堂對點練習1.[2012·北京理綜，5]高中生物學實驗中，在接種時不進行嚴格無菌操作對實驗結(jié)果影響最大的一項是()A．將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中B．將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上C．將轉(zhuǎn)基因植物葉片接種到無菌培養(yǎng)基上D．將土壤浸出液涂布在無菌的選擇培養(yǎng)基上1.[2012·北京理綜，5]高中生物學實驗中，在接種時不進答案：C解析：考查微生物的培養(yǎng)和應用，實驗分析能力。將轉(zhuǎn)基因植物葉片接種到無菌培養(yǎng)基上，是進行植物組織培養(yǎng)，必需嚴格的無菌操作，否則會失敗。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修2.飼養(yǎng)動物常用的植物飼料中含有難溶的植酸鈣等物質(zhì)，很難被動物吸收利用，并且影響對其他營養(yǎng)物質(zhì)的利用。若在飼料中添加植酸酶，則能催化其水解成為可以被動物吸收利用的磷酸鹽等。如圖是科研人員從作物根部土壤中分離產(chǎn)生植酸酶的菌株的過程示意圖。請分析作答：2.飼養(yǎng)動物常用的植物飼料中含有難溶的植酸鈣等物質(zhì)，很難被(1)培養(yǎng)基中除了添加植酸鈣以外，應含有________、________、水、無機鹽等基本營養(yǎng)物質(zhì)。(2)為防止雜菌污染，要對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿等進行________，其中，培養(yǎng)基的制備過程中滅菌之前要進行________。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修(3)接種以前進行的一系列操作，目的是在培養(yǎng)皿表面形成________。根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計平板上的________就能大致推測出樣品中的活菌數(shù)。(4)由于植酸鈣不溶解，使培養(yǎng)基形成白色渾濁狀態(tài)。產(chǎn)生植酸酶的菌株會水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域，根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)生植酸酶。實驗結(jié)果顯示A～E五種菌株中，________是產(chǎn)生植酸酶的理想菌株。(3)接種以前進行的一系列操作，目的是在培養(yǎng)皿表面形成___(5)獲得目的菌以后，若要用于植酸酶的生產(chǎn)，還需要進行________。答案：(1)碳源氮源(2)(高壓蒸汽)滅菌調(diào)pH(3)單個菌落菌落數(shù)(4)E(5)擴大培養(yǎng)高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修解析：(1)從土壤中分離培養(yǎng)產(chǎn)生植酸酶的菌株的過程中，培養(yǎng)基中加入植酸鈣，以篩選所需要的微生物，此外還要有充足的碳源和氮源等營養(yǎng)物質(zhì)。(2)實驗的滅菌方法一般有：灼燒滅菌(接種環(huán)、接種針或其他金屬用具)、干熱滅菌(玻璃器皿和金屬用具等)、高壓蒸汽滅菌(培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿)。其中，培養(yǎng)基的制備過程中滅菌之前要調(diào)pH。

解析：(1)從土壤中分離培養(yǎng)產(chǎn)生植酸酶的菌株的過程中，培養(yǎng)基(3)當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。(4)根據(jù)題干提供的信息，E的周圍形成的透明區(qū)域最大，是產(chǎn)生植酸酶的理想菌株。(5)獲得目的菌以后，若要用于植酸酶的生產(chǎn)，還需要進行擴大培養(yǎng)。(3)當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修專題2微生物的培養(yǎng)與應用專題2微生物的培養(yǎng)與應用讀讀教材基礎(chǔ)讀讀教材基礎(chǔ)一、微生物的實驗室培養(yǎng)1．培養(yǎng)基(1)概念：人們按照微生物對________的不同需求，配制出供其生長繁殖的________。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修2．無菌技術(shù)(1)含義：指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法。(2)關(guān)鍵：________。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修(3)措施條件結(jié)果常用的方法消毒較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)________消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學藥劑消毒法滅菌強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子________滅菌、干熱滅菌、________滅菌(3)措施條件結(jié)果常用的方法消毒較為溫和的物理或化學方法僅殺3.純化大腸桿菌以及菌種的保藏(1)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟：計算→稱量→溶化→________→________。(2)純化大腸桿菌①原理：在培養(yǎng)基上將細菌稀釋或分散成________，使其長成單個的菌落，這個菌落就是一個純化的細菌菌落。②方法：________、________。3.純化大腸桿菌以及菌種的保藏(3)菌種的保藏①短期保存：________上4℃保存，菌種易被污染或產(chǎn)生變異。②長期保存：________中－20℃在冷凍箱中保藏。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修為什么在倒平板時，等平板冷卻后要將平板倒置？高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修二、土壤中分解尿素的細菌的分離和計數(shù)1．菌種篩選：使用尿素是唯一氮源的選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)。2．統(tǒng)計菌落數(shù)目：常用方法有________、顯微鏡直接計數(shù)法。3．細菌分離與計數(shù)的實驗流程：土壤取樣→配制________→微生物的培養(yǎng)與觀察→細菌的計數(shù)。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修三、分解纖維素的微生物的分離1．纖維素酶(1)組成：纖維素酶是一種復合酶，它包括___________________________________________________________________________________。(2)作用三、分解纖維素的微生物的分離2．菌種篩選(1)方法：_________________________________。(2)原理2．菌種篩選3．篩選流程土壤取樣：富含________的環(huán)境↓選擇培養(yǎng)：用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的數(shù)量↓梯度稀釋↓涂布平板：將樣品涂布于含CR的鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上↓挑選產(chǎn)生透明圈的菌落：產(chǎn)生________的菌落周圍出現(xiàn)透明圈3．篩選流程一、1.(1)營養(yǎng)物質(zhì)營養(yǎng)基質(zhì)(3)固體培養(yǎng)基2.(2)防止外來雜菌的入侵(3)煮沸灼燒高壓蒸汽3.(1)滅菌倒平板(2)①單個細胞②平板劃線法稀釋涂布平板法(3)①固體斜面培養(yǎng)基②甘油瓶二、2.稀釋涂布平板法3.培養(yǎng)基三、1.(1)C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶2.(1)剛果紅染色法(2)是否產(chǎn)生透明圈3.纖維素纖維素酶[想一想]提示：將平板倒置的目的是防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠滴落到平板上造成污染。一、1.(1)營養(yǎng)物質(zhì)營養(yǎng)基質(zhì)(3)固體培養(yǎng)基21．教材第17頁倒平板操作的討論(1)培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度？可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時，就可以進行倒平板了。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修(2)為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。(3)平板冷凝后，為什么要將平板倒置？平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。(4)在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物。(2)為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？2．教材第18頁平板劃線操作的討論(1)為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。2．教材第18頁平板劃線操作的討論(2)在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。(3)在作第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？劃線后，線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修3．教材第22頁兩位同學用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細菌數(shù)，在對應稀釋倍數(shù)106的培養(yǎng)基中，得到以下兩種統(tǒng)計結(jié)果：1.第一位同學在該濃度下涂布了一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)為230；2.第二位同學在該濃度下涂布了三個平板統(tǒng)計的菌落數(shù)分別為20、200、239，并且取平均值153作為統(tǒng)計結(jié)果。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修第一位同學只涂布了一個平板，沒有設置重復組，因此結(jié)果不具有說服力。第二位同學考慮到設置重復組的問題，涂布了3個平板，但是，其中1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差太遠，說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤，因此，不能簡單地將3個平板的計數(shù)值用來求平均值。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修研研核心要點研研核心要點1．培養(yǎng)基的成分(1)碳源①含義：能提供碳元素的物質(zhì)。②作用：構(gòu)成生物體的物質(zhì)，異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修③主要來源無機物：CO2、NaHCO3。有機物：糖類、脂肪酸、石油、花生粉餅等。(2)氮源①含義：能提供氮元素的物質(zhì)。②作用：合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮代謝產(chǎn)物。③主要來源無機物：N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽。有機物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等。③主要來源(3)生長因子①含義：生長不可少的微量有機物。②作用：酶和核酸的成分。③主要包括：維生素、氨基酸、堿基等。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修(4)水①含量：在生物體內(nèi)含量很高，在低等生物體內(nèi)含量更高。②作用：不僅是優(yōu)良的溶劑，而且可維持生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定。③主要來源：培養(yǎng)基、大氣、代謝產(chǎn)物等。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修(5)無機鹽①含義：為微生物提供除C、H、O以外的各種重要元素，包括大量元素和微量元素。②作用：細胞內(nèi)的組成成分，生理調(diào)節(jié)物質(zhì)；某些化能自養(yǎng)菌的能源、酶的激活劑。③主要來源：培養(yǎng)基、大氣等。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修2．常見的消毒和滅菌方法內(nèi)容種類主要方法應用范圍滅菌灼燒滅菌法酒精燈火焰灼燒微生物接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬用具等，接種過程中試管口或瓶口等干熱滅菌法干熱滅菌箱160℃～170℃加熱1h～2h玻璃器皿(如吸管、培養(yǎng)皿等)、金屬用具等凡不適合用其他方法滅菌而又能耐高溫的物品高壓蒸汽滅菌法121℃維持15min～30min培養(yǎng)基及多種器材、物品消毒巴氏消毒法70℃～75℃煮30min或80℃煮15min牛奶、啤酒、果酒和醬油等不宜進行高溫滅菌的液體煮沸消毒法100℃煮沸5min～6min日常食品、罐裝食品紫外線消毒法紫外線照射30min接種室、接種箱等化學藥物消毒法用體積分數(shù)為70%～75%的酒精、碘酒涂抹，來蘇水噴灑等用于皮膚、傷口、動植物組織表面消毒、手術(shù)器械、塑料或玻璃器皿等2．常見的消毒和滅菌方法內(nèi)容種類主要方法應用范圍滅菌灼燒滅酒自養(yǎng)微生物與異養(yǎng)微生物所需的營養(yǎng)物質(zhì)不同(1)自養(yǎng)微生物所需的碳源、氮源來自含碳、含氮的無機物，而異養(yǎng)微生物需要的碳源、氮源來自含碳、含氮的有機物，因此可根據(jù)培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)判斷微生物的代謝類型。(2)含氮無機物不但能給自養(yǎng)微生物提供氮源，也能作為能源物質(zhì)，提供能量，如NH3既作為硝化細菌的氮源也作為能源。自養(yǎng)微生物與異養(yǎng)微生物所需的營養(yǎng)物質(zhì)不同[師說·一語破天機]該考點在高考中主要考查微生物的消毒和滅菌，在2011年全國課標卷中做了重點考查，預計在2014年高考中還有可能考查。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修[選題·典型中選秀]例1：[2011·新課標全國卷]有些細菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染，某同學欲從污染的土壤中篩選出能高效降解原油的菌株?；卮饐栴}：(1)在篩選過程中，應將土壤樣品稀釋液接種于以________為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修(2)純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即________和________。(3)為了篩選出高效菌株，可比較單菌落周圍分解圈的大小，分解圈大說明該菌株的降解能力________。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修(4)通常情況下，在微生物培養(yǎng)過程中，實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、________和________。無菌技術(shù)要求實驗操作應在酒精燈________附近進行，以避免周圍環(huán)境中微生物的污染。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修[破題·分層揭秘密](一)明確解題思路實驗目的是為了篩選出可以分解原油的高效菌株，因此在篩選的時候選擇培養(yǎng)基的碳源為原油。純化分離微生物的方法有兩種：平板劃線法和稀釋涂布平板法；滅菌的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修(二)調(diào)動和運用知識解題(1)原油選擇(2)平板劃線法稀釋涂布平板法(3)強(4)干熱滅菌高壓蒸汽滅菌火焰高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修(三)同類互動探究(1)若在該培養(yǎng)基中加入青霉素，能更好地起到篩選作用嗎？提示：不能。分析：青霉素培養(yǎng)基往往是真菌選擇培養(yǎng)基，在加青霉素的培養(yǎng)基中，細菌生長被抑制，因而不能篩選出能高效降解原油的菌株(細菌)。(三)同類互動探究(2)細菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理方法，這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌？提示：培養(yǎng)基、手、接種環(huán)。分析：高壓蒸汽滅菌的設備，通常用于培養(yǎng)基的滅菌。用酒精擦拭雙手是消毒的一種方法?；鹧孀茻梢匝杆購氐椎販缇?，適用于微生物的接種工具，如接種環(huán)。(2)細菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種1.原理：在培養(yǎng)基上將細菌稀釋或分散成單個細胞，使其長成單個的菌落，這個菌落就是純化的細菌菌落。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修2．微生物接種方法(1)平板劃線法：平板劃線法中細胞的分離和稀釋過程發(fā)生在接種環(huán)在固體平板表面上的劃線和移動過程中。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成純種的單個菌落。(如下圖)2．微生物接種方法(2)稀釋涂布平板法10倍系列稀釋操作①將分別盛有9mL水的6支試管滅菌，并按101～106的順序編號。②用移液管吸取1mL培養(yǎng)的菌液，注入101倍稀釋的試管中。用手指輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸3次，使菌液與水充分混勻。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修③從101倍稀釋的試管中吸取1mL稀釋液，注入102倍稀釋的試管中，重復②步混勻操作。依次類推，直到完成最后1支試管的稀釋。③從101倍稀釋的試管中吸取1mL稀釋液，注入102倍稀釋平板劃線法純化大腸桿菌時不同階段灼燒接種環(huán)的目的不同(1)第一次操作：殺死接種環(huán)上原有的微生物。(2)每次劃線之前：殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種直接來源于上次劃線的末端。(3)劃線結(jié)束后：殺死接種環(huán)上殘存的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。平板劃線法純化大腸桿菌時不同階段灼燒接種環(huán)的目的不同[師說·一語破天機]本考點內(nèi)容常以環(huán)境污染為背景考查微生物的生存條件及分離、純化和培養(yǎng)條件等，復習中引起關(guān)注。

高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修[選題·典型中選秀]例2：從自然界微生物中篩選某菌種的一般步驟是：采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→性能測定。(1)不同微生物的生存環(huán)境不同，獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化、培養(yǎng)噬鹽菌的菌樣應從________環(huán)境中采集。[選題·典型中選秀](2)富集培養(yǎng)指創(chuàng)設僅適合待分離微生物旺盛生長的特定環(huán)境條件，使其群落中的數(shù)量大大增加，從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。對產(chǎn)耐高溫淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)應選擇________的培養(yǎng)基，并在________條件下培養(yǎng)。(3)接種前要對培養(yǎng)基進行________處理。在整個微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在________條件下進行。

(2)富集培養(yǎng)指創(chuàng)設僅適合待分離微生物旺盛生長的特定環(huán)境條件(4)如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖，請分析接種的具體方法。獲得圖A效果的接種方法是________，圖B效果的接種方法是________。一同學在純化土壤中的細菌時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是________________，應當怎樣操作才可避免此種現(xiàn)象？_______________________________________________。(4)如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果(5)如果探究溫度對纖維素酶活性的影響，自變量是________，應該保持________等不變(至少答兩項)。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修[破題·分層揭秘密](一)明確解題思路(1)篩選菌種應從適于目的菌種生長、繁殖的環(huán)境中尋找，故培養(yǎng)噬鹽菌應從高鹽環(huán)境中采集。(2)富集培養(yǎng)時培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件應能促進目的菌的生長、繁殖。(3)微生物的分離及培養(yǎng)中必須保證無菌，包括培養(yǎng)基的滅菌和操作過程的滅菌等。[破題·分層揭秘密](4)純化培養(yǎng)中接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，前一種方法形成的菌落分布較均勻，后一種方法形成的菌落分布不均勻，先劃線的部分菌落密集甚至相連，后劃線的部分菌落分布稀疏。(5)探究溫度對酶活性的影響時，溫度為自變量，酶活性為因變量，其他變量如底物和酶的用量、pH、反應時間等均為無關(guān)變量。(4)純化培養(yǎng)中接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，前一種(二)調(diào)動和運用知識解題(1)海灘等高鹽(2)以淀粉為唯一碳源高溫(3)高壓蒸汽滅菌

無菌(4)稀釋涂布平板法

平板劃線法

菌液濃度過高

增大稀釋倍數(shù)(或培養(yǎng)過程被雜菌污染

嚴格無菌操作；或用接種環(huán)劃下一區(qū)域前接種環(huán)沒有滅菌

每劃一個新區(qū)域前都要對接種環(huán)進行滅菌處理)(原因與操作要對應)(5)溫度

纖維素的量與濃度、反應時間、pH(二)調(diào)動和運用知識解題(三)同類變式訓練如圖表示平板劃線法分離純化細菌示意圖。根據(jù)所學生物學知識，完成下列問題。(三)同類變式訓練(1)微生物所需的營養(yǎng)成分一般包括________、________、水和無機鹽。(2)培養(yǎng)微生物時，除考慮微生物生長所需的營養(yǎng)外，還要考慮微生物生長所需的溫度、______以及是否需要O2等。(3)對培養(yǎng)基進行滅菌時，多采用________法，而對接種環(huán)或涂布器滅菌時則用________法。(4)平板劃線時，為保證每次劃線都從上次劃線末端的微生物濃度開始，所以每次劃線前都要________，平板劃線結(jié)束后，最后一次劃的線不能與第一次劃的線________。(1)微生物所需的營養(yǎng)成分一般包括________、____(5)脲酶可以將尿素分解為NH3，從而使尿素溶液pH升高，這可用________試劑來檢驗。用纖維素作唯一碳源的培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物，得到的纖維素分解菌中可能還混有________。答案：(1)碳源氮源(2)pH(3)高壓蒸汽滅菌灼燒滅菌(4)對接種環(huán)灼燒滅菌相交(相接、相連、交叉等)(5)酚紅自養(yǎng)微生物(硝化細菌)(5)脲酶可以將尿素分解為NH3，從而使尿素溶液pH升高，這解析：(1)(2)培養(yǎng)基中一般含有水、無機鹽、碳源、氮源等物質(zhì)；培養(yǎng)基中除含有營養(yǎng)物質(zhì)外還需提供適宜的溫度、pH、O2等。(3)培養(yǎng)基常采用高壓蒸汽滅菌，玻璃器皿常采用干熱滅菌，接種環(huán)等金屬器具常采用灼燒滅菌。(4)考查平板劃線法的操作方法，如果劃線相重合則不能分離出純種。(5)酚紅可檢驗堿性溶液，用纖維素作唯一碳源的培養(yǎng)基培養(yǎng)微生物，得到纖維素分解菌，但自養(yǎng)微生物可以利用空氣中的CO2作為碳源，也能生存，需要進一步分離。解析：(1)(2)培養(yǎng)基中一般含有水、無機鹽、碳源、氮源等物1．篩選菌株(1)原則：人為提供有利于目的菌生長的條件，同時抑制或阻止其他微生物的生長。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修(2)菌株篩選原理的比較土壤中分解尿素的細菌分解纖維素的微生物①選擇培養(yǎng)基的成分：尿素作為唯一的氮源②鑒定方法：在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變紅，pH升高，說明細菌能分解尿素①選擇培養(yǎng)基的成分：纖維素作為唯一的碳源②鑒定方法：剛果紅染色法，即剛果紅與纖維素形成紅色復合物，當纖維素被分解后，培養(yǎng)基出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈(2)菌株篩選原理的比較土壤中分解尿素的細菌分解纖維2.統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法(1)顯微鏡直接計數(shù)法①原理：利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。②方法：用計數(shù)板計數(shù)。③缺點：不能區(qū)分死菌與活菌。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修(2)間接計數(shù)法(活菌計數(shù)法)①原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。②計算公式：每克樣品中的菌株數(shù)＝(C÷V)×M，其中，C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)。(2)間接計數(shù)法(活菌計數(shù)法)③操作：設置重復組，增強實驗的說服力與準確性。同時為了保證結(jié)果準確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進行計數(shù)。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修

選擇培養(yǎng)基的選擇方法(1)在培養(yǎng)基中加入某種化學物質(zhì)。例如，加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌；加入高濃度的食鹽可以得到金黃色葡萄球菌。這里的加入是在主要營養(yǎng)成分完整的基礎(chǔ)上加入。(2)改變培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分。例如缺乏氮源時可以分離出固氮微生物；石油作為唯一碳源時，可以分離出消除石油污染的微生物。(3)改變微生物的培養(yǎng)條件。例如，將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境下培養(yǎng)，可以得到耐高溫的微生物。選擇培養(yǎng)基的選擇方法[師說·一語破天機]本部分知識常與前面兩考點綜合在一起考查，單科試卷中多有涉及，理綜考試中多以填空形式出現(xiàn)。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修[選題·典型中選秀]例3：下面是探究如何從土壤中分離自生固氮菌與計數(shù)的實驗，完成下列問題：實驗原理：農(nóng)田的表層土壤中，自生固氮菌的含量比較多。將用表層土壤制成的稀泥漿，接種到無氮培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。在這種情況下，只有自生固氮菌才能生長繁殖。用這種方法，可以將自生固氮菌與其他細菌分離。[選題·典型中選秀]材料用具：農(nóng)田的表層土壤、無氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、盛有9mL無菌水的試管、無菌吸管、無菌涂布器、無菌培養(yǎng)皿、盛有90mL無菌水的錐形瓶、恒溫箱。(1)方法步驟：①倒平板：分別將無氮培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基倒平板，應在________操作。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件-新人教版選修②制備土壤稀釋液：取土樣10g加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中，充分搖勻。用無菌吸管吸取上清液1mL，轉(zhuǎn)至盛有9mL的無菌水的試管中，依次稀釋到107稀釋度。③涂布：按照由107～103稀釋度的順序分別吸取0.1mL進行平板涂布，每個稀釋度下，無氮培養(yǎng)基應至少涂布________個平板，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基涂布________個。高考生物一輪復習-專題2-微生物的培養(yǎng)與應用課件