實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件

實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)1內(nèi)容血清學(xué)檢測:血凝抑制試驗(yàn)?zāi)囼?yàn)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)病原學(xué)檢測聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)內(nèi)容2基本概念●抗原:抗原是指那些能夠誘導(dǎo)機(jī)體的免疫系統(tǒng)發(fā)生免疫應(yīng)答,產(chǎn)生抗體和致敏效應(yīng)淋巴細(xì)胞,并在體內(nèi)外與之特異性結(jié)合,發(fā)生免疫反應(yīng)的物質(zhì)●抗體:是能與相應(yīng)的抗原特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)分子和機(jī)體其他生物大分子一樣是細(xì)胞的產(chǎn)物,分泌到體液中或表現(xiàn)在細(xì)胞表面上抗原、抗體反應(yīng):抗原和抗體在體外的反應(yīng)亦稱血清學(xué)反應(yīng)。基本概念3血凝及血凝抑制試驗(yàn)血凝及血凝抑制試驗(yàn)4試驗(yàn)原理某些病毒或病毒的血凝素,能選擇性的使某種或某幾種動物的紅細(xì)胞發(fā)生凝集,這種凝集紅細(xì)胞的現(xiàn)象稱為血凝(hemagglutination,HA),也稱直接血凝反當(dāng)病毒的懸液中先加入特異性抗體,且這種抗體的量足以抑制病毒顆?；蚱溲貢r,則紅細(xì)胞表面的受體就不能與病毒顆粒或其血凝素直接接觸。這時紅細(xì)胞的凝集現(xiàn)象就被扣制,稱為紅細(xì)胞凝集抑制(hemagglutinationingibition,H)反應(yīng),也稱血凝抑制反應(yīng)。試驗(yàn)原理5試驗(yàn)原理(續(xù))血凝抑制試驗(yàn)可以用于:①應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)病毒懸液測定血清中的相應(yīng)抗體;②應(yīng)用特異性抗體鑒定新分離的病毒測定動物血清中的血凝扣制抗體,必須首先:①滴定病毒或其血凝素對相應(yīng)紅細(xì)胞的血凝效價;②應(yīng)用某種或某幾種方法處理被檢血清,除去其中的非特異性血凝抑制物質(zhì)。試驗(yàn)原理(續(xù))6實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備血凝板o5%-1%的紅細(xì)胞懸液●1oo山微量移液器●PBS或生理鹽水待檢病毒液或檢測抗原●待檢血清及陽性血清實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備7血凝實(shí)驗(yàn)步驟1234678910112)))))))3))PBS(ul紅細(xì)胞懸液(山1)252525252525252525252525注:第12孔為陰性對照,振蕩混勻,于室溫(0℃-25℃)放置4分鐘后判定結(jié)果(如果環(huán)境溫度太高,可置4℃環(huán)境下)。對照孔紅細(xì)胞將呈明顯的紐扣狀沉到孔底血凝實(shí)驗(yàn)步驟8結(jié)果判定將板傾斜,觀察紅細(xì)胞有無成淚滴狀流淌。完全血凝(不流淌)的抗原或病毒最高稀釋倍數(shù)代表一個血凝單位(HAU結(jié)果判定9四單位抗原配置根據(jù)血凝試驗(yàn)結(jié)果配置4HAU抗原。以完全血凝的病毒最高稀釋倍數(shù)作為終點(diǎn),終點(diǎn)稀釋倍數(shù)除以4即為含4HAU抗原的稀釋倍數(shù)。如血凝終點(diǎn)滴度為1:256,則4HAU抗原的稀釋倍數(shù)應(yīng)是1:64(256/4)。四單位抗原配置10實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件11實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件12實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件13實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件14實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件15實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件16實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件17實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件18實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件19實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件20實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件21實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件22實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件23實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件24實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件25實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件26實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件27實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件28實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件29實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件30實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件31實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件32實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件33實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件34實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件35實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件36實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件37實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件38實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件39實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件40實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件41實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件42實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件43實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件44實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件45實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件46實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件47實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件48實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件49實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件50實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件51實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件52實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件53實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件54實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件55實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件56實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件57實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件58實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件59實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件60實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件61實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件62實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)63內(nèi)容血清學(xué)檢測:血凝抑制試驗(yàn)?zāi)囼?yàn)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)病原學(xué)檢測聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)內(nèi)容64基本概念●抗原:抗原是指那些能夠誘導(dǎo)機(jī)體的免疫系統(tǒng)發(fā)生免疫應(yīng)答,產(chǎn)生抗體和致敏效應(yīng)淋巴細(xì)胞,并在體內(nèi)外與之特異性結(jié)合,發(fā)生免疫反應(yīng)的物質(zhì)●抗體:是能與相應(yīng)的抗原特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)分子和機(jī)體其他生物大分子一樣是細(xì)胞的產(chǎn)物,分泌到體液中或表現(xiàn)在細(xì)胞表面上抗原、抗體反應(yīng):抗原和抗體在體外的反應(yīng)亦稱血清學(xué)反應(yīng)?；靖拍?5血凝及血凝抑制試驗(yàn)血凝及血凝抑制試驗(yàn)66試驗(yàn)原理某些病毒或病毒的血凝素,能選擇性的使某種或某幾種動物的紅細(xì)胞發(fā)生凝集,這種凝集紅細(xì)胞的現(xiàn)象稱為血凝(hemagglutination,HA),也稱直接血凝反當(dāng)病毒的懸液中先加入特異性抗體,且這種抗體的量足以抑制病毒顆粒或其血凝素時,則紅細(xì)胞表面的受體就不能與病毒顆?；蚱溲刂苯咏佑|。這時紅細(xì)胞的凝集現(xiàn)象就被扣制,稱為紅細(xì)胞凝集抑制(hemagglutinationingibition,H)反應(yīng),也稱血凝抑制反應(yīng)。試驗(yàn)原理67試驗(yàn)原理(續(xù))血凝抑制試驗(yàn)可以用于:①應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)病毒懸液測定血清中的相應(yīng)抗體;②應(yīng)用特異性抗體鑒定新分離的病毒測定動物血清中的血凝扣制抗體,必須首先:①滴定病毒或其血凝素對相應(yīng)紅細(xì)胞的血凝效價;②應(yīng)用某種或某幾種方法處理被檢血清,除去其中的非特異性血凝抑制物質(zhì)。試驗(yàn)原理(續(xù))68實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備血凝板o5%-1%的紅細(xì)胞懸液●1oo山微量移液器●PBS或生理鹽水待檢病毒液或檢測抗原●待檢血清及陽性血清實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備69血凝實(shí)驗(yàn)步驟1234678910112)))))))3))PBS(ul紅細(xì)胞懸液(山1)252525252525252525252525注:第12孔為陰性對照,振蕩混勻,于室溫(0℃-25℃)放置4分鐘后判定結(jié)果(如果環(huán)境溫度太高,可置4℃環(huán)境下)。對照孔紅細(xì)胞將呈明顯的紐扣狀沉到孔底血凝實(shí)驗(yàn)步驟70結(jié)果判定將板傾斜,觀察紅細(xì)胞有無成淚滴狀流淌。完全血凝(不流淌)的抗原或病毒最高稀釋倍數(shù)代表一個血凝單位(HAU結(jié)果判定71四單位抗原配置根據(jù)血凝試驗(yàn)結(jié)果配置4HAU抗原。以完全血凝的病毒最高稀釋倍數(shù)作為終點(diǎn),終點(diǎn)稀釋倍數(shù)除以4即為含4HAU抗原的稀釋倍數(shù)。如血凝終點(diǎn)滴度為1:256,則4HAU抗原的稀釋倍數(shù)應(yīng)是1:64(256/4)。四單位抗原配置72實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件73實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件74實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件75實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件76實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件77實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件78實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件79實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件80實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件81實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件82實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件83實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件84實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件85實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件86實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件87實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件88實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件89實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件90實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件91實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件92實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件93實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件94實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件95實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件96實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件97實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件98實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件99實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件100實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件101實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件102實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件103實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件104實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件105實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件106實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件107實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件108實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件109實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件110實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件111實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件112實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)習(xí)課件113實(shí)驗(yàn)室檢測常用技術(shù)講解學(xué)