分析化學(xué)下冊課件8hplc

1一、輸液系組成：儲(chǔ)液瓶、高壓輸液泵、過濾器往復(fù)泵結(jié)構(gòu)示第二節(jié)高效液相色譜輸液進(jìn)樣分離檢測HPLC與氣相色譜比氣相色相分析對操作溫HPLC與經(jīng)典液相色譜1一、輸液系組成：儲(chǔ)液瓶、高壓輸液泵、過濾器往復(fù)泵結(jié)構(gòu)示第二節(jié)高效液相色譜輸液進(jìn)樣分離檢測HPLC與氣相色譜比氣相色相分析對操作溫HPLC與經(jīng)典液相色譜比經(jīng)典液相色柱1-3cm（玻璃2-6mm（不銹鋼固定<均勻（球型相驅(qū)動(dòng)方重高壓輸分析時(shí)周期周期效柱效柱效檢測方無 檢檢操作方純手可自動(dòng)第一節(jié)概HC是007HighPerformanceLiquidChromatogra 2（一）紫外-可見檢2（一）紫外-可見檢用于在紫外可見光區(qū)有吸收的樣靈敏對溫度、流速和 四、檢測系紫外可見檢測熒光檢測電化示差折光檢測蒸發(fā)光散射檢測三、分離系統(tǒng)-色譜材料：不銹鋼柱管（耐高壓形狀長度：長10～30cm，內(nèi)徑2～5mm（分析 固定相粒度：1～10m（分析預(yù)保存：沖凈密六通針頭式微孔濾 進(jìn)樣注：樣品需使用微孔濾膜過定量二、進(jìn)樣系統(tǒng)-六通進(jìn)六通閥工作原載樣位置（load）進(jìn)樣位置輸液等度洗脫梯度洗脫輸液泵使用注防止任何固體進(jìn)入泵—— 相過濾 過相不能含腐蝕性物防 相被用不得超過最高3檢測構(gòu)第三節(jié)固定相 一、HPLC類3檢測構(gòu)第三節(jié)固定相 一、HPLC類 液固色吸附色親和色2、二極管陣列檢測（二）紫外-可見檢測器1、可變波長檢測類似紫外可見分4三 （一 相的要求4三 （一 相的要求①不與固定相發(fā)生反②對試樣有一定的溶③必須與檢測器相適④純度⑤粘度⑥使用前，須過濾并2化學(xué)鍵合相特點(diǎn)和使用注意事特使用過程中固定相不流化學(xué)穩(wěn)定性通過改變鍵合官能團(tuán)的類型來改變分離選擇性 相中水相 2-8，避免硅膠溶不同廠家、不同批號(hào)的同一類鍵合相可能有不同的色譜性弱極極性鍵合氨基(≡Si(CH2)3NH2)通常作為正相色譜固定相，也可用于反相色（1）非極性鍵合相（反相色譜鍵合相（C18或ODS）應(yīng)用分離樣品：非極性（一）化學(xué)鍵合將固定液通過化學(xué)反應(yīng)鍵合到載體表面，這樣制得的固定相稱為化載體：硅鍵合相種類：正相、反相、離子交換、手性、親正相鍵合相色 ase,NP）反相鍵合相色 ase,二、固定相（填料液固吸附色譜法-硅膠、高分子微固定液液分配色譜化學(xué)鍵合5一、渦流擴(kuò)散項(xiàng)A=5一、渦流擴(kuò)散項(xiàng)A=HPLC中減小渦流擴(kuò)散的措施第四節(jié)分離條件的選高效液相色譜中的速率理論同氣相色譜理HAB/u梯度洗脫優(yōu)缺改善分離,加快分析速度改善峰形,減少拖尾可能引起基線（三）洗脫方 （二 相的選正相色譜：石油醚、醇類、酮類、酯類、鹵代烷及反相色譜①以水為主體，加入甲醇、乙腈甲醇-水、乙腈②可用弱酸、弱堿或者緩沖鹽調(diào)節(jié)值，抑制組分解離，增 相的過濾-除去過濾方法：使用水相或有機(jī) 相脫方法：超聲波、抽真空、加熱 6三、分離方法的選擇 6三、分離方法的選擇 二、定量分①外標(biāo)②內(nèi)標(biāo)第五節(jié)高效液相色譜分析方一、色譜鑒定保留時(shí)間、保留體積、相對保留值、已知物對化學(xué)鑒定法-收集柱后餾聯(lián)用HPLC合適的分離條件粒度、均勻的球形化學(xué)鍵合②低