艾滋病實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理

（優(yōu)選）艾滋病實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理第一頁(yè)，共五十七頁(yè)。一、質(zhì)量保證(QA）質(zhì)量保證是指從接收樣本起，到實(shí)驗(yàn)室發(fā)出報(bào)告止，為確保實(shí)驗(yàn)室最終報(bào)告結(jié)果的正確性所進(jìn)行的全過(guò)程，包括采取各種行政和技術(shù)上的措施和方法。第二頁(yè)，共五十七頁(yè)。行政支持（行政部門(mén)關(guān)心實(shí)驗(yàn)室發(fā)展、建設(shè)，人員穩(wěn)定，足夠經(jīng)費(fèi)）人員培訓(xùn)（新人員上崗前培訓(xùn)獲得合格證書(shū)，接受復(fù)訓(xùn)，篩查實(shí)驗(yàn)室人員至少2年一次。檢測(cè)人員應(yīng)分為檢驗(yàn)人、復(fù)核人、簽發(fā)人。復(fù)核人和簽發(fā)人應(yīng)具備對(duì)檢測(cè)過(guò)程進(jìn)行分析和解決問(wèn)題的能力）環(huán)境條件（實(shí)驗(yàn)室設(shè)置、建筑、設(shè)備符合要求）標(biāo)本采集、運(yùn)送和處理檢測(cè)方法和試劑的選擇設(shè)備維護(hù)與校準(zhǔn)（酶標(biāo)儀、移液器、高壓滅菌器、溫度計(jì)等）文件和文件管理第三頁(yè)，共五十七頁(yè)。檢測(cè)方法和試劑的選擇使用經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)批準(zhǔn)的試劑，選擇敏感性高，特異性好的，根據(jù)參比室組織的國(guó)家級(jí)艾滋病診斷試劑臨床質(zhì)量評(píng)價(jià)各實(shí)驗(yàn)室更換試劑批號(hào)時(shí)，應(yīng)進(jìn)行平行試驗(yàn)所有試劑盒要嚴(yán)格按照要求條件保存。第四頁(yè)，共五十七頁(yè)。設(shè)備維護(hù)與校準(zhǔn)第五頁(yè)，共五十七頁(yè)。目前常用的艾滋病檢測(cè)設(shè)備類(lèi)安全類(lèi)：生物安全柜、洗眼器、普通冰箱、超低溫冰箱、高壓滅菌器。檢測(cè)類(lèi)：微量加樣器、搖擺平臺(tái)、全自動(dòng)蛋白印跡儀、普通離心機(jī)、震蕩器、移液器、恒溫水浴、酶標(biāo)儀+洗板機(jī)、病毒載量?jī)x、流式細(xì)胞儀其它：計(jì)算機(jī)、空調(diào)第六頁(yè)，共五十七頁(yè)。規(guī)范化管理的意義遵照《全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范》、《全國(guó)艾滋病檢測(cè)工作管理辦法》。檢測(cè)質(zhì)量保證延長(zhǎng)設(shè)備的使用時(shí)間便于設(shè)備的管理節(jié)約資源第七頁(yè)，共五十七頁(yè)。HIV實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備維護(hù)日常維護(hù)定期檢定和校準(zhǔn)第八頁(yè)，共五十七頁(yè)。設(shè)備對(duì)環(huán)境的普通要求電源：電壓一定要匹配，插線板合適，專(zhuān)用的.經(jīng)常停電或電壓不穩(wěn)的實(shí)驗(yàn)室，建議配備穩(wěn)壓器和不間斷電源環(huán)境：清潔，溫、濕度合適良好通風(fēng)長(zhǎng)時(shí)間不用的設(shè)備，注意特別容易壞第九頁(yè)，共五十七頁(yè)。酶標(biāo)儀第十頁(yè)，共五十七頁(yè)。移液器的檢定一年至少檢定一次需檢定的原因-經(jīng)常使用-要求高的準(zhǔn)確性第十一頁(yè)，共五十七頁(yè)。超低溫冰箱定期清理灰塵過(guò)濾器（建議每月一次）

第十二頁(yè)，共五十七頁(yè)。超低溫冰箱注意事項(xiàng)要求環(huán)境溫度控制在28度以下空間的清潔穩(wěn)定的電源供應(yīng)不宜放得太擠第十三頁(yè)，共五十七頁(yè)。生物安全柜HEPA-過(guò)濾裝置容納有害生物氣體。需提供人員保護(hù)也為產(chǎn)品提供保護(hù)(按等級(jí)而定)二級(jí)生物安全柜第十四頁(yè)，共五十七頁(yè)。生物安全柜的維護(hù)每年檢定一次安全柜保持所有操作在窗扇4英寸以內(nèi)清潔物質(zhì)和污染物隔離開(kāi)，減少相互干擾使用后及時(shí)清理柜內(nèi)不宜放太多的物品，不能儲(chǔ)藏化學(xué)物質(zhì)第十五頁(yè)，共五十七頁(yè)。離心機(jī)的維護(hù)第十六頁(yè)，共五十七頁(yè)。轉(zhuǎn)頭、套桶第十七頁(yè)，共五十七頁(yè)。使用離心機(jī)的注意事項(xiàng)離心力、離心速度平穩(wěn)的儀器臺(tái)不用時(shí)，松轉(zhuǎn)頭；使用時(shí)，擰緊轉(zhuǎn)子保持平衡使用安全：蓋子要嚴(yán)使用后要擦干或開(kāi)蓋至晾干防止液體泄漏到腔內(nèi)第十八頁(yè)，共五十七頁(yè)。高壓滅菌器第十九頁(yè)，共五十七頁(yè)。滅菌器的維護(hù)壓力表需要定期檢驗(yàn)（一年兩次）等氣壓和溫度下降到正常后,再開(kāi)閥高壓時(shí),放入指示紙,以便判定滅菌效果第二十頁(yè)，共五十七頁(yè)。設(shè)備的檢定和校準(zhǔn)

對(duì)檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性和有效性有影響的儀器設(shè)備必須進(jìn)行檢定和校準(zhǔn)。

有國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程的儀器設(shè)備，由法定計(jì)量檢定機(jī)構(gòu)或經(jīng)計(jì)量行政部門(mén)授權(quán)的技術(shù)機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢定；

沒(méi)有國(guó)家檢定規(guī)程的，可以由廠家、自行檢定和校準(zhǔn)。第二十一頁(yè)，共五十七頁(yè)。制訂儀器設(shè)備檢定計(jì)劃。經(jīng)檢定的儀器設(shè)備校驗(yàn)結(jié)果貼上標(biāo)志：合格標(biāo)志為綠色、準(zhǔn)用標(biāo)志為黃色、停用標(biāo)志為紅色。凡檢定不合格或超過(guò)檢定有效期的儀器設(shè)備，一律不得用于檢驗(yàn)工作。對(duì)超過(guò)檢定期，但暫時(shí)不用的儀器設(shè)備，貼上停用標(biāo)志。

第二十二頁(yè)，共五十七頁(yè)。強(qiáng)制檢定的工作計(jì)量器具目錄

HIV檢測(cè)強(qiáng)制檢定儀器：加樣器、酶標(biāo)儀、溫度計(jì)、高壓滅菌器

第二十三頁(yè)，共五十七頁(yè)。強(qiáng)制檢定的周期，由執(zhí)行強(qiáng)制檢定的計(jì)量檢定機(jī)構(gòu)根據(jù)計(jì)量檢定規(guī)程確定。

屬于強(qiáng)制檢定的工作計(jì)量器具，未按照本辦法規(guī)定申請(qǐng)檢定或者經(jīng)檢定下合格的，任何單位或者個(gè)人不得使用。

第二十四頁(yè)，共五十七頁(yè)。文件及文件管理

1.標(biāo)準(zhǔn)操作程序

(SOP)

2.實(shí)驗(yàn)原始記錄表

3.結(jié)果報(bào)告

4.樣品登記和保存

5.文件存檔

第二十五頁(yè)，共五十七頁(yè)。

1.標(biāo)準(zhǔn)操作程序

(SOP)

艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室要建立覆蓋主要工作內(nèi)容的SOP文件。

SOP由各崗位工作人員起草，實(shí)驗(yàn)室主任審定，并應(yīng)定期修訂。修訂應(yīng)該在實(shí)驗(yàn)室主管人員的領(lǐng)導(dǎo)下進(jìn)行，每年至少一次。所有工作人員要在所從事工作的SOP文件上簽名表示已經(jīng)閱讀并掌握了有關(guān)內(nèi)容。.第二十六頁(yè)，共五十七頁(yè)。艾滋病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立以下SOP1、樣品的接收、登記、處理、保存和運(yùn)輸2、檢測(cè)方法和步驟3、試劑使用方法和保存4、儀器的使用維護(hù)和校準(zhǔn)5、實(shí)驗(yàn)中的質(zhì)量控制要求及程序6、結(jié)果解釋與報(bào)告7、保密程序8、實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)、相關(guān)文件記錄與保存9、不確定樣本的追蹤和處理10、實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)及實(shí)驗(yàn)室的的清理和消毒11、職業(yè)暴漏第二十七頁(yè)，共五十七頁(yè)。SOP通常包括以下內(nèi)容（1）標(biāo)題和編號(hào)（2）編寫(xiě)和修改日期（3）編寫(xiě)和修訂人員姓名（4）方法、目的和應(yīng)用范圍（5）相應(yīng)的職業(yè)規(guī)范（6）檢測(cè)設(shè)備和試劑（7）安全防護(hù)相關(guān)步驟（8）結(jié)果的解釋和報(bào)告（9）附錄（包括相關(guān)的附加文件如標(biāo)準(zhǔn)表格、設(shè)備和試劑盒說(shuō)明書(shū)等。）

第二十八頁(yè)，共五十七頁(yè)。寫(xiě)你所做的做你所寫(xiě)的第二十九頁(yè)，共五十七頁(yè)。2、實(shí)驗(yàn)原始記錄表

應(yīng)按實(shí)驗(yàn)要求，設(shè)計(jì)操作的原始記錄表，標(biāo)明空白對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照、外部對(duì)照以及待檢樣品的位置，便于指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)人員加樣。要注明試劑廠家、測(cè)定方法、批號(hào)、有效期、操作人員和復(fù)核人員姓名及檢測(cè)日期。

第三十頁(yè)，共五十七頁(yè)。ELISA原始記錄快速原始記錄表實(shí)驗(yàn)室樣本交接記錄08高壓滅菌器.實(shí)驗(yàn)室所有設(shè)備的使用記錄和維護(hù)記錄第三十一頁(yè)，共五十七頁(yè)。

3、結(jié)果報(bào)告分析結(jié)果及發(fā)出檢測(cè)報(bào)告前，應(yīng)注意須在試劑盒及外部質(zhì)控結(jié)果滿足要求的前提下，對(duì)樣品進(jìn)行分析。試劑盒及外部質(zhì)控不合格，樣品需要重新檢測(cè)復(fù)核人對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行仔細(xì)復(fù)核并對(duì)結(jié)果提出結(jié)論簽發(fā)人對(duì)試驗(yàn)結(jié)論進(jìn)行審核、分析、總結(jié)、簽字第三十二頁(yè)，共五十七頁(yè)。4、樣品登記和保存

收到樣品后，建立唯一編碼，及時(shí)登記有關(guān)信息，包括受檢者姓名或代號(hào)、試管編號(hào)、性別、職業(yè)、送檢單位、人群類(lèi)別、檢測(cè)結(jié)果、送檢日期、報(bào)告日期、通訊地址第三十三頁(yè)，共五十七頁(yè)。5、文件存檔

實(shí)驗(yàn)原始記錄表、打印數(shù)據(jù)、膜反應(yīng)條帶或其照片、檢測(cè)記錄表、標(biāo)本登記、標(biāo)本保存記錄以及儀器設(shè)備維修和校準(zhǔn)記錄等都應(yīng)該妥善存檔保存10年以上。最好同時(shí)使用計(jì)算機(jī)保存各種文件和記錄。

第三十四頁(yè)，共五十七頁(yè)。二、質(zhì)量控制(QC)p15

質(zhì)量控制是指為確保實(shí)驗(yàn)工作正常進(jìn)行而在每一步實(shí)驗(yàn)過(guò)程中必須采取的各種措施。是對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的即時(shí)性評(píng)價(jià)，通過(guò)對(duì)質(zhì)控結(jié)果的連續(xù)觀察，監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室結(jié)果的精密性。第三十五頁(yè)，共五十七頁(yè)。

（一）抗體檢測(cè)的統(tǒng)計(jì)學(xué)室內(nèi)質(zhì)量控制

在所有實(shí)驗(yàn)中必須包含有試劑盒內(nèi)部對(duì)照質(zhì)控血清和室內(nèi)質(zhì)控品（外部對(duì)照質(zhì)控血清）。1、試劑盒內(nèi)部對(duì)照質(zhì)控品即為試劑盒內(nèi)提供的陽(yáng)性和陰性對(duì)照血清。試劑盒內(nèi)部對(duì)照用于判斷每次實(shí)驗(yàn)的有效性，但不能做為室內(nèi)質(zhì)控品使用。內(nèi)部對(duì)照是質(zhì)量控制的基礎(chǔ)。每一次檢測(cè)必須使用內(nèi)部對(duì)照，而且只能在同批號(hào)的試劑盒中使用。內(nèi)部對(duì)照結(jié)果無(wú)效必須重新實(shí)驗(yàn)。

第三十六頁(yè)，共五十七頁(yè)。2、室內(nèi)質(zhì)控品（外部對(duì)照）為非試劑盒組份的外部質(zhì)控品，是為了監(jiān)控檢測(cè)的重復(fù)性而設(shè)置的，包括強(qiáng)陽(yáng)性、弱陽(yáng)性和陰性質(zhì)控血清。也可以只設(shè)置一個(gè)弱陽(yáng)性質(zhì)控，以該試劑盒臨界值（cutoff）的2-3倍為宜。外部質(zhì)控品的作用是，判斷該批臨床樣本檢測(cè)的有效性，因此，每次實(shí)驗(yàn)必須包含室內(nèi)質(zhì)控品，其結(jié)果無(wú)效，必須重新實(shí)驗(yàn)。室內(nèi)質(zhì)控品可以是商品或?qū)嶒?yàn)室自行制備第三十七頁(yè)，共五十七頁(yè)。室內(nèi)質(zhì)控品的保存

（1）按一周實(shí)驗(yàn)用量分裝、分類(lèi)、標(biāo)記、封口、-20℃凍存。

（2）外部對(duì)照血清不可反復(fù)凍融，一旦融化后應(yīng)該存放2-8℃，一周內(nèi)使用。第三十八頁(yè)，共五十七頁(yè)。3、室內(nèi)質(zhì)控品的使用每一次實(shí)驗(yàn)必須使用室內(nèi)質(zhì)控品，以便監(jiān)控實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性。同時(shí)可以了解各批試劑盒的批間差異或孔間差異，繪制質(zhì)量控制圖。

第三十九頁(yè)，共五十七頁(yè)。統(tǒng)計(jì)室內(nèi)質(zhì)控的主要方法----

建立質(zhì)控圖最常用的質(zhì)控圖是Levey-Jennings質(zhì)控圖，該圖使用累計(jì)和技術(shù)或趨勢(shì)分析技術(shù)的圖形提供系統(tǒng)偏移和漂移的狀況。下面以ELISA方法檢測(cè)HIV抗體為例，描述建立質(zhì)控圖步驟：第四十頁(yè)，共五十七頁(yè)。（二）質(zhì)控圖的建立及應(yīng)用

1.建立質(zhì)控圖參數(shù)2.繪制質(zhì)控圖3.質(zhì)控圖的判斷和分析4.繪制和分析質(zhì)控圖的要點(diǎn)5.變異系數(shù)（CV）分析6.灰區(qū)

第四十一頁(yè)，共五十七頁(yè)。1、建立質(zhì)控圖參數(shù)

（1）算術(shù)平均值(x)代表一組S/CO值的平均值。為了統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性意義，應(yīng)該采用至少20次(天)所測(cè)得的外部對(duì)照質(zhì)控血清S/CO值結(jié)果計(jì)算出平均值。（2）標(biāo)準(zhǔn)差(s)是描述樣本與均數(shù)之間離散程度的一個(gè)指標(biāo)，是與對(duì)照值的均值有關(guān)的預(yù)期范圍。一組S/CO值的標(biāo)準(zhǔn)差以s表示。

第四十二頁(yè)，共五十七頁(yè)。

（3）控制限：外部對(duì)照S/CO值的±2s

（4）變異系數(shù)(cv)，是反映各次S/CO值相對(duì)于均值離散程度的一個(gè)指標(biāo)，可以用來(lái)衡量檢測(cè)的重復(fù)性或精密度。

第四十三頁(yè)，共五十七頁(yè)。計(jì)算公式為：

Σx

x=──

n

s

計(jì)算公式為：───────

∑(xn-x)2

s=───────

n-1

cv

計(jì)算公式為：

s

cv=──x100%

x

第四十四頁(yè)，共五十七頁(yè)。2、繪制質(zhì)控圖

質(zhì)控圖是把檢測(cè)數(shù)據(jù)與計(jì)算出的“控制限”進(jìn)行比較的圖，包含一條中心橫線和其上、下兩條平行的控制線，并有按時(shí)間順序點(diǎn)入的質(zhì)控血清測(cè)定值。

第四十五頁(yè)，共五十七頁(yè)。質(zhì)控圖的繪制步驟是

（1）在常規(guī)條件下，對(duì)同一批血清連續(xù)測(cè)定20次（天）或以上，獲得一組S/CO值，求均數(shù)(x)和標(biāo)準(zhǔn)差(s),超出2s或3s的數(shù)據(jù)不應(yīng)刪除。

（2）將均值(x)和標(biāo)準(zhǔn)差(s)分別在質(zhì)控框架圖中標(biāo)示出來(lái)。以S/CO值作縱座標(biāo)(Y軸)，每一次(天)試驗(yàn)作橫座標(biāo)(x軸)，繪制質(zhì)控圖。

第四十六頁(yè)，共五十七頁(yè)。 （3）從第21次起，將每次檢測(cè)的質(zhì)控血清的結(jié)果依次點(diǎn)入該質(zhì)控框架圖中，檢驗(yàn)進(jìn)入質(zhì)控狀態(tài)。

第四十七頁(yè)，共五十七頁(yè)。質(zhì)控圖第四十八頁(yè)，共五十七頁(yè)。3、質(zhì)控圖的判定和分析

（1）告警：外部對(duì)照的S/CO值超出±2s，系統(tǒng)處于告警狀態(tài)，應(yīng)予以注意，是否可以繼續(xù)檢測(cè)需要進(jìn)一步觀察。

(2)失控：外部對(duì)照的S/CO值超出±3s，稱(chēng)為失控，則本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能被接受?？赡苁窍到y(tǒng)誤差或外部對(duì)照滴度下降造成。

（3）移漂：連續(xù)幾個(gè)（3-5次）外部對(duì)照S/CO值都落在均值的一側(cè)則稱(chēng)為位移，提示實(shí)驗(yàn)條件發(fā)生了較大的變化。應(yīng)重新繪制質(zhì)控圖。

（4）趨勢(shì)：連續(xù)幾個(gè)（5-7個(gè)）外部對(duì)照質(zhì)控血清S/CO值幾乎按一個(gè)方向分布時(shí)稱(chēng)為趨勢(shì)，通常由參數(shù)的緩慢改變引起。

第四十九頁(yè)，共五十七頁(yè)。4、繪制和分析質(zhì)控圖的要點(diǎn)

（1）要在最佳條件下建立質(zhì)控圖參數(shù)。

（2）用S/CO比值繪制質(zhì)控圖。

（3）由專(zhuān)人負(fù)責(zé)建立質(zhì)控圖，每月定期召開(kāi)質(zhì)控分析會(huì)，討論本月的質(zhì)量控制情況。每次檢測(cè)之前都應(yīng)了解質(zhì)控結(jié)果。

（4）建議長(zhǎng)期和穩(wěn)定地使用一種質(zhì)量好的試劑盒。

第五十頁(yè)，共五十七頁(yè)。（5）更換不同廠家的試劑盒后，必須重新繪制質(zhì)控圖。改用新批號(hào)試劑盒如結(jié)果偏離較大也應(yīng)重新制作質(zhì)控圖。使用新批號(hào)或不同廠家的試劑盒必須在質(zhì)控圖上注明使用日期。

（6）如發(fā)現(xiàn)質(zhì)控值劇烈位移或失控，應(yīng)填寫(xiě)報(bào)告單，上交質(zhì)量負(fù)責(zé)人，分析原因并決定是否發(fā)出檢測(cè)報(bào)告。

（7）使用新批次的外部對(duì)照質(zhì)控血清時(shí)，必須重新繪制質(zhì)控圖。

（8）及時(shí)發(fā)現(xiàn)質(zhì)控結(jié)果失