臨床實驗室室內(nèi)質(zhì)量控制精講課件

結(jié)合PCR實驗室分析相關(guān)“質(zhì)量管理”.結(jié)合PCR實驗室.1質(zhì)量管理

Qualitycontrol臨床實驗室為了保證檢驗結(jié)果實事求是的反映客觀存在而建立的操作程序體系分析前分析后分析中影響因素.質(zhì)量管理

Qualitycontrol臨床實驗室為了保證檢2標(biāo)本檢驗結(jié)果的誤差我們往往過分緊盯檢驗人員“實驗過程”（分析中）的質(zhì)量情況！1043.....標(biāo)本檢驗結(jié)果的誤差我們往往過分緊盯檢驗人員“實驗過程”（分析3實驗前期過程復(fù)雜、涉及面廣，不受控制分析前疾病診斷及檢驗項目選擇正確性1.檢驗項目選擇2.采集標(biāo)本采血容器用錯、內(nèi)各種抗凝劑、促凝劑、表面活性劑及一些微量金屬壓脈帶綁扎過久、采血量、采血器材選擇除非生產(chǎn)商另有說明，否則無論何種采血管應(yīng)緩慢倒轉(zhuǎn)所有含添加劑的采血管（枸櫞酸鈉除外）至少5-10次，含枸櫞酸鈉的采血管應(yīng)倒轉(zhuǎn)3-4次離心前樣品應(yīng)凝固，不建議挑除血凝塊。若凝固時間不夠長，纖維蛋白形成可影響多個儀器系統(tǒng)，導(dǎo)致結(jié)果偏差，可選用含促凝劑的采血管加快凝血?！酒胀ü苁覝兀?0-25℃）30-60分完全凝血，溫度低或冷藏則時間延長】除非文獻(xiàn)中建議，否則不冷藏全血樣品，因為冷藏樣品抑制血細(xì)胞代謝，穩(wěn)定了某些熱不穩(wěn)定性組分。除非有確鑿證據(jù)說明長時間接觸不會導(dǎo)致結(jié)果偏差，否則應(yīng)盡快用物理方法分離血清或血漿與細(xì)胞。分離的血漿/血清①室溫下保存時間不可超過8小時②若在8小時內(nèi)無法完成檢測，則應(yīng)（2-8攝氏度）冷藏血清/血漿③48小時內(nèi)無法完成檢測則血清/血漿應(yīng)-20攝氏度下冷凍保存送檢標(biāo)本質(zhì)量缺陷的隱蔽性4.標(biāo)本運送血液尿液護(hù)士是否按前述規(guī)則操作？①前段、中段、末段有區(qū)別②3小時前與3小時后結(jié)果有變化3.標(biāo)本處理除非有經(jīng)驗證明的文獻(xiàn)指出偏離標(biāo)準(zhǔn)不會影響結(jié)果，否則應(yīng)嚴(yán)格遵守生產(chǎn)商的指南.實驗前期過程復(fù)雜、涉及面廣，不受控制分析前疾病診斷及檢驗項目4綜上我想到的……我們工作中應(yīng)注意采血管類型，不要用錯。普通采血管應(yīng)待血液完全凝固后，有添加劑的采血管按類型搖勻相應(yīng)次數(shù)，靜置一定時間(約30分），按要求迅速離心，分離出血清/血漿，按實際情況分揀：馬上要檢測的，該冷藏的，該冷凍的，要做出相應(yīng)處理。采血管最好不要放置到最后統(tǒng)一離心處理。除非有要求，否則不冷藏，更不可過夜??！我想如果有一個小型便捷的離心機(jī)，放在采血口旁邊，能很好的完成這些。分離出的血清/血漿完成檢測期限：⑴室溫放置應(yīng)在8小時以內(nèi)。⑵冷藏放置應(yīng)在48小時內(nèi)。⑶而48小時以外需-20℃冷凍保存。⑷我們科產(chǎn)篩一周檢測一次，標(biāo)本是冷凍保存的；我們的優(yōu)生系列、九聯(lián)檢的標(biāo)本也應(yīng)該冷凍保存；而染色體冷藏時間越長肯定會越難培養(yǎng)。⑸巨細(xì)胞尿液、乳汁標(biāo)本；手足口、STD、HPV分泌物標(biāo)本因為有細(xì)胞培養(yǎng)液，可冷藏保存。.綜上我想到的……我們工作中應(yīng)注意采血管類型，不要用錯。.5分析中-1硬件設(shè)備和技術(shù)對實驗室未來關(guān)系重大（不進(jìn)則退）RT-PCR（實時熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）針對病原體DNA特異保守核酸序列進(jìn)行擴(kuò)增實時熒光核酸恒溫擴(kuò)增檢測技術(shù)（SAT技術(shù)上海仁度）上海仁度由美籍華裔科學(xué)家與國內(nèi)企業(yè)家共同創(chuàng)建，擁有核酸診斷技術(shù)自主知識產(chǎn)權(quán)RNA擴(kuò)增技術(shù)（針對單鏈RNA目標(biāo)序列）轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)的擴(kuò)增技術(shù)（TMA技術(shù)）【美國HOLOGICGen-Probe公司】.分析中-1硬件設(shè)備和技術(shù)對實驗室未來關(guān)系重大（不進(jìn)則退）RT6ＲＮＡ擴(kuò)增檢測技術(shù)國外，ＲＮＡ已超過ＤＮＡ技術(shù)成為病原體診斷主流美國85%頂級醫(yī)院使用RNA擴(kuò)增技術(shù)檢測優(yōu)生系列的CT/NG（定性檢測）。HOLOGICGen-Probe公司的TMA(APTIMACombo2),是目前市場上最好的

CT/NG檢測產(chǎn)品，無競爭對手。TMA用于CT/NG的檢測是目前行業(yè)公認(rèn)的“金標(biāo)準(zhǔn)”。新方法學(xué)CT/NG的產(chǎn)品臨床試驗都必須選擇TMA做參比試劑。在國內(nèi)，由于價格昂貴開展使用的醫(yī)院少，還未發(fā)展起來北京—北京協(xié)和醫(yī)院＼北大三院＼北大醫(yī)院＼北京兒童醫(yī)院。上海—上海瑞金醫(yī)院＼上海長征醫(yī)院＼上海復(fù)旦婦產(chǎn)科醫(yī)院＼上海兒童醫(yī)學(xué)中心。廣州—中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院＼中山大學(xué)附屬三院＼南方醫(yī)院＼廣州市婦女兒童中心＼廣州軍區(qū)總院。.ＲＮＡ擴(kuò)增檢測技術(shù)國外，ＲＮＡ已超過ＤＮＡ技術(shù)成為病原體診斷7

ＲＮＡＶＳＤＮＡ.ＲＮＡＶＳＤＮＡ.8PCR93℃解鏈變性（解螺旋單鏈）55℃退火（復(fù)性）引物延伸用帶熒光的探針與產(chǎn)物結(jié)合，機(jī)器讀熒光值，計算產(chǎn)物濃度.PCR93℃解鏈變性55℃退火引物延伸用帶熒光的探針與產(chǎn)物結(jié)9PCR溫度曲線圖變性延伸退火.PCR溫度曲線圖變性延伸退火.10SAT的優(yōu)勢（RNA擴(kuò)增）同一溫度下，首先通過M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶產(chǎn)生靶標(biāo)核酸（RNA）的一個雙鏈DNA拷貝；然后利用T7

RNA多聚酶從該DNA拷貝上產(chǎn)生多個（100～1000個）RNA拷貝；每一個RNA拷貝再從反轉(zhuǎn)錄開始進(jìn)入下一個擴(kuò)增循環(huán)；帶有熒光標(biāo)記的探針和這些RNA拷貝特異結(jié)合，產(chǎn)生熒光；機(jī)器讀取熒光值計算產(chǎn)物濃度。ＲＮＡ恒溫擴(kuò)增原理圖.SAT的優(yōu)勢（RNA擴(kuò)增）ＲＮＡ恒溫擴(kuò)增原理圖.11SAT技術(shù)優(yōu)勢一、先進(jìn)的恒溫擴(kuò)增技術(shù)

擴(kuò)增在一個溫度下進(jìn)行（42℃），無需熱循環(huán)。二、領(lǐng)先的

RNA

檢測技術(shù)SAT

技術(shù)直接以病原體特異性RNA為擴(kuò)增靶標(biāo)，以擴(kuò)增產(chǎn)物RNA為檢測靶標(biāo)，因RNA的存在時間段，對活動性進(jìn)行感染有診斷意義。三、更高的檢測靈敏度和準(zhǔn)確性SAT技術(shù)的擴(kuò)增效率極高，15～30分鐘即可將模板擴(kuò)增109倍，檢測靈敏度和準(zhǔn)確性遠(yuǎn)高于其他核酸檢測技術(shù)

。四、有效減少假陰性結(jié)果SAT技術(shù)采用M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶和T7

RNA多聚酶進(jìn)行核酸擴(kuò)增，相對于其它核酸擴(kuò)增技術(shù)，反應(yīng)抑制物更少，有效減少假陰性結(jié)果。五、有效的解決了擴(kuò)增產(chǎn)物的污染問題擴(kuò)增產(chǎn)物的污染是核酸檢測的控制難點。SAT技術(shù)采用實時熒光閉管檢測，使污染得到有效控制；即使污染產(chǎn)生，由于擴(kuò)增產(chǎn)物為RNA

，環(huán)境中極易降解，從而大幅度提高檢測結(jié)果的可靠性。

六、大大降低了核酸擴(kuò)增實驗室的要求.SAT技術(shù)優(yōu)勢一、先進(jìn)的恒溫擴(kuò)增技術(shù)

.12一、實踐經(jīng)驗告訴我們，實驗室要高效、準(zhǔn)確的完成各種繁重的工作任務(wù)，僅僅依靠領(lǐng)導(dǎo)和共產(chǎn)黨員的模范帶頭作用是不夠的，必須依靠科學(xué)管理，將人力資源進(jìn)行科學(xué)分配，實施全員崗位責(zé)任制，科主任起領(lǐng)導(dǎo)、管理的作用，而不是忙于日常事務(wù)，忙于每天替班、接班。二、臨床實驗室現(xiàn)在面臨一個矛盾：“檢驗質(zhì)量”和“經(jīng)濟(jì)支出”，若單純追求經(jīng)濟(jì)效益使用價廉質(zhì)差的試劑、材料、質(zhì)控品、標(biāo)準(zhǔn)品，必然造成檢驗質(zhì)量的下降，肯定是不對。經(jīng)濟(jì)支出管理的原則是——以保證檢驗質(zhì)量為前提，其次是經(jīng)濟(jì)效益。三、質(zhì)控品和標(biāo)準(zhǔn)品的選擇是影響檢驗質(zhì)量核心和關(guān)鍵，不能以次充好，做“室內(nèi)質(zhì)控”和“室間質(zhì)評”無論做多少次，也不得巧立名目亂收費。分析中-2在實驗室中人的重要性-人力資源管理.一、實踐經(jīng)驗告訴我們，實驗室要高效、準(zhǔn)確的完成各種繁重的工作13正態(tài)分布在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中有許多變量的頻數(shù)分布是中間（靠近平均數(shù)）的頻數(shù)多，兩邊的頻數(shù)少，越靠近平均數(shù)，越符合正常的機(jī)率高，而且左右對稱，此種分布叫做正態(tài)分布。那么醫(yī)學(xué)衛(wèi)生工作中又有許多指標(biāo)近似服從正態(tài)分布，相應(yīng)的我們實驗室中所測樣本數(shù)據(jù)中的隨機(jī)誤差等也服從正態(tài)分布（這是實驗室做質(zhì)量控制，將隨機(jī)誤差控制在均數(shù)加減N倍標(biāo)準(zhǔn)差范圍內(nèi)的理論基礎(chǔ)）還有一些數(shù)據(jù)雖不服從正態(tài)分布，但可以通過轉(zhuǎn)換，如求對數(shù)log值轉(zhuǎn)換后服從正態(tài)分布，被稱為對數(shù)正態(tài)分布，實驗室所測樣品不論單位是IU/ml或Copies/ml，濃度均較高，不容易計算，故都經(jīng)log轉(zhuǎn)換后再分析。.正態(tài)分布在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中有許多變量的頻數(shù)分布14平均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)描述定量資料分布規(guī)律的指標(biāo)有三類一類是：平均數(shù)X（集中趨勢）一類是：標(biāo)準(zhǔn)差S（離散趨勢）一類是變異系數(shù)CV%.變異系數(shù)CV=（標(biāo)準(zhǔn)差S÷平均值X）×100%

——.平均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)描述定量資料分布規(guī)律的指標(biāo)有三類15平均數(shù)X的公式是：所有樣本數(shù)據(jù)之和（∑x）除以樣本個數(shù)n.它是用來描述一組資料的集中趨勢的。算數(shù)平均數(shù)X：——.平均數(shù)X的公式是：所有樣本數(shù)據(jù)之和（∑x）除以樣本個數(shù)n.算16標(biāo)準(zhǔn)差S是怎么來的：

S是用來表示樣本資料的離散趨勢的，實際上是求每個樣本值與平均值差值的平均數(shù)。質(zhì)控品的標(biāo)準(zhǔn)差與精密度或隨機(jī)誤差有關(guān)，質(zhì)控品的均值與準(zhǔn)確度或系統(tǒng)誤差有關(guān)。一、公式是所有數(shù)據(jù)減去平均數(shù)（離均差）之和除以n-1(自由度)。

缺點是離均差之和為零！

二、為了解決，公式改為離均差先平方再相加除以n-1(自由度)。

缺點是數(shù)據(jù)平方之后太大，不利于統(tǒng)計處理！

三、數(shù)據(jù)再開方求出算數(shù)根，這就是最終的標(biāo)準(zhǔn)差S，標(biāo)準(zhǔn)差S和算術(shù)平均數(shù)是有相同單位的，某個數(shù)據(jù)距離均數(shù)的距離可以用1S、2S、3S……來表示！四、控制限是判斷質(zhì)控品測定結(jié)果允許范圍的上、下限，通常以標(biāo)準(zhǔn)差的倍數(shù)表示.標(biāo)準(zhǔn)差S是怎么來的：S是用來表示樣本資17平均數(shù)就是絕大多數(shù)人檢測后的數(shù)值標(biāo)準(zhǔn)差就是那極少部分人檢測后的數(shù)值醫(yī)學(xué)上制定參考值范圍通常把絕大多數(shù)正常人的某指標(biāo)值范圍稱為正常值范圍，那這個絕大多數(shù)到底是選多少呢？90%、95%、99%？我們認(rèn)為根據(jù)實際情況一般選擇95%，95%的正常人的值認(rèn)為是正常的，超過的則異常。.平均數(shù)就是絕大多數(shù)人檢測后的數(shù)值.18X±S范圍曲線所占頻數(shù)是68.27%

X±1.64S范圍曲線所占頻數(shù)是90.90%

X±1.96S范圍曲線所占頻數(shù)是95.00%

X±2S范圍曲線所占頻數(shù)是95.45%

X±3S范圍曲線所占頻數(shù)是99.73%.X±S范圍曲線所占頻數(shù)是68.27%

X±1.64S范圍曲線19統(tǒng)計質(zhì)控方法實驗變異的基線（X）的測定：OCV（optimalconditionsvariance）質(zhì)控物在最佳條件下的變異最佳條件是指在儀器、試劑和實驗操作者等可能影響實驗結(jié)果的因素處于最佳時，連續(xù)測定同一濃度同一批號質(zhì)控物20批次以上，即可得到一組質(zhì)控數(shù)據(jù)，經(jīng)過計算得出均值、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)CV，此CV即為OCV。RCV（routineconditionsvariance）常規(guī)條件下的變異常規(guī)條件是指在儀器、試劑和實驗操作者等可能影響實驗結(jié)果的因素均處于通常的實驗條件下，連續(xù)測定同一濃度同一批號質(zhì)控物20批次以上，即可得到一組質(zhì)控數(shù)據(jù)，經(jīng)過計算得出均值、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)CV，此CV即為RCV。所有數(shù)據(jù)無論是否超過3S，均應(yīng)用于上述統(tǒng)計計算，否則標(biāo)準(zhǔn)差變小，導(dǎo)致以后的實驗數(shù)據(jù)更容易失控：

RCV與OCV接近或小于2倍OCV時，則RCV是可以接受的，否則就需要對常規(guī)條件下的操作水平采取措施予以改進(jìn)。

這20批次的測定值間的變異即稱為批間變異！—.統(tǒng)計質(zhì)控方法實驗變異的基線（X）的測定：—.20在臨床基因擴(kuò)增檢驗中，按上述步驟通常會很繁瑣，希望直接能進(jìn)入RCV的測定計算，如果有一定的實驗工作基礎(chǔ)，應(yīng)該說是可以的。因為OCV從某種意義上來說，指的是試劑盒或方法學(xué)本身的批間變異，可以從其他一些途徑得到，如試劑的生產(chǎn)廠家或文獻(xiàn)報道。基因擴(kuò)增結(jié)果的原始數(shù)據(jù)很大，故使用對數(shù)值來進(jìn)行質(zhì)控統(tǒng)計分析要更為方便一些。.在臨床基因擴(kuò)增檢驗中，按上述步驟通常會很繁瑣，希望直接能進(jìn)入21室內(nèi)質(zhì)控基本概念

室內(nèi)質(zhì)量控制：是由檢驗人員對實驗室的工作和測定結(jié)果進(jìn)行連續(xù)評價，以決定工作和結(jié)果的可靠性是否達(dá)到發(fā)出報告規(guī)定的一系列活動。主要目的是保證日間結(jié)果的一致性，因此要求每個項目具有一定的重現(xiàn)性，其以精密度來衡量。.室內(nèi)質(zhì)控基本概念室內(nèi)質(zhì)量控制：是由檢驗人員對實驗室的工作22室內(nèi)質(zhì)控室內(nèi)質(zhì)控的目的是監(jiān)測測定過程，當(dāng)出現(xiàn)醫(yī)學(xué)上重要的誤差時，用適當(dāng)?shù)馁|(zhì)控方法警告分析人員。一般來說，實驗室通過測定質(zhì)控品來檢查檢驗結(jié)果的質(zhì)量，并將質(zhì)控結(jié)果畫在質(zhì)控圖上，觀察質(zhì)控結(jié)果是否超過質(zhì)控限來決定是否失控。實驗室最常用的是Levey-Jennings質(zhì)控圖。.室內(nèi)質(zhì)控室內(nèi)質(zhì)控的目的是監(jiān)測測定過程，當(dāng)出現(xiàn)醫(yī)學(xué)上重要的誤差23誤差

是指測量結(jié)果減去被測量的真值所得的差，稱為誤差。

㈠隨機(jī)誤差

是由于某些偶然原因引起，這種誤差難以預(yù)料或不可控制。特點：誤差的大小和正負(fù)相等，在均數(shù)兩側(cè)對稱分布（正態(tài)分布）；主要來自能影響結(jié)果的操作誤差、實驗條件的改變等。標(biāo)本多次重復(fù)測定可減少偶然誤差，提高精密度。

㈡系統(tǒng)誤差

是指一系列分析測定結(jié)果對真值或靶值存在同一傾向的誤差。其特點是重復(fù)檢驗時，常按一定規(guī)律重復(fù)出現(xiàn)，即測定結(jié)果與真值或靶值相比，結(jié)果總是偏高或偏低，增加測定次數(shù)也不能使之消除；主要來源于方法誤差儀器誤差、試劑誤差、實驗器具誤差、恒定的環(huán)境誤差等。消除系統(tǒng)誤差能提高測結(jié)果的準(zhǔn)確性。臨床基因擴(kuò)增實驗室產(chǎn)生的檢驗誤差同樣有兩類：一是系統(tǒng)誤差（通常表現(xiàn)為質(zhì)控物測定均值的漂移，是由操作者所使用的儀器設(shè)備、試劑、標(biāo)準(zhǔn)品或校準(zhǔn)物出現(xiàn)問題而造成的，這種誤差是可以通過措施方法加以控制，是可以排除的）………二是隨機(jī)誤差（主要表現(xiàn)為測定標(biāo)準(zhǔn)差得增大，主要是由實驗操作人員的操作等隨機(jī)因素所致，隨機(jī)誤差的出現(xiàn)是難以完全避免和控制的）………基本概念.誤差基本概念.24精密度精密度是指在規(guī)定條件下相互獨立的檢測結(jié)果間的一致程度。它表示測量結(jié)果中的隨機(jī)誤差大小。它分三種：（1）批內(nèi)精密度（批內(nèi)變異）

是指對同一標(biāo)本用同一方法在相同條件下多次重復(fù)測定所得的各次結(jié)果之間或各次結(jié)果與均值之間的符合程度。在重復(fù)檢測時它的變異性是最小的。

（同一質(zhì)控品提取完畢后，多次重復(fù)上機(jī)檢測所得結(jié)果）

（2）批間精密度（批間變異）

是指在同一天內(nèi)（日內(nèi)）幾個不同批重復(fù)檢測同一標(biāo)本時的變異性，它通常比批內(nèi)變異性要高。

（同一質(zhì)控品在一日內(nèi)重復(fù)提取數(shù)次上機(jī)檢測所得結(jié)果）（3）日間精密度

是在不同天重復(fù)檢測同一樣本所得的變異性。這種變異性是分析性能最實際的評價，因為它包括了不同操作人員、儀器日間、實驗室溫度或其它條件的變化對方法性能的影響。

（同一質(zhì)控品在不同日期內(nèi)重復(fù)提取數(shù)次上機(jī)檢測所得結(jié)果）基本概念.精密度精密度是指在規(guī)定條件下相互獨立的檢測結(jié)果間的一致程度。25標(biāo)準(zhǔn)品是指一定量的純品溶解在容量瓶內(nèi)稀釋至容積刻度的標(biāo)準(zhǔn)液，標(biāo)準(zhǔn)品的值由稱量和容積計算確定。校準(zhǔn)品是指定用來校準(zhǔn)某檢測系統(tǒng)的物質(zhì)，它有在考慮了基質(zhì)效應(yīng)的情況下，人為賦予的值。校準(zhǔn)品專用于某一檢測系統(tǒng)；同一個校準(zhǔn)品用于不同儀器時，應(yīng)該有不同的校準(zhǔn)值。質(zhì)控品專門用于質(zhì)量控制目的的標(biāo)本或溶液，不能用作校準(zhǔn)?；靖拍?標(biāo)準(zhǔn)品是指一定量的純品溶解在容量瓶內(nèi)稀釋至容積刻度的標(biāo)準(zhǔn)液26質(zhì)控品與校準(zhǔn)品的區(qū)別①溯源性：校準(zhǔn)品必須具有溯源性，質(zhì)控品不需溯源性。②專一性：校準(zhǔn)品專用于某一檢測系統(tǒng)，質(zhì)控品可在不同檢測系統(tǒng)使用。③用途不同：質(zhì)控品用于檢測實驗室結(jié)果的重復(fù)性，而校準(zhǔn)品是保證實驗室檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性?；靖拍?質(zhì)控品與校準(zhǔn)品的區(qū)別①溯源性：校準(zhǔn)品必須具有溯源性，質(zhì)控品不27干擾指標(biāo)本中某些非被測物質(zhì)本身不與試劑反應(yīng)，但以其它方式使測定結(jié)果偏高或偏低，這種現(xiàn)象稱為干擾，這些非被測物質(zhì)稱為干擾物。例如患者服用維生素C達(dá)到一定濃度可干擾葡萄糖氧化酶法，使血糖測定結(jié)果偏低?；|(zhì)是指標(biāo)本中除分析物以外的一切組成成分?；|(zhì)效應(yīng)是指標(biāo)本中除分析物以外的其它成分對分析物測定值的影響；或者是指基質(zhì)對分析方法準(zhǔn)確測定分析物能力的干擾。檢測系統(tǒng)是指完成一個檢驗項目的測定所涉及的儀器、試劑、校準(zhǔn)品、耗材等的組合?；靖拍?干擾指標(biāo)本中某些非被測物質(zhì)本身不與試劑反應(yīng)，但以其它方式使28質(zhì)控規(guī)則

是解釋質(zhì)控數(shù)據(jù)和作出控制狀態(tài)判斷的規(guī)定，一般用符號AL表示，A是質(zhì)控測定值的個數(shù)或特定統(tǒng)計量的縮寫，L是控制界限，如12s

、13s、22s、R4s、41s、10x等。符號定義12S

一個質(zhì)控測定值超出±2s控制限。13S

一個質(zhì)控測定值超出±3s控制限。22S

兩個連續(xù)的質(zhì)控測定值同時超出+2s或－2s控制限。R4S

同一批測定中，兩個不同濃度質(zhì)控物的測定值之間的差值超出4s控制限。41S

四個連續(xù)的質(zhì)控測定值同時超出+1s或－1s控制限。10x

十個連續(xù)的質(zhì)控測定值同時處于均值的同一側(cè)。在控指根據(jù)質(zhì)控規(guī)則判斷質(zhì)控品檢測結(jié)果沒有符合失控規(guī)則的情況。失控指根據(jù)質(zhì)控規(guī)則判斷質(zhì)控品檢測結(jié)果有符合失控規(guī)則的情況基本概念.質(zhì)控規(guī)則是解釋質(zhì)控數(shù)據(jù)和作出控制狀態(tài)判斷的規(guī)定，一般用符號29質(zhì)控品

1.質(zhì)控品的種類：

根據(jù)物理性狀不同分為凍干質(zhì)控品、液體質(zhì)控品和混合血清等。

根據(jù)生產(chǎn)商是否賦值分為定值質(zhì)控品和非定值質(zhì)控品。不論定值還是非定值質(zhì)控品，用戶在使用時，必須用自己的檢測系統(tǒng)確定自己的均值和標(biāo)準(zhǔn)差。廠家提供的均值是基于人家實驗室檢測系統(tǒng)和環(huán)境測出的，他標(biāo)示的預(yù)期范圍只是告訴用戶，只要你的測定值在預(yù)期范圍內(nèi)，說明他的控制品是好的，千萬不能將預(yù)期值范圍認(rèn)為是控制的允許范圍。.質(zhì)控品1.質(zhì)控品的種類：.30..312.質(zhì)控品的質(zhì)量要求：㈠、質(zhì)控品應(yīng)為人血清基質(zhì)；基質(zhì)效應(yīng)小；㈡、生化、免疫等質(zhì)控品在規(guī)定保存條件下至少穩(wěn)定一年，凍干品復(fù)溶后室溫下穩(wěn)定時間大于8小時；㈢、臨床實驗室開展統(tǒng)計過程分析其目的是控制檢驗結(jié)果的重復(fù)性。檢驗結(jié)果的變異由檢測不精密度和更換的各瓶控制品間差異的綜合因素導(dǎo)致。只有將瓶間差異控制到最小，才能使檢測結(jié)果間的變異真正反映日常檢驗操作的不精密度。①日?？刂破啡羰莾龈善?，用戶對凍干品的復(fù)溶要遵循嚴(yán)格的復(fù)溶操作標(biāo)準(zhǔn)化。如：質(zhì)控品均勻溶解，用AA級容量移液管，優(yōu)級的去離子水，對瓶內(nèi)凍干物濕潤和混勻的動作與時間要求都有明確規(guī)定。②市場上已提供液體的控制品，它消除了復(fù)溶過程引入的誤差；缺點是價格昂貴，而且總含有防腐劑，會引入新的基質(zhì)效應(yīng)帶來的誤差。液體控制品雖昂貴，但開瓶后可穩(wěn)定14-30天；而凍干的控制品復(fù)溶后通常只穩(wěn)定48小時。液體控制品的穩(wěn)定可減少浪費，消除瓶間差，也消除了操作人員原來復(fù)溶過程的操作誤差，所以不少實驗室愿意采用。㈣、質(zhì)控品應(yīng)盡量保證一個批號一年左右用量，這樣才能在較長時間內(nèi)觀察控制過程的質(zhì)量變化，也減低不斷應(yīng)用新批號質(zhì)控品的成本和工作量。.2.質(zhì)控品的質(zhì)量要求：.323.凍干質(zhì)控品的復(fù)溶與儲存，須嚴(yán)格按其說明書執(zhí)行，要點有：①按生產(chǎn)商推薦方法儲存。復(fù)融時從冰箱中取出，放室溫約30’待與室溫平衡后，再小心打開瓶塞，防止質(zhì)控物丟失。②用經(jīng)校準(zhǔn)的移液管，用符合廠家要求的稀釋液準(zhǔn)確稀釋。③蓋上蓋子，室溫靜置約15’，期間溫和轉(zhuǎn)動瓶子讓其完全溶解，取樣前，溫和顛倒瓶子數(shù)次，以保各成分均一。..33質(zhì)控品的設(shè)置、數(shù)量及排列順序臨床基因擴(kuò)增檢驗的室內(nèi)質(zhì)控中，每次檢測究竟使用幾個質(zhì)控樣本？并排在哪個位置最為適宜呢？這個問題非常實際理論上說，為最大可能的檢出實驗的隨機(jī)和系統(tǒng)誤差，應(yīng)每隔幾份臨床標(biāo)本插入1份質(zhì)控樣本，均勻分散于臨床標(biāo)本中，與臨床標(biāo)本一同處理（核酸提取）。但考慮國內(nèi)實際和成本效益，如果擴(kuò)增的樣本量不是特別大如小于30，弱陽性和陰性質(zhì)控各1份，標(biāo)本數(shù)量增加，質(zhì)控物數(shù)量相應(yīng)按比例增加

定性測定有一份接近cut-off（定性陽性判斷值copies/ml）

的弱陽性和一份陰性質(zhì)控樣本應(yīng)可以滿足要求。

定量測定要根據(jù)實驗的測定范圍，采取高、中、低三種濃度的質(zhì)控樣本。至于測定中的排列順序，可排于標(biāo)準(zhǔn)品或校準(zhǔn)品之后，臨床樣本之前。但在擴(kuò)增儀中的位置，不應(yīng)永久性的固定的在一個孔，而應(yīng)在每次擴(kuò)增檢測時，進(jìn)行相應(yīng)的順延，以使在一定的時間內(nèi)，可以盡可能的監(jiān)測每一個孔的擴(kuò)增有效性。.質(zhì)控品的設(shè)置、數(shù)量及排列順序臨床基因擴(kuò)增檢驗的室內(nèi)質(zhì)控中，每34需要指出的是，臨床基因擴(kuò)增檢驗室內(nèi)質(zhì)控與其他臨床檢驗室內(nèi)質(zhì)控相比，應(yīng)增加一個監(jiān)測污染發(fā)生的陰性質(zhì)控設(shè)置，它不用參與統(tǒng)計學(xué)方法來分析，但對于臨床基因擴(kuò)增檢驗必不可少！具體方法是：一個陰性原血清質(zhì)控樣本；

一個由核酸提取過程中帶入的一個空管，內(nèi)加水來模擬標(biāo)本；一個僅含擴(kuò)增反應(yīng)混合液的管以水代替核酸提取樣本。陰性原血清質(zhì)控樣本功能：①監(jiān)測實驗室的以前擴(kuò)增產(chǎn)物是否已產(chǎn)生污染。②實驗室操作所致的標(biāo)本間的交叉污染，具體如：ⅰ強(qiáng)陽性標(biāo)本氣溶膠經(jīng)加樣器所致的污染。ⅱ強(qiáng)陽性標(biāo)本經(jīng)操作者的手所致的污染。ⅲ使用翻蓋離心管核酸提取時在較高溫溫育時蓋子崩開等。③擴(kuò)增反應(yīng)試劑的污染?？展茏饔檬瞧鋬?nèi)不含可能有的擴(kuò)增抑制物，因此對污染的反應(yīng)更為敏感，但因陰性原血清質(zhì)控樣本含蛋白、脂類的特殊性，具體操作細(xì)節(jié)還是有所不同，不能替代。僅含擴(kuò)增反應(yīng)液的A管加樣前（水）不要打開，另取一個或多個B空管，打開蓋子靜置于標(biāo)本制備區(qū)30-60分鐘，然后加入擴(kuò)增反應(yīng)液以及以水替代核酸樣本擴(kuò)增，A管為陰性，而B管擴(kuò)增出現(xiàn)陽性，說明實驗室以前擴(kuò)增產(chǎn)物的存在。.需要指出的是，臨床基因擴(kuò)增檢驗室內(nèi)質(zhì)控與其他臨床檢驗室內(nèi)質(zhì)控351）穩(wěn)定性較好的質(zhì)控物：(1)先建立暫定均值和質(zhì)控限。在“舊”批號質(zhì)控物使用結(jié)束前，將新批號質(zhì)控物與“舊”批號質(zhì)控物同時進(jìn)行測定約一個月，獲得至少20個新質(zhì)控物的測定結(jié)果，計算其均值、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)，剔除超過均值±3S的離群值，重新計算余下數(shù)據(jù)的均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差，作為下一個月新質(zhì)控物室內(nèi)質(zhì)控圖的均值和標(biāo)準(zhǔn)差；此月結(jié)束后，將該月的在控結(jié)果與前20個質(zhì)控測定結(jié)果匯集一起，計算它們的累積均值和標(biāo)準(zhǔn)差，作為再下一個月質(zhì)控圖的均值和標(biāo)準(zhǔn)差，繪制該月質(zhì)控圖。(2)重復(fù)上述過程，連續(xù)累積三至五個月，作為該質(zhì)控物在有效期內(nèi)的常規(guī)均值和標(biāo)準(zhǔn)差。2）穩(wěn)定期較短的質(zhì)控品：在3至4天內(nèi)，每天分析每水平質(zhì)控品3至4瓶，每瓶進(jìn)行2至3次重復(fù)，收集數(shù)據(jù)計算均值、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)，剔除離群值，重新計算其均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差，其中均值作為質(zhì)控圖的均值。標(biāo)準(zhǔn)差獲得由于使用的數(shù)據(jù)量越大，標(biāo)準(zhǔn)差估計值就越好，因此，不推薦用上述對穩(wěn)定性較短的質(zhì)控品建立均值的方法來建立其標(biāo)準(zhǔn)差，而用以前變異系數(shù)（CV%）來估計。以前變異系數(shù)是幾個月數(shù)據(jù)累積的結(jié)果，考慮了檢測過程中更多的變異。新的標(biāo)準(zhǔn)差等于其均數(shù)乘上以前變異系數(shù)。質(zhì)控品的均值、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)獲得.1）穩(wěn)定性較好的質(zhì)控物：質(zhì)控品的均值、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)36內(nèi)質(zhì)控（internalcontrol,IC）臨床標(biāo)本中有多種成分可能會通過與酶反應(yīng)成分的相互作用而抑制核酸擴(kuò)增，如血紅素，以及腦脊液、尿液、痰液中也存在DNA聚合酶抑制物，以及降解靶核苷酸的核酸酶，但抑制物的確切成分尚不清楚。對臨床標(biāo)本及核酸提取中可能存在的抑制/干擾物的質(zhì)控措施，可通過內(nèi)質(zhì)控(通常也稱為內(nèi)標(biāo))來檢測。這種內(nèi)標(biāo)最好在臨床標(biāo)本制備前加入，然后與標(biāo)本中靶核酸一起經(jīng)歷核酸提取過程，成為核酸提取過程中的質(zhì)控。⑴內(nèi)標(biāo)和樣本靶核苷酸都未出現(xiàn)擴(kuò)增，說明抑制物的存在，處理措施最簡單的是稀釋法，但不能稀釋過大至濃度低至測定方法的下限以下。⑵內(nèi)標(biāo)未出現(xiàn)擴(kuò)增但靶序列出現(xiàn)擴(kuò)增，則可能是靶序列濃度過高，內(nèi)標(biāo)受到抑制，同樣可用稀釋方法來證明這一點。.內(nèi)質(zhì)控（internalcontrol,IC）臨床標(biāo)本中有371924年，美國休哈特（W.A.Shewhart）首先提出質(zhì)控圖。

（在提出質(zhì)控圖之前，人們曾試圖采用各種方法來預(yù)測質(zhì)量變動的預(yù)兆，但均未獲成功，工業(yè)品的不合格率相當(dāng)高）20世紀(jì)50年代，Levey和Jennings把質(zhì)控圖引入到臨床檢驗中。

（質(zhì)控方法是建立在單個質(zhì)控品雙份測定值的均值和極差的基礎(chǔ)上）Henry和Segalove對L-J質(zhì)控圖（X-R）進(jìn)行了修改，以20份質(zhì)控品的試驗結(jié)果，計算均值和標(biāo)準(zhǔn)差，定出質(zhì)控限，每天或每批隨患者標(biāo)本測定質(zhì)控品一次，將所得的質(zhì)控結(jié)果標(biāo)在質(zhì)控圖上。這各質(zhì)控圖一般稱為單值質(zhì)控圖，也就目前大家所熟悉的L-J質(zhì)控圖。質(zhì)控圖.1924年，美國休哈特（W.A.Shewhart）首先提出質(zhì)38Levey-Jennings質(zhì)控圖

的演變過程最早的L-J質(zhì)控圖，每天要做兩個控制品檢測，只要有一個超過13S控制限即為失控；（假失控率0.3%）修改的L-J質(zhì)控圖，每天只做一個控制品檢測，只要有一個超過12S控制限即為失控，這是L-J質(zhì)控圖統(tǒng)計學(xué)控制方法確定的。

因為僅檢測一個控制品超出12S假失控的概率為5%。假若是兩個不同濃度控制品同時使用，任一個控制值超出2SD控制限，不能判斷為失控，因為任一個控制品的控制值超出2SD控制限的可能性升為10%，會增加結(jié)果屬于正常的假失控錯誤率。改良的L-J質(zhì)控圖，是在控制圖上同時標(biāo)出12S和13S控制限。

①兩個水平控制品中，任一個超出13S可立即確定失控，因為0.3%假失控率很小，可以認(rèn)為，一旦出現(xiàn)，即真有問題。

②兩個水平控制品中，任一個超出12S，不能判斷失控，僅為警告限，繼續(xù)觀察。

改良的L-J質(zhì)控圖，其實為將來Westgard多規(guī)則質(zhì)控圖奠定基礎(chǔ)。第一代質(zhì)量控制技術(shù).Levey-Jennings質(zhì)控圖

的演39一次試驗中如果使用一個控制品，則應(yīng)以±2S為失控限。超過2SD即為失控，不可以發(fā)報告，假失控的錯誤概率為5%。假若是兩個不同濃度控制品同時使用，任一個控制值超出2SD控制限，不能判斷為失控，因為任一個控制品的控制值超出2SD控制限的可能性升為10%，三個質(zhì)控物則假失控率為15%！如果使用兩個不同濃度的控制品則應(yīng)以±3s為失控限。超過3SD即為失控。

Levey-Jennings質(zhì)控圖

基本的統(tǒng)計學(xué)含義.Levey-Jennings質(zhì)控圖

基本的統(tǒng)計學(xué)含40..41..42Levey-Jennings質(zhì)控圖

存在不足以2SD為失控限，有5%的假失控率，只要超過2SD就認(rèn)為失控。隨著自動化控制儀器的引入，電腦嚴(yán)格按照程序執(zhí)行質(zhì)量控制，按此超過2SD，儀器會自動報警，就必須尋找原因，排除故障，方可重新啟動。但是究竟是失控還是95%以外的偶然概率，無法分辨。那么經(jīng)實驗證實，若每批用兩個控制品，同時使用3SD和2SD兩個控制規(guī)則，則判斷為“失控”的次數(shù)之比約為3SD:2SD=1:9⒈僅以2SD為控制規(guī)則靈敏度特異度⒉僅以3SD為控制規(guī)則靈敏度特異度

儀器的引入，使第一代質(zhì)量控制技術(shù)顯得粗糙、落后！.Levey-Jennings質(zhì)控圖

存在不足以2SD為失控限43Westgard多規(guī)則控制方法第二代質(zhì)量控制方法Westgard建議使用兩個控制品，濃度一高一低，形成一個范圍的控制（沒有條件也可只用一個控制品，但有很多局限性）。2.在控制圖上繪制7條平行線。均數(shù)、均數(shù)±1S、均數(shù)±2S、均數(shù)±3S。3.將所有規(guī)則以符號表示，便于使用。規(guī)則以符號AL來表示，其中A為質(zhì)控測定中超出質(zhì)量控制限的測定值的個數(shù)，L為控制限，通常用均值或均值±1～3SD來表示。當(dāng)質(zhì)控測定值超出控制限L時，即可將該批測定判為失控。常用的13S質(zhì)控規(guī)則，其中1為原式中的A，3s為原式中的L，表示均值±3s，其確切的含義為：在質(zhì)控測定值中，如果有一個測定值超出均值±3s范圍，即可將該批測定判為失控。4.Westgard多規(guī)則控制方法中，將12S僅作為警告規(guī)則，要檢查一下，但不是失控規(guī)則，這樣充分利用12S對誤差檢出的靈敏性高，同時又限制了它對誤差識別特異性差的弱點，它只是首先指出可能有問題，最后還要經(jīng)后續(xù)的其它規(guī)則判斷。5.經(jīng)過選擇，將13S，22S，R4S，41S，10等列為失控規(guī)則，其中既有對隨機(jī)誤差敏感的，也有對系統(tǒng)誤差敏感的。結(jié)合在一起，大大提高了多規(guī)則的控制效率。6.將各規(guī)則合在一起，形成了可執(zhí)行的，邏輯判斷檢索程序。.Westgard多規(guī)則控制方法第二代質(zhì)量控制方法Westga44Westgard多規(guī)則通常有六個質(zhì)控規(guī)則，即12s，13s，22s，R4s，41s，10X質(zhì)控規(guī)則，其中12s規(guī)則只是在

手工作業(yè)時作為警告規(guī)則，啟動其他質(zhì)控規(guī)則以助于數(shù)據(jù)的快速判斷。在進(jìn)行質(zhì)控狀態(tài)的判斷時，只有當(dāng)所有質(zhì)控規(guī)則判斷分析批在控時才決定分析批在控；只要其中之一的質(zhì)控規(guī)則判斷為失控就被認(rèn)定為失控。

在實踐中常由規(guī)則13S和R4S檢出隨機(jī)誤差，而由22S，41S

，10X規(guī)則檢出系統(tǒng)誤差。當(dāng)系統(tǒng)誤差非常大時，也可由規(guī)則13S檢出。.Westgard多規(guī)則通常有六個質(zhì)控規(guī)則，即12s，13s，45Westgard多規(guī)則誤差檢索程序ss.Westgard多規(guī)則誤差檢索程序ss.46Westgard常用的質(zhì)控規(guī)則12S警告規(guī)則：1個質(zhì)控測定值超過X±2S質(zhì)控限時為警告界限！13S失控規(guī)則：1個質(zhì)控測定值超過X±3S質(zhì)控限為失控，觀察隨機(jī)誤差。22S失控規(guī)則：對系統(tǒng)誤差敏感。

①同一濃度水平控制品連續(xù)兩次控制值同方向超出X+2S

或X-2S限值，是失控表現(xiàn)。

②在一批檢測中兩個濃度水平的控制值同方向超出X+2S或X-2s質(zhì)控限為失控。R4S失控規(guī)則：是隨機(jī)誤差。當(dāng)同一批內(nèi)不同的質(zhì)控物，一個質(zhì)控物測定值超過X+2S限，且另一個測定值超過X-2S限時，判斷該批為失控；不能報告病人的測定結(jié)果。（要求一定是同批次，如果發(fā)生在兩批檢測中，就不是該多規(guī)則的R4S）。

.Westgard常用的質(zhì)控規(guī)則12S警告規(guī)則：1個質(zhì)控測定值47Westgard常用的質(zhì)控規(guī)則41S失控規(guī)則：有連續(xù)4次的控制值超出了X+1S或X-1S的限值，是系統(tǒng)誤差。

①同一濃度水平控制品連續(xù)4次控制值同方向超出X+2S或X-2S限值，是失控表現(xiàn)。

②在一批檢測中兩個濃度水平的控制品同時連續(xù)各有2次的控制值同方向超出X+1S或X-1s是失控表現(xiàn)。10X失控規(guī)則：有連續(xù)10次控制值在均值的一側(cè)，是系統(tǒng)誤差的表現(xiàn)。

①同一濃度水平控制品連續(xù)10次控制值在均值的同一側(cè)，是失控表現(xiàn)。

②兩個濃度水平的控制品同時連續(xù)各有5次的控制值在均值的同一側(cè)，是失控表現(xiàn).Westgard常用的質(zhì)控規(guī)則41S失控規(guī)則：有連續(xù)4次的控4812S警告規(guī)則：1個質(zhì)控測定值超過X±2S質(zhì)控限時為警告界限！.12S警告規(guī)則：1個質(zhì)控測定值超過X±2S質(zhì)控限時為警告界限4913S失控規(guī)則：1個質(zhì)控測定值超過X±3S質(zhì)控限為失控，觀察隨機(jī)誤差。.13S失控規(guī)則：1個質(zhì)控測定值超過X±3S質(zhì)控限為失控，觀察5022S失控規(guī)則：對系統(tǒng)誤差敏感。

①同一濃度水平控制品連續(xù)兩次控制值同方向超出X+2S

或X-2S限值，是失控表現(xiàn)。

②在一批檢測中兩個濃度水平的控制值同方向超出X+2S或X-2s質(zhì)控限為失控。.22S失控規(guī)則：對系統(tǒng)誤差敏感。.51R4S失控規(guī)則：是隨機(jī)誤差。當(dāng)同一批內(nèi)不同的質(zhì)控物，一個質(zhì)控物測定值超過X+2S限，且另一個測定值超過X-2S限時，判斷該批為失控；不能報告病人的測定結(jié)果。（要求一定是同批次，如果發(fā)生在兩批檢測中，就不是該多規(guī)則的R4S）。.R4S失控規(guī)則：是隨機(jī)誤差。當(dāng)同一批內(nèi)不同的質(zhì)控物，一個質(zhì)控5241S失控規(guī)則：有連續(xù)4次的控制值超出了X+1S或X-1S的限值，是系統(tǒng)誤差。

①同一濃度水平控制品連續(xù)4次控制值同方向超出X+2S或X-2S限值，是失控表現(xiàn)。

②在一批檢測中兩個濃度水平的控制品同時連續(xù)各有2次的控制值同方向超出X+1S或X-1s是失控表現(xiàn)。.41S失控規(guī)則：有連續(xù)4次的控制值超出了X+1S或X-1S的5310X失控規(guī)則：有連續(xù)10次控制值在均值的一側(cè)，是系統(tǒng)誤差的表現(xiàn)。

①同一濃度水平控制品連續(xù)10次控制值在均值的同一側(cè)，是失控表現(xiàn)。

②兩個濃度水平的控制品同時連續(xù)各有5次的控制值在均值的同一側(cè)，是失控表現(xiàn)。.10X失控規(guī)則：有連續(xù)10次控制值在均值的一側(cè)，是系統(tǒng)誤差的54圖一圖二.圖一圖二.55從兩個圖表看，圖1的數(shù)據(jù)所反映出的檢測系統(tǒng)雖然存在系統(tǒng)誤差，但它很穩(wěn)定，對檢測結(jié)果的影響也不大。圖2的數(shù)據(jù)所反映出的檢測系統(tǒng)的穩(wěn)定性相比圖1應(yīng)該更差，對檢測結(jié)果的影響可能也會更大。但這兩個圖都是在控的！這是什么原因呢？難道是westgard質(zhì)控規(guī)則的建立有問題？.從兩個圖表看，圖1的數(shù)據(jù)所反映出的檢測系統(tǒng)雖然存在系統(tǒng)誤差，56ss10X12S13S41SR4S22S.ss10X12S13S41SR4S22S.57圖三

從邏輯圖我們可以看到：當(dāng)出現(xiàn)失控時，必然已經(jīng)有了12S的表現(xiàn)，以后任何一個質(zhì)控規(guī)則的解釋都必須以12S為先導(dǎo)原則，必須連同12S表現(xiàn)在一起才可判斷為失控。有了以上對多規(guī)則質(zhì)控規(guī)則的正確理解，我們再來判斷圖一、二是否屬于失控數(shù)據(jù)？答案當(dāng)然在控！那么，怎樣的質(zhì)控數(shù)據(jù)才符合“10X”這一失控規(guī)則呢？從圖三可以看出，當(dāng)出現(xiàn)連續(xù)10次結(jié)果落在平均值（靶值線）的一側(cè)，且必須出現(xiàn)12S，才算10X失控；若未出現(xiàn)12S，則不能判斷為失控。（R4S、41S等質(zhì)控規(guī)則同樣適用。）.圖三從邏輯圖我們可以看到：當(dāng)出現(xiàn)失控時，必然已58幾種不同的質(zhì)控圖畫法.幾種不同的質(zhì)控圖畫法.59一、直接法.一、直接法.60二、數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換后制成控制圖原始數(shù)據(jù)過大經(jīng)log轉(zhuǎn)換便于計算.二、數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換后制成控制圖原始數(shù)據(jù)過大經(jīng)log轉(zhuǎn)換便于計算.61..6212.04

4.36

8.20

4.36

0.52

-3.32-7.16原始數(shù)據(jù)對數(shù)轉(zhuǎn)換后畫質(zhì)控圖Log值.12.044.368.204.360.52-3.363三、表格式質(zhì)控圖測定批＜-3S≥-3S≥-2S≥-1SX≤+1S≤+2S≤+3S＞+3S在控或失控備注測定項目

質(zhì)控物濃度

質(zhì)控物批號

均值（X）

標(biāo)準(zhǔn)差（S）

填表人

表格式質(zhì)控圖便于手工記錄，每批測定后可將質(zhì)控物測定值填入表格中的相應(yīng)格內(nèi)，再根據(jù)質(zhì)控規(guī)則決定該批測定是否在控，同時記錄存在的問題及解決措施。.三、表格式質(zhì)控圖測定批＜-3S≥-3S≥-2S≥-1SX≤+64四、Z計分質(zhì)控圖用于使用多個質(zhì)控物（如高、中和低濃度）進(jìn)行質(zhì)控的情況下，使得在同一質(zhì)控圖上同時記錄不同質(zhì)控物的結(jié)果成為可能。Z=（Xn-均數(shù)X）/S,“Z計分”的實質(zhì)是計算質(zhì)控測定支偏離均值相當(dāng)于多少個標(biāo)準(zhǔn)差。以“Z計分”值作圖，與質(zhì)控物的濃度大小無關(guān)，因而其可用于多個質(zhì)控物的同時作圖。.四、Z計分質(zhì)控圖用于使用多個質(zhì)控物（如高、中和低濃度）進(jìn)行65五、“即刻法”質(zhì)控即刻法又叫Crubs異常值取舍法。對于基層醫(yī)院有些項目不是每天做，有的項目好幾天才做一次，以及有效期較短的試劑盒的項目，用上述方法計算獲得平均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差有很大的難度。采用Crubs法，只需連續(xù)測定三次，即可對第三次檢驗結(jié)果進(jìn)行質(zhì)量控制。

具體計算方法如下：（1）計算出測定結(jié)果（至少3次）的平均值和標(biāo)準(zhǔn)差（2）計算SI上限值和SI下限值：

SI上限=(X最大值－X)/sSI下限=(X－X最小值)/s（3）查SI表，將SI上限和SI下限與SI值表中的數(shù)據(jù)進(jìn)行比較--.五、“即刻法”質(zhì)控即刻法又叫Crubs異常值取舍法。--.66“即刻法”質(zhì)控結(jié)果判斷當(dāng)SI上限和SI下限值＜n2s時，表示處于控制范圍之內(nèi)，可以繼續(xù)進(jìn)行測定，并重復(fù)以上計算；當(dāng)SI上限和SI下限有一值處于n2s和n3s值之間時，說明該值在2s～3s范圍，處于警告狀態(tài)；當(dāng)SI上限和SI下限有一值＞n3s時，說明該值已在3s范圍之外，屬失控。數(shù)字屬于失控狀態(tài)應(yīng)舍去，重新測定該項質(zhì)控品和病人標(biāo)本。舍去的只是失控的這次數(shù)值，其他次測定值仍可繼續(xù)使用。

當(dāng)檢測的數(shù)字超過20次以后，可轉(zhuǎn)入使用常規(guī)的質(zhì)控圖進(jìn)行質(zhì)控。更換質(zhì)控品擬更換新批號的質(zhì)控品時，應(yīng)在舊批號使用結(jié)束前與舊批號質(zhì)控品一起測定，建立新的均值和標(biāo)準(zhǔn)差。繪制質(zhì)控圖及記錄質(zhì)控結(jié)果根據(jù)質(zhì)控品的均值和標(biāo)準(zhǔn)差繪制Levey-Jennings控制圖（單一濃度水平），或?qū)⒉煌瑵舛人嚼L制在同一圖上的Z-分?jǐn)?shù)圖，將原始質(zhì)控結(jié)果記錄在質(zhì)控圖表上。保留打印的原始質(zhì)控數(shù)據(jù)。.“即刻法”質(zhì)控結(jié)果判斷當(dāng)SI上限和SI下限值＜n2s時，表示67“即刻法”質(zhì)控SI值表nn3Sn2Snn3Sn2S31.151.15122.552.2941.491.46132.612.3351.751.67142.662.3761.941.82152.712.4172.101.94162.752.4482.222.03172.792.4792.322.11182.822.50102.412.18192.852.53112.482.23202.882.56.“即刻法”質(zhì)控SI值表nn3Sn2Snn3Sn2S31.1568失控的處理操作者如發(fā)現(xiàn)失控，應(yīng)填寫失控報告單，對失控的最佳處理是：確認(rèn)問題的原因，發(fā)現(xiàn)問題并提出妥善的解決辦法，消除失控的原因，并防止以后再次發(fā)生。多種因素可導(dǎo)致失控：①操作失誤，②試劑、校準(zhǔn)物、質(zhì)控物失效，③儀器維護(hù)不良，④采用不適當(dāng)?shù)馁|(zhì)控規(guī)則和太小的質(zhì)控限范圍，⑤一個分析批測定的質(zhì)控物數(shù)量不當(dāng)?shù)鹊取?失控的處理操作者如發(fā)現(xiàn)失控，應(yīng)填寫失控報告單，對失控的最佳處69失控原因分析和處理步驟：1、檢查控制圖或失控規(guī)則，確定誤差的類型。

①在實踐中規(guī)則13S和R4S是檢驗控制值分布的尾部或分布的寬度，屬于隨機(jī)誤差，而且出現(xiàn)隨機(jī)誤差失控的表現(xiàn)常突然，圖上反應(yīng)的失控點相對于均值的離散程度比往常都大。

②而由22S，41S

，10X規(guī)則檢出系統(tǒng)誤差，在圖上往往表現(xiàn)為控制值具有定向的漂移，并且隨時間在增大，最后形成失控。2、確定誤差類型后，較易查找失控問題，并且解決。

①試劑質(zhì)量差，靈敏度低、特異性差②過期失效、貯存不當(dāng)、室溫放置太久③試劑不同批號，批間或批內(nèi)的變異。④加樣槍是否經(jīng)過校正，加液量是否準(zhǔn)確⑤試劑是否混勻、是否產(chǎn)生氣泡⑥試劑配置及樣本加樣的量一定要嚴(yán)格遵守廠家規(guī)定⑦自動分析儀變溫模塊是否正常⑧用患者標(biāo)本連做10次重復(fù)檢測，了解分析儀針對真實患者標(biāo)本的批內(nèi)精密度，了解隨機(jī)誤差是否加大。

.失控原因分析和處理步驟：1、檢查控制圖或失控規(guī)則，確定誤差的70失控原因分析和處理步驟：3.請專家?guī)椭?/p>

如果前面各步驟都未能得到“在控”結(jié)果，可能是更復(fù)雜的原因，實驗室很難自己簡單排除，此時可請技術(shù)專家?guī)椭蚺c儀器、試劑廠家聯(lián)系請求技術(shù)支援。實驗室應(yīng)記錄此過程并至少保存兩年。4、確認(rèn)問題已解決，做好記錄。找出問題糾正后，重做所有控制品，以新檢測的控制值恢復(fù)“在控”來確認(rèn)失控問題已解決。事后，應(yīng)將出現(xiàn)的失控事件和糾正過程形成文件，以備今后參考查閱。.失控原因分析和處理步驟：3.請專家?guī)椭?71失控后的不當(dāng)做法：⑴、重做控制品

目前，絕大多數(shù)實驗室對待失控的第一反應(yīng)不是檢查失控原因，而是重復(fù)檢測控制品，這種做法已過時。

較好的做法應(yīng)該是拒發(fā)報告，查找原因，問題解決后，控制品和病人標(biāo)本一起重做。只是重做控制品意味著你考慮此次控制值只是落在警告線外，（否則你應(yīng)該既不重做控制品，也不必做其他處理，照發(fā)報告?。┢鋵嵤菍⒖刂品椒ㄍ说?2S規(guī)則，用警戒值發(fā)生后查找問題。而12S規(guī)則在每批用一個質(zhì)控品時假失控報告的可能性為5%，用兩個假失控的可能性為升為9%，三個為14%，因此出現(xiàn)12S表現(xiàn)后重做控制品得到的控制值常在“限值內(nèi)”，給檢驗人員感覺是“又恢復(fù)正常了”“放心了”“過關(guān)了”；后果是延誤了誤差的發(fā)現(xiàn)，將問題積累，留給了以后！.失控后的不當(dāng)做法：⑴、重做控制品.72失控后的不當(dāng)做法：⑵、試用新控制品另一種觀念是出現(xiàn)失控一定是“控制品”壞了。如果重做的結(jié)果仍不好，換一瓶新控制品再試，結(jié)果還不好的情況下，迫使工作人員才去考慮其他的可能原因。這其實是實驗室沒有真正在解決失控問題上下功夫，只是通過簡單的步驟，僥幸發(fā)現(xiàn)問題，但是，從根本上延誤了發(fā)現(xiàn)質(zhì)量控制失敗的真正原因。.失控后的不當(dāng)做法：⑵、試用新控制品.73IQC是一個集體活動，不光是對實驗室一次測定的有效性的判斷，也反應(yīng)了實驗室測定趨勢的變化。IQC的失控不能做為處罰的依據(jù)，應(yīng)建設(shè)性的找出失控的原因，針對其采取措施加以改進(jìn)。對IQC應(yīng)定期進(jìn)行評價。室內(nèi)質(zhì)量控制（IQC）的評價.IQC是一個集體活動，不光是對室內(nèi)質(zhì)量控制（IQC）的評價74謝謝！.謝謝！.75結(jié)合PCR實驗室分析相關(guān)“質(zhì)量管理”.結(jié)合PCR實驗室.76質(zhì)量管理

Qualitycontrol臨床實驗室為了保證檢驗結(jié)果實事求是的反映客觀存在而建立的操作程序體系分析前分析后分析中影響因素.質(zhì)量管理

Qualitycontrol臨床實驗室為了保證檢77標(biāo)本檢驗結(jié)果的誤差我們往往過分緊盯檢驗人員“實驗過程”（分析中）的質(zhì)量情況！1043.....標(biāo)本檢驗結(jié)果的誤差我們往往過分緊盯檢驗人員“實驗過程”（分析78實驗前期過程復(fù)雜、涉及面廣，不受控制分析前疾病診斷及檢驗項目選擇正確性1.檢驗項目選擇2.采集標(biāo)本采血容器用錯、內(nèi)各種抗凝劑、促凝劑、表面活性劑及一些微量金屬壓脈帶綁扎過久、采血量、采血器材選擇除非生產(chǎn)商另有說明，否則無論何種采血管應(yīng)緩慢倒轉(zhuǎn)所有含添加劑的采血管（枸櫞酸鈉除外）至少5-10次，含枸櫞酸鈉的采血管應(yīng)倒轉(zhuǎn)3-4次離心前樣品應(yīng)凝固，不建議挑除血凝塊。若凝固時間不夠長，纖維蛋白形成可影響多個儀器系統(tǒng)，導(dǎo)致結(jié)果偏差，可選用含促凝劑的采血管加快凝血?！酒胀ü苁覝兀?0-25℃）30-60分完全凝血，溫度低或冷藏則時間延長】除非文獻(xiàn)中建議，否則不冷藏全血樣品，因為冷藏樣品抑制血細(xì)胞代謝，穩(wěn)定了某些熱不穩(wěn)定性組分。除非有確鑿證據(jù)說明長時間接觸不會導(dǎo)致結(jié)果偏差，否則應(yīng)盡快用物理方法分離血清或血漿與細(xì)胞。分離的血漿/血清①室溫下保存時間不可超過8小時②若在8小時內(nèi)無法完成檢測，則應(yīng)（2-8攝氏度）冷藏血清/血漿③48小時內(nèi)無法完成檢測則血清/血漿應(yīng)-20攝氏度下冷凍保存送檢標(biāo)本質(zhì)量缺陷的隱蔽性4.標(biāo)本運送血液尿液護(hù)士是否按前述規(guī)則操作？①前段、中段、末段有區(qū)別②3小時前與3小時后結(jié)果有變化3.標(biāo)本處理除非有經(jīng)驗證明的文獻(xiàn)指出偏離標(biāo)準(zhǔn)不會影響結(jié)果，否則應(yīng)嚴(yán)格遵守生產(chǎn)商的指南.實驗前期過程復(fù)雜、涉及面廣，不受控制分析前疾病診斷及檢驗項目79綜上我想到的……我們工作中應(yīng)注意采血管類型，不要用錯。普通采血管應(yīng)待血液完全凝固后，有添加劑的采血管按類型搖勻相應(yīng)次數(shù)，靜置一定時間(約30分），按要求迅速離心，分離出血清/血漿，按實際情況分揀：馬上要檢測的，該冷藏的，該冷凍的，要做出相應(yīng)處理。采血管最好不要放置到最后統(tǒng)一離心處理。除非有要求，否則不冷藏，更不可過夜??！我想如果有一個小型便捷的離心機(jī)，放在采血口旁邊，能很好的完成這些。分離出的血清/血漿完成檢測期限：⑴室溫放置應(yīng)在8小時以內(nèi)。⑵冷藏放置應(yīng)在48小時內(nèi)。⑶而48小時以外需-20℃冷凍保存。⑷我們科產(chǎn)篩一周檢測一次，標(biāo)本是冷凍保存的；我們的優(yōu)生系列、九聯(lián)檢的標(biāo)本也應(yīng)該冷凍保存；而染色體冷藏時間越長肯定會越難培養(yǎng)。⑸巨細(xì)胞尿液、乳汁標(biāo)本；手足口、STD、HPV分泌物標(biāo)本因為有細(xì)胞培養(yǎng)液，可冷藏保存。.綜上我想到的……我們工作中應(yīng)注意采血管類型，不要用錯。.80分析中-1硬件設(shè)備和技術(shù)對實驗室未來關(guān)系重大（不進(jìn)則退）RT-PCR（實時熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）針對病原體DNA特異保守核酸序列進(jìn)行擴(kuò)增實時熒光核酸恒溫擴(kuò)增檢測技術(shù)（SAT技術(shù)上海仁度）上海仁度由美籍華裔科學(xué)家與國內(nèi)企業(yè)家共同創(chuàng)建，擁有核酸診斷技術(shù)自主知識產(chǎn)權(quán)RNA擴(kuò)增技術(shù)（針對單鏈RNA目標(biāo)序列）轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)的擴(kuò)增技術(shù)（TMA技術(shù)）【美國HOLOGICGen-Probe公司】.分析中-1硬件設(shè)備和技術(shù)對實驗室未來關(guān)系重大（不進(jìn)則退）RT81ＲＮＡ擴(kuò)增檢測技術(shù)國外，ＲＮＡ已超過ＤＮＡ技術(shù)成為病原體診斷主流美國85%頂級醫(yī)院使用RNA擴(kuò)增技術(shù)檢測優(yōu)生系列的CT/NG（定性檢測）。HOLOGICGen-Probe公司的TMA(APTIMACombo2),是目前市場上最好的

CT/NG檢測產(chǎn)品，無競爭對手。TMA用于CT/NG的檢測是目前行業(yè)公認(rèn)的“金標(biāo)準(zhǔn)”。新方法學(xué)CT/NG的產(chǎn)品臨床試驗都必須選擇TMA做參比試劑。在國內(nèi)，由于價格昂貴開展使用的醫(yī)院少，還未發(fā)展起來北京—北京協(xié)和醫(yī)院＼北大三院＼北大醫(yī)院＼北京兒童醫(yī)院。上?！虾Ｈ鸾疳t(yī)院＼上海長征醫(yī)院＼上海復(fù)旦婦產(chǎn)科醫(yī)院＼上海兒童醫(yī)學(xué)中心。廣州—中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院＼中山大學(xué)附屬三院＼南方醫(yī)院＼廣州市婦女兒童中心＼廣州軍區(qū)總院。.ＲＮＡ擴(kuò)增檢測技術(shù)國外，ＲＮＡ已超過ＤＮＡ技術(shù)成為病原體診斷82

ＲＮＡＶＳＤＮＡ.ＲＮＡＶＳＤＮＡ.83PCR93℃解鏈變性（解螺旋單鏈）55℃退火（復(fù)性）引物延伸用帶熒光的探針與產(chǎn)物結(jié)合，機(jī)器讀熒光值，計算產(chǎn)物濃度.PCR93℃解鏈變性55℃退火引物延伸用帶熒光的探針與產(chǎn)物結(jié)84PCR溫度曲線圖變性延伸退火.PCR溫度曲線圖變性延伸退火.85SAT的優(yōu)勢（RNA擴(kuò)增）同一溫度下，首先通過M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶產(chǎn)生靶標(biāo)核酸（RNA）的一個雙鏈DNA拷貝；然后利用T7

RNA多聚酶從該DNA拷貝上產(chǎn)生多個（100～1000個）RNA拷貝；每一個RNA拷貝再從反轉(zhuǎn)錄開始進(jìn)入下一個擴(kuò)增循環(huán)；帶有熒光標(biāo)記的探針和這些RNA拷貝特異結(jié)合，產(chǎn)生熒光；機(jī)器讀取熒光值計算產(chǎn)物濃度。ＲＮＡ恒溫擴(kuò)增原理圖.SAT的優(yōu)勢（RNA擴(kuò)增）ＲＮＡ恒溫擴(kuò)增原理圖.86SAT技術(shù)優(yōu)勢一、先進(jìn)的恒溫擴(kuò)增技術(shù)

擴(kuò)增在一個溫度下進(jìn)行（42℃），無需熱循環(huán)。二、領(lǐng)先的

RNA

檢測技術(shù)SAT

技術(shù)直接以病原體特異性RNA為擴(kuò)增靶標(biāo)，以擴(kuò)增產(chǎn)物RNA為檢測靶標(biāo)，因RNA的存在時間段，對活動性進(jìn)行感染有診斷意義。三、更高的檢測靈敏度和準(zhǔn)確性SAT技術(shù)的擴(kuò)增效率極高，15～30分鐘即可將模板擴(kuò)增109倍，檢測靈敏度和準(zhǔn)確性遠(yuǎn)高于其他核酸檢測技術(shù)

。四、有效減少假陰性結(jié)果SAT技術(shù)采用M-MLV逆轉(zhuǎn)錄酶和T7

RNA多聚酶進(jìn)行核酸擴(kuò)增，相對于其它核酸擴(kuò)增技術(shù)，反應(yīng)抑制物更少，有效減少假陰性結(jié)果。五、有效的解決了擴(kuò)增產(chǎn)物的污染問題擴(kuò)增產(chǎn)物的污染是核酸檢測的控制難點。SAT技術(shù)采用實時熒光閉管檢測，使污染得到有效控制；即使污染產(chǎn)生，由于擴(kuò)增產(chǎn)物為RNA

，環(huán)境中極易降解，從而大幅度提高檢測結(jié)果的可靠性。

六、大大降低了核酸擴(kuò)增實驗室的要求.SAT技術(shù)優(yōu)勢一、先進(jìn)的恒溫擴(kuò)增技術(shù)

.87一、實踐經(jīng)驗告訴我們，實驗室要高效、準(zhǔn)確的完成各種繁重的工作任務(wù)，僅僅依靠領(lǐng)導(dǎo)和共產(chǎn)黨員的模范帶頭作用是不夠的，必須依靠科學(xué)管理，將人力資源進(jìn)行科學(xué)分配，實施全員崗位責(zé)任制，科主任起領(lǐng)導(dǎo)、管理的作用，而不是忙于日常事務(wù)，忙于每天替班、接班。二、臨床實驗室現(xiàn)在面臨一個矛盾：“檢驗質(zhì)量”和“經(jīng)濟(jì)支出”，若單純追求經(jīng)濟(jì)效益使用價廉質(zhì)差的試劑、材料、質(zhì)控品、標(biāo)準(zhǔn)品，必然造成檢驗質(zhì)量的下降，肯定是不對。經(jīng)濟(jì)支出管理的原則是——以保證檢驗質(zhì)量為前提，其次是經(jīng)濟(jì)效益。三、質(zhì)控品和標(biāo)準(zhǔn)品的選擇是影響檢驗質(zhì)量核心和關(guān)鍵，不能以次充好，做“室內(nèi)質(zhì)控”和“室間質(zhì)評”無論做多少次，也不得巧立名目亂收費。分析中-2在實驗室中人的重要性-人力資源管理.一、實踐經(jīng)驗告訴我們，實驗室要高效、準(zhǔn)確的完成各種繁重的工作88正態(tài)分布在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中有許多變量的頻數(shù)分布是中間（靠近平均數(shù)）的頻數(shù)多，兩邊的頻數(shù)少，越靠近平均數(shù)，越符合正常的機(jī)率高，而且左右對稱，此種分布叫做正態(tài)分布。那么醫(yī)學(xué)衛(wèi)生工作中又有許多指標(biāo)近似服從正態(tài)分布，相應(yīng)的我們實驗室中所測樣本數(shù)據(jù)中的隨機(jī)誤差等也服從正態(tài)分布（這是實驗室做質(zhì)量控制，將隨機(jī)誤差控制在均數(shù)加減N倍標(biāo)準(zhǔn)差范圍內(nèi)的理論基礎(chǔ)）還有一些數(shù)據(jù)雖不服從正態(tài)分布，但可以通過轉(zhuǎn)換，如求對數(shù)log值轉(zhuǎn)換后服從正態(tài)分布，被稱為對數(shù)正態(tài)分布，實驗室所測樣品不論單位是IU/ml或Copies/ml，濃度均較高，不容易計算，故都經(jīng)log轉(zhuǎn)換后再分析。.正態(tài)分布在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中有許多變量的頻數(shù)分布89平均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)描述定量資料分布規(guī)律的指標(biāo)有三類一類是：平均數(shù)X（集中趨勢）一類是：標(biāo)準(zhǔn)差S（離散趨勢）一類是變異系數(shù)CV%.變異系數(shù)CV=（標(biāo)準(zhǔn)差S÷平均值X）×100%

——.平均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)描述定量資料分布規(guī)律的指標(biāo)有三類90平均數(shù)X的公式是：所有樣本數(shù)據(jù)之和（∑x）除以樣本個數(shù)n.它是用來描述一組資料的集中趨勢的。算數(shù)平均數(shù)X：——.平均數(shù)X的公式是：所有樣本數(shù)據(jù)之和（∑x）除以樣本個數(shù)n.算91標(biāo)準(zhǔn)差S是怎么來的：

S是用來表示樣本資料的離散趨勢的，實際上是求每個樣本值與平均值差值的平均數(shù)。質(zhì)控品的標(biāo)準(zhǔn)差與精密度或隨機(jī)誤差有關(guān)，質(zhì)控品的均值與準(zhǔn)確度或系統(tǒng)誤差有關(guān)。一、公式是所有數(shù)據(jù)減去平均數(shù)（離均差）之和除以n-1(自由度)。

缺點是離均差之和為零！

二、為了解決，公式改為離均差先平方再相加除以n-1(自由度)。

缺點是數(shù)據(jù)平方之后太大，不利于統(tǒng)計處理！

三、數(shù)據(jù)再開方求出算數(shù)根，這就是最終的標(biāo)準(zhǔn)差S，標(biāo)準(zhǔn)差S和算術(shù)平均數(shù)是有相同單位的，某個數(shù)據(jù)距離均數(shù)的距離可以用1S、2S、3S……來表示！四、控制限是判斷質(zhì)控品測定結(jié)果允許范圍的上、下限，通常以標(biāo)準(zhǔn)差的倍數(shù)表示.標(biāo)準(zhǔn)差S是怎么來的：S是用來表示樣本資92平均數(shù)就是絕大多數(shù)人檢測后的數(shù)值標(biāo)準(zhǔn)差就是那極少部分人檢測后的數(shù)值醫(yī)學(xué)上制定參考值范圍通常把絕大多數(shù)正常人的某指標(biāo)值范圍稱為正常值范圍，那這個絕大多數(shù)到底是選多少呢？90%、95%、99%？我們認(rèn)為根據(jù)實際情況一般選擇95%，95%的正常人的值認(rèn)為是正常的，超過的則異常。.平均數(shù)就是絕大多數(shù)人檢測后的數(shù)值.93X±S范圍曲線所占頻數(shù)是68.27%

X±1.64S范圍曲線所占頻數(shù)是90.90%

X±1.96S范圍曲線所占頻數(shù)是95.00%

X±2S范圍曲線所占頻數(shù)是95.45%

X±3S范圍曲線所占頻數(shù)是99.73%.X±S范圍曲線所占頻數(shù)是68.27%

X±1.64S范圍曲線94統(tǒng)計質(zhì)控方法實驗變異的基線（X）的測定：OCV（optimalconditionsvariance）質(zhì)控物在最佳條件下的變異最佳條件是指在儀器、試劑和實驗操作者等可能影響實驗結(jié)果的因素處于最佳時，連續(xù)測定同一濃度同一批號質(zhì)控物20批次以上，即可得到一組質(zhì)控數(shù)據(jù)，經(jīng)過計算得出均值、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)CV，此CV即為OCV。RCV（routineconditionsvariance）常規(guī)條件下的變異常規(guī)條件是指在儀器、試劑和實驗操作者等可能影響實驗結(jié)果的因素均處于通常的實驗條件下，連續(xù)測定同一濃度同一批號質(zhì)控物20批次以上，即可得到一組質(zhì)控數(shù)據(jù)，經(jīng)過計算得出均值、標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)CV，此CV即為RCV。所有數(shù)據(jù)無論是否超過3S，均應(yīng)用于上述統(tǒng)計計算，否則標(biāo)準(zhǔn)差變小，導(dǎo)致以后的實驗數(shù)據(jù)更容易失控：

RCV與OCV接近或小于2倍OCV時，則RCV是可以接受的，否則就需要對常規(guī)條件下的操作水平采取措施予以改進(jìn)。

這20批次的測定值間的變異即稱為批間變異！—.統(tǒng)計質(zhì)控方法實驗變異的基線（X）的測定：—.95在臨床基因擴(kuò)增檢驗中，按上述步驟通常會很繁瑣，希望直接能進(jìn)入RCV的測定計算，如果有一定的實驗工作基礎(chǔ)，應(yīng)該說是可以的。因為OCV從某種意義上來說，指的是試劑盒或方法學(xué)本身的批間變異，可以從其他一些途徑得到，如試劑的生產(chǎn)廠家或文獻(xiàn)報道。基因擴(kuò)增結(jié)果的原始數(shù)據(jù)很大，故使用對數(shù)值來進(jìn)行質(zhì)控統(tǒng)計分析要更為方便一些。.在臨床基因擴(kuò)增檢驗中，按上述步驟通常會很繁瑣，希望直接能進(jìn)入96室內(nèi)質(zhì)控基本概念

室內(nèi)質(zhì)量控制：是由檢驗人員對實驗室的工作和測定結(jié)果進(jìn)行連續(xù)評價，以決定工作和結(jié)果的可靠性是否達(dá)到發(fā)出報告規(guī)定的一系列活動。主要目的是保證日間結(jié)果的一致性，因此要求每個項目具有一定的重現(xiàn)性，其以精密度來衡量。.室內(nèi)質(zhì)控基本概念室內(nèi)質(zhì)量控制：是由檢驗人員對實驗室的工作97室內(nèi)質(zhì)控室內(nèi)質(zhì)控的目的是監(jiān)測測定過程，當(dāng)出現(xiàn)醫(yī)學(xué)上重要的誤差時，用適當(dāng)?shù)馁|(zhì)控方法警告分析人員。一般來說，實驗室通過測定質(zhì)控品來檢查檢驗結(jié)果的質(zhì)量，并將質(zhì)控結(jié)果畫在質(zhì)控圖上，觀察質(zhì)控結(jié)果是否超過質(zhì)控限來決定是否失控。實驗室最常用的是Levey-Jennings質(zhì)控圖。.室內(nèi)質(zhì)控室內(nèi)質(zhì)控的目的是監(jiān)測測定過程，當(dāng)出現(xiàn)醫(yī)學(xué)上重要的誤差98誤差

是指測量結(jié)果減去被測量的真值所得的差，稱為誤差。

㈠隨機(jī)誤差

是由于某些偶然原因引起，這種誤差難以預(yù)料或不可控制。特點：誤差的大小和正負(fù)相等，在均數(shù)兩側(cè)對稱分布（正態(tài)分布）；主要來自能影響結(jié)果的操作誤差、實驗條件的改變等。標(biāo)本多次重復(fù)測定可減少偶然誤差，提高精密度。

㈡系統(tǒng)誤差

是指一系列分析測定結(jié)果對真值或靶值存在同一傾向的誤差。其特點是重復(fù)檢驗時，常按一定規(guī)律重復(fù)出現(xiàn)，即測定結(jié)果與真值或靶值相比，結(jié)果總是偏高或偏低，增加測定次數(shù)也不能使之消除；主要來源于方法誤差儀器誤差、試劑誤差、實驗器具誤差、恒定的環(huán)境誤差等。消除系統(tǒng)誤差能提高測結(jié)果的準(zhǔn)確性。臨床基因擴(kuò)增實驗室產(chǎn)生的檢驗誤差同樣有兩類：一是系統(tǒng)誤差（通常表現(xiàn)為質(zhì)控物測定均值的漂移，是由操作者所使用的儀器設(shè)備、試劑、標(biāo)準(zhǔn)品或校準(zhǔn)物出現(xiàn)問題而造成的，這種誤差是可以通過措施方法加以控制，是可以排除的）………二是隨機(jī)誤差（主要表現(xiàn)為測定標(biāo)準(zhǔn)差得增大，主要是由實驗操作人員的操作等隨機(jī)因素所致，隨機(jī)誤差的出現(xiàn)是難以完全避免和控制的）………基本概念.誤差基本概念.99精密度精密度是指在規(guī)定條件下相互獨立的檢測結(jié)果間的一致程度。它表示測量結(jié)果中的隨機(jī)誤差大小。它分三種：（1）批內(nèi)精密度（批內(nèi)變異）

是指對同一標(biāo)本用同一方法在相同條件下多次重復(fù)測定所得的各次結(jié)果之間或各次結(jié)果與均值之間的符合程度。在重復(fù)檢測時它的變異性是最小的。

（同一質(zhì)控品提取完畢后，多次重復(fù)上機(jī)檢測所得結(jié)果）

（2）批間精密度（批間變異）

是指在同一天內(nèi)（日內(nèi)）幾個不同批重復(fù)檢測同一標(biāo)本時的變異性，它通常比批內(nèi)變異性要高。

（同一質(zhì)控品在一日內(nèi)重復(fù)提取數(shù)次上機(jī)檢測所得結(jié)果）（3）日間精密度

是在不同天重復(fù)檢測同一樣本所得的變異性。這種變異性是分析性能最實際的評價，因為它包括了不同操作人員、儀器日間、實驗室溫度或其它條件的變化對方法性能的影響。

（同一質(zhì)控品在不同日期內(nèi)重復(fù)提取數(shù)次上機(jī)檢測所得結(jié)果）基本概念.精密度精密度是指在規(guī)定條件下相互獨立的檢測結(jié)果間的一致程度。100標(biāo)準(zhǔn)品是指一定量的純品溶解在容量瓶內(nèi)稀釋至容積刻度的標(biāo)準(zhǔn)液，標(biāo)準(zhǔn)品的值由稱量和容積計算確定。校準(zhǔn)品是指定用來校準(zhǔn)某檢測系統(tǒng)的物質(zhì)，它有在考慮了基質(zhì)效應(yīng)的情況下，人為賦予的值。校準(zhǔn)品專用于某一檢測系統(tǒng)；同一個校準(zhǔn)品用于不同儀器時，應(yīng)該有不同的校準(zhǔn)值。質(zhì)控品專門用于質(zhì)量控制目的的標(biāo)本或溶液，不能用作校準(zhǔn)。基本概念.標(biāo)準(zhǔn)品是指一定量的純品溶解在容量瓶內(nèi)稀釋至容積刻度的標(biāo)準(zhǔn)液101質(zhì)控品與校準(zhǔn)品的區(qū)別①溯源性：校準(zhǔn)品必須具有溯源性，質(zhì)控品不需溯源性。②專一性：校準(zhǔn)品專用于某一檢測系統(tǒng)，質(zhì)控品可在不同檢測系統(tǒng)使用。③用途不同：質(zhì)控品用于檢測實驗室結(jié)果的重復(fù)性，而校準(zhǔn)品是保證實驗室檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性?；靖拍?質(zhì)控品與校準(zhǔn)品的區(qū)別①溯源性：校準(zhǔn)品必須具有溯源性，質(zhì)控品不102干擾指標(biāo)本中某些非被測物質(zhì)本身不與試劑反應(yīng)，但以其它方式使測定結(jié)果偏高或偏低，這