免疫學(xué)性能驗(yàn)證課件

免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量控制及性能驗(yàn)證2015.08.12質(zhì)量控制報(bào)告單申請(qǐng)樣本采集/接收樣本檢測(cè)檢測(cè)結(jié)果的獲得結(jié)果分析及報(bào)告發(fā)放影響檢驗(yàn)結(jié)果的要素人員設(shè)施和環(huán)境條件實(shí)驗(yàn)室設(shè)備溫濕度控制培訓(xùn)、比對(duì)設(shè)備操作、校準(zhǔn)內(nèi)部質(zhì)量控制操作規(guī)程試劑性能驗(yàn)證SOP文件室內(nèi)質(zhì)控程序EP5A2EP15A2EP6AEP17AEP12ClinicalLaboratoryandStandardsInstitute(CLSI)涉及免疫評(píng)價(jià)方法醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室精密度和準(zhǔn)確度的確認(rèn)定量測(cè)定方法精密度方法定量測(cè)定方法線性的評(píng)價(jià)檢出限與定量限的評(píng)價(jià)定性檢測(cè)評(píng)價(jià)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)EP17A空白限、檢測(cè)低限、定量限的驗(yàn)證Limitofblank(LOB)空白限Limitofdetection(LOD)檢出限Limitofquantitation(LOQ)定量限LOB<LOD≤LOQ是一定概率下(α)測(cè)量空白時(shí)可能得到的最高檢測(cè)結(jié)果，低濃度LOD的樣本在一定概率下(β)能得到的最低測(cè)量結(jié)果。誤判概率α、β：聲稱(chēng)在給定物質(zhì)中存在某成分的誤判概率為α?xí)r（Ⅰ類(lèi)錯(cuò)誤，假陽(yáng)性），聲稱(chēng)不存在該成分的誤判概率為β（Ⅱ類(lèi)錯(cuò)誤，假陰性）。α、β默認(rèn)值為0.05?？瞻紫蓿↙OB）α=假陽(yáng)性可能β=假陰性可能相對(duì)頻率0LoBLoDLoQ總誤差報(bào)告αβ不能檢出能檢出能檢出可檢測(cè)<LoB<LoD<LoQ空白限（LOB）測(cè)定空白樣本20次測(cè)定結(jié)果與試劑廠家給定的LOB比較，不超過(guò)3個(gè)結(jié)果大于LOB驗(yàn)證通過(guò)。驗(yàn)證空白限（LOB）定量檢出限（LOQ）選擇濃度≥LOD的樣本，測(cè)定25次（多樣本，多天，重復(fù)完成），每個(gè)樣本測(cè)定結(jié)果與參考值的偏差和TEa（實(shí)驗(yàn)室總誤差）相比較。計(jì)算小于TEa所占比例是否符合（β=0.05）的要求。符合要求，驗(yàn)證通過(guò)；不符合，聯(lián)系廠家。定性檢出限（LOQ）系列濃度樣本制備（有證，康徹斯坦標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?zhuān)?biāo)準(zhǔn)曲線的制作臨界值附近濃度樣本制備樣本的檢測(cè)：對(duì)臨界值附近濃度樣本進(jìn)行連續(xù)20次測(cè)定當(dāng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽(yáng)性率≥95%的最低濃度確認(rèn)為檢出限，表明被測(cè)物在該濃度及以上樣本，實(shí)驗(yàn)方法將給出穩(wěn)定的結(jié)果。定性精密度（只報(bào)告陰性、陽(yáng)性、無(wú)反應(yīng)性）不宜用陰性或強(qiáng)陽(yáng)性標(biāo)本衡量定性試驗(yàn)的重復(fù)性選擇分析物濃度應(yīng)接近醫(yī)學(xué)決定水平（臨界值）評(píng)價(jià)指標(biāo)：臨界值驗(yàn)證以COI(cut-off)或以s/co值報(bào)告結(jié)果的精密度評(píng)價(jià)。定性-重復(fù)性（精密度）-EP12A臨界值：作為判斷特定疾病、狀態(tài)或被測(cè)量存在或不存在的界限的量值。也就是指試驗(yàn)結(jié)果處于（陰性、陽(yáng)性）分界點(diǎn)時(shí)的樣品中分析物的濃度。對(duì)純粹的定性檢測(cè)來(lái)說(shuō)，臨界值就是（唯一）醫(yī)學(xué)決定水平。臨界值(cut-offvalue)臨界點(diǎn):對(duì)陽(yáng)性樣本進(jìn)行系列稀釋?zhuān)缓髮?duì)系列稀釋樣本進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)（20-40次），能獲得50%陽(yáng)性和50%陰性結(jié)果的濃度。20次（+20%與-20%濃度各10次），30%-70%40次（+20%與-20%濃度各20次）,35%-65%臨界點(diǎn)接近臨界值濃度的分析物（臨界值+20%與-20%）對(duì)接近臨界值濃度分析物的重復(fù)性檢測(cè)（各20次）10天（每日測(cè)定2次）或20天（每日單次測(cè)定）陰性、陽(yáng)性質(zhì)控監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)是否有效（10天，失效≤1次；20天失控≤2次），失控后該該批數(shù)據(jù)舍棄，在當(dāng)日或其他補(bǔ)充新一批檢測(cè)。計(jì)算陰陽(yáng)性率數(shù)據(jù)分析（C50或臨界值95%區(qū)間是否正確）定性-重復(fù)性（精密度）-EP12A臨界值+20%與臨界值-20%濃度分別進(jìn)行20次檢測(cè)。+20%濃度的樣本產(chǎn)生的陽(yáng)性率≥95%-20%濃度的樣本產(chǎn)生的陰性率≥95%。意味著與臨界值相差20%以上的樣本就可預(yù)期用這種方法得到一致的結(jié)果。臨界值的95%區(qū)間驗(yàn)證定性：以臨床診斷、金標(biāo)準(zhǔn)方法比較、血清盤(pán)檢測(cè)或參加衛(wèi)計(jì)委能力驗(yàn)證的來(lái)評(píng)價(jià)。評(píng)價(jià)指標(biāo)：符合率定性：符合率≥80%正確度證實(shí)分析測(cè)量范圍有效時(shí)：需5-7個(gè)樣品，每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定2次。驗(yàn)證聲明范圍或改良方法：需7-9個(gè)樣品，每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定2-3次。樣品：可比預(yù)期的分析測(cè)量范圍寬20-30%，以期檢測(cè)到“拐點(diǎn)”。線性范圍評(píng)價(jià)可用計(jì)算濃度或標(biāo)定濃度作為X值，儀器測(cè)量結(jié)果或儀器輸出值（均值）作為Y值。也可用相對(duì)濃度作為X值，如果濃度間為等間隔，可用樣品編號(hào)（如1、2、3、4、5等）代表X值。如所制備的樣品系列非等間隔，其濃度間的關(guān)系應(yīng)明確，在測(cè)定時(shí)可以這些間隔間的相對(duì)比值做為X值，此時(shí)的樣品編號(hào)可以不為整數(shù)。曲線制作做一次、二次和三次多項(xiàng)式回歸分析。SPS統(tǒng)計(jì)軟件+統(tǒng)計(jì)學(xué)知識(shí)確定線性范圍界別回歸方